Biotecnia (E-Journal)
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    Contaminación orgánica por coliformes, Nitrógeno y Fosforo en los ecosistemas acuáticos de la cuenca Ayuquila-Armería, Jalisco, México

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    The Ayuquila-Armería river basin is within the classification of priority basins in Mexico, given its high diversity and due to its high degree of alteration of functional dynamics and the levels of social pressure it presents, therefore, it is necessary to carry out a analysis of water quality within the basin. The objective was to evaluate organic contamination, carrying out two sampling campaigns in the rainy season (2015) and dry season (2016), in 18 sites in the basin. The comprehensive analysis of physicochemical and biological variables was implemented. 90% of the sites presented eutrophication given the PTotal concentrations, 77% exceeded the permissible limit for the NTotal concentrations; the IIB showed that 19% of the sites present a high degree of organic contamination; in the rainy season the highest concentrations of CFU (18 to 190 CFU / mL) were found and 50% of the sites exceeded the permissible limit (10 CFU / mL). The influence of tributary tributaries to the main channel increases drastically in the rainy season, it increases flows and impoverishes the quality of surface water by the carryover of pollutants from rural and urban areasLa cuenca del río Ayuquila-Armería se encuentra dentro de la clasificación de cuencas prioritarias de México, dada su alta diversidad y por su alto grado de alteración de la dinámica funcional y los niveles de presión social que presenta, por ende, es necesario realizar un análisis de la calidad del agua dentro de la cuenca. El objetivo fue evaluar la contaminación orgánica, realizando dos campañas de muestreo en la temporada lluviosa (2015) y seca (2016), en 18 sitios de la cuenca. Se implemento el análisis integral de variables físicoquímicas y biológicas. El 90 % de los sitios presento eutrofización dadas las concentraciones de PTotal, el 77 % superó el límite permisible para las concentraciones de NTotal; el IIB evidencio que el 19 % de los sitios presenta un alto grado de contaminación orgánica; en la temporada lluviosa se encontraron las mayores concentraciones de UFC (18 a 190 UFC/mL) y un 50 % de los sitios superó el límite permisible (10 UFC/mL). La influencia de los afluentes tributarios al cauce principal aumenta drásticamente en la temporada de lluvias, este incrementa los caudales y empobrece la calidad del agua superficial por el arrastre de contaminantes desde las zonas rurales y urbana

    Color influence on phenolic compounds and bioactive properties of honey from Guerrero, Mexico

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    Honey is mainly composed of glucose and fructose between 80 and 85 %, which come from the nectar collected by the bees; therefore, it is considered a great caloric source. The present study aimed to evaluate the influence of color, on chemical composition and bioactive properties of polyfloral honey collected in different geographical regions of Guerrero state, Mexico. The honey samples were from the 2018 harvest and honeys were analyzed to determine their total phenolic and flavonoids content, as well as their antioxidant and antimicrobial activity. The phenolic and flavonoids content varied considerably, and the highest values were obtained for dark amber honeys. Similarly, dark amber honeys showed higher antioxidant activity. The antibacterial activity was more effective against Gram-positive bacteria than Gram-negative bacteria; also, results indicated that fungi were less susceptible than bacteria. A positive correlation between color and antioxidant capacity was found. Correlation existed also between color vs phenolics content, vs flavonoid content or between phenolic vs flavonoid. Principal component analysis (PCA) on bioactive results was a useful tool to characterize different types of honey based on the variables of each group in relation to the similarity between the samples.La miel está compuesta principalmente por glucosa y fructosa entre un 80 y 85 %, que provienen del néctar recolectado por las abejas; por tanto, se considera una gran fuente calórica. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la influencia del color en la composición química y  las propiedades bioactivas de la miel polifloral de varias regiones geográficas del estado de Guerrero, México. Las muestras de miel fueron cosechadas en 2018 y se analizaron para determinar su contenido total de fenoles y flavonoides, así como su actividad antioxidante y antimicrobiana. El contenido total de fenoles y flavonoides varió considerablemente y los valores más altos se obtuvieron para las mieles de color ámbar oscuro. De manera similar, las mieles de color ámbar oscuro mostraron una mayor actividad antioxidante. La actividad antibacteriana fue más eficaz contra bacterias Gram-positivas que contra bacterias Gram-negativas; Además, los resultados indicaron que los hongos eran menos susceptibles que las bacterias. Se encontró una correlación positiva entre el color y la actividad antioxidante. También existió correlación entre el color y el contenido fenólico, el contenido de flavonoides o entre fenoles y flavonoides. El análisis de componentes principales (PCA) sobre los resultados bioactivos fue una herramienta útil para caracterizar diferentes tipos de miel en función con la similitud entre las muestras

    Contenido de acetogeninas a partir de semillas del fruto de guanábana (Annona muricata L.): Evaluación de diferentes condiciones de extracción

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    The objective was to evaluate the extraction of acetogenins (ACGs) from soursop seeds using different solvents, methods, and the number of extractions. The work was carried out in four trials. In the first trial, seven solvents (methanol, ethyl acetate, dichloromethane, chloroform, diethyl ether, hexane, and petroleum ether) were evaluated to extract ACGs from seeds by ultrasound-assisted extraction (UAE). In the second trial, UAE, soxhlet method, and solvents were compared to obtain ACGs from defatted seeds. In the third trial, the effect of solvents and the number of extractions by UAE on the content of ACGs in defatted endosperm was evaluated. In the fourth trial, ACGs were identified. The highest presence of ACGs was observed in extracts obtained from defatted whole seeds with methanol and ethyl acetate. UAE extracted more ACGs from the defatted whole seed. However, the highest ACG content (25.14 mg/g dry basis) was obtained using the defatted endosperm, UEA, and five extractions with methanol for 50 min each. Two ACGs were identified (annonacin and pseudoannonacin) in proportion 73:27. The latter conditions are an alternative to increasing the extraction yield of ACGs from A. muricata seeds.El objetivo fue evaluar la extracción de acetogeninas (ACGs) de semillas de guanábana usando diferentes disolventes, métodos y número de extracciones. El trabajo se desarrolló en cuatro ensayos. En el primer ensayo se evaluaron siete disolventes (metanol, acetato de etilo, diclorometano, cloroformo, éter dietílico, hexano, y éter de petróleo) para extraer ACGs de semillas mediante extracción asistida con ultrasonido (EAU). En el segundo ensayo se comparó la EAU, método soxhlet y disolventes, para obtener ACGs de semillas desengrasadas. En el tercer ensayo se evaluó el efecto del disolvente y número de extracciones con EAU, sobre el contenido de ACGs en endospermo desengrasado. En el cuarto ensayo, se identificaron ACGs. Se observó una mayor presencia de ACGs en los extractos de semillas completas sin desengrasar, con metanol y acetato de etilo. La EAU extrajo más ACGs a partir de la semilla completa desengrasada. Sin embargo, usando el endospermo desengrasado, EAU y cinco extracciones con metanol por 50 min cada una, se obtuvo el mayor contenido de ACGs (25.14 mg/g base seca). Se identificaron dos ACGs (annonacina, y pseudoannonacina) en proporción 73:27. Estas últimas condiciones, son una alternativa para aumentar el rendimiento de extracción de ACGs de semillas de A. muricata

    Description of the main attributes (origin, gender, age, body condition, and slaughter weight) at slaughter house arrival and their impact on carcass characteristics from cull Quarter Horse

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    In order to describe the effects of origin (Mexico and United States of America), sex, age at slaughter (AS, 4categories), body condition score (BCS, 5 categories) and slaughter weight (SW, 4 categories) on carcass characteristics of culled quarter horses, data from 235 horses sacrificed in the same slaughter facility within a 150 days period wereanalyzed. Overall, 74.5% were from the US, 80% were < 15 years of age and had BCS ≤ 4, and sex proportion was similar(51.5% female vs 48.5% males). Horses from USA had heavierSW (27%), leg circumference (4%), carcass weight (4.2%) and carcass yield (2.9%). Sex did not affect any characteristics evaluated. Horses from 3 to 8 years had greater rib eye area(REA) and backfat thickness. Except for leg length, as BCS and SW improved, all carcass characteristics linearly increased as BCS and SW increased. It is concluded that origin, sex, and age, explained very little on the carcass characteristics. The slaughter weight mainly explained changes in linear measures,carcass weight, and compact index, while BCS mainly explained carcass yield and REA.Para describir los efectos de origen (México y Estados Unidos de América), sexo, edad al sacrificio (AS, 4 categorías), puntaje de condición corporal (BCS, 5 categorías) y peso de faena (SW, 4 categorías) se utilizaron datos de 235 caballos cuartos de milla sacrificados en una misma instalación durante un período de 150 días. Del total, el 74.5 % provenían de EUA, el 80 % fue <15 años y una BCS ≤ 4, la proporción de sexos fue similar (51.5 % hembras vs 48.5 % machos). Los caballos EUA presentaron mayor SW (27 %), circunferencia de pierna (4 %), peso en canal (4.2 %) y rendimiento en canal (2.9 %). El sexo no afectó ninguna característica evaluada. Los caballos de 3 a 8 años presentaron mayor área del ojo de la costilla (REA) y grasa dorsal. Exceptuando la longitud de pierna, las características de la canal aumentaron linealmente a medida que aumentaron BCS y SW. Se concluye que origen, sexo y edad explican poco sobre las características de la canal. El peso al sacrifico explicó principalmente los cambios en las medidas lineales, peso de la canal e índice compacto, mientras que BCS explicó principalmente el rendimiento de la canal y REA.

    Isolation and characterization of one autochthonous Beauveria sp. isolate from Cuban fields

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    The genus Beauveria comprises a cosmopolitan teleomorphic and anamorphic group of ento-mopathogenic fungi. The aim of this study was to characterize a new isolate of Beauveria spp. and compare it to the LBB-1 commercial strain. The isolate was collected from the ant Atta insularis and adults of the coffee borer, respectively. It was cultivated on solid SDAY medium enriched with 1% yeast extract. The biological effectiveness of the isolate was determined on C. formicarius. DNA was isolated using the CTAB method and an internal transcribed spacer (ITS1, ITS4) were used as primers for amplification. The consensus sequence obtained was deposited in GenBank (MK246940) and used for phylogenetic analysis. This isolate showed differences in morphological characteristics; however, it showed low genetic variability regarding worldwide isolates of B. bassiana. Concerning its biological effectiveness, the isolate demonstrated to be virulent on the phytophagous adults, producing 50% mortality. Four clades were identified and the polytomous topography recovered for clade 1 indicates high genetic similarity (99-96%) with Beauveria bassiana from several countries. The morphological and molecular characterization made it possible to accurately identify the new isolate as Beauveria bassiana. The identified specie is another possibility for integrated pest management in Cuba and Mexico.El género Beauveria comprende un grupo cosmopolita teleomórfico y anamórfico de hongos entomopatógenos. El objetivo de esta investigación fue caracterizar el nuevo aislado de Beauveria spp. en comparación con la cepa comercial LBB-1. El aislamiento se obtuvo de Atta insularis y adultos del barrenador del café, respectivamente. Se cultivó en medio sólido SDAY enriquecido con 1% de extracto de levadura. Se determinó la eficacia biológica del aislado sobre C. formicarius. El ADN se aisló usando el método CTAB y se usó un espaciador transcrito interno (ITS1, ITS4) como cebadores para la amplificación. La secuencia consenso obtenida se depositó en GenBank (MK246940) y se utilizó para análisis filogenético. Este aislado mostró diferencias en sus características morfológicas; sin embargo, mostró una baja variabilidad genética con respecto a los aislamientos mundiales de B. bassiana. En cuanto a su eficacia biológica, el aislado demostró ser virulento sobre los adultos fitófagos, alcanzando el 50% de mortalidad. Se identificaron cuatro clados y la topografía politómica recuperada para el clado 1 indica una alta similitud genética (99-96%) con Beauveria bassiana de varios países. La caracterización morfológica y molecular permitió identificar con precisión la especie del nuevo aislado. La especie identificada es otra posibilidad para el manejo integrado de plagas en Cuba y México

    Actividad antiinflamatoria y antioxidante in vitro de fracciones de hidrolizado de proteínas de garbanzo (Cicer arietinum L.)

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    Chickpea is a legume that has exhibited various biological activities. The anti-inflammatory and antioxidant activities of chickpea proteins hydrolysate fractions were evaluated. The extensive protein hydrolysate (greater than 50 %) obtained by enzymatic hydrolysis was fractionated and 5-10 kDa, 3-5 kDa, 1-3 kDa, and ≤1 kDa fractions were obtained. The anti-inflammatory activity was determined in murine peritoneal macrophages stimulated with lipopolysaccharide (LPS). Fractions of F5-10 kDa, F3-5 kDa, F1-3 kDa presented the highest inhibition of nitric oxide (76 %), Tumoral Necrosis Factor-α (93 %), and Interleukin-1β (90 %) synthesis. Antioxidant activity was evaluated by ABTS, DPPH methods, Fe3+ reducing power and Cu2+ chelating capacity. The fraction of F1-3 kDa showed higher inhibition of ABTS (78 %) and DPPH (7.76 %) radicals, besides showed the highest Fe3+ reducing capacity (0.508 Abs700nm), for Cu2+ chelating capacity F≤1 kDa showed higher inhibition (52.60 %). Chickpea protein shows biological activities such as anti-inflammatory and antioxidant, so it can be considered a source of low molecular weight bioactive peptides that can be used as alternative therapies for certain diseases related to chronic inflammation.El garbanzo es una leguminosa que ha exhibido diversas actividades biológicas. Se evaluaron las actividades antiinflamatorias y antioxidantes de las fracciones de hidrolizado de proteínas de garbanzo. El hidrolizado de proteína extenso (más del 50 %) obtenido por hidrólisis enzimática se fraccionó y se obtuvieron fracciones de 5-10 kDa, 3-5 kDa, 1-3 kDa y ≤1 kDa. La actividad antiinflamatoria se determinó en macrófagos peritoneales murinos estimulados con lipopolisacárido (LPS). Las fracciones de F5-10 kDa, F3-5 kDa, F1-3 kDa presentaron la mayor inhibición de la síntesis de óxido nítrico (76 %), factor de necrosis tumoral-α (93 %) e interleucina-1β (90 %). La actividad antioxidante se evaluó por métodos ABTS, DPPH, poder reductor de Fe3+ y capacidad quelante de Cu2+. La fracción F1-3 kDa mostró mayor inhibición de radicales ABTS (78 %) y DPPH (7.76 %), además mostró la mayor capacidad reductora de Fe3+ (0.508 Abs700nm), para Cu2+ capacidad quelante F≤1 kDa mostró mayor inhibición (52.60 % ). La proteína de garbanzo muestra actividades biológicas como antiinflamatoria y antioxidante, por lo que puede considerarse como una fuente de péptidos bioactivos de bajo peso molecular que pueden utilizarse como terapias alternativas para ciertas enfermedades relacionadas con la inflamación crónica

    Efecto de rizobacterias solubilizadoras de calcio en caracteres agronómicos y minerales de Tagetes erecta

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    The objective of the study was to evaluate three wild plant growth promoter rhizobacteria (PGPR) (Bacillus sp, B. cereus and B. licheniformis), inoculated individually and in combination on the agronomic properties and mineral quality of marigold crop on open field. Eight treatments were compared: T0= control, T1= Bacillus sp., T2= B. cereus, T3= B. licheniformis, T4=Bacillus sp. + B. cereus, T5= Bacillus sp. + B. licheniformis, T6= B. cereus + B. licheniformis, T7= Bacillus sp. + B. cereus + B. licheniformis, with Steiner nutrient solution without Calcium. The experiment was established in randomized complete blocks with three repetitions per treatment. The results showed that the fresh and dry root biomass increased with the application of the T6 treatment, fresh and dry foliage biomass presented higher values in T5, same treatment that increased total carotenoids (847.01 μg·g-1). Meanwhile the minerals, calcium was concentrated in leaves, in T2 and T1, magnesium in leaves in T7, potassium in stem in T5, phosphorus in petals in T5, nitrogen in leaves, in T1 and T2. Bacillus application is an alternative to replace calcium fertilizers, which could help mitigate the negative effects of chemical fertilization.El objetivo del estudio fue evaluar tres rizobacterias silvestres (Bacillus sp, B. cereus y B. licheniformis) promotoras del crecimiento vegetal (PGPR) inoculadas de forma individual y combinadas sobre las propiedades agronómicas y calidad mineral de flor de cempasúchil en campo abierto. Se evaluaron ocho tratamientos: T0= testigo, T1= Bacillus sp., T2= B. cereus, T3= B. licheniformis, T4=Bacillus sp. + B. cereus, T5= Bacillus sp. + B. licheniformis, T6= B. cereus + B. lichenifomris, T7= Bacillus sp. + B. cereus + B. licheniformis, se aplicó  solución nutritiva Steiner sin Calcio. El experimento se estableció en bloques completos al azar con tres repeticiones por tratamiento. Los resultados mostraron que la biomasa fresca y seca de raíz se incrementó con la aplicación del tratamiento T6, la biomasa fresca y seca de follaje presentó mayores valores en T5, mismo tratamiento que incrementó los carotenoides totales (847.01 μg·g-1). En cuanto a minerales el calcio se concentró en hoja, en T2 y T1, el magnesio  en hoja en T7, en tallo el potasio en T5, el fósforo en pétalos en T5, en  hojas el nitrógeno, en T1 y T2. La aplicación de Bacillus es una alternativa para sustituir los fertilizantes cálcicos, lo que podría ayudar a mitigar los efectos negativos de una fertilización química

    Evaluación de infiltración con equipo TDR-300 y el modelo Green y Ampt, en suelo con aditivos orgánicos en Guasave, Sinaloa, México

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    The water needs in crops are naturally satisfied by rains, when it is insufficient, gravity irrigation is applied, which requires knowing the soil’s moisture behavior. There are methods to measure and estimate humidity: the TDR- 300 method calculates humidity in real time and the Green and Ampt model that estimates the irrigation sheet (cm)in the laboratory. The Green and Ampt method knows the physical parameters of the 12 textural classes of soils, but does not know physical parameters by mixing soil with organic additives. In this investigation, numerical values of hydrodynamic parameters were calculated in soil mixed with organic additive, using TDR-300 equipment in three 30-mrows, with measurements every 5 m, an experimental design of 3 x 3, with T1-control treatments (soil normal), T2 (Soil + 25% additive) and T3 (soil + 50% additive), applying gravity irrigation, and compare estimates with the Green and Ampt  model. Using Green and Ampt methodology, initial and finalgravimetric humidity, water advance time, recession time and opportunity were calculated. The higher the additive content, the retention increased. The estimates made by the Green and Ampt method were similar with the TDR method.Las necesidades de agua en cultivos satisfacen en forma natural por lluvias, cuando es insuficiente, se aplica riegopor gravedad, lo anterior requiere conocer comportamiento de humedad un suelo. Existen métodos para medir y estimar la humedad: el método TDR-300 calcula humedad tiempo real y el modelo de Green y Ampt que estima la lámina de riego (cm) en laboratorio. El objetivo de la investigación fue calcular y evaluar numéricamente parámetros hidrodinámicos, mesclando suelo con aditivo orgánico, utilizando equipo TDR-300, obteniendo mediciones en tiempo real, en un diseño experimental de 3 x 3, en 3 surcos de 30 m, con 6 mediciones cada 5 m, a profundidad de 30 cm a los 3 tratamientos: testigo T1 (suelo normal), T2 (Suelo + aditivo 25 g) y T3 (suelo + aditivo 50 g) aplicando riego por gravedad, y se compararon con las estimaciones obtenidas del modelo deGreen y Ampt en laboratorio. Se calcularon tiempo de avance del agua, tiempo de recesión y oportunidad. A mayor contenido de aditivo orgánico, menor avance y mayor retención de agua, las estimaciones realizadas por método de Green y Ampt en laboratorio, fueron similares a los datos recolectados en campo con TDR-300

    Concentración y método de aplicación de selenio en plántulas de pimiento

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    Selenium (Se) is considered a beneficial element for plants; however, high concentrations can cause physiological and morphological disorders. The objective of the study was to identify the concentration and application method of Se that allow obtaining quality seedlings in pepper cultivation, therefore, two experiments were established under greenhouse conditions cultivated in nutrient solution. In experiment 1, for root application, seedlings were grown in a nutrient solution enriched with Se in the form of Na3SeO4 at concentrations of: 0.0, 1.0, 2.5, 5.0 and 10.0 μM. In experiment 2, for foliar application, the seedlings were sprayed with Se in the form of Na3SeO4 at concentrations of 0, 5, 10, 25 and 50 μM. In each experiment, a completely randomized experimental design with five replications per treatment was used. The supply of 1 and 5 μM of Se through root and foliar application, respectively, stimulated the growth of pepper seedlings, similarly, the presence of Se in both application methods increased the concentration of photosynthetic pigments in leaves. Se improved seedling quality by inducing favorable responses in growth and concentration of photosynthetic pigments.El selenio (Se) es considerado un elemento benéfico para las plantas; sin embargo, concentraciones elevadas pueden causar trastornos fisiológicos y morfológicos. El objetivo del estudio, fue identificar la concentración y método de aplicación de Se que permita la obtención de plántulas de calidad en cultivo de pimiento, por ello, se establecieron dos experimentos bajo condiciones de invernadero cultivados en solución nutritiva. En el experimento 1, para aplicación radical, se cultivaron plántulas en solución nutritiva enriquecida con Se en forma de Na3SeO4 en concentraciones de: 0.0, 1.0, 2.5, 5.0 y 10.0 μM. En el experimento 2, para aplicación foliar, las plántulas se asperjaron con Se en forma de Na3SeO4 en concentraciones de 0, 5, 10, 25 y 50 μM. En cada experimento se utilizó un diseño experimental completamente al azar con cinco repeticiones por tratamiento. El suministro de 1 y 5 μM de Se mediante aplicación radical y foliar respectivamente, estimularon el crecimiento de las plántulas de pimiento, asimismo, la presencia de Se en ambos métodos de aplicación, aumentó la concentración de pigmentos fotosintéticos en hojas. El Se mejoró la calidad de las plántulas, al inducir respuestas favorables en el crecimiento y concentración de pigmentos fotosintéticos

    Vigilancia de la resistencia bacteriana en unidades de salud de Hermosillo y Ciudad Obregón, Sonora, México

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    The objective of this study was to analyze the antibiotic resistance percentages of bacteria collected from health units (HU) in Hermosillo and Ciudad Obregón, Sonora, Mexico. Eight HU from Hermosillo and three HU from Ciudad Obregón, nine belong to the public sector and two to the private sector. Overall, 15,653 results of identification and drug resistance from clinical bacterial isolates were analyzed for a one-year period (2019-2020). Subsequently, a comparative study was carried out for six health units in Hermosillo, for 2014-2015 and 2019-2020 periods. Differences between populations and time periods were assessed through the Chi square test, for differences among populations and time periods. Altogether, for the 2019-2020 period the most frequently isolated microorganisms were Escherichia coli (32.9 %), Klebsiella pneumoniae (8.4 %), Pseudomonas aeruginosa (7.6 %) and Staphylococcus aureus (6.6 %). Different resistance percentages to widely used drugs such as cephalosporins, quinolones and carbapenems were detected. A significant decrease in resistance percentages was observed, in six HU in Hermosillo, for most of the antibiotics tested in 2020, compared to 2015. Significative differences were found in antibiotic resistance between clinical isolates from Hermosillo and Ciudad Obregón, two cities that are separated by only 252 km (156 miles).El objetivo del presente trabajo fue analizar los porcentajes de resistencia a los antibióticos, de bacterias colectadas de unidades de salud (US) en Hermosillo y Ciudad Obregón, Sonora, México. Participaron ocho US de Hermosillo y tres de Ciudad Obregón, nueve pertenecen al sector público y dos al sector privado. Se analizaron los resultados de identificación y drogorresistencia de 15,653 aislamientos en un periodo de un año (2019-2020). Posteriormente, se compararon seis unidades de salud de Hermosillo, para los periodos 2014-2015 y 2019-2020. Las diferencias , entre poblaciones y periodos de tiempo, se obtuvieron mediante chi quadrada. Durante el periodo 2019-2020, los microorganismos más frecuentemente aislados fueron Escherichia coli (32.9 %), Klebsiella pneumoniae (8.4 %), Pseudomonas aeruginosa (7.6 %) y Staphylococcus aureus (6.6 %). Se detectaron diferencias en la resistencia a fármacos ampliamente utilizados como cefalosporinas, quinolonas y carbapenémicos, entre las instituciones de Hermosillo y Ciudad Obregón. En seis unidades de salud de Hermosillo, se observó una disminución en los porcentajes de resistencia para la mayoría de los antibióticos ensayados en 2020, respecto a 2015. Se encontraron diferencias significativas en la resistencia a los antibióticos entre los aislamientos clínicos de Hermosillo y Ciudad Obregón, dos ciudades separadas por sólo 252 km

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