Repositorio Institucional de CIAD
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NIVEL DE OXIDACIÓN DE LDL Y SU ASOCIACIÓN CON LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA PARAOXONASA 1 EN SONORENSES CON SNPS DEL GEN ABCA 1
Uno de los factores de riesgo para desarrollar enfermedades cardiovasculares son las bajas concentraciones de colesterol HDL (HDL-C) ya que éste evita la oxidación del colesterol LDL mediante su enzima paraoxonasa 1. Un estudio previo en sonorenses asoció los polimorfismos (SNPs) R230C y el R1587K del gen ABCA1 con las bajas concentraciones de HDL-C. Objetivo: Evaluar el nivel de oxidación de LDL y su asociación con la concentración y la actividad de la enzima PON1 en sujetos adultos sonorenses con y sin los SNPs R230C y R1587K del gen ABCA1. Materiales y métodos: Se realizó un estudio de corte transversal con 57 adultos sonorenses previamente identificados con la presencia o ausencia de los SNPs R230C y R1587K del gen ABCA1. Se evaluó antropometría, composición corporal, presión arterial, dieta y actividad física. De marcadores bioquímicos se analizó el perfil de lípidos sanguíneos y glucosa por métodos enzimáticas colorimétricas. Las LDLOx se determinaron a través de la medición de anticuerpos anti LDLOx (Anti-LDLOx), la concentración de la enzima PON1 e insulina a través de métodos de ELISA y la actividad de la enzima PON1 por ensayo enzimático. Resultados: La concentración promedio de HDL-C en los sujetos de estudio clasificó como muy baja (39.44 ± 7.35 mg/dL). A su vez, las concentraciones de anticuerpos anti LDLOx se encontraron muy elevadas (540.37 ± 424 mU/mL), no encontrándose diferencias significativas entre portadores de SNPs (535.84 ± 478.43 mU/mL) y no portadores (543.25 ± 397.37 mU/mL). Así mismo, tanto la concentración (21.64 ± 12.42 ng/mL) como la actividad (53.33 ± 11.87 kU/L) de la enzima PON1 obtenidas se encontraron en niveles muy bajos y ninguna de éstas presentó asociación con la concentración de anticuerpos anti LDLOx (p > 0.05). Se observó una tendencia a tener un mejor perfil bioquímico metabólico cuando la concentración de PON1 es mayor a 22 ng/mL y la actividad de PON1 es mayor a 53 kU/L. Conclusión: El alto nivel de oxidación de LDL en la población estudiada, no se asoció con la baja concentración y baja actividad de la enzima PON1 y esto a su vez, fue independiente de la presencia de los polimorfismos del gen ABCA1
DISEÑO Y VALIDACIÓN DE ECUACIONES PARA ESTIMAR LA COMPOSICIÓN CORPORAL EN ADULTOS MAYORES CON SOBREPESO Y OBESIDAD
El objetivo fue diseñar y validar ecuaciones para estimar la grasa corporal y la masa corporal libre de grasa (MCLG) en adultos mayores de 60 años con sobrepeso y obesidad, utilizando el modelo molecular de 4C como estándar de oro. Metodología: Se determinó el agua corporal total por deuterio, el contenido mineral óseo por absorciometría dual de rayos X y la densidad corporal por pletismografía de desplazamiento de aire. Estas mediciones fueron incorporadas a la ecuación de Baumgartner et al. (1991) para obtener la grasa corporal. También se midieron diversas variables antropométricas y de bioimpedancia eléctrica. Para el diseño y la validación, la muestra total (n=133) se dividió aleatoriamente en dos grupos. En el grupo de diseño se utilizó regresión lineal múltiple. La precisión del modelo se evaluó mediante el coeficiente de determinación (R2) y el error estándar del estimador (EEE). En la muestra de validación, la exactitud del modelo se evaluó mediante el error puro, regresión lineal y por ANOVA de dos vías. El sesgo se probó mediante análisis de concordancia. Resultados: La ecuación de predicción generada para estimar la MCLG incluyó las siguientes variables: talla2/resistencia, peso corporal, pliegue bicipital y sexo; con una R2 de 0.90 y un EEE de 3.04 kg. En la muestra de validación el error puro fue de 3.12 kg, el cual es similar al valor del EEE de la nueva ecuación de 3.04 kg. A nivel individual, la línea de identidad no fue estadísticamente diferente de cero y la pendiente no fue estadísticamente diferente de uno. Asimismo, la R2 fue de 0.85. A nivel grupal no se encontraron diferencias significativas entre métodos. Finalmente, no hubo sesgo significativo entre la ecuación diseñada y el modelo de 4C. Conclusión: La ecuación desarrollada es confiable y puede ser de gran utilidad para estimar de manera sencilla la CC de adultos mayores con IMC entre 25.2 – 42.7 kg/m2
DESARROLLO Y EVALUACIÓN DE UN MÉTODO POR PCR DIGITAL EN GOTAS PARA LA CUANTIFICACIÓN DEL TRANSPORTADOR DE FOSFATO 1 EN PLANTAS DE TOMATE (Solanum lycopersicum L.) CON DEFICIENCIA DE FÓSFORO
El fósforo (P) es un macronutriente involucrado en procesos biológicos y metabólicos (respiración, división celular, síntesis de adenosín trifosfato, fotosíntesis, transducción de señales celulares, etc.) de las plantas. Su deficiencia, activa cascadas de señalización celular que modifican la expresión génica; así como la producción de enzimas, proteínas y metabolitos que inducen cambios fisiológicos como el retraso de la madurez, defectos en la coloración, crecimiento reducido del tallo, incrementa el desarrollo de raíces terciarias, entre otros. Actualmente, para el diagnóstico de la nutrición de los cultivos se emplean análisis fisicoquímicos; sin embargo, deben ser complementados con el análisis de suelo para obtener un panorama integral de la movilización de los nutrientes del suelo hacia la planta. Previamente se ha correlacionado la expresión del gen transportador de fosfato 1 (LePT1) en tomate, a la deficiencia de P, constituyendo una alternativa para el uso de éste como indicador del estado metabólico de las plantas y marcador molecular de deficiencia de P. Por lo que en el presente estudio, se desarrolló y evaluó una metodología para la cuantificación absoluta de copias de LePT1 mediante PCR digital en gotas, en plantas de tomate con deficiencia inducida de P, como base para generar una metodología molecular de diagnóstico complementaria, que permita adecuar la nutrición al metabolismo celular de la planta. Para ello, primeramente se amplificó por PCR punto final con ADNc de hoja de tomate (var. San Marzano) como molde, un fragmento de aproximadamente 146 pb de LePT1. Con la secuencia del mismo, se diseñaron iniciadores y sonda de hibridación para su cuantificación en PCR digital en gotas. Se optimizaron las condiciones de amplificación en PCR digital en gotas, mediante un diseño central compuesto de tres factores (temperatura de alineamiento, concentración de iniciadores y concentración de sonda de hibridación) y dos variables de respuesta (resolución y variabilidad,). Las condiciones óptimas de amplificación de LePT1 fueron: 59.77 ºC de temperatura de alineamiento, 782.16 nM de iniciadores y 269.53 nM de sonda
Regulación de citocinas séricas por la administración de leches fermentadas con cepas específicas de Lactobacillus spp. o Lactococcus spp. en un modelo murino estimulado con LPS
Los productos lácteos fermentados por bacterias ácido lácticas (BAL) son conocidos por sus efectos benéficos a la salud, ya que algunos de ellos contienen componentes bioactivos. La regulación del sistema inmune es uno de los beneficios de estos productos. El objetivo principal de este estudio fue evaluar el efecto de leches fermentadas por cepas específicas de Lactobacillus (J20, J23, J25 o J28) y Lactococcus (NRRL B-50 571 o NRRL B-50 572) sobre la regulación de los niveles séricos de citocinas proinflamatorias (IL-1β, IL-6 y TNF-α) y antiinflamatorias (IL-10), en un modelo murino estimulado con lipopolisacárido (LPS). Se seleccionaron las cepas por sus propiedades tecnológicas y se determinaron las condiciones del proceso de fermentación de la leche. Una vez determinadas las mejores condiciones de fermentación, se administraron diferentes tratamientos preparados con cada cepa; a saber, leche fermentada (FM), leches fermentada pasteurizada (PFM) y fracciones <10 KDa de PFM (PFM10). Los tratamientos fueron administrados diariamente durante 4 semanas a ratas Wistar macho. Posteriormente, se indujo un proceso de inflamación aguda en los animales mediante la administración subcutánea (s.c.) de LPS y se determinaron los niveles de las citocinas 6 h posteriores a la inducción. Finalmente se identificaron los péptidos presentes en las leches fermentadas que podrían estar involucrados en la regulación de las citocinas séricas. Los resultados evidenciaron que los tratamientos preparados con leches fermentadas (FM, PFM y/o PFM10) por cepas de Lactobacillus (J20, J23, J25 o J28) o Lactococcus (NRRL B-50 571 o NRRL B-50 572) regularon los niveles séricos de citocinas, ya que fueron capaces de disminuir los niveles de IL-6 y TNF-α e incrementar los niveles de IL-10. Los resultados fueron dependientes de la cepa y el tratamiento administrado. También se observó que el efecto se mantuvo con la pasteurización de las leches fermentadas. En conclusión, la administración de leches fermentadas por cepas específicas de Lactobacillus o Lactococcus mostró un efecto regulador de citocinas séricas en un modelo murino. Por lo anterior, las leches fermentadas estudiadas podrían tener potencial como alimentos funcionales.
Palabras clave: Leches fermentadas, citocinas, Lactococcus, Lactobacillus, lipopolisacárido, péptidos
LA CAPACIDAD DE ABSORCION DEL CONOCIMIENTO DETERMINANTE DE LA INNOVACIÓN EN LAS UNIDADES PRODUCTIVAS ACUÍCOLAS DE CAMARÓN: EL CASO SONORA
El principal objetivo de este trabajo de investigación es analizar el papel que juega la capacidad de absorción del conocimiento (CapAb) como determinante de la innovación en las empresas acuícolas. La CapAb está conformada por cuatro dimensiones; Adquisición, Asimilación, Transformación y Explotación; las cuales intervienen en la innovación de las organizaciones. Si bien existen estudios previos que señalan la influencia positiva de la CapAb como determinante de la innovación, ninguno de ellos señala la relevancia de cada una de las dimensiones en su individualidad, correlación y sinergia hacia la innovación; esto nos motiva a realizar un estudio con sustento empírico en las Unidades Productivas Acuícolas (UPAS) de camarón en el estado de Sonora, se elige este sector debido a la relevancia y dinamismo del mismo; lo cual la vuelve una industria clave para otorgarle importancia a su activo más preciado, el conocimiento. Este estudio se realizó mediante la aplicación de una encuesta a 45 UPAS de camarón en el Estado de Sonora. Dirigida a gerentes y propietarios de las UPAS. Con la información que generó este instrumento se demostró mediante el análisis estadístico de ecuaciones estructurales en qué medida cada una de las dimensiones que contempla la CapAb están asociadas positivamente con los niveles de innovación existentes en las empresas participantes y comprobando los resultados con regresión lineal múltiple. Destacando la dimensión “Asimilación” por los coeficientes de determinación más elevados en comparación con las dimensiones restantes. Esta investigación contribuye a la literatura en dos aspectos: (1) resaltando la necesidad de abordar las diferentes dimensiones de la CapAb de manera individual y su relación con la innovación (2) La relevancia de la CapAb en un sector dinámico, no explorado como el acuícola.
Palabras clave: Capacidad de absorción del conocimiento (CapAb), Unidades Productivas Acuícolas (UPAS), Innovación
GOBERNANZA EN LA COMPETITIVIDAD DE LAS COOPERATIVAS: CASO SOCIEDADES COOPERATIVAS DE PRODUCCIÓN PESQUERA DE RIBERA
En México las cooperativas surgen después de los gobiernos emanados de la revolución con el objetivo de impulsar el desarrollo rural y ser una fuente de generación de empleos. Estas organizaciones representan a grupos de importancia económica y social que dan sustento a muchas familias y hoy en día enfrentan problemas de competitividad y un deterioro en sus estructuras organizativas. El objetivo de esta investigación es identificar en qué medida se lleva a cabo la gobernanza cooperativa y cómo se relaciona con las condiciones que permiten mejorar la competitividad de las sociedades cooperativas pesqueras ribereñas, para proponer estrategias de desarrollo local. El fundamento teórico parte de la gobernanza cooperativa definida como la capacidad de estas organizaciones para cumplir con su propósito o identidad cooperativa. Para abordar el problema de investigación se parte de la hipótesis que señala que la gobernanza cooperativa permite mejorar la condición competitiva de las cooperativas de pescadores ribereños. La verificación de este postulado se realizó a partir del análisis de las sociedades cooperativas de producción pesquera (S.C.P.P.) con permiso o concesión de pesca comercial de camarón, ubicadas en el sistema lagunar Topolobampo-Ohuira-Santa María, Ahome, Sinaloa, México. Se realizaron entrevistas a actores clave y se analizó la información con la técnica de análisis clásico del contenido. Se pudo corroborar que la gobernanza cooperativa permite mejorar la condición competitiva de las cooperativas de pescadores ribereños; el estudio mostró que en la cooperativa con mejores condiciones competitivas lleva a cabo un mayor nivel de gobernanza cooperativa. En contraste, la organización que presenta un menor nivel de gobernanza cooperativa es la que exhibe condiciones competitivas menos favorables.
Palabras Clave: Competencia, cooperación, gobernanza, cooperativas, competitivida
ANÁLISIS TRANSCRIPTÓMICO DE YEMAS DE VID (Vitis vinifera L.) DURANTE LA LIBERACIÓN DE LA LATENCIA INDUCIDA POR CIANAMIDA DE HIDRÓGENO Y COMPUESTOS AZUFRADOS
Uno de los mayores obstáculos para la producción comercial de uva de mesa en lugares con inviernos cálidos, es la latencia prolongada, provocada por la ausencia de frío invernal, por lo que la aplicación de medios artificiales para romper la latencia es un factor dominante para mantener una producción económicamente exitosa. El rompedor de latencia por excelencia es la cianamida de hidrógeno (HC). Regionalmente, una mezcla de compuestos azufrados (SD) presenta resultados similares a HC. Poco es conocido de los eventos metabólicos y celulares que desencadena la aplicación de HC y mucho menos se ha estudiado para los SD. Mediante el uso de microarreglos, se analizó el transcriptoma de yemas de vid durante la liberación de la latencia inducida por HC y SD. Los genes expresados diferencialmente por los tratamientos fueron enriquecidos en funciones biológicas y se evaluó la expresión de los genes del sistema antioxidante, ascorbato peroxidasa (APX), dehidroascorbato reductasa (DHAR), glutatión reductasa (GR) y catalasa (CAT), mediante PCR de tiempo real. Para HC se expresaron diferencialmente genes relacionados a respuestas al estrés, metabolismo secundario, oxidación-reducción y se enriquecieron funciones moleculares de glutatión S-transferasas (GST). Los SD indujeron la expresión de genes involucrados en la biosíntesis de pared celular, al igual que el control. Se encontró inhibido el enriquecimiento del metabolismo secundario y oxidación-reducción por efecto de SD e inducida la función de GST. Utilizando el perfil de MapMan, confirmamos que HC induce genes del metabolismo secundario y de oxidación-reducción, específicamente monodehidroascorbato reductasa (MDHAR), tiorredoxina 2 (TRX2), glutarredoxina (GRX). Para los SD se confirma la inhibición de la expresión del metabolismo secundario y oxido-reducción, similar al control. Por qPCR confirmamos que HC inhibe la expresión de APX, DHAR y CAT, provocando una mayor peroxidación. Por el contrario, los SD presentan un perfil de expresión similar al control, manteniendo la homeostasis redox. Ambos tratamientos presentaron niveles altos de expresión de GR, indicándonos una participación del ciclo del glutatión. Conjuntando estos resultados, podemos concluir que el tratamiento HC induce a un estrés abiótico y oxidativo en las yemas de vid, lo que podría ser la causa de su fitotoxicidad. En cambio, los SD inducen a la expresión de genes relacionados al sistema antioxidante como GR y GSTs
PARTICIPACIÓN DE p53 Y METALOTIONEÍNA EN LA RESPUESTA APOPTÓTICA A HIPOXIA EN EL CAMARÓN BLANCO Litopenaeus vannamei, Boone 1931
El camarón blanco Litopenaeus vannamei es un organismo capaz de sobrevivir a periodos de hipoxia a través de estrategias que incluyen cambios en el metabolismo energético. Este trabajo se condujo para investigar si es la evasión apoptótica, mediada por las proteínas p53 y metalotioneína (MT), una estrategia más de L. vannamei para tolerar la hipoxia. Se caracterizó el gen MT de L. vannamei y se encontró que comparte con otros organismos el arreglo de tres exones/dos intrones. Entre los elementos de respuesta presentes en su región promotora se encuentra uno para p53. En condiciones de normoxia, MT se expresa diferencialmente en hemocitos, intestino, branquias, pleópodos, músculo y -con los niveles más altos- en hepatopáncreas y corazón. Se analizaron los transcritos de MT en hepatopáncreas y branquias después de 3 y 24 h de hipoxia (1.5 mg OD·L-1), encontrándose que aumentan a las 3 h, posiblemente para conferir mayor capacidad antioxidante al organismo. Además, el silenciamiento de p53 con RNA de doble cadena (dsRNA) induce un dramático aumento en la expresión de MT tanto en condiciones de hipoxia como de normoxia, sugiriendo que p53 participa en el control de la expresión de MT mediante un mecanismo regulatorio de interferencia transcripcional. La apoptosis evaluada por actividad de caspasa-3 y citometría de flujo, revela una alta actividad apoptótica en hemocitos de camarón aún en normoxia (5 mg OD·L-1). Bajo condiciones de hipoxia (1.5 mg OD·L-1), la apoptosis en hemocitos aumenta significativamente. Al silenciar p53 para evaluar su participación en el proceso apoptótico, éste se disminuye significativamente después de 24 h de hipoxia, efecto que no se observó a las 48 h. Lo anterior sugiere que en hemocitos de camarón pudieran existir vías de apoptosis tanto dependientes como independientes de p53. El silenciamiento de MT no tuvo efecto significativo sobre la frecuencia apoptótica frente a hipoxia en estos experimentos. El silenciamiento de p53 y MT bajo condiciones de normoxia aumenta significativamente la apoptosis, lo que sugiere que el estrés impuesto por el silenciamiento de estos genes, desencadena vías apotóticas independientes de p53 y MT
LAS PROLAMINAS DEL MAIZ INDUCEN RESPUESTA INMUNE CELULAR EN ALGUNOS PACIENTES CON ENFERMEDAD CELIACA
La enfermedad celiaca (EC) es un desorden sistémico mediado inmunológicamente en
individuos predispuestos y es inducido por gliadinas del trigo, principalmente después
de deamidadas por la transglutaminasa tisular (TG) del intestino. En raros casos, el maíz
induce los síntomas por lo que se hipotetiza que las zeinas, aunque diferentes a gliadinas
pero deamidables por la TG, son capaces de inducir una respuesta celular similar en
algunos pacientes celiacos. Nuestro objetivo fue demostrar que las zeínas inducen una
respuesta inmune celular y la reacción pro-inflamatoria que la precede. Se midió
respuesta pro-inflamatoria y permeabilidad de monocapa en la línea celular CACO-2 al
estimularlas con digeridos de zeínas y gliadinas. La respuesta inmune se evaluó
estimulando biopsias del duodeno de pacientes celiacos con los péptidos sintéticos Z34-
mer y G33-mer, productos inmunogénicos de la digestión de α-zeína y α-gliadina
respectivamente. Ambos péptidos deamidados fueron utilizados para estimular linfocitos
T de sangre periférica extraídos de dos pacientes con EC y tres controles sanos retados
in vivo con gluten después de una dieta sin gluten de al menos un mes. Las zeínas
aumentaron la permeabilidad de la monocapa celular y la liberación de la proteína
zonulina-1 (ZO-1). Simultáneamente, la respuesta pro-inflamatoria fue evidenciada por
el aumento de los marcadores moleculares como interleucina 8 (IL-8), ciclooxigenasa 2
(COX2) y la proteína fosforilada p38 cinasa (pp38 MAPK). Z34-mer aumentó la
producción de interferón gamma (IFN-γ) en 3 de 5 biopsias de pacientes celiacos de
forma similar al G33-mer. Además, en las células T de uno de dos pacientes, Z34-mer
indujo una mayor producción de IFN-γ respecto a los controles y similar al G33-mer. En
conclusión, las zeínas son capaces de inducir una respuesta inmune celular similar a la
producida por gliadinas, en algunos pacientes celiacos
ALTERACIONES EN EL PERFIL DE TERPENOIDES EN OLIVO (Olea europaea L.) COMO RESPUESTA A LA INOCULACIÓN CON Verticillium dahliae
La verticilosis es considerada como la patología más importante y devastadora
del olivo. El agente causal de esta enfermedad es el hongo Verticillium dahliae,
el cual provoca importantes pérdidas económicas a nivel mundial. Actualmente
no existe un tratamiento efectivo y seguro para su control, por lo que es
necesario evaluar tratamientos alternativos que garanticen el control de la
enfermedad y que a su vez sean amigables con el medio ambiente y la salud
del consumidor. Una posible alternativa son los terpenoides, metabolitos
secundarios con actividad antifúngica que participan en el mecanismo de
defensa natural de las plantas. Por lo que, el objetivo de este trabajo fue evaluar
los cambios en el perfil de terpenoides en plantas de olivo variedad ‘Manzanillo’
en respuesta a la inoculación con V. dahliae. Se propagaron plantas de olivo a
partir de estacas semileñosas; se aisló el hongo en medio selectivo a base de
polipectato de sodio, y se inoculó en plantas jóvenes de olivo. Se realizaron 4
muestreos a distintos tiempos (0, 1, 3 y 5 días post-inoculación), se seccionó el
tallo de cada planta en 4 secciones de 3 cm. A cada sección se le determinó el
contenido de terpenoides totales por espectrofotometría, y se identificaron y
cuantificaron por HPLC. Se observó por microscopia de fluorescencia las
alteraciones causadas por el patógeno. Se aislaron colonias de Verticillium spp
en medio selectivo, con características macro y microscópicas que coinciden
con las reportadas en la literatura para Verticillium dahliae. Se obtuvieron 96
plantas de olivo enraizadas de 1 año de crecimiento con tallos de 1 cm de
diámetro. La inoculación indujo un aumento en la concentración de terpenoides
totales en tallo de olivo, presentándose la mayor concentración al día 1 en los 3
cm cercanos al punto de inoculación (78.84 μg/g peso seco). Se identificaron
los ácidos triterpénicos pentacíclicos: oleanólico, maslínico, betulínico, ursólico,
y los alcoholes triterpénicos eritrodiol y uvaol, de los cuales el ácido maslínico
se incrementó 3.8 veces su concentración con respecto al testigo. En cortes
histológicos de tallo inoculado se observó por microscopia de fluorescencia la
formación de tilosas en el xilema en respuesta a la inoculación del patógeno