Ehime University Institutional Repository

市川, 克明

Japanese

モラヴィア兄弟団の管楽アンサンブルについての一考察

笹沼, 朋子

脆弱化する労働者の保護に関する覚書 : 日本政策金融公庫(うつ病・自殺)事件(大阪高判平成26年7月17日労判1108号13頁、大阪地判平成25年3月6日労判1108号52頁)を参考にして

寺谷, 亮司

北海道におけるワイン産業の新動向 : 余市産地と空知産地を中心に

野本, ひさ

平尾, 智隆

花田, 真吾

岡, 靖子

垰, 康介[他]

どのような体験が愛大学生コンピテンシーを獲得させるのか? : キャリア・ポートフォリオのテキストマイニング分析

山口, 由等

20世紀初頭の名古屋の流通基盤整備と都心化

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)thesi

菊池, 聡

KIKUCHI, Satoshi

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名 菊池 聡 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
  
 
  
 
  
 
  
 
 
論  文  名  
睡眠鎮静剤であるブロムワレリル尿素投与の敗血症治療効果：JAK1 阻害との関連 
 
審査結果の要旨（2,000 字以内） 
敗血症は重症患者にとって死亡の原因となりうる重篤な病態である。今回の研究では睡眠
鎮静剤であるブロムワレリル尿素（BU）に注目し、ラット盲腸結紮穿刺（CLP）による敗血
症モデルと腹腔マクロファージ(AMs)、肺胞マクロファージ(PMs)を用いて抗炎症作用やシグ
ナル伝達解析を行った。 
CLP ラット敗血症モデルは BU 非投与群での死亡率が 85％であったが BU 投与群では 50％
と有意に死亡率を改善させた。また CLP 施術後 24 時間で様々な検査を行い BU の効果を検討
したところ、BU 投与群では有意に血清 IL-6 の産生とクレアチニンの上昇を抑制した。血液
ガス検査では酸素化能を改善し、乳酸の産生を抑制した。肺の免疫染色では BU は肺の浮腫
を抑制し、炎症の指標となる CD-11b や Iba1 の陽性細胞数を減少させた。AMs に LPS、LPS+B
U を加え mRNA でサイトカインを調べたところ、炎症性サイトカインのみならず抗炎症性サ
イトカインも抑制した。回腸末端の免疫染色では、敗血症群で漿膜面に pSTAT1 陽性細胞が
多く見られたが BU 投与群では pSTAT1 陽性細胞が減少した。BU の作用機序の検索では、LPS
と INFγを用いシグナル伝達の解析を行ったところ BU は LPS 刺激で起こる TBK のリン酸化
と IkB の減少を抑制しなかった。一方で BU は INFγ刺激で起こる STAT１のリン酸化を抑制
した。PMs で siRNA を用いたノックダウン系で BU は NO の産生を抑制しなかった。NF-kB を
ノックダウンした PMs で LPS 刺激では STAT1 のリン酸化が起こらなかった。NF-kB をノック
ダウンした AMs で LPS 刺激では STAT1 のリン酸化は消失したが IFNγを加えたところ STAT1
のリン酸化が起こり、BU はそのリン酸化も抑制した。 
LPS によって導かれる炎症シグナルは NF-kb の核内移行とそれに続く JAK1-STAT1 の活性
化によって起こると考えられる。従って JAK1-STAT1 の活性化の阻害は敗血症治療のターゲ
ットと思われ、ブロムワレリル尿素が敗血症の新規医療薬の候補となりうると思われた。 
 
本研究の発表において以下のような質問が出された。 
１． なぜ敗血症作用薬として BU に注目したのか、その経緯は。 
２． 既存薬に新しい作用を見出すドラッグ・リポジショニングとしての有用性はどうか。 
３． JAK1/STAT1 シグナルへの特異性の検討はしているか。 
４． 分子メカニズムから見た副作用の問題はどのように考えているか。 
５． 敗血症の動物モデルには他にどのようなものがあるか。 
６． ヒトの敗血症と類似の所見が得られているのか。 
７． BU との併用薬やその効果はどうか。 
８． マクロファージ以外のＴ細胞系は関与していないのか。 
９． BU のヒトへの臨床応用についてどのような構想があるのか。 
 
以上各審査委員は論文内容のみならず、その関連領域を含めた幅広い質問を行った。その
結果、申請者は各質問に対して明確に応答し、学位授与に値する充分な見識と能力を有する
ことが認められた。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


English

The ameliorative effects of a hypnotic bromvalerylurea in sepsis

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)doctoral thesi

文, 明

BUN, Mei

DGCR6 at the proximal part of the DiGeorge critical region is involved in conotruncal heart defects

清松, 悠

KIYOMATSU, Hiroshi

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名  清松 悠 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
 
      論  文  名 変形性関節症モデルにおける診断的応用を目的とした第二次高調波発生 
（SHG）イメージングによる軟骨変性過程の定量的評価 
審査結果の要旨 
 変形性関節症 (OA: osteoarthritis)は、軟骨破壊や骨の異常増殖に特徴づけられる炎症性
慢性疾患であり、その早期診断が実現すれば患者の QOL(quality of life)向上につながるこ
とが期待される。しかしながら、従来のレントゲンや CT スキャンによる画像診断法では、軟
骨組織を直接造影することはできず、MRI においても軟骨の変性を高感度で検出することは困
難である。近年、疾患モデル動物を用いた病態解明や診断・治療法開発のための研究ツールと
して、光イメージング技術が注目されている。特に、先端的光学技術を駆使した多光子励起顕
微鏡を用いた非線形光学光イメージングを用いることにより、生体組織を傷つけずに高い空間
分解能で細胞・組織の形態変化や生体分子の動態をリアルタイムかつ、多次元的に捉えること
が可能となってきた。 
 清松悠氏等は、先進的なイメージング技術として注目されている第二次高調波発生（second 
harmonic generation: SHG）イメージングと画像解析法および統計解析法によって、軟骨組織
の形態学的特徴や変性の程度を定量化し、診断的応用への展開を目指した多光子励起顕微鏡の
基盤技術の確立を目的として以下のような検討を行った。 
① マウス変形性関節症モデルを作成し、多光子励起顕微鏡による観察を病理組織学的な検討
と対比させ、多光子励起顕微鏡の有用性について検討を行った。 
② 同様に、自然発症の変形性関節症を模した老齢マウスにおいても軟骨変性の評価を行った。 
この際、全身の細胞核が蛍光で確認できる H2B-GFP マウスを用いて、軟骨基質の SHG イメー
ジと軟骨細胞における GFP の 2 光子励起蛍光イメージを取得して、コントロールマウスと対比
させて軟骨変性の評価を行った。 
その結果、定量的画像解析によって関節軟骨表面の不整像、軟骨基質の微細な構造破壊、シグ
ナル強度分布の不均一化、軟骨細胞数の有意な減少を明らかにすることに成功した。さらに、
画像視野中の SHG シグナルの分布を標準偏差 (standard deviation: SD)が高い値を示す群と
低い値を示す群に分類することが出来、SD 低値群では、軟骨層の菲薄化、硝子軟骨の異所性
増生が見られ、SD 高値群では繊維軟骨増生や軟骨下骨の露出が認められることを明らかにし
た。清松悠氏らは、これらの発見により、軟骨基質中のⅡ型コラーゲンの分子構造や組成変化
など、軟骨変性の過程を定量的に評価することによって、OA の新たな診断指標となり得るこ
とを示した。 
 本論文の公開審査会は、平成 27 年 2 月 2 日に開催された。清松悠氏による研究内容の英語
による発表の後、１）SHG イメージングの分解能、焦点深度、生物学的な意義、２）人に対す
る応用と変形性関節症を早期発見にむけての実用性、３）治療展開への展望、４）病理形態的
な特徴である fibrillation 所見がどのように観察されるか、５）病理診断との併用の有用性
などについて審査委員より質問があり、清松悠氏はそれに対して明快に応答した。英語による
発表は、研究の背景から今後の展望まですべての研究内容が正確に英語で表現されており、ス
ライドに用いられた図表も必要かつ十分なものが選別されていた。従って、審査委員会は全員
一致して、本研究が学位に値すると判断した。 


Quantitative SHG imaging in osteoarthritis model mice, implying a diagnostic application

Ehime University (愛媛大学)博士(農学)thesi

佐藤, 彰彦

SATO, Akihiko

（第３号様式）(Form No. 3) 
学  位  論  文  要  旨  
Dissertation Abstract 
 
 
氏名：  
Name 
佐藤 彰彦  
 
学位論文題目：  
Title of Dissertation 
Studies on antiallergic activities of edible plants and fruits 
(食用植物、果実の抗アレルギー活性についての研究 ) 
 
学位論文要旨：  
Dissertation Abstract 
 
 
 
 
 
 
 
 
Some of common flavonoids, phytochemicals that may be rich in various 
vegetables and fruits showed a great suppression of degranulation of RBL 2H3 cells. 
Isorhamnetin showed the highest suppression of degranulation at 3.1 μmol/L. Flavones 
and flavonols such as isorhamnetin, luteolin and quercetin bearing double bond 
between C2 and C3 positions showed high level (IC50: 3.1 μmol/L to 3.7 μmol/L) of the 
activities in suppression. As antioxidant activities of flavonoids were related with 
anti-inflammatory activity, chemical structure activity relationship of flavonoids was 
investigated by TBA tests for antioxidant activity and RBL-2H3 tests for anti-allergic 
activity. As the results, aromatic ring on C-ring was indispensable for the anti-allergic 
activity. However, aromatic ring with orth diols on B-ring was essential for antioxidant 
activity. Therefore the active sites and acting mechanisms of flavonoids for 
anti-allergic activity and antioxidant activity was found to be a bit different even 
though polyphenolic character of flavonoids are required in both activities. This kind 
of information is quite useful for the selection of target plants that may contain 
valuable flavonoids as nutraceutical ingredients. 
The following compounds with higher antiallergic activities were isolated from Eau 
de Cologne mint leaves: 5,6,4'-trihydroxy-7,8-dimethoxyflavone (M6), 
5,6,4'-trihydroxy-7,8,3'-trimethoxyflavone (M7), 
5,6-dihydroxy-7,3',4'-trimethoxyflavone (M8), 
5,6-dihydroxy-7,8,3',4'-tetramethoxyflavone (M9), and 5,6-dihydroxy-7,8,4'- 
trimethoxyflavone (M10). The IC50 values of compounds M6−M10 against RBL-2H3 
（第３号様式）(Form No. 3) 
cells were 6.7, 2.4, 5.6, 3.0, and 6.1 μM. Compounds M7 and M9 (IC50 2.4 μM and 3.0 
μM) had the highest antiallergic activities among the flavonoids previously reported. 
The amounts of M7, M9, and M10 isolated were fairly high, at 177.7 mg/kg, 278.0 
mg/kg, and 179.7 mg/kg in the mint, respectively. LD5 value (index of toxicity) and 
LD5/IC50 ratio of M7 and M9 indicate that the safety is greater than that of luteolin, a 
typical antiallergic substance. The extract containing powerful antiallergic flavones, 
M6−M10 with higher hydrophobicity could be selectively separated from the extract 
containing luteolin and other flavonoids glycosides by partition with dichloromethane 
and water. Therefore, compounds M7 and M9 in mints, and the dichloromethane extract 
would be the most potent and preventive resources against allergy. 
3,4-DHPEA-EA is a kind of secoiridoid first found in three Japanese olive 
pomaces: Mission, Lucca, and Manzanillo. These varieties showed high activity of 
3,4-DHPEA-EA as an antiallergic active substance with IC50 at 33.5 ± 0.6 μg/mL. 
Because 3,4-DHPEA-EA was the most abundant among the active substances in the 
pomaces and the activity of 3,4-DHPEA-EA was greater than that of hydroxytyrosol 
and elenolic acid, 3,4-DHPEA-EA, which has the ester linkage of hydroxytyrosol and 
elenolic acid, should be essential for antiallergic activity. Although a trace amount 
(1.04 mg/kg) of luteolin in the pomace showed the highest antiallergic activity with 
IC50 at 0.752 ± 0.1 μg/mL, we concluded that the entire antiallergic effect derives from 
the abundance of 3,4-DHPEA-EA, especially in the green olive pomace of the Mission 
variety in October, which showed the highest level of 3,4-DHPEA-EA (5033 ± 118 
mg/kg). Therefore, the Mission variety had the most effective antiallergy property. 
The edible parts of onions used for daily meals have antiallergic activity (IC50 = 
20.8 to 310.1 μg/mL). The correlation coefficient between the antiallergic activity of 
eleven onions (eight cultivars, three onions from local markets) and thirty-four peaks 
in HPLC chromatograms of eleven crude extracts isolated using the QuEChERS method 
indicated that quercetin 4'-glucoside (A22) has a highly-positive correlation (0.91) with 
antiallergic activity. Quercetin 4'-glucoside (A22) isolated from Satsuki cultivar onion 
showed high antiallergic activity (IC50 = 3.0 ± 0.2 μg/mL) and a high amount (69.4 
mg/kg). Therefore, we conclude that QuEChERS extraction and correlation coefficient 
are a systematic method of selection or prediction for main active compounds, without 
having to isolate all the candidate compounds and biologically test potent fractions. 
Overall, we also conclude that quercetin 4'-glucoside is a unique flavonol that is 
water-soluble, has high antiallergic activity, and is abundant in onion. 
The entire results raise the value as the antiallergic material of the food used in 
usual meals (onion and mint), and flavonoid is concerned with the antiallergy mainly. 
In the olive study, new function as antiallergy was found in secoiridoid, and this result 
promote more effective use of waste material. This study provides significant and basic 
information regarding for further development leading compounds of antiallergic drugs 
or nutraceutical applications. 


Studies on antiallergic activities of edible plants and fruits

嶋田, さおり

SHIMADA, Saori

栄養教諭を中心とした学校における食育システムの研究

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