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Study of micro- and nanoplastic pollution in the environment : sampling in the atmosphere, development of a labelled environmentally relevant model, interaction with living organisms
Le suivi et la gestion des déchets plastiques sont devenus un enjeu important pour nos sociétés. Cependant, il n'existe pas de méthode optimale unique pour l'étude et la surveillance efficaces de la contamination plastique. L'objectif de ce projet était d’explorer de nouvelles approches pour étudier l'origine, le devenir et le comportement de la matière plastique présente dans l’environnement. Trois axes d’investigation ont été combinés dans ce travail : i) le développement d’une méthodologie de collecte, d’échantillonnage et d’analyse de micro (MPs) et nanoparticules (NPs) de plastique provenant de l’atmosphère ; ii) le développement d’un modèle de MPs et de NPs pertinent pour l'environnement, qui pourrait être utilisé pour des études écotoxicologiques et iii) l’étude de son interaction avec les micro-organismes vivants. Un modèle pertinent de micro- et nanoplastiques de HDPE a ainsi été obtenu par une approche top-down, en exposant du matériau polymère brut à un broyage mécanique. Les particules ont été marquées avec des sondes luminescentes constituées de particules upconverting, qui permettent leur détection même dans des échantillons épais, comme dans un tissu ou un petit animal. Ce modèle de plastique a été ensuite utilisé pour étudier le mécanisme d'interaction entre les MPs et la microalgue verte d'eau douce Chlorella vulgaris en utilisant des expériences à l'échelle nanométrique et moléculaire par microscopie à force atomique (AFM). Ces travaux ont révélé qu'une interaction hydrophobe entre les algues et les microplastiques était à l'origine de la production de matière organique par les algues, et que cette dernière jouait un rôle important dans les phénomènes d'agrégation des microalgues et des microplastiques. Par ailleurs, des MPs et NPs de l'atmosphère ont été collectées sur des zones présentant différents niveaux d'activité humaine : d'une zone éloignée des activités humaines à une zone fortement industrialisée. L'étude de ces zones comprennait la collecte de données météorologiques et l'échantillonnage d'échantillons atmosphériques, y compris les aérosols (particules en suspension dans l'atmosphère) et les dépôts (pluie, neige, grésil, etc.). À la suite de ce travail, nous avons proposé une méthodologie de collecte d'échantillons, de préparation, d'analyse qualitative et quantitative effectuée par la combinaison de méthodes analytiques, notamment la μ-FTIR (microscopie infrarouge à transformée de Fourier), la Py-GC-MS (pyrolyse couplée à la chromatographie en phase gazeuse et à la spectrométrie de masse), la DLS (diffusion dynamique de la lumière) ou encore la NTA (analyse de suivi des nanoparticules), etc…The management and monitoring of plastic waste have become a major issue for our society. However, there is no single optimal method for the effective study and monitoring of plastic pollution. The objective of this thesis work was to explore new approaches to study the occurrences, fate, and behavior of micro- and nanoplastics in the environment. Thee vectors of investigation were combined in this work, including: i) the development of a methodology of sampling and analysis of MPs and NPs from the atmosphere; ii) the development of an environmentally relevant model of MPs and NPs, which could be used for ecotoxicological studies and iii) the study of its interaction with living microorganisms. Environmentally relevant models of micro- and nanoplastics of HDPE were obtained by top-down approach, by exposing bulk polymer material to mechanical grinding. Particles were labelled with background-free persistent luminescent probes such as UCNPs that allows their detection even in thick samples such as in a tissue or a small animal. Further, we used a developed model of plastic to study the interaction mechanism between MPs and green freshwater microalgae Chlorella vulgaris using atomic force microscopy (AFM) nano- and molecular scale experiments. This work revealed that a hydrophobic interaction between algae and microplastics was at the origin of the production of organic matter by algae, and that the latter played an important role in the aggregation phenomena of microalgae and microplastics. Otherwise, MPs and NPs from the atmosphere were collected on areas with different levels of human activity: from an area separated from human activities to a highly industrialized. Investigation of those areas included the collection of meteorological data and sampling of atmospheric samples including aerosols (suspended particles in the atmosphere) and deposition (rain, snow, sleet, etc.). As a result, we proposed a methodology for samples collection, preparation, qualitative and quantitative analysis performed by the combination of analytical methods including μ-FTIR (Fourier transform-infrared microscopy), Py-GC-MS (pyrolysis coupled with gas chromatography and mass spectrometry), DLS (Dynamic Light Scattering), NTA (Nanoparticle Tracking Analysis), etc
Study of plastic particles distribution in the ocean : characterization, modelling and comparison with observations
Annuellement, 200 000 tonnes de plastique entrent dans les océans. Dans l’état actuel des connaissances, seul 1 % de cette quantité est retrouvé. Où est le reste ? Pour des raisons logistiques, les scientifiques ont surtout étudié la pollution de plastique à la surface de la mer. Or un mélange de surface, induit par le vent et les vagues, transporte cette pollution en profondeur. Cette thèse est dédiée à l’étude du transport vertical en haute mer des micro-plastiques (1 µm < L < 5mm), plus sensibles à ce transport vertical du fait de leur faible flottabilité. Cette dynamique est décrite par l’équilibre entre le flux de flottabilité, qui tend à les faire remonter, et le flux turbulent, qui les entraine vers le bas. Nous étudions cette distribution verticale à l’aide d’échantillons collectés en mer et d’expériences de laboratoire dans lesquelles les micro-plastiques sont modélisés par des particules aux géométries régulières (sphères et disques). La turbulence de surface à laquelle ils sont soumis est générée par un dispositif de grille oscillante pour répliquer la décroissance de la turbulence avec la profondeur. Premièrement, un modèle pour la vitesse de remontée (flottabilité) des micro-plastiques, tenant compte de leurs propriétés (densité, taille et forme), est proposé. Devant la grande variété de ces propriétés, un encadrement de la flottabilité est proposé pour chaque gamme de taille de micro-plastique. Il est construit grâce à un choix de géométries régulières et de densité, deux aspects déduits d’une étude statistique des propriétés de 400 échantillons collectés dans le gyre de l’Atlantique Nord en 2015. Deuxièmement, la caractérisation de l’écoulement utilisé en laboratoire est faite grâce à des mesures de vélocimétrie par imagerie de particules (PIV). La turbulence de grille oscillante est étudiée en fluide homogène et en fluide bi-couche. Un modèle paramétrique de viscosité turbulente, tenant compte de la décroissance de la turbulence avec la profondeur, est proposé. Cette approche, permettant une description générique de l’écoulement, est originale, la turbulence de grille oscillante étant essentiellement décrite en termes d’énergie cinétique turbulente et taux de dissipation. Troisièmement, la distribution verticale de particules flottantes est étudiée dans le même dispositif expérimental. Elle est obtenue grâce à des mesures en deux dimensions non résolues en temps (dans un plan laser) et en volume résolue en temps (vélocimétrie par suivi de particules et mesures stéréoscopiques). En les couplant à la caractérisation de l’écoulement, nous avons pu décrire le transport vertical des plastiques par un modèle de turbulence de type « k-epsilon », en fournissant une première valeur du nombre de Schmidt turbulent pour des particules faiblement inertielles et de taille finie ; le nombre de Schmidt turbulent étant le paramètre essentiel du couplage fluide-particules pour ce genre d’approches. Grâce à ce travail, nous proposons un certain nombre de recommandations pour la communauté scientifique, notamment, de réaliser un échantillonnage dans la colonne d’eau et non pas qu’en surface. Cela permettra de collecter un nombre représentatif des petits micro-plastiques (<1 mm) et de mieux décrire la pollution en mer lorsque celle-ci est agitée (Beaufort 3 et plus). Nous préconisons aussi de prendre en compte la diversité de taille et de forme des micro-plastiques dans les modèles de correction des mesures de surface, comme nous le proposons au Chapitre 3. Enfin, en parallèle de la prise en compte de leurs propriétés, nous insistons sur l’importance de prendre en compte la décroissance de la turbulence. En effet, l’allure du profil de concentration des micro-plastiques en dépend et peut, dans certain cas, s’éloigner du modèle couramment prescrit (exponentielle décroissante). Le calcul explicite du profil de concentration en utilisant le nombre de Schmidt turbulent, identifié dans cette thèse, est alors nécessaire.The annual plastic input in the ocean is estimated to be 200 000 tons. To the best of current knowledge, only 1 % of this quantity is retrieved. Where is the rest? For logistical reasons, scientists have essentially investigated the plastic pollution at the sea surface. However, some mixing at the surface is induced by wind and waves, which moves this pollution in depth. In this work, we focus on the vertical transport of micro-plastics offshore, which are more sensitive to this vertical transport due to their low buoyancy. Their dynamics is described by a balance between an upward flux due to plastic buoyancy and a downward flux due to turbulence. We study their vertical distribution thanks to samples collected at sea and laboratory experiments, in which, micro-plastics are modeled by particles with regular shapes (spheres and disks). The surface turbulence, which mixes them in the water column, is generated by an oscillating grid system to mimic the turbulence decay with depth. First, we propose a model for the rise velocity (buoyancy) of the micro-plastics, taking into account their properties (density, size and shape). Given the wide range of plastic properties, we propose to encompass their rise velocity by an upper and a lower bound for each range of size. These bounds comes from a choice of two densities and regular shapes, based on a statistical analysis of the properties of 400 samples collected in the Atlantic North Gyre in 2015. Second, the characterization of the flow used in laboratory experiments is done using Particle Image Velocimetry (PIV) technique. The oscillating grid turbulence is studied in both homogeneous and two-layer fluids. A parametric law for the eddy viscosity, taking into account the turbulence decay with depth, is proposed. This approach, giving a general description of the flow, is new. Indeed, oscillating grid turbulence is usually described in terms of turbulent kinetic energy and dissipation rate. Third, the vertical distribution of buoyant particles is investigated in oscillating grid turbulence experiments. It is obtained thanks to measurements in two dimensions unresolved in time (in a laser sheet) and measurements in volume resolved in time (Particle Tacking Velocimetry and stereoscopy). Coupling them with the characterization of the flow, we describe the vertical transport of plastic using the “k-epsilon” turbulent model. We provide the first estimation of the turbulent Schmidt number for finite size particles with low inertia; the turbulent Schmidt number being the key parameter for the fluid-particles coupling in such approaches. Thanks to this work, we supply some recommendations for the scientific community. Especially, we advocate for samplings in depth and not only at the surface. This should ensure more representative figures for small micro-plastics (<1 mm) collected and a better description of the plastic pollution when the sea is rough (Beaufort 3 and more). We also recommend to take into account the large range of micro-plastic’s size and shape in correction models for surface measurements, like we propose in Chapter 3. Finally, added to the variability of plastic properties, we highly recommend to take into account the turbulence decay with depth. Indeed, the shape of the concentration profile with depth of micro-plastics depends on it. In some cases, this can lead to different types of profiles compared to the commonly used exponential decay. The explicit calculation of the concentration profile, using the value for the turbulent Schmidt number identifiedin this work, is then necessary
Spatio-temporal monitoring of MP pollution in the Garonne and potential transfer in the food web
L'omniprésence des microplastiques (MP) représente une nouvelle pression environnementale agissant sur les écosystèmes d'eau douce et une meilleure compréhension de la dynamique de cette pollution est nécessaire. Ici, nous avons étudié les changements spatiaux et temporels de la pollution en MPs (gamme de taille entre 700 μm et 5 mm) dans le bassin versant de la Garonne (Sud-Ouest de la France) et la consommation de ces particules par les organismes aquatiques. La composition des particules a été vérifiée par spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier à réflectance totale atténuée (ATR-FTIR). Premièrement, un total de 14 sites situés dans le fleuve principal et plusieurs affluents a été échantillonné pendant quatre saisons. Nous avons constaté que la concentration de MP variait fortement à la fois dans l'espace et dans le temps en fonction de l'urbanisation et des conditions hydrologiques, respectivement. Des concentrations plus élevées de MP avec des tailles de particules plus petites ont été observées pendant les périodes chaudes avec de faible débits. En deuxième, nous avons analysé les changements dans la pollution des MP causés par les crues. Deux sites dans la Garonne, situés en amont et en aval de Toulouse, ont été échantillonnés lors de deux épisodes de crue. Nous avons constaté une augmentation générale de la concentration de MP pendant la crue, induite par le débit de la rivière, mais cette augmentation était plus importante dans le site en aval. En ce qui concerne les caractéristiques MPs, la prédominance de particules plus grosses a été remarquée. En plus, un profil d'oxydation plus élevé, représenté par une bande spectrale de carbonyle, a été trouvé dans les particules recueillies pendant la crue. En troisième, une nouvelle voie d’entrée MP dans les eaux douces a été évaluée en quantifiant la contamination en MP dans les amorces de pêche. Nous avons analysé trois types d'amorces fabriquées industriellement (« pellets », « bouillettes » et « farines »). A partir de 160 échantillons d'amorces, 28 MP ont été identifiés dans les farines et les bouillettes, tandis qu’aucun MP n'a été trouvé dans les pellets. Nous avons révélé que les MPs introduits accidentellement lors de la fabrication des amorces et/ou ceux provenant de matières premières contaminées pouvaient être transférés dans les eaux douces. En quatrième, la consommation de MPs par les macroinvertébrés et les poissons a été quantifiée. Cette consommation a été liée aux niches trophiques individuelles, quantifiées à l'aide d'analyses d'isotopes stables (δ13C et δ15N). Nous avons d’abord démontré que l'abondance de MP ingérée différait entre les macroinvertébrés et les poissons et n'était pas significativement liée à la pollution en MP. Nous avons également constaté que les caractéristiques des MP différaient entre les compartiments abiotique (eau et sédiments) et biotique (macroinvertébrés et poissons). L'abondance de MP ingérée augmentait avec la taille de l'organisme chez les poissons et les macroinvertébrés et avait tendance à augmenter avec la position trophique des macroinvertébrés. L'origine des ressources consommées par les poissons affectait significativement l'abondance des MP ingérés dans les poissons. Dans l'ensemble, ces résultats suggèrent la prédominance d’une consommation directe, très probablement accidentellement. En conclusion, nous soulignons que la pollution par les MP devrait être perçue comme une forme de stress multiple en raison du comportement particulier et des interactions potentielles avec d'autres contaminants environnementaux. Les conséquences de ces interactions devraient être au centre des recherches futures. Ce travail contribue à améliorer notre compréhension et à élucider les moteurs de la dynamique et de la consommation de MP par les organismes aquatiques. Des études complémentaires sont désormais nécessaires pour quantifier les risques induits par cette pollution dans les écosystèmes d'eau douce.The omnipresence of microplastic (MP) represents a novel environmental pressure acting on freshwater ecosystems and a better understanding of the dynamic of this pollution is needed. Here, we investigated the spatial and temporal changes in MP pollution (size range 700 μm – 5 mm) in the Garonne catchment (Southwestern France) and the consumption of these particles by aquatic organisms. The composition of MP was verified through attenuated total reflectance Fourier transformed infrared spectroscopy (ATR-FTIR). First, a total of 14 sites located in the main river and several tributaries were sampled during four seasons. We found that MP concentration averaged 0.15 particles.m-3 (± 0.46 SD) and strongly varied both in space and in time, driven by urbanization and hydrological conditions. Higher MP concentrations and smaller particle sizes were observed in warm seasons with low discharge. Second, we analysed the changes in MP pollution caused by flooding. Two sites in the Garonne River, located upstream and downstream of Toulouse, were sampled during two flood episodes. We found a general increase in MP concentration during flood episodes. This was driven by river discharge, but this increase was greater in the downstream site. Regarding MP characteristics, a predominance of larger particles was observed. Using multivariate analysis of the infrared spectra, we quantified the changes in MP chemical profile during flooding. A higher oxidation profile, represented by an increased carbonyl spectral band, was found in particles collected during the flood. Third, a novel pathway of MP into freshwaters was assessed by quantifying MP pollution in angling baits. We analysed three different categories of industrially-produced baits (‘groundbait’, ‘boilies’ and ‘pellets’). From 160 bait samples, 28 MP were identified in groundbait and boilies. No MP within the studied size range were found in pellets. We revealed that MPs introduced accidentally during bait manufacturing and/or those originating from contaminated raw ingredients might be transferred into freshwaters. Fourth, the consumption of MPs by macroinvertebrates and fish was quantified. This consumption was linked to individual trophic niches, which were measured by stable isotope analyses (δ13C and δ15N). We demonstrated that the abundance of ingested MP differed between macroinvertebrates and fish and was not significantly related to MP pollution. We also found that MP characteristics differed between the abiotic (water and sediment) and biotic (macroinvertebrates and fish) compartments. The abundance of ingested MP increased with organism size in both fish and macroinvertebrates and tended to increase with the trophic position of macroinvertebrates. The origin of the resources consumed by fish significantly affected the abundance of MP ingested in fish. Altogether, these results suggested the absence of MP bioaccumulation in the studied size range in freshwater food webs and the dominance of direct consumption, most likely accidentally. In conclusion, we highlighted that MP pollution should be perceived as a multi-stressor due to the particulate behaviour and potential interactions with other environmental contaminants. The consequences of these interactions should be the focus of future research. This work contributes to improve our understanding to elucidate the drivers of the dynamic and consumption of MP, and further studies are needed to quantify the actual risks associated with this pollution in freshwater ecosystems
Caractérisation et détermination de l'origine des débris plastiques accumulés dans le gyre subtropicale de l'océan Indien
La plupart des déchets plastiques mal gérés pénètrent dans l'environnement marin. Une fois dans les océans, ces plastiques dérivent jusqu'à atteindre des zones de convergence subtropicales, où ils s'accumulent pour former des « Garbage Patch ». Cinq de ces zones ont été découvertes,dont l’une dans le sud de l'océan Indien. Cette dernière a fait l'objet de peu d'études d'observation en surface, et plusieurs modèles de dispersion indiquent une localisation différente, la plaçant soit à l’ouest ou à l’est du bassin. Supposée être la deuxième « Garbage Patch » la plus polluée après celle du Pacifique Nord, il est crucial de l'identifier correctement pour intervenir efficacement. C'est dans ce contexte que s'inscrit le projet doctoral, visant à déterminer la composition, la concentration et l'origine des débris plastiques accumulés dans le sud-ouest de l'océan Indien. Depuis le début du projet, 19 campagnes océanographiques ont été déployées pour effectuer des suivis visuels des macrodéchets (> 2,5 cm) et collecter des microplastiques (500 μm – 5 mm). Des collectes des déchets marins (macro et méso : 5 mm – 2,5 cm) échoués sur des plages inhabitées ont également été réalisées pour évaluer la proportion qui ne reste pas en surface. De plus, une étude à long terme de cette pollution plastique a été entreprise en recherchant des espèces bio-indicatrices de la pollution dans la région. Toutes les observations ont été comparées ou complétées par des modèles de dispersion de particules dans l'océan Indien. Sur l'ensemble des déchets marins collectés ou observés, 95 % étaient constitués de plastiques. Parmi les plastiques, la sous-catégorie prédominante était celle des plastiques durs déjà fragmentés, retrouvés en surface de l'océan, échoués sur des îles inhabitées et ingérés par les espèces bio-indicatrices. La composition principale de ces polymères était le polyéthylène et le polypropylène, et elle ne différait pas entre la surface de l'océan et les plages. Un gradient de concentration de microplastiques a également été identifié, allant de 10^3 items.km^-2 à 40°E à 10^5 items.km^-2 à 65°E sur les latitudes 30/33°S. Ce gradient a été confirmé par les modèles de dispersion, bien que sous-estimé par ces derniers. Certains macroplastiques échoués sur des îles venaient d'emballages alimentaires d'Asie du Sud-Est. Afin de poursuivre l'étude de la pollution plastique dans la région, trois espèces ont été identifiées répondant aux critères de sélection : les tortues caouannes (Caretta caretta), les pétrels de Barau (Pterodroma baraui) et les puffins tropicaux (Puffinus baillonni). Pour les futures études, il serait intéressant d'accroître les collectes dans la partie centrale et orientale du bassin de l'Océan Indien à différentes saisons, d'étudier également l'impact de ces déchets plastiques sur les écosystèmes associés et d’établir des solutions de gestions adaptées.The majority of mismanaged plastic waste enters the marine environment. Once in the oceans, these plastics drift until reaching subtropical convergence zones, where they accumulate to form “Garbage Patches”. Five zones have been discovered, including one in the southern Indian Ocean. This latter patch has undergone limited surface observation studies, and several predicted models indicate a different location, placing it either west or east of the basin. Supposedly the second most polluted “Garbage Patch” after the North Pacific, it is crucial to identify it for effective intervention accurately. Within this context, the doctoral project aimed to determine the composition, concentration, and origin of plastic debris accumulated in the Southwest Indian Ocean. Since the project's inception, 19 oceanographic campaigns have been conducted to visually monitor macro-debris (> 2.5 cm) and collect microplastics by manta trawl deployment (500 μm – 5 mm). Surveys of marine debris (macro-meso (5 mm – 2.5 cm) beached on uninhabited, remote islands have also been carried out to assess the concentration that does not remain on the surface. Furthermore, a long-term study of plastic pollution was initiated by identifying bio-indicator species in the region. All observations have been compared or complemented with plastic dispersion predictive models in the Indian Ocean. Of all the marine debris collected or observed, 95% consisted of plastics. Among plastics, the predominant subcategory was pre-existing fragmented hard plastics found on the ocean surface, beached on uninhabited islands, and ingested by bio-indicator species. The primary composition of these polymers was polyethylene and polypropylene, and it did not differ between the ocean surface and beaches. A concentration gradient of microplastics was also identified, ranging from 10^3 items.km^-2 at 40°E to 10^5 items.km^-2 at 65°E on latitudes 30/33°S. This gradient has been confirmed by plastic dispersion predicted models, although they tend to underestimate it. In addition, some of the macroplastics stranded on the islands originated mainly from Southeast Asian food packaging. Three species have been identified for long-term monitoring of plastic pollution in the region: loggerhead turtles (Caretta caretta), Barau's petrels (Pterodroma baraui), and tropical shearwaters (Puffinus baillonni). Future studies should include increasing sampling in the central and eastern parts of the Indian Ocean basin during different seasons, studying the impact of plastic debris on associated ecosystems, and developing tailored management solutions
Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis
The present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation
counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings
are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that
only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into
account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed
Variations on the Author
“Variations on the Author” discusses two of Eduardo Coutinho’s recent films (Um Dia na Vida, from 2010, and Últimas Conversas, posthumously released in 2015) and their contribution to the general question of documentary authorship. The director’s filmography is characterized by a consistent yet self-effacing form of authorial self-inscription: Coutinho often features as an interviewer that rather than express opinions propels discourses; an interviewer that is good at listening. This mode of self-inscription characterizes him as an author who is not expressive but who is nonetheless markedly present on the screen. In Um Dia na Vida, however, Coutinho is completely absent form the image, while Últimas Conversas, on the contrary, includes a confessional prologue that moves the director from the margins to the center of his films. This article examines the ways in which these works stand out in the filmography of a director who offers new insights into the notion of cinematic authorship
Appropriate Similarity Measures for Author Cocitation Analysis
We provide a number of new insights into the methodological discussion about author cocitation analysis. We first argue that the use of the Pearson correlation for measuring the similarity between authors’ cocitation profiles is not very satisfactory. We then discuss what kind of similarity measures may be used as an alternative to the Pearson correlation. We consider three similarity measures in particular. One is the well-known cosine. The other two similarity measures have not been used before in the bibliometric literature. Finally, we show by means of an example that our findings have a high practical relevance.information science;Pearson correlation;cosine;similarity measure;author cocitation analysis
Dispelling the Myths Behind First-author Citation Counts
We conducted a full-scale evaluative citation analysis study of scholars in the XML research field to explore just how different from each other author rankings resulting from different citation counting methods actually are, and to demonstrate the capability of emerging data and tools on the Web in supporting more realistic citation counting methods. Our results contest some common arguments for the continued
use of first-author citation counts in the evaluation of scholars, such as high correlations between author rankings by first-author citation counts and other citation
counting methods, and high costs of using more realistic citation counting methods that are not well-supported by the ISI databases. It is argued that increasingly available digital full text research papers make it possible for citation analysis studies to go beyond what the ISI databases have directly supported and to employ more
sophisticated methods
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