366 research outputs found
Sort by
Cинтез та скринінг протисудомної активності нових 5-заміщених 2-іміно-4-тіазолідинонів
Get PDFAim. To synthesize 5-ene-4-thiazolidinones containing heterocyclic rings in the molecule as potential anticonvulsants, and screen their anticonvulsant activity on a model of pentylenetetrazole (PTZ) seizures.Results and discussion. A straightforward and convenient synthesis of novel 5-ene-derivatives of thiazol/oxazole-bearing 4-thiazolidinones as possible anticonvulsant agents was performed. Compounds were characterized using methods of spectral analysis (1H NMR and LC-MS). 5-Chloro-3-methyl-1-phenyl-1H-pyrazole-4-carbaldehyde underwent the aminolysis on a chlorine atom by a molecule of monoethanolamine (MEA) in the Knoevenagel reaction with thiazole/oxazole-bearing 4-thiazolidinones. The preliminary screening of the anticonvulsant activity was performed for the compounds synthesized on the model of PTZ-induced seizures, and active derivatives were identified.Experimental part. Commercially available 2-aminothiazole and 5-methylisoxazol-3-amine were used as starting compounds for the synthesis of 2-chloro-N-(hetaryl)acetamides. The latter were transformed into thiazole/oxazole-bearing 4-thiazolidinones by the treatment with ammonium isothiocyanate. Modification at C5 position of the heterocycles synthesized was performed by the Knoevenagel reaction with aromatic/heteroaromatic aldehydes and MEA as a catalyst (either equimolar or 0.1 mol% amount) in the ethanol medium. The structure of novel derivatives was confirmed by 1H NMR and LC-MS spectra. The anticonvulsant activity of all derivatives synthesized was studied in vivo on the model of PTZ-induced seizures. Latency of the seizures, the number of clonic-tonic seizures in one mouse, the percent of animals with clonic and tonic seizures, the duration of the seizure period, and the lifetime of the animals before death were evaluated and calculated.Conclusions. The results obtained are promising for further design of potential anticonvulsants among oxazole-bearing 4-thiazolidones with the possible mechanism of the anticonvulsant action through the GABA-ergic impact and inhibition of the prostaglandin and leukotriene synthesis. Мета. Синтезувати 5-ен-4-тіазолідинони з гетарильними фрагментами в молекулі як потенційні протисудомні засоби та провести скринінг їхньої протисудомної активності на моделі пентилентетразолових судом.Результати та їх обговорення. Проведено простий і зручний синтез нових 5-ен-похідних тіазол/оксазоловмісних 4-тіазолідинонів як потенційних протисудомних засобів. Структуру нових сполук досліджено та підтверджено методами спектрального аналізу (1Н ЯМР та LC-MS). 5-Хлор-3-метил-1-феніл-1H-піразол-4-карбальдегід зазнає амінолізу за атомом хлору дією моноетаноламіну (МЕА) в реакції Кньовенагеля з тіазол/оксазолвмісними 4-тіазолідінонами. Проведено первинний скринінг протисудомної активності синтезованих сполук на моделі пентилентетразол-індукованих судом та ідентифіковано активні сполуки.Експериментальна частина. Комерційно доступні 2-амінотіазол і 5-метилізоксазол-3-амін було використано як вихідні сполуки для одержання 2-хлор-N-(гетарил)ацетамідів. Останні обробленням амоній ізотіоціанатом було перетворено на тіазол/оксазолвмісні 4-тіазолідинони. Модифікацію за положенням С5 сполук проводили за реакцією Кньовенагеля з ароматичними/гетероароматичними альдегідами в присутності МЕА як каталізатора (в еквімолярній або 0,1 моль% кількості) в середовищі етанолу. Структуру нових синтезованих речовин підтверджено даними 1H ЯМР-спектроскопії та LC-MS. Протисудомну активність синтезованих похідних вивчали in vivo на моделі PTZ-індукованих судом. Оцінювали та розраховували латентність судом; кількість клоніко-тонічних судом в однієї миші; відсоток тварин із клонічними та тонічними судомами; тривалість судомного періоду та тривалість життя тварин.Висновки. Отримані результати є перспективними для наступного дизайну потенційних протисудомних засобів серед оксазолвмісних похідних 4-тіазолідинонів з можливим механізмом протисудомної дії через ГАМК-ергічний вплив та пригнічення синтезу простагландинів і лейкотриєнів
Валідація алкаліметричної методики кількісного визначення вільних органічних кислот у листі малини
Get PDF Organic acids are a large group of biologically active compounds that perform important functions in the plant organism. Moreover, all plants, regardless of the species and family, contain organic acids to a small or large extent as organic acids belong to intermediate metabolites arising from the oxidation of proteins and amino acids, fats and carbohydrates.Aim. To validate the method of alkalimetry proposed with potentiometric detection of the end-point for the quantitative determination of free organic acids in raspberry leaves.Results and discussion. The method proposed was validated according to the International Conference on Harmonization (ICH) guidelines. The linearity was in the concentration range of 40 – 200 % (r2 = 0.9991). The percentage of recovery was found to be in the range of 98.77 – 102.48 %. The repeatability and intermediate precision were 1.58 % and 1.74 %, respectively. The method is accurate and reliable, with the relative standard deviation of less than 2 %.Experimental part. Leaves of raspberry were collected in the Kharkiv region during the period of full ripening. A Hanna 2550 pH-meter with a HI 1131P potentiometric electrode was used for alkalimetric titration of free organic acids. The titration was carried out using a microburette with Class A accuracy.Conclusions. The alkalimetry method for the quantitative determination of free organic acids in raspberry leaves has been proposed and validated according to the following parameters: specifcity, linearity, accuracy, repeatability, intermediate precision, robustness. It has been confrmed that the method is simple, reliable, accurate and cost-effective.Key words: raspberry; leaves; free organic acids; alkalimetry; validationОрганічні кислоти – велика група біологічно активних сполук, які виконують важливі функції в обміні речовин рослин. Усі рослини, незалежно від виду та родини, містять органічні кислоти в невеликій або значній кількості, бо ці речовини належать до проміжних метаболітів, що утворюються в результаті окиснення білків, амінокислот, жирів та вуглеводів.Мета. Валідувати запропоновану алкаліметричну методику з потенціометричним виявленням кінцевої точки титрування для кількісного визначення вільних органічних кислот у листі малини.Результати та їх обговорення. Запропонований метод валідовано згідно з директивою International Conference on Harmonization. Лінійність зберігалася в діапазоні концентрацій 40 – 200 % (r2= 0,9991). Визначено, що відсоток відновлення становить 98,77 – 102,48 %, повторюваність та проміжна точність – 1,58 % та 1,74 % відповідно. Метод характеризується як точний і надійний, має відносне стандартне відхилення менше 2 %.Експериментальна частина. Листя малини в період повного дозрівання збирали в Харківській області. Для алкаліметричного титрування вільних органічних кислот використовували рН-метр Hanna 2550 з потенціометричним електродом HI 1131P. Титрування проводили мікробюреткою з класом точності А.Висновки. Розроблену титриметричну методику кількісного визначення вільних органічних кислоту листі малини валідовано за такими параметрами: специфічність, лінійність, точність, збіжність, внутрішня прецизійність, робасність. Підтверджено, що метод є простим, надійним, точним та економічно вигідним.Ключові слова: малина; листя; вільні органічні кислоти; алкаліметрія; валідаці
Дослідження впливу концентрації етилового спирту на антиоксидантну активність розчинів аскорбінової кислоти
Get PDFMuch attention is currently paid to the study of the antioxidant properties of various objects – individual antioxidants, dietary supplements, medicines, liquid plant extracts. Antioxidant medicines are widely used as the main or additional correction agents in the treatment of a number of diseases. Therefore, the study and development of procedures for determining the antioxidant activity is a prospective task for today.
Aim. To determine the contribution of different concentrations of ethanol to the level of the antioxidant activity (AOA) of ascorbic acid solutions by the potentiometric method.
Results and discussion. The different ethanol content in the solution had the following percent of the contribution to the value of AOA of ascorbic acid solutions – 1.85, 3.56, 4.89, 6.76, 7.63 % for 20, 40, 60, 80, 96 % ethanol, respectively. The linearity of the procedure was proven in the range from 0.039 to 0.31 mmol/L.
Experimental part. The object of the study was solutions of ascorbic acid prepared using ethanol of different concentrations – 20, 40, 60, 80, 96 %. Potentiometric measurements were conducted by a Hanna 2550 pH meter (Germany) with an EZDO 5010 combined platinum electrode. Weighing was carried out using an АN100 digital analytical balance (AXIS, Ukraine) with d = 0.0001 g. Ascorbic acid was purchased from Sigma Aldrich (≥ 99.0 %), K3[Fe(CN)6], K4[Fe(CN)6], NaHPO4, KH2PO4 were of analytical grade.
Conclusions. It has been found that ethyl alcohol affects the change of the potential in the electrochemical cell and the level of AOA of ascorbic acid solutions. The percentage of the contribution of different concentrations of ethyl alcohol to the AOA value ranges from 1.85 to 7.63 %. The approach and the formula for calculation that take into account the effect of ethyl alcohol on the final AOA result of the test sample of ascorbic acid in a water-alcohol solutions have been proposed. The results of this study can be used in the pharmaceutical and food industries to determine, assess and control the AOA level of dietary supplements, liquid extracts, tinctures, medicines, and alcoholic beverages.У цей час велику увагу приділяють вивченню антиоксидантних властивостей різних об’єктів – індивідуальних антиоксидантів, дієтичних добавок, лікарських препаратів, настоянок, рідких екстрактів рослин. Антиоксидантні препарати широко використовують як основний або додатковий коригувальний засіб у лікуванні захворювань. Тому вивчення і розроблення методики визначення антиоксидантної активності наразі є актуальним завданням.
Мета. За допомогою потенціометричного методу визначити залежність рівня антиоксидантної активності (АОА) розчинів аскорбінової кислоти від концентрації етанолу.
Результати та їх обговорення. Різний вміст етанолу в розчині мав такий відсоток внеску в значення антиоксидантної активності розчинів аскорбінової кислоти – 1,85, 3,56, 4,89, 6,76, 7,63 % для 20, 40, 60, 80 96 % етанолу відповідно. Доведено лінійність методики в діапазоні від 0,039 до 0,31 ммоль/л.
Експериментальна частина. Об’єктом дослідження були розчини аскорбінової кислоти, приготовлені з використанням етанолу різної концентрації – 20, 40, 60, 80, 96 %. Потенціометричні вимірювання проводили на pH-метрі Hanna 2550 (Німеччина) з комбінованим платиновим електродом EZDO 5010. Зважування проводили за допомогою цифрових аналітичних ваг АN100 (AXIS, Україна) з d = 0,0001 г. Аскорбінова кислота виробництва Sigma Aldrich (≥ 99,0 %); K3[Fe(CN)6], K4[Fe(CN)6], NaHPO4, KH2PO4 кваліфікації «хімічно чистий».
Висновки. З’ясовано, що етиловий спирт впливає на зміну потенціалу електрохімічної комірки й рівень АОА розчинів аскорбінової кислоти. Відсоток внеску етилового спирту різних концентрацій в значення АОА перебуває в діапазоні від 1,85 до 7,63 %. Запропоновано підхід і формулу обчислення, що враховує вплив етилового спирту на кінцевий результат АОА досліджуваного зразка аскорбінової кислоти у водно-спиртовому розчині. Результати цього дослідження можуть бути використані у фармацевтичній і харчовій промисловості для визначення, оцінювання та контролю рівня АОА дієтичних добавок, рідких екстрактів, настоянок, лікарських препаратів, алкогольних напоїв
1,2-Бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксид – малодосліджений білдинг-блок із високим синтетичним та фармакологічним потенціалом: синтез, хімічні властивості, біологічна активність
Get PDFAim. To analyze the available literature data on the methods of synthesis, chemical transformations and the biological activity of derivatives containing a sultone core – 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxide – and to show the possibilities of their further use in the construction of new molecular systems with attractive pharmacological properties.
Results and discussion. The most widespread method for the synthesis of 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxides is the cyclization of salicylic acid derivatives. The known chemical transformations of 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxides deal with all reaction centers of the heterocyclic fragment of the condensed system – C=O and CH2 groups, SO2–O bond, CH2CO fragment as a whole. It should be noted that the oxathiine nucleus is prone to undergo recyclizations. The use of 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxides in multicomponent transformations still remains hardly explored. The “abnormal” course of some classical transformations involving 1,2-benzoxathiine 2,2-dioxides is also noteworthy. The study of the pharmacological properties of 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxide derivatives is scarce and mainly based on their structural similarity to the coumarin core, which led to the study of anticoagulant, antimicrobial and antitumor properties for the sultone derivatives.
Conclusions. The analysis has shown a limited number of studies in each aspect – approaches to the synthesis of 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxides, their chemical transformations and the study of their pharmacological activity. In addition to a small number of publications on this heterocyclic system, there have been almost no sultone studies in the last 20 years. Taking this into account 1,2-benzoxathiin-4(3H)-one 2,2-dioxide and its derivatives deserve close attention as objects of research for experimental chemistry and pharmacology.Мета. Проаналізувати наявні літературні дані щодо методів синтезу, хімічних перетворень та біологічної активності похідних, які містять у своєму складі ядро сультону – 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксиду та показати можливості їх подальшого використання у побудові нових молекулярних систем з привабливими фармакологічними властивостями.
Результати та їх обговорення. Найбільш популярний метод для синтезу ядра 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксидів – циклізація похідних саліцилової кислоти. Відомі хімічні перетворення 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксидів зачіпають усі реакційні центри гетероциклічного фрагмента конденсованої системи – С=О та СН2 групи, SO2-O зв’язок та CH2CO фрагмент у цілому. Варто зазначити, що оксатіїнове ядро схильне до рециклізаційних перетворень. Використання 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксидів у багатокомпонентних перетвореннях досі залишається майже не дослідженим. Також звертає на себе увагу «аномальний» перебіг деяких класичних перетворень за участю 1,2-бензоксатіїн 2,2-діоксидів. Дослідження фармакологічних властивостей похідних 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксиду носить одиничний характер та базується на їх структурній схожості з ядром кумарину, що зумовило вивчення антикоагулянтних, протимікробних та протипухлинних властивостей для похідних цього сультону.
Висновки. Проведений аналіз засвідчив обмежену кількість досліджень щодо кожного аспекту – підходів до синтезу 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксидів, вивчення їх хімічних перетворень та фармакологічної активності. Окрім незначної кількості публікацій, де висвітлено особливості цієї гетероциклічної системи, останні 20 років майже немає робіт з досліджень сультону. З огляду на це, 1,2-бензоксатіїн-4(3Н)-он 2,2-діоксид та його похідні заслуговують на пильну увагу як об’єкти дослідження для експериментальної хімії та фармакології
Визначення активності холінестерази з використанням 3,3′,5,5′-тетраметилбензидину як індикаторної сполуки
Get PDFAim. To develop a new method, which has a good reproducibility of the experimental results, is fast, cheap and provides safe working conditions during the analysis, in order to determine the activity of cholinesterase.Experimental part. The light absorption of the test and control samples was measured using a CPhC-3-01 photoelectric photometer (420 nm, l = 3 cm). The reaction rate was characterized by the value of the optical density of the solution in 10 min (the fixed time method). Measurements were performed at +37 °C, the temperature of the reaction mixture was maintained by thermostatіng in water, the pH of the solutions was monitored potentiometrically using a glass electrode. The determination was repeated five times with each solution of a certain concentration of the enzyme. According to the average values obtained, the calibration graph of the specific activity of the enzyme (in international units – activity unit (AU/mg) – kmol/min to 1 mg of the substance) on the optical density of the solution was constructed. Using the mean value of five measurements of the optical density of the test solution the specific activity of the enzyme (U) was found by the calibration graph.Results and discussion. The essence of the method is the photometrical measurement of the rate of the enzymatic hydrolysis of acetylcholine in a buffer medium using 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine (TMB). The enzymatic hydrolysis reaction of the substrate was performed at pH 8.3, and in 10 min after the start the rate of enzymatic hydrolysis of acetylcholine was measured. The linear dependence of the optical density on the specific activity of the enzyme (U) was observed in the range of 3.5 – 28 AU/mg (activity unit/mg). The activity of the enzyme, according to the average results of 5 measurements, was 27.9 AU/mg. The declared activity the enzyme in accordance with the quality certificate was 28 AU/mg. The limit of quantification was 0.2 AU/mg. Metrological characteristics of the method were as follows: RSD = 1.8 % (n = 5; P = 0.95), accuracy – 0.45 %. These values indicate that the method proposed for determining the activity of cholinesterase is characterized by high sensitivity, reliability and reproducibility of the results. At the same time, it was proven that there was no systematic error in determining the activity of cholinesterase by the method developed.Conclusions. As a result of the research conducted a new method for determining the activity of the cholinesterase enzyme has been developed; it is characterized by high sensitivity, reliability and reproducibility of the results, and also provides safe working conditions during the analysis.Мета. Розробити новий метод визначення активності холінестерази, який має хорошу відтворюваність результатів експерименту, є швидкий, дешевий і забезпечує безпечні умови праці під час аналізу.Експериментальна частина. Світлопоглинання досліджуваного та контрольного зразків вимірювали на фотоелектричному фотометрі КФК-3-01 (420 нм, l = 3 см). Швидкість реакцій характеризували значенням величини оптичної густини розчину через 10 хв (методом фіксованого часу). Вимірювання здійснювали за +37 °C, підтримання температури реакційної суміші забезпечували за допомогою водяного термостата, рН розчинів контролювали потенціометрично за допомогою скляного електрода. Визначення оптичної густини розчину повторювали п’ять разів із кожним розчином певної концентрації ензиму. За отриманими пересічними даними будували градуювальну залежність питомої активності ензиму (у міжнародних одиницях (АО/мг) – кмоль/хв до 1 мг субстанції) від оптичної густини розчину. За пересічним з п’яти визначень значенням оптичної густини випробуваного розчину за допомогою градуювального графіка знаходили питому активність ензиму (U).Результати та їх обговорення. Суть методу полягає у фотометричному вимірюванні швидкості ферментативного гідролізу субстрату ацетилхоліну в буферному середовищі з використанням 3,3′,5,5′-тетраметилбензидину (ТМБ). Реакцію ферментативного гідролізу субстрату проводили за рН 8,3, а через 10 хвилин після початку вимірювали швидкість ферментативного гідролізу ацетилхоліну. Лінійна залежність оптичної густини від питомої активності ензиму (U) спостерігалась в інтервалі 3,5 – 28 АО/мг. Активність ензиму за пересічними результатами 5 визначень становила 27,9 АО/мг (заявлена у сертифікаті якості питома активність становить 28 АО/мг). Межа кількісного визначення – 0,2 АО/мг. Метрологічні характеристики опрацьованого способу були такими: RSD = 1,8 % (n = 5; P = 0,95), правильність – 0,45 %. Це свідчить, що запропонований спосіб визначення активності холінестерази крові характеризується високою чутливістю, достовірністю і відтворюваністю результатів. Водночас було доведено відсутність систематичної похибки під час здійснення визначення активності холінестерази опрацьованим методом.Висновки. У результаті проведених досліджень було опрацьовано новий метод визначення активності ферменту холінестерази, який характеризується високою чутливістю, достовірністю і відтворюваністю результатів, а також дозволяє забезпечити безпечні умови праці під час виконання аналізу
Новий хемілюмінесцентний метод визначення ацетилхоліну з використанням люмінолу
Get PDFAim. To develop а new simple non-enzymatic method for the determination of acetylcholine (ACh) by the chemiluminescent reaction of luminol under conditions of the enzymatic hydrolysis of acetylcholine (pH 8.5).Experimental part. The method proposed is based on the perhydrolysis reaction of ACh by the excess ofhydrogen peroxide with the formation of peracetic acid. The latter was further determined by the activation effect of the luminol chemiluminescent oxidation reaction in the presence of hydrogen peroxide. The analytical signal was the summary luminescence (Σ) registered within certain time.Results and discussion. The pH range of the analytically applicable system was from 8.2 to 8.5. The effect of ACh + H2O2 incubation period on the reaction progress was also studied. The increase of the incubation period enhanced the sensitivity of the method (the limit of detection (LOD)), but because of practical reasons (especially the detection speed) and practical experience the incubation period was set to 30 min. The linear dependence was observed in the acetylcholine chloride concentration range of (0.8 – 2.8) × 10-4 mol/L. While determining acetylcholine chloride in the concentration range of (1.1 – 2.2) × 10-4 mol/L the relative standard deviation (RSD) did notexceed 3 % ((X – μ) × 100 %/μ = –0.5…+0.5 %). The Limit of Quantitation (LOQ, 10S) was 7.7 × 10-5 mol/L.Conclusions. A new non-enzymatic kinetic method for the chemiluminescent determination of ACh in aqueous solutions and the pharmaceutical formulation Acetylcholinchlorid Injeel® has been proposed. This method is simple, fast, inexpensive, and thus appropriate for the routine ACh quality control in the laboratories of hospitals, pharmaceutical industries and research institutions.Key words: acetylcholine; chemiluminescence methodМета. Розробити новий простий неферментативний метод визначення ацетилхоліну (ACh) за допомогою хемілюмінесцентної реакції люмінолу за умов ферментативного гідролізу ацетилхоліну (рН 8,5).Експериментальна частина. Запропонований спосіб засновано на реакції пергідролізу ацетилхоліну надлишком пероксиду водню з утворенням пероцтової кислоти. Пероцтову кислоту далі визначали за допомогою ефекту активації реакції хемілюмінесцентного окиснення люмінолу в присутності пероксиду водню.Аналітичним сигналом була сумарна люмінесценція (Σ) за певний час.Результати та їх обговорення. Діапазон рН аналітично застосовної системи становив від 8,2 до 8,5. Додатково досліджено вплив інкубаційного періоду ACh+H2O2 на перебіг реакції. Збільшення інкубаційного періоду підвищило чутливість методу (межу виявлення (LOD)), але з практичних причин (особливо швидкості визначення) та практичного досвіду інкубаційний період було зафіксовано на рівні 30 хв. Лінійна залежність спостерігалась у діапазоні концентрацій ацетилхолін хлориду (0,8 – 2,8) × 10-4 моль/л. За визначення ацетилхолін хлориду в модельному розчині в межах концентрацій (1,1 – 2,2) × 10-4 моль/л відносне стандартне відхилення RSD не перевищувало 3 % ((X – μ) × 100 %/μ = –0,5…+0,5 %). Межа кількісного визначення (LOQ, 10S) становила 7,7 × 10-5 моль/л.Висновки. Запропоновано новий неферментативний кінетичний метод для хемілюмінесцентного визначення ацетилхоліну у водних розчинах та фармацевтичному засобі Acetylcholinchlorid Injeel®. Цей метод є простим, швидким, недорогим і придатним для рутинного контролю якості ацетилхоліну в лабораторіях лікарень, фармацевтичної промисловості та науково-дослідних установ.Ключові слова: ацетилхолін; хемілюмінесцентний мето
Сучасні хімічні дезінфектанти та антисептики. Частина І
Get PDFAim. To generalize and systematize information on the properties of modern chemical disinfectants and antiseptic agents (DA and AA).Results and discussion. The review provides generalized and systematized information on the properties of modern chemical DA and AA – alkylating reagents, aldehydes, amides, amidines, bisguanidines, dyes, halogenated reagents, halogens and their complexes, 2-nitrofuran derivatives. The classification of DA and AA by their chemical structure was carried out. The activity spectra, possible application ways and forms of DA and AA were given. Their toxicity and impact on the environment were described as well.Conclusions. On the basis of the analysis carried out it was shown that aldehydes, halogen-active compounds and halogen-containing complexes are modern effective DA and AA with a wide spectrum of biocidal action. Amides, amidines and bisguanidines are characterized by a narrow spectrum of activity. Dyes and 2-nitrofuran derivatives are old-fashioned antiseptics.Мета. Узагальнити та систематизувати інформацію щодо властивостей сучасних хімічних дезінфікувальних та антисептичних засобів (ДЗ і АЗ).Результати та їх обговорення. В огляді узагальнено та систематизовано інформацію про властивості сучасних хімічних ДЗ і АЗ – алкілувальних реактантів, альдегідів, амідів, амідинів та бісгуанідинів, барвників, галогенактивних реагентів, галогенів та їх комплексів, похідних 2-нітрофурану. Здійснено класифікацію ДЗ і АЗ за хімічною структурою, наведено спектри їхньої активності, напрями і форми застосування, описано токсичність і вплив на екологію.Висновки. Результати проведеного дослідження дозволяють констатувати, що сучасними ефективними ДЗ та АЗ з широким спектром біоцидної дії є альдегіди, галогенактивні сполуки і галогеновмісні комплекси. Аміди, амідини та бісгуанідини характеризуються вужчим спектром активності. Барвники та похідні 2-нітрофурану є морально застарілими антисептиками
Новий метод для визначення активності холінестерази
Get PDFAim. To develop a principally new method, which would allow achieving the necessary accuracy and reproducibility of the analysis results, for determining the activity of the blood cholinesterase; to create safe working conditions when performing the analysis.
Results and discussion. The kinetic method proposed for determining the activity of cholinesterase consists in photometric measurement of the rate of the enzymatic hydrolysis of the acetylcholine substrate (by its residue) in the phosphate buffer using p-phenetidine as an indicator. The rate of the enzymatic hydrolysis of acetylcholine was determined by the tangent of the inclination angle of the linear part of the kinetic curve in the А–t coordinates at a wavelength of 358 nm. The linear dependence of the conditional reaction rate (tgα) on the enzyme concentration was observed in the concentration range of 0.12 – 0.36 mg/mL. Metrological characteristics of the method developed were: RSD = 2.0 % (n = 5; P = 0.95), correctness 0.4 %. These values indicate that the method for determining the activity of blood cholinesterase is sensitive, reliable and reproducible.
Experimental part. The experiments on determining the rate of the enzymatic hydrolysis were repeated three times with a specific concentration of the enzyme. Using the data obtained the kinetic curves were constructed in the А–t coordinates; on their basis the tangents of the angles of inclination in min-1 were calculated. The calibration graph was constructed using the average values of the tangents of the angles of inclination, which corresponded to a certain concentration of the solution of the working standard sample of the enzyme. The equation of the calibration dependence of tgα-enzyme concentration was calculated by the method of least squares and found to be tgα (min-1) = –0.17с + 9.13 (r = 0.999).
Conclusions. As a result of the studies conducted, a new method for determining the activity of the cholinesterase enzyme has been developed. The method is characterized by a high sensitivity, reliability and reproducibility and provides safe working conditions when performing the analysis.Мета. Опрацювати принципово новий метод визначення активності холінестерази крові, який би дозволив досягнути необхідної точності та відтворюваності результатів аналізу, а також створити безпечні умови праці під час виконання аналізу.
Результати та їх обговорення. Запропонований кінетичний метод визначення активності холінестерази полягає у фотометричному вимірюванні швидкості ензимного гідролізу субстрату ацетилхоліну (за його залишком) у середовищі фосфатного буферу з використанням п-фенетидину як індикатора. Швидкість ензимного гідролізу ацетилхоліну вимірювали за тангенсом кута нахилу лінійної ділянки кінетичної кривої у координатах A–t за довжини хвилі 358 нм. Лінійну залежність умовної швидкості реакції (tgα) від концентрації ферменту спостерігали в інтервалі концентрацій 0,12 – 0,36 мг/мл. Метрологічні характеристики опрацьованого способу становили: RSD = 2,0 % (n = 5; P = 0,95), правильність 0,4 %. Це свідчить, що запропонований спосіб визначення активності холінестерази крові характеризується високою чутливістю, достовірністю і відтворюваністю результатів.
Експериментальна частина. Досліди з визначення швидкості ензимного гідролізу повторювали тричі з кожною концентрацією ензиму. За отриманими даними будували кінетичні криві в координатах А–t, за прямолінійними ділянками яких розраховували тангенси кутів нахилу у хв-1. Градуювальний графік будували за усередненими значеннями тангенсів кутів нахилу, які відповідали певній концентрації розчину робочого стандартного зразка ензиму. Розраховували рівняння градуювальної залежності tgα – концентрація ензиму за методом найменших квадратів. Рівняння градуювальної залежності tgα – концентрація ензиму мало вигляд tgα (хв-1) = –0,17с + 9,13 (r = 0,999).
Висновки. У результаті проведених досліджень було опрацьовано новий метод визначення активності ферменту холінестерази, який характеризується високою чутливістю, достовірністю і відтворюваністю результатів, а також дозволяє забезпечити безпечні умови праці під час виконання аналізу
Визначення катехінів у листі зеленого чаю методом ВЕРХ у порівнянні з методом спектрофотометрії
Get PDFAim. To study the qualitative composition, the quantitative content of catechins in green tea leaves and compare the data obtained with those evaluated by spectrophotometry.Materials and methods. Green tea leaves used for the analysis were collected in Anhui Province, China. The extract for the HPLC analysis was obtained by the maceration method with 60 % ethanol twice in the raw material/extractant ratio of 1 : 20. In the case of the spectrophotometric analysis, green tea leaves were extracted with 70 % ethanol twice by the maceration method in the raw material/extractant ratio of 1 : 20. The analysis of the extract from green tea leaves was performed by high performance liquid chromatography using a Prominence LC-20 Shimadzu chromatographic system (Japan) with a SPD-20AV spectrophotometric detector, an Agilent Technologies Microsorb-MV-150 column (reversed phase, C18 modified silica gel, length – 150 mm, diameter – 4.6 mm, particles size – 5 μm). Substances in the extract were identified by comparing the retention time and the spectral characteristics of the test substances with the same characteristics of the reference standards. Spectrophotometric measurements were carried out using a UV-1000 single beam spectrophotometer (China) with the pair of S90-309Q quartz square cells.Results and discussion. Using high performance liquid chromatography 5 catechins were identified. Among them epigallocatechin-3-O-gallate (10.85 %) predominated, while catechin (0.61 %) had the lowest concentration. The total amount of catechins in green tea leaves was 30.56 and 24.79 % by HPLC and spectrophotometry, respectively. The F- and t-tests showed that there was no significant difference between the results of HPLC and spectrophotometry.Conclusions. The qualitative composition and the quantitative content of catechins have been determined in the extract from green tea leaves by high performance liquid chromatography and spectrophotometry. Both HPLC and spectrophotometric methods can be used to determine the total catechin content in green tea leaves. The high content of catechins makes the extract promising for further study and creation of new herbal medicinal products and dietary supplements. The results obtained will be used for standardization of green tea leaves and for future pharmacological research of its extract.Мета. Методом ВЕРХ вивчити якісний склад і кількісний вміст катехінів листя зеленого чаю та порівняти результати з даними, отриманими методом спектрофотометрії.Матеріали та методи. Для аналізу використовували листя зеленого чаю, зібране в провінції Аньхой, Китай. Для ВЕРХ-аналізу екстракт отримували двічі методом мацерації 60 % спиртом у співвідношенні сировина/екстрагент 1 : 20. У випадку спектрофотометричного аналізу листя зеленого чаю двічі екстрагували 70 % спиртом методом мацерації у співвідношенні сировина/екстрагент 1 : 20. Аналіз витяжки листя зеленого чаю проводили методом високоефективної рідинної хроматографії за допомогою хроматографічної системи Prominence LC-20 Shimadzu (Японія) зі спектрофотометричним детектором SPD-20AV, колонка Agilent Technologies Microsorb-MV-150 (обернено-фазова, C18 модифікований силікагель, довжина 150 мм, діаметр 4,6 мм, розмір зерен сорбенту 5 мкм). Ідентифікацію речовин у витяжці проводили шляхом порівняння часу утримування і спектральних характеристик досліджуваних речовин з аналогічними характеристиками стандартів. Спектрофотометричні вимірювання виконували за допомогою однопроменевого спектрофотометра UV-1000 (Китай) з парою кварцових кювет S90-309Q.Результати та їх обговорення. За допомогою високоефективної рідинної хроматографії у листі зеленого чаю було ідентифіковано 5 катехінів, з-поміж яких переважає епігалокатехін-3-О-галат (10,85 %), а найменший вміст мав катехін (0,61 %). Сумарний вміст катехінів у досліджуваній сировині склав 30,56 % та 24,79 % за методом ВЕРХ та спектрофотометрією відповідно. Розрахунки F- і t- продемонстрували, що немає суттєвої різниці між результатами ВЕРХ та спектрофотометрією.Висновки. Якісний склад та кількісний вміст катехінів в екстракті листя зеленого чаю визначено за допомогою високоефективної рідинної хроматографії та спектрофотометрії. Для визначення загального вмісту катехінів у листі зеленого чаю можна використовувати як ВЕРХ, так і спектрофотометричний метод. Високий вміст катехінів в екстракті робить цю сировину перспективною для подальшого вивчення і ство-рення нових фітопрепаратів та дієтичних добавок. Отримані результати будуть використані для стандартизації листя зеленого чаю та для подальших фармакологічних досліджень його екстракту
Вивчення поліфенольних сполук трави анісу звичайного та визначення їхньої антиоксидантної активності
Get PDFAim. To study the qualitative composition and quantitative content of the polyphenolic compounds in Pimpinella anisum herb and determine their antioxidant activity.Results and discussion. Among the polyphenolic compounds contained in anise herb, chlorogenic acid(4.409 mg/g) predominates. Signifcant amounts of catechins (3.104 mg/g), apigenin derivatives (3.077 mg/g) and luteolin (1.864 mg/g) also accumulate in the herb. Minor amounts of myricetin (0.105 mg/g) and naringenin (0.019 mg/g) derivatives, rutin (0.189 mg/g), quercetin (0.028 mg/g), apigenin (0.009 mg/g) and hesperetin (0.002 mg/g) are present. According to the research results, the antioxidant activity of polyphenolic compounds of anise herb with reference to ascorbic acid was found to be 67.76 ± 0.05 mmol/g. Rutin exhibited the antioxidant activity at the level of 3979.59 ± 0.08 mmol/g.Experimental part. Pimpinella anisum herb collected during the flowering stage in the summer of 2019 inthe Kharkiv region (Ukraine) was used for analysis. The analysis of 70 % ethanolic extract from anise herb was performed by high performance liquid chromatography using a Prominence LC-20 Shimadzu chromatographic system (Japan) with a SPD-20AV spectrophotometric detector, an Agilent Technologies Microsorb-MV-150 column (reversedphase, C18 modifed silica gel, length – 150 mm, diameter – 4.6 mm, particles size – 5 μm). Identifcation of substances in the extract was carried out by comparing the retention time and the spectral characteristics of the test substances with the same characteristics of the reference standards. The antioxidant activity was determined by the potentiometric method (pH meter – Hanna 2550, with redox electrode EZDO PO50) with reference to ascorbic acid.Conclusions. The qualitative composition and quantitative content of polyphenolic compounds in the ethanolic extract of anise herb have been determined by high performance liquid chromatography. The total content of polyphenolic compounds is 17.576 mg/g. The antioxidant activity of polyphenolic compounds of anise herb with reference to ascorbic acid has been found to be 67.76 ± 0.05 mmol/g.Key words: polyphenolic compounds; anise; herb; high performance liquid chromatography; antioxidant activityМета. Вивчити якісний склад та кількісний вміст поліфенольних сполук трави анісу звичайного та визначити рівень їхньої антиоксидантної активності.Результати та їх обговорення. З-поміж поліфенольних сполук, що містяться в траві анісу звичайного, переважає хлорогенова кислота (4,409 мг/г). Також у траві накопичуються значні кількості катехінів (3,104 мг/г), похідних апігеніну (3,077 мг/г) та лютеоліну (1,864 мг/г). У мінорних кількостях присутні рутин (0,189 мг/г), похідні мірицетину (0,105 мг/г), кверцетин (0,028 мг/г), похідні нарингеніну (0,019 мг/г), апігенін (0,009 мг/г) та гесперетин (0,002 мг/г). За результатами дослідження визначено, що антиоксидантнаактивність поліфенольних сполук трави анісу звичайного, виміряна щодо аскорбінової кислоти, становить 67,76 ± 0,05 ммоль/г, для рутину антиоксидантна активність склала 3979,59 ± 0,08 ммоль/г.Експериментальна частина. Для аналізу використовували траву анісу звичайного, заготовлену в період цвітіння влітку 2019 року в Харківській області, Україна. Аналіз 70 % етанольної витяжки трави анісу звичайного проводили методом високоефективної рідинної хроматографії за допомогою хроматографічноїсистеми Prominence LC-20 Shimadzu (Японія) зі спектрофотометричним детектором SPD-20AV, колонка Agilent Technologies Microsorb-MV-150 (обернено-фазова, C18 модифікований силікагель, довжина 150 мм, діаметр 4,6 мм, розмір зерен сорбенту 5 мкм). Ідентифікацію речовин у витяжці проводили шляхом порівняння часу утримування і спектральних характеристик досліджуваних речовин з аналогічними характеристиками стандартів. Антиоксидантну активність визначали потенціометричним методом (рН-метр – Hanna 2550, з редокс-електродом EZDO PO50) щодо аскорбінової кислоти.Висновки. Методом високоефективної рідинної хроматографії визначено якісний склад та кількісний вміст поліфенольних сполук в етанольному екстракті трави анісу звичайного. Сумарний вміст поліфенольних сполук склав 17,576 мг/г. Виявлено, що антиоксидантна активність етанольного екстракту трави анісузвичайного щодо активності аскорбінової кислоти становить 67,76 ± 0,05 ммоль/г.Ключові слова: поліфенольні сполуки; аніс звичайний; трава; високоефективна рідиннахроматографія; антиоксидантна активніст