Repositorio Institucional de CIAD
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DIRECCIONAMIENTO DE ANTÍGENOS A CÉLULAS DENDRÍTICAS DEC205+ A TRAVÉS DE UN ANTICUERPO QUIMÉRICO ANTIGENIZADO
Get PDFEl direccionamiento de antígenos a células dendríticas mediante anticuerpos híbridos mejora la activación del sistema inmunológico e induce respuestas más robustas. Esta estrategia representa un gran potencial en el campo de la vacunación, donde continuamente se buscan alternativas más eficaces y seguras para el control de enfermedades infecciosas. Una de ellas es el síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRS) donde las vacunas tradicionales no son suficientes para su control y se mantiene un problema latente en la porcicultura a nivel mundial. Uno de los receptores de células presentadoras de antígenos con más potencial para este fin es el receptor DEC205. Ensayos de direccionamiento a DEC205 en diversos modelos animales muestran resultados alentadores en cuanto a producción de anticuerpos y citocinas, características deseadas en un candidato a vacuna. El objetivo de este trabajo fue el producir un anticuerpo quimérico antigenizado dirigido al receptor DEC205 porcino, capaz de estimular células dendríticas e inducir una respuesta inmune protectora, utilizando péptidos inmunogénicos del virus del PRRS (PRRSV) como modelo. Para lo anterior, se diseñaron genes in silico de las cadenas variables de un anticuerpo de ratón anti-DEC205 porcino y cadenas constantes de un anticuerpo IgG1 porcino, y se clonaron en el plásmido pcDNA3.1(-) para su expresión en el sistema eucariota Expi293F. Aunado a esto se expresó una versión antigenizada con péptidos inmunogénicos de proteínas estructurales y no estructurales del PRRSV. Se comprobó su capacidad de reconocer el dominio extracelular del DEC205 porcino mediante Western blot y por citometría de flujo se demostró que es capaz de identificar células dendríticas DEC205+. Para probar su inmunogenicidad se realizó un ensayo de inmunización en cerdos. Las inmunizaciones se realizaron vía intradérmica en el área del cuello, con un refuerzo a las tres semanas seguido de un desafío con PRRSV dos semanas después. Se analizaron niveles de anticuerpo anti-PRRSV, así como frecuencia de células CD4+ productoras de IFNγ, proliferación celular y carga viral en pulmón, amígdala y sangre. Se encontró que el anticuerpo antigenizado aumentó la inmunogenicidad de los péptidos, ya que fue capaz de estimular la producción de anticuerpo y disminuir la carga viral en amígdala. Sin embargo, no se observaron diferencias en carga viral en pulmón ni sangre, lo que sugiere que el anticuerpo confiere limitada inmunidad protectora en cerdo
ANÁLISIS FARMACOGNÓSTICO Y MOLECULAR DE Turnera diffusa var. aphrodisiaca y Turnera diffusa var. diffusa Willd. Ex. Schult
Get PDFLa damiana mexicana (Turnera diffusa Willd. Ex. Schult), se utiliza en la medicina tradicional como hipoglucemiante, tranquilizante, control de síntomas de la menopausia, infecciones genito-urinarias y afrodisíaco, este último uso es el más popular y por el cual, específicamente la damiana de California tiene una gran demanda tanto nacional e internacionalmente. Sin embargo, su comercialización se ha visto afectada por la adulteración de sus productos, debido a la falta de mecanismos de identificación e información limitada sobre las diferencias entre las variedades actualmente conocidas. El objetivo de este estudio fue elaborar una monografía con bases científicas, de hojas de las variedades aphrodisiaca y diffusa de Turnera diffusa, cultivadas bajo las mismas condiciones. Una monografía de plantas medicinales consta de parámetros para su control de calidad y la comprobación de sus principios activos terapéuticos, por ello, este trabajo se dividió en dos etapas: una etapa descriptiva, donde, se realizaron los estudios para determinar parámetros de control de calidad, a nivel macroscópico y microscópico, se obtuvo un perfil cromatográfico por HPTLC (cromatografía de capa fina de alta resolución) de extractos metanólicos y hexánicos de cada variedad, además se analizaron los perfiles genéticos, por marcadores de ADN denominados ISRRs (Inter Secuencias Simple Repetidas). En los resultados obtenidos, las hojas de la var. difusa fueron dos veces más grandes que las de la variedad aphrodisiaca. Se observó mayor densidad de tricomas glandulares en la var. aphrodisiaca. Las hojas de ambas variedades son dorsiventrales e hipostomáticas con estomas paracíticos. En los perfiles por HPTLC, para el extracto metanólico se obtuvieron diez picos para la var. aphrodisiaca y ocho para la var. diffusa, las bandas fueron de coloraciones amarillas a naranja las cuales pertenecen a flavonoides, mientras que en los perfiles del extracto hexánico se observaron bandas en coloraciones violetas, lo que indica la presencia de terpenos, mientras que en el cromatograma se obtuvieron nueve picos para cada variedad, con diferencias en los tiempos de retención y altura
IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE TRANSPORTADORES DE FÓSFORO (PHT1) Y ZINC (ZIP) EN TOMATE (Solanum lycopersicum L.)
Get PDFLas plantas poseen un sistema de respuesta ante condiciones ambientales no favorables que se perciben como condición de estrés. Dos grandes familias de proteínas participan en la homeostasis celular del fósforo y zinc, las cuales se asocian con los mecanismos de regulación del transporte de estos elementos para cubrir las funciones biológicas de las células. En el presente trabajo se utilizaron bases de datos disponibles del genoma del tomate (Solanum lycopersicum L.) para la caracterización de secuencias putativas de transportadores de la familia ZIP; mientras que se dedujeron roles funcionales a partir de secuencias no caracterizadas de miembros de la familia PHT1. Se realizó una búsqueda bibliográfica exhaustiva de donde se seleccionaron las secuencias candidatas a ser caracterizadas y evaluadas en tomate; posteriormente se realizó una caracterización in silico de tres genes de la familia ZIP (ZIP4, ZIP5 y ZIP8) con el uso de diversas herramientas para evaluar su regulación ante deficiencia inducida de Zn en plántulas bajo sistema hidropónico. La estrategia aplicada y el estado del arte recopilado de la caracterización de ambas familias de proteínas, se presentan en dos artículos de revisión. A partir de esta revisión, se seleccionaron las condiciones de espacio-temporalidad a evaluar en plantas de tomate Micro-tom. A partir del análisis de secuencias se realizaron modelaciones y caracterizaciones in silico y se reportan los distintivos estructurales y conformacionales que las asemejan a secuencias previamente caracterizadas. Se caracterizaron dos isoformas de la familia PHT1 en tomate, las cuales no han sido reportadas previamente y éstas presentan sitios de acción potencialmente distintivos. Adicionalmente se identificaron cinco nuevos miembros de la familia ZIP (ZIP2, 3, 4, 5 y 8) en tomate cuyo análisis in silico muestra alta homología con las secuencias previamente reportadas. Los ensayos experimentales de expresión génica realizados bajo condiciones limitadas en aporte de Zn sugieren la regulación temporal de ZIP5 y ZIP8. De esta investigación derivó información que sustenta la existencia de secuencias candidatas a cumplir funciones de transporte de Zn y P, las cuales no han sido funcionalmente caracterizadas; sin embargo, es necesario ampliar los estudios para confirmar su identidad y función, que sirva de base para considerarlas en el diseño futuro de estrategias de manejo nutrimental de cultivos.
Palabras clave: ZIP, tomate, zinc, homeostasis
ESTUDIO AGRONÓMICO Y PROPIEDADES FUNCIONALES DE CULTIVARES DE JAMAICA (Hibiscus sabdariffa L.) CON ESTRÉS HÍDRICO EN INVERNADERO
Get PDFLas plantas durante su desarrollo están expuestas a factores bióticos y abióticos, éstos provocan estrés y como consecuencia, cambios morfológicos, fisiológicos y bioquímicos en plantas, esto depende de la severidad y duración del estrés, genotipo, mecanismos de defensa, etapa de desarrollo e interacciones genotipo/ambiente. La sequía produce las mayores limitaciones para el crecimiento y desarrollo de cultivos; sin embargo, diversas investigaciones demuestran que niveles moderados de estrés hídrico inducen la producción de metabolitos secundarios, sin afectar las características morfológicas. Por lo tanto, el propósito de esta investigación fue estudiar el efecto del estrés hídrico sobre compuestos químicos y síntesis de antocianinas en cultivares de jamaica (Hibiscus sabdariffa L.); para ello, se evaluó la dinámica de crecimiento de seis cultivares (4Q4, Criolla Huajicori, Cruza Negra, UAN16-2, UAN 25-1 y UAN 6-Puga) bajo condiciones de invernadero y se caracterizó la composición química y nutracéutica de cálices. Se determinó la influencia del estrés hídrico en el desarrollo de 4Q4, Cruza Negra y UAN16-2 y su efecto en la calidad química relacionada con pigmentos mediante cromatografía líquida de alta resolución (UPLC). Finalmente, se seleccionaron y validaron genes endógenos (UBI1, FE1α, ANS y GAPDH) en 4Q4, mediante RT-qPCR con el software RefFinder que permitan en un futuro evaluar la expresión de genes involucrados en la síntesis de antocianinas. Los resultados de ésta investigación muestran que para todos los cultivares de jamaica de acuerdo al análisis principal de componentes, el contenido de fibra total, fibra insoluble, fenoles, antocianinas, humedad, cenizas y capacidad antioxidante (ORAC, DPPH) son los atributos que más contribuyen a la calidad nutricional y nutracéutica de cáliz, donde Cruza Negra puede considerarse la más sobresaliente. El estudio agronómico mostró que la tasa de crecimiento relativo de los cultivares de jamaica se ajusta a un modelo lineal positivo, cúbico positivo y cuadrático negativo, mientras que la tasa de crecimiento del diámetro de tallo exhibe un modelo lineal positivo y cuadrático negativo, ambos procesos con respecto a días después de trasplante. Asimismo, se determinó que un régimen de riego moderado (65% de humedad) es indicado para potenciar el aumento de antocianinas, donde UAN16-2 incrementó un 55% el contenido de cianidina 3-O-sambubiósido y el estrés hídrico extremo (33% de humedad) afectó la concentració
INFLUENCIA DE FACTORES BIÓTICOS Y ABIÓTICOS EN LA OCURRENCIA DEL VIRUS DE LA INFLUENZA AVIAR EN AVES SILVESTRES DE INTERÉS CINEGÉTICO EN SONORA
Get PDFLa influenza aviar, es una enfermedad causada por el virus de la influenza aviar (VIA), afecta principalmente a las aves, y puede tener potencial pandémico. Diversos factores ambientales podrían incrementar el riesgo de transmisión de los VIA hacia otras poblaciones. El objetivo del estudio fue analizar la ocurrencia del VIA en aves silvestres de interés cinegético y su asociación con factores bióticos y abióticos en un agroecosistema de Sonora. Se realizó un estudio analítico transversal con muestreo por conveniencia en una Unidad de Manejo para aprovechamiento cinegético al sur de Sonora (temporada 2018-2019). Se colectaron 1,201 hisopados cloacales de palomas Alas Blancas (Zenaida asiatica) (n=597), Huilota Común (Zenaida macroura) (n=592) y de Collar Turca (Streptopelia decaocto) (n=12), y 103 hisopados de 8 especies de patos, de los géneros Anas sp. (n=56), Mareca sp. (n=34), Spatula sp. (n=9) y Aythya sp. (n=4). La detección del VIA tipo A se realizó mediante la amplificación del gen de Matriz y Hemaglutinina subtipos H5 linaje euroasiático y norteamericano por RT-qPCR. Para la determinación de la abundancia relativa y diversidad de especies, se realizaron censos en 15 rutas del Valle del Yaqui durante el otoño-2018, invierno-2019. Las palomas fueron negativas a influenza. La prevalencia de influenza aviar en patos fue del 12.6%, donde la mayoría de las muestras positivas (76.9%), fueron de la especie Anas crecca. Dos muestras resultaron positivas para H5 linaje norteamericano (Aythya marila y Anas crecca). La variación estacional de la abundancia y diversidad de especies, encontró que el índice de Simpson fue de 0.91 en otoño y 0.77 en invierno, y el de Shannon-Wiener en otoño fue de 2.84 e invierno de 2.45. Se encontraron 74 especies en otoño, donde las más abundantes fueron: Columba livia (17.94%) y Zenaida asiatica (12.87%); mientras que en invierno se observó la presencia de 87 especies, con dominancia del Xanthocephalus xantthocephalus (44.91%) y Agelaius phoeniceus (12.10%). Los resultados confirman la ocurrencia del VIA con alta prevalencia en especies acuáticas migratorias. La prevalencia cero en muestras de paloma de esta región árida indica que no hay suficiente evidencia para concluir que son especies puente de VIA al entorno doméstico en este agroecosistema. Los factores ambientales y los de estructura poblacional, no pudieron asociarse a la ocurrencia del VIA en las poblaciones estudiadas
EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE DOS ENVASES ACTIVOS CON ACEITE ESENCIAL DE AZAHAR (Citrus aurantium) EN LA VIDA DE ANAQUEL DE LA TORTILLA DE MAÍZ
Get PDFLa tortilla de maíz es un alimento básico en México que tiene una actividad de agua de 0.98, humedad de 45-50% y nutrientes suficientes que hacen de ésta el medio ideal para la proliferación de microorganismos (Rooney y Serna, 2016). Este tipo de deterioro causa alteraciones negativas en la calidad sanitaria. Lo anterior aunado a falta de buenas prácticas de manufactura, ocasionan que la vida de anaquel de la tortilla sea entre 8 y 16 d en refrigeración. El objetivo de la presente tesis fue evaluar la capacidad antimicrobiana de envases activos con aceite esencial de azahar (AEA) fabricados por dos procesos y su efecto en la vida de anaquel de las tortillas de maíz adquiridas en un comercio local.
Los microorganismos identificados en la tortilla de maíz fueron Escherichia coli, Aspergillus niger y Penicillium sp. Se evaluó la concentración mínima inhibitoria (CMI) del AEA frente a Escherichia coli (1.12E6 UFC), Aspergillus niger (100,000 conidias) y Penicillium sp (100,000 conidias) la cual fue de 12.5, 85.0 y 85.0 mg/mL, respectivamente. Estos datos se emplearon para el diseño y elaboración de los dos envases activos: envase activo por el proceso de extrusión (E) y envase activo por el proceso de recubrimiento (R). Una vez fabricados, se envasaron tortillas en cada tipo de envase y un control (sin AEA) por 25 d a 5°C, encontrando que la concentración de bacterias mesófilas aerobias y hongos y levaduras en las tortillas de los envases activos se redujo significativamente respecto a las cuantificadas en las tortillas del envase control (p<0.05). La vida de anaquel de las tortillas de maíz en los envases activos se extendió en un 53 y 66%, respecto al control y tuvieron una aceptabilidad para olor y sabor mayor o igual al 80 y 38%, respectivamente. Por todo lo anterior se infiere que la adición de AEA en un envase activo es una alternativa para preservar la calidad de alimentos como la tortilla de maíz
Relación entre estilos de liderazgo y responsabilidad social empresarial en las organizaciones productoras de uva de mesa sonorense
Get PDF"Las organizaciones sonorenses del sistema vid de mesa se han visto presionadas por segmentos de consumidores especializados que demandan frutos que cumplan criterios de calidad directa (color, sabor, dulzura, textura y tamaño) e indirecta (relacionados con inocuidad y ciertas condiciones ambientales, sociales y económicas de los trabajadores), codificadas en lo que se conoce como Responsabilidad Social Empresarial (RSE). Esas nuevas imposiciones del mercado, además de propiciar cambios en las organizaciones tienden a demandar cierto tipo de gerente o líder que las ayude en esta fase transitiva.
Considerando lo anterior, el objetivo del presente trabajo de investigación fue relacionar como los estilos de liderazgo coadyuvan en implementar la RSE en el caso de las organizaciones sonorenses exportadoras de uva de mesa. La hipótesis de investigación que guía este trabajo señala que los liderazgos transformacionales son los que permiten mayores niveles de RSE en las organizaciones.
Para acceder a la información de interés, se realizaron entrevistas a gerentes de las principales organizaciones productoras de uva de mesa localizadas en el municipio de Hermosillo, Sonora, siendo elegidos 12 en total, logrando una representatividad estadística del 90% de confianza y 7.5% de error.
Los resultados obtenidos demuestran que los lideres transformacionales y transaccionales de las organizaciones sonorenses exportadoras de uva de mesa son los que permiten mayores niveles de RSE; resaltando los transaccionales con los puntajes más altos, ya que este principio ético en las productoras fue impuesto más como una exigencia de sus clientes que por una iniciativa propia de sus propietarios.
ESTUDIO DEL POTENCIAL EFECTO PROTECTOR DE METABOLITOS INTRACELULARES DE Lactobacillus casei CRL 431 CONTRA EL ESTRÉS OXIDATIVO INDUCIDO POR AFLATOXINA B1
Get PDFEstudios recientes han demostrado que las bacterias ácido lácticas (BAL) poseen propiedades antioxidantes, lo cual podría ser utilizado como estrategia para la prevención de enfermedades crónico degenerativas relacionadas con el estrés oxidativo. Sin embargo, se necesitan estudios que permitan profundizar en la identificación de los metabolitos responsables de dicha actividad. En este sentido, el objetivo de la presente investigación fue estudiar el potencial efecto protector del contenido intracelular de bacterias ácido lácticas específicas, contra el estrés oxidativo inducido por aflatoxina B1 e identificar los metabolitos relacionados con las propiedades antioxidantes. Los resultados de la presente tesis demostraron, en general, que el contenido intracelular de las cepas probióticas presentan las mayores propiedades antioxidantes en comparación con las células completas y fragmentos de pared. La etapa de selección, evidenció que el contenido intracelular de la cepa Lactobacillus casei CRL 431 fue la que mostró las mejores propiedades antioxidantes. Los datos sugieren que la naturaleza de los compuestos antioxidantes es principalmente de origen lipídico y proteico, observándose la participación de glutatión, pero en menor medida. Por otra parte, el análisis del espectro de Raman mostró una variedad de compuestos con potencial antioxidante, incluyendo cisteína, triptófano, tirosina, ácido mirístico, ácido esteárico, ácido palmítico y ácido oleico y glutatión. Finalmente, los resultados de los ensayos in vitro, ex vivo e in vivo sugieren que CI-CRL431, posee metabolitos capaces de atravesar las membranas de células epiteliales e inhibir la oxidación a nivel celular, reducir el daño oxidativo de las membranas de eritrocitos, así como modular el sistema antioxidante en organismos vivos, respectivamente. Por lo tanto, se concluye que el contenido intracelular de la cepa Lactobacillus casei CRL 431 puede ser una fuente prometedora de antioxidantes dietarios, con un alto potencial para ser utilizado en la preparación de alimentos fermentados y/o suplementos. De esta forma, pueden mejorar la capacidad antioxidante total del consumidor y puedan ayudar en la prevención de enfermedades asociadas al estrés oxidativo inducido por agentes pro-oxidantes, particularmente por aflatoxina B1
Mecanismos Moleculares Involucrados en el Crecimiento Muscular del Pargo Flamenco Lutjanus guttatus
Get PDFSe investigó el efecto de la fuente de proteína y la restricción total de alimento en el pargo flamenco Lutjanus guttatus. Primeramente, se generó un transcriptoma de referencia a partir de once tejidos (cerebro, corazón, gónada, hígado, intestino, músculo, piel blanca, piel oscura y grasa visceral) utilizando la plataforma Illumina HiSeq 2000. El ensamblaje del transcriptoma fue realizado con Trinity, mientras que la anotación se realizó con Trinotate; se ensamblaron 267,601 contigs con una longitud promedio de 845 pb; mientras que se identificaron 85,677 proteínas hipotéticas. Se extrajeron secuencias de interés del transcriptoma para la generación de oligos para cuantificación de expresión génica por qPCR. En cerebro, se examinó la expresión de pacap; en hígado, igf1, igf2, ghr, lal, atg7 y ulk1; y en músculo, mtor, igf1, igf2, myod1, myod2, myogenin, atg7,ulk1, foxo3a, foxo3b, murf1, mafbx, mstn1 y mstn2. Se realizó un ensayo de alimentación, utilizando tres dietas, una formulada a base de harina de pescado (FM), una formulada a base de harina de carne porcina y subproductos avícolas (PPM), y una dieta vegetal (VEG), con gluten de maíz y concentrado de proteína de soya. La dieta vegetal ocasionó un crecimiento reducido, así como una reducción en la expresión de genes del eje somatotrópico y genes miogénicos; sin embargo, no se encontró un aumento en la expresión de mecanismos de atrofia. Los resultados indican que la proteína vegetal carece de nutrientes necesarios para L. guttatus. En un segundo experimento, se sometió a juveniles de L. guttatus a una semana (1WF) y dos semanas (2WF) de ayuno total, con el propósito de inducir una respuesta de crecimiento compensatorio. Después del ayuno, los peces mostraron una reducción en la masa corporal, así como una intensa movilización de reservas lipídicas. En cuanto a la expresión génica, una semana de ayuno ocasionó un aumento en la expresión de genes involucrados en procesos proteolíticos en tejido muscular, más no en hígado. Por otro lado, dos semanas de ayuno generaron cambios inesperados en la expresión génica pues no hubo un aumento en la expresión de genes involucrados en proteólisis muscular. Durante la realimentación, se registró un aumento en la ingesta de alimento y tasas de crecimiento en la primera semana post-realimentación. El perfil de expresión génica no se caracterizó por una sobreexpresión en genes involucrados en crecimiento en el grupo 1WF
LEPTOSPIROSIS Y SU TRANSMISIÓN ZOONÓTICA EN TRABAJADORES DE EXPLOTACIONES DE GANADO BOVINO DEL ESTADO DE SONORA
Get PDFLa leptospirosis es la enfermedad zoonótica con mayor distribución en el planeta y es causada por bacterias del género Leptospira. Debido a que es zoonótica, se considera una infección de riesgo ocupacional que afecta a los trabajadores que tienen contacto con animales enfermos. El objetivo del estudio fue identificar la seroprevalencia de anticuerpos anti-leptospira y factores de riesgo, nivel de conocimiento y percepción de los riesgos a la salud por Leptospira spp., que influyen en la transmisión y potencial zoonótico de esta bacteria en trabajadores de explotaciones con ganado de leche, de carne y de doble propósito de Sonora. Es un estudio epidemiológico analítico transversal exploratorio realizado de octubre del 2018 a mayo del 2019. El muestreo fue por conveniencia en 17 sitios de explotación de ganado bovino, se tomaron muestras sanguíneas y se aplicaron cuestionarios a los participantes (n=60). La detección de anticuerpos anti-leptospira se hizo mediante la prueba de microaglutinación en placa (MAT), usando como antígenos a los serovares Australis, Autumnalis, Bratislava, Canicola, Cynopteri, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorragiae, Mankarso, Pomona, Pyrogenes, Sejroe y Wolffi. La edad promedio de los trabajadores fue de 41±17.5 años y el 78.33% eran hombres. El 71.67% de los individuos estuvieron en la categoría de conocimiento bajo de la infección. La percepción de riesgos obtuvo un promedio de puntaje de 33.4 y sólo el 21.6% de los participantes tuvo una percepción de riesgos alta. El conocimiento sobre la enfermedad de Weil se asoció (p<0.05) con la percepción de riesgos a la salud. Sin embargo, estas variables no se asociaron a la presencia de anticuerpos anti-leptospira. La seroprevalencia de anticuerpos anti-leptospira fue de 41.66% en los trabajadores de explotaciones de ganado bovino de Sonora. Se encontró prevalencia de todos los serovares probados, siendo Canicola, Bratislava y Mankarso los serovares predominantes en la población de estudio. Se encontró que trabajar en ejidos representa un riesgo de contraer leptospirosis (RM=3.62; IC=1.03-12.71, p=0.044) y el tomar muestras sanguíneas de los bovinos podría aumentar el riesgo de infección (RM=3.62; IC= 0.85-15.28; p=0.08). El estudio aporta información del estado actual de esta zoonosis en trabajadores de explotaciones de bovinos en Sonora la cual podría ser la base para el diseño de intervenciones que disminuyan el riesgo de transmisión de Leptospira en esta población