1,721,002 research outputs found
Conserved function of anopheles gambiae midgut-specific promoters in the fruitfly.
Control of malaria by a methodology that would permit the effective blockage of the Anopheles gambiae midgut wall penetration by Plasmodium parasites requires a detailed understanding of both the physiology of the mosquito's digestion, and of the interactions between the parasite and its host. We have transformed Drosophila melanogaster with several constructs that allow the study of the promoter region of two of the major late trypsin genes of A. gambiae. Using several deletions, we have identified, for both genes, small genomic segments that are sufficient to confer tissue specificity to the promoter in a species that is far away in evolution from the mosquito. This will allow further studies that will enable both the understanding of the blood meal digestion, and may potentially be useful for the design of anti-plasmodial constructs at a later stage
Molecular characterization of ribosomal DNA (rDNA) polymorphisms discriminating among chromosomal forms of Anopheles gambiae s.s.
The sequence of a 2.3 kb long DNA segment derived from the 5'-most end of the ribosomal intergenic spacer was determined in three chromosomal forms of Anopheles gambiae s.s. The analysis revealed that the sequence of the Mopti form differed from that of the Bamako and Savanna forms by a total of ten nucleotide substitutions. Using these sequence variations we set up a diagnostic polymerase chain reaction (PCR) assay to distinguish mosquitoes belonging to the three chromosomal forms, facilitating studies on the distribution and the ecology of these incipient taxa. The assay also allows to distinguish whether a given specimen could represent a heterozygote between Mopti and Savanna or Bamako
Gametogenesis and study of actin 2 in malaria parasites
Η διατριβή έχει ως σκοπό την μελέτη των σταδίων του παράσιτου της
ελονοσίας που λαμβάνουν χώρα στο κουνούπι. Τα αποτελέσματα χωρίζονται σε
τέσσερα κεφάλαια. Στο πρώτο κεφάλαιο μελετήσαμε τον μηχανισμό της έξοδου του
παρασίτου από το κύτταρο ξενιστή κατά την γαμετογένεση. Τα παράσιτα εισβάλουν
στα ερυθροκύτταρα του αίματος και αρχίζει ένας κύκλος από μη φυλετικά στάδια, ενώ
κάποια θα διαφοροποιηθούν σε αρσενικά και θηλυκά γαμετοκύτταρα. Με την είσοδο
των παρασίτων στο κουνούπι ξεκινάει η γαμετογένεσης, δηλαδή η δημιουργία
αρσενικών και θηλυκών γαμετών. Κρίσιμο σημείο στην γαμετογένεση αποτελεί η
έξοδος του παρασίτου από το ερυθροκύτταρο, με την ρήξη των δύο μεμβρανών που
περιβάλλουν το παράσιτο, την μεμβράνη του παρασιτοφόρου κενοτοπίου (PVM) και
την μεμβράνη του ερυθροκυττάρου (RBCM). Μ ε τ ην κ αταγραφή τ ης ε ξόδου τ ων
παρασίτων σε πραγματικό χρόνο και με την μέθοδο του ανοσοφθορισμού
αποκαλύψαμε τέσσερις διακριτές φάσεις. Αρχικά το ερυθροκύτταρο διογκώνεται, η
PVM διαρρηγνύεται και σχηματίζει κυστίδια, ένας μοναδικός πόρος ανοίγει στην
RBCM και ακολουθεί η ρήξη της RBCM και ο σχηματισμός κυστιδίων από αυτήν. Το
δεύτερο κεφάλαιο έχει ως θέμα τη λειτουργία της ακτίνης 2, της δεύτερης ισομορφής
ακτίνης του παρασίτου. Η ακτίνη 1 είναι απαραίτητη για όλα τα στάδια του κύκλου
ζωής ενώ η ακτίνη 2 είναι απαραίτητη για την γαμετογένεση των αρσενικών. Με την
γενετική αντικατάσταση της ακτίνης 2 με την ακτίνη 1 δείξαμε ότι οι δύο ισομορφές
έχουν ξεχωριστές λειτουργίες στην γαμετογένεση και αποκαλύψαμε ένα δεύτερο
κρίσιμο ρόλο της ακτίνης 2 στην ανάπτυξη των ωοκυστών στο έντερο του κουνουπιού.
Ο πολυμερισμός της ακτίνης είναι σημαντικός για την λειτουργία της. Στο τρίτο
κεφάλαιο των αποτελεσμάτων, η αντικατάσταση της ακτίνης 2 με χιμαιρικές μορφές
της ακτίνης 1 έδειξε ότι ο πολυμερισμός της ακτίνης 2 είναι απαραίτητος για την
γαμετογένεση των αρσενικών αλλά δεν αρκεί για την ανάπτυξη των ωοκυστών. Στο
τέταρτο κεφάλαιο των αποτελεσμάτων με μικροσυστοιχίες γονιδίων πήραμε το προφίλ
της γονιδιακής έκφρασης σε γαμετοκύτταρα όπου απουσιάζει είτε η ακτίνη 2 είτε η
ασβεστο-εξαρτώμενη κινάση 4 (CDPK4). Βρέθηκε ένας σημαντικός αριθμός κοινών
και διαφορετικών γονιδίων με διαφορά στην έκφραση στα δύο μεταλλάγματα.This study focus in the mosquito stages of malaria parasites. The results are
presented in four chapters. The first chapter describes the mechanism of gametocyte
egress from the host erythrocyte during gametogenesis. Malaria parasites infect
erythrocytes and initiate a series of asexual multiplication cycles or they develop into
female and male gametocytes. The production of female and male gametes, known as
gametogenesis, takes place after uptake by the mosquito. The parasite egress from the
host erythrocyte during gametogenesis involving sequential rupture of the membranes
of the parasitophorous vacuole (PVM) and erythrocyte (RBCM). We present detailed
observations of these events in real time using high-speed video microscopy and
immunofluorescence assays. The first sign of egress is swelling of the host cell. The
PVM ruptures and vesiculates. This is followed by the opening of a single stabilized
pore of the RBCM. The RBCM is subsequently vesiculated, releasing the gametes. In
the second chapter we study actin 2, one of the two actin isoforms in malaria parasites.
Actin 1 has a vital role in all developmental stages, whereas actin 2 is essential in male
gametogenesis. By genetic replacement of actin 2 with actin 1, we show that the two
actin isoforms have distinct functions in male gametogenesis and we found an
additional essential role of actin 2 in oocyst development. The function of actins
depends on the polymerization properties. In the third chapter, replacement of actin 2
by chimeric actin 1 revealed that polymerization of actin 2 is necessary in
gametogenesis but is not enough for the oocyst development. In the fourth chapter,
global expression profiling reveals shared and distinct transcript signatures in arrested
act2(-) and CDPK4(-) gametocytes
Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis
The present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation
counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings
are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that
only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into
account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed
- …
