Biblioteca Virtual en Salud, Cuba: Repositorio de Tesis de Doctorado
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Enterococcus aislados en Cuba:resistencia antimicrobiana, virulencia y diversidad genética
Se estudiaron 501 aislamientos de Enterococcus procedentes de 26 hospitales cubanos del periodo 2000-2005 para conocer las especies circulantes, susceptibilidad antimicrobiana y mecanismos implicados, virulencia, diversidad genética y relación filogenética con aislamientos del resto del mundo. Las especies más prevalentes fueron Enterococcus faecalis y E. faecium. La resistencia a glicopéptidos (0,4%) y ampicilina (5,4%) se detectó en baja proporción, mientras que se observó un alto porcentaje de resistencia a los aminoglucósidos (gentamicina, 32%; estreptomicina, 27% y kanamicina, 29%) mediada por los genes aac(6')Ie-aph(2")Ia, aph(3')-IIIa, ant(6)Ia, ant(3")(9). La resistencia a eritromicina (35%) y a tetraciclina (54%) se correlacionó con la presencia de los genes erm(B) (71%), tet(L) (7%) y tet(M) (78%). En el 92% de los aislamientos se evidenció, al menos, un gen de virulencia y E. faecalis resultó ser la especie más virulenta. Se detectó una diseminación inter e intrahospitalaria de clones de Enterococcus y la resistencia antimicrobiana detectada obedeció a la diseminación de clones resistentes y a la transferencia de elementos genéticos móviles. La caracterización de E. faecalis mediante Multilocus sequence typing reveló una relación filogenética estrecha entre los aislamientos de Cuba y los previamente descritos en Europa lo que sugiere la existencia de un ancestro común
Modelo predictivo para determinar el riesgo de caries dental en niños de 6 a 12 años:Ciudad de Matanzas 2004-2006
La Caries Dental afecta a algunos individuos más que otros; por lo que, teniendo esto presente se decidió desarrollar un Modelo Predictivo para determinar el riesgo de Caries Dental en niños. La investigación se dividió en dos etapas: la primera, descriptiva-transversal, a través de un estudio de prevalencia y la segunda analítica, mediante un estudio de casos y testigos; esta se desarrolló en el municipio Matanzas, provincia Matanzas, en el período comprendido por los cursos académicos 2004-2006; el universo estuvo constituido por 11311 niños de 6-12 años, del que se extrajo una muestra de 1498 niños pertenecientes a la zona urbana, para el estudio de prevalencia, y de 900 infantes para el estudio de casos y testigos. Se estimó la prevalencia de la enfermedad y utilizando la Regresión Logística se identificaron presuntos factores de riesgo de Caries Dental, se construyó un Modelo matemático para el vaticinio de la enfermedad y una Escala de clasificación de riesgo de tres categorías. La prevalencia de la Caries fue de 40.0% en la población investigada y la probabilidad de padecer la misma estuvo significativamente influenciada por: Grado de infección por Estreptococos Mutans y Lactobacilos en saliva, Capacidad de Remineralización del esmalte, Experiencia Anterior de Caries, Morfología de fosas y fisuras, Capacidad Buffer salival, Viscosidad de la saliva e Higiene bucal. El Modelo construido permite a partir de los perfiles de riesgo individuales, la predicción de la Caries Dental en la población estudiada
Manifestaciones cutáneas de la giardiasis:un problema de salud sobredimensionado
Empleando los procedimientos complementarios más universales para la detección de G. lamblia, se demostró que en Ciudad de La Habana, como posiblemente en el resto del país, las manifestaciones cutáneas asociadas a giardiasis constituían un problema de salud sobredimensionado. Con el objetivo de incursionar en las posibles causas de la sobredimensión, se aplicó una encuesta sobre conocimientos, percepciones y prácticas (CPP) a médicos de las seis especialidades relacionadas con el diagnóstico, tratamiento y control de esta parasitosis en Ciudad de La Habana (Medicina General Integral, Pediatría, Medicina Interna, Dermatología, Alergología y Gastroenterología). Los resultados de la aplicación de ese instrumento evidenciaron, entre otros aspectos de interés, que la sobredimensión de las manifestaciones cutáneas asociadas a giardiasis podría estar vinculada a insuficiencias cognoscitivas, percepciones inadecuadas y prácticas incorrectas. Para atenuar las deficiencias detectadas, se procedió a realizar, a modo de intervención, un grupo de acciones en el municipio Playa. Estas acciones incluyeron la preparación, publicación y posterior distribución gratuita a los médicos sobre los que se realizó la intervención, del libro titulado “Giardiasis. Entre realidades y mitos”. Esta monografía ofrece una reestructuración y actualización de los conocimientos sobre giardiasis a los profesionales encarados al diagnóstico, tratamiento y control de esta parasitosis. Para la evaluación de las acciones llevadas a cabo, se hizo una segunda aplicación de la encuesta CPP arriba mencionada. Los resultados de esa evaluación permitieron conocer de una significativa mejoría en la casi totalidad de los aspectos cognoscitivos, perceptuales y conductuales evaluados
Realidades y retos en la clÃnica y el manejo del asma en el niño pequeño
Conocer las circunstancias que subyacen en la evolución natural del asma es imprescindible para percibir la significación clínico pronóstica que se confiere a la temprana caracterización y al manejo precoz y eficaz desde las primeras expresiones de obstrucción bronquial; no contamos con un capital de información coherente con los conocimientos que revolucionan los aspectos que se relacionan en la historia natural del asma, lo cual impide a nuestros médicos percibir esa significación pronóstica. Este estudio, estructurado en cuatro capítulos contribuye a comprender las realidades y retos en la clínica y el manejo del asma en el niño pequeño. El trabajo expone el ejercicio de consenso clínico-terapéutico del Servicio de Neumología del Hospital Necker donde tuvo lugar el estudio descriptivo en dos períodos invernales. En este ejercicio se constató la utilidad clínico-terapéutica de las definiciones de bronquiolitis aguda del lactante y del asma del niño de dos años, así como la importancia del ejercicio médico de discusión que sostiene los fundamentos de cada una de las recomendaciones terapéuticas. El trabajo muestra el estudio descriptivo en el que se aplicó un cuestionario dirigido a identificar el estado de información sobre aspectos que sostienen el manejo precoz y eficaz desde los primeros episodios de sibilancias, en especialistas que brindan asistencia en los Servicios de Alergia y Neumología en los Hospitales Pediátricos de Ciudad de La Habana; los resultados confirman el problema científico que se plantea. Por último se diseñó una estrategia de intervención para modificar el nivel de información de los especialistas. Con la intervención se logra diferenciar el nivel de conocimiento y actitud de aspectos medidos en el cuestionario médico. El trabajo identifica la necesidad de perfeccionar acciones clínico-terapéuticas en el asma del niño pequeño y recomienda la confección de un Programa de Salud para la Atención al niño con Asma de Edad Preescolar
Evaluación de la actividad antioxidante y hepatoprotectora de una nueva formulación de tabletas, obtenida a partir del extracto blando estandarizado de las hojas de Tamarindus indica L
El Tamarindo (Tamarindus indica L) es una planta medicinal poco estudiada en Cuba y en el mundo. El uso etnobotánico de esta planta como hepatoprotector, se refiere desde hace más de 50 años en Cuba. Las hojas han sido el órgano menos investigado y la decocción de éstas es consumida por la población cubana para el tratamiento de las hepatopatías. Sin embargo, en el Sistema de Salud se importan los fármacos para el tratamiento de estas enfermedades, ya que en el Cuadro Básico de Medicamentos de Cuba no se contempla ningún fármaco hepatoprotector. En el presente trabajo se estandarizó el extracto blando de las hojas de Tamarindus indica L. como un nuevo ngrediente Farmacéutico Activo, rico en metabolitos entre los que destacan: polifenoles, flavonoides, triterpenos, aceites esenciales, ácidos grasos, compuestos volátiles y elementos minerales, como el cobre, cinc, manganeso, níquel y selenio. Con este extracto se desarrolló una formulación de tabletas, a la cual se le evaluó su capacidad antioxidante y hepatoprotectora. En este proceso se obtuvieron modelos teóricos que permiten predecir las propiedades físicomecánicas de los granulados y las propiedades tecnológicas de las tabletas. La estabilidad de las propiedades tecnológicas de las tabletas se mantuvo hasta 18 meses, la estabilidad microbiológica se mantuvo durante dos años y la estabilidad química se ha evaluado hasta 9 meses. Por ello, la estabilidad integral de la formulación de tabletas, envasadas en frasco de cloruro de polivinilo de alta densidad con tapa inviolable, y almacenadas en lugar seco y fresco, se informa hasta nueve meses. Esta forma farmacéutica no mostró toxicidad aguda oral en ratas Sprague Dawley a la dosis límite de 2000 mg/kg de peso y produce una irritabilidad media de la mucosa oral. Los dos niveles de dosis evaluados (100 y 200 mg/kg de peso) inhibieron la peroxidación lipídica y mostraron actividad antioxidante y hepatoprotectora frente al modelo de intoxicación hepática con tetracloruro de carbono. El efecto observado resultó similar estadísticamente al producido por la silimarina; fármaco utilizado como control en una dosis de 150 mg/kg de peso corporal. Los resultados de la tesis por vez primera aportan elementos que evidencian las propiedades antioxidantes y hepatoprotectoras de una forma farmacéutica sólida obtenida a partir de las hojas de Tamarindus indica L
Bases moleculares y celulares del efecto antineoplásico del péptido CIGB-300 en células derivadas de tumores sólidos
El CIGB-300 es un péptido sintético seleccionado por su capacidad de inhibir la fosforilación catalizada por la enzima CK2 a través de la interacción con el sitio fosfoaceptor. Evidencias preliminares sugieren que el CIGB-300 es capaz de inhibir la proliferación celular y que retarda el crecimiento tumoral en un modelo singénico de cáncer. Sin embargo, la identidad del(los) blanco(s) molecular(es), y los efectos de la inhibición de su fosforilación sobre la célula tumoral no han sido caracterizados. Los resultados del presente trabajo demuestran que la proteína multifuncional B23/NPM constituye el principal blanco molecular del péptido CIGB-300 en células tumorales derivadas de pulmón, cérvix, colon y próstata. La inhibición de la fosforilación de B23/NPM indujo muerte celular por apoptosis y arresto en el ciclo celular en dichas células, proceso que pudiera ser antecedido por la desintegración nucleolar. Por otra parte, el fenotipo de respuesta antiproliferativa de las líneas celulares estudiadas correlacionó con la llegada del péptido al nucléolo, principal localización subcelular de B23/NPM. Finalmente, se evidenció que el CIGB-300 modula la expresión de genes relacionados con la traducción de proteínas, el metabolismo energético y la biogénesis ribosomal, en correspondencia con las funciones adscritas a B23/NPM y el papel de la fosforilación catalizada por CK2 sobre su actividad chaperona. Estos hallazgos develan por primera vez la identidad del principal blanco molecular del péptido CIGB-300 en células tumorales, así como aportan un conjunto de conocimientos sobre las bases moleculares y celulares que contribuyen a explicar el amplio efecto antineoplásico manifestado por el CIGB-300 en modelos preclínicos de cáncer
NeurofisiologÃa de la ataxia espinocerebelosa tipo 2:biomarcadores y fases evolutivas de la enfermedad
Este trabajo integra los resultados de un grupo de investigaciones neurofisiológicas que se iniciaron hace más de 20 años. Se evaluaron sujetos enfermos, presintomáticos y controles con los objetivos de ampliar la caracterización electrofisiológica de la enfermedad desde estadios preclínicos y describir las etapas evolutivas de la misma. Las principales alteraciones detectadas en los enfermos fueron: una neuropatía periférica sensitiva, disfunción olfatoria, disminución del aprendizaje visuomotor, enlentecimiento sacádico, movimientos periódicos de las extremidades y trastornos del sueño REM. En los sujetos portadores de la mutación, se evidenciaron disfunciones sensoriales, oculomotoras, cognitivas y reducción del porcentaje del sueño REM, en ausencia de manifestaciones clínicas cerebelosas. La reducción de la velocidad sacádica y las anormalidades polisomnográficas antecedieron a la aparición de los signos cerebelosos en más de una década. Las alteraciones olfatorias, del desempeño motor y la neuropatía periférica se iniciaron más tardíamente. La integración de las variables neurofisiológicas y clínicas permitió definir fases evolutivas para la ataxia SCA2. La fase pre-fisiológica se caracteriza por la ausencia de manifestaciones clínicas y neurofisiológicas anormales. Durante la fase pre-diagnóstica aparecen las primeras alteraciones electrofisiológicas, unido a déficit olfatorio, contracturas musculares dolorosas, insomnio, trastornos cognitivos, disfunción autonómica e hiperreflexia. La aparición de las manifestaciones cerebelosas y su progresión definen la fase clínica en sus diferentes estadios evolutivos. La neuropatía periférica, movimientos periódicos de las extremidades y alteraciones cognitivas se identificaron como variables respuestas que permiten evaluar la eficacia de ensayos clínicos
Infección por herpesvirus en individuos cubanos seropositivos al VIH-1
Para evaluar el comportamiento de la infección por Herpesvirus(HVs) en algunas patologías que producen en individuos cubanos seropositivos al VIH-1 se estudiaron 241 pacientes con Síndrome Neurológico Infeccioso (SNI), 49 con Sarcoma de Kaposi (SK) epidémico (SK-SIDA), 22 contactos sin SK, 49 con Síndrome Adénico (SA) y 46 con enfermedades asociadas al HVH-8. Se empleó PCR anidada múltiple de HVs y PCR en tiempo real (qRT-PCR) de HVs linfotropos para amplificar su genoma en diferentes muestras clínicas. El subtipo del HVH-8 se determinó mediante secuenciación nucleotídica del gen K1. El 10.4 % del SNI fue de etiología herpesviral, los HVs más frecuentes fueron el CMVh (44 %), el VEB (28 %) y las coinfecciones(16 %). El 98 y el 72.7 % de los SK-SIDA y contactos, respectivamente, estaban infectados con el HVH-8, detectándose su ADN en diferentes fluidos y células. La CV del VEB >1000 copias en ganglio linfático (GL) se asoció con el linfoma de Hodgkin (p=0.0295) y el ADN del HVH-8 en GL con el SK (p=0.0030). No se encontró asociación entre CV y subtipos del HVH-8 en el tejido (p>0.05). Los resultados obtenidos resaltan la participación de los HVs en algunas patologías de pacientes cubanos VIH, tanto de evolución aguda como en procesos tumorales
Caracterización de la muerte encefálica y el estado vegetativo persistente
Se realizó un estudio longitudinal, prospectivo, observacional, para caracterizar la muerte encefálica y el estado vegetativo persistente como alteraciones de conciencia que presentan diferencias esenciales. La muestra quedó constituida por 357 sujetos en muerte encefálica y 37 en estado vegetativo persistente, egresados del Hospital Provincial “Saturnino Lora”, desde enero de 1994 a diciembre de 2007. El análisis estadístico inferencial se centró en la identificación de asociación estadísticamente significativa entre criterios de interés seleccionados. Fue aplicado el Test χ2 de homogeneidad. Se demostró que el diagnóstico de muerte encefálica se puede realizar con el examen clínico sin pruebas instrumentales. Se evidenciaron diferencias anatomopatológicas: para la muerte encefálica predominaron el cerebro de respirador y el edema cerebral difuso; mientras que para el estado vegetativo persistente, las necrosis del tálamo y laminar de la corteza. Se comprobó por Tomografía computarizada que el daño axonal difuso caracteriza al estado vegetativo persistente. Se demostró que los pacientes en muerte encefálica están muertos y la pérdida de las funciones del encéfalo se erigió como atributo esencial para identificar la muerte con fundamentaciones neurológicas. Los enfermos en estado vegetativo persistente están vivos porque no cumplen criterios de muerte desde el punto de vista neurológico ni cardiovascular
Desarrollo a ciclo completo de las primeras vacunas estandarizadas de alergenos de ácaros para la inmunoterapia del asma en Cuba
Los ácaros domésticos constituyen los alergenos de mayor preeminencia en el país, causantes de alergias respiratorias y asma. Se describe el desarrollo, a ciclo completo, de tres extractos alergénicos estandarizados de las especies más importantes: Dermatophagoides pteronyssinus (DP), Dermatophagoides siboney (DS) y Blomia tropicalis (BT), como vacunas terapéuticas para el asma. La estandarización de los productos se apoyó en el desarrollo de inmunoensayos analíticos para la actividad y composición alergénicas, basados en IgE de pacientes alérgicos, y para la determinación de Alergenos Mayores con anticuerpos monoclonales o policlonales. El proceso de fabricación estandarizado, desarrollado a partir de un método original de cultivo de ácaros, logró altos índices de consistencia. Se demostró la estabilidad de los productos liofilizados durante 60 meses a 4°C. Dos ensayos clínicos por producto para la aplicación diagnóstica, permitieron estandarizar la prueba cutánea con la dosis y límite de corte óptimos, en cuanto a sensibilidad y especificidad. Finalmente, la consistencia de la eficacia y seguridad como vacunas terapéuticas, se demostró mediante un meta-análisis de seis ensayos clínicos de inmunoterapia en asma. El tratamiento fue eficaz en el 76% de los pacientes, y se redujeron los síntomas y la medicación en 60%. No se registraron reacciones sistémicas severas. Los productos fueron Registrados en Cuba para ambas indicaciones, constituyendo los primeros de su tipo en el país, y los primeros en el mundo para DS y BT. La disponibilidad de vacunas alergénicas estandarizadas de alta calidad, a escala industrial, constituye una herramienta útil para el manejo etiológico del asma