Tokyo University of Agriculture Repository / 東京農業大学リポジトリ

鈴木, 岳

3678

SUZUKI, Takashi

3679

氏 名 鈴 木 岳
学位（専攻分野の名称） 博 士（学術）
学 位 記 番 号 乙 第 0012 号
学 位 授 与 の 日 付 平成 28 年 3 月 20 日
学 位 論 文 題 目 19世紀後半から 20世紀前半のフランスにおける協同組合の
理論と実践―生産協同組合と消費協同組合を中心に―
論 文 審 査 委 員 主査 教 授・農 学 博 士 立 岩 壽 一
教 授・博士（農業経済学） 友 田 清 彦
教 授・博士（農学） 両 角 和 夫
名誉教授・博士（農学） 白 石 正 彦
社会学博士 富 沢 賢 治＊
論文内容の要旨
18世紀後半に英国から産業革命が始まり，機械化の
進展と大工場の建ちならぶ時代は，かつてない生産力の
発展によって恩恵を存分に享受する人々が出現し，資本
主義体制が進行する一方で，格差と貧困が社会を覆い，
その弊害も明らかになっていった。このような状況を打
破すべく，英国ではロバアト・オウエン（1771-1858）
が人々の協同による社会を，構想するばかりではなく
数々の実践を試みた。マンチェスターの郊外では，これ
までの数々の試みの失敗から脱却して後に世界の消費協
同組合（生活協同組合）運動の模範となる「ロッチデー
ル公正先駆者組合」が 1844年に創設される。さらに，
ドイツでは 19世紀後半になってシュルツェ・デーリッ
チュ（1808-83）とフリードリッヒ・ライファイゼン
（1818-88）がそれぞれ手工業型と農村型の信用組合を創
設した。近代的な協同組合運動の始まりである。
さてフランスでは，ジュラ地方でチーズ製造協同組織
「フリュイティエール」が既に中世から存在していた。
そしてフランス大革命と人権宣言，そしてさまざまな政
体と革命を経て理想と現実に常に直面していた先進地域
のフランスにあって，新しい協同の構想が現れないわけ
はなかった。オウエンと同じ時期には，サン・シモン
（1760-1825）や，シャルル・フーリエ（1772-1835）の構
想が現れ，後の世代に大きな影響力を及ぼすことになる。
実践的にも彼らの次世代の人々，例えば，エチィエン
ヌ・カベ（1788-1856）やフィリップ・ビュシェ（1796-
1865）が，実際に労働者によるアソシアシオン構想を具
現化しようとした。
とりわけ自ら出資し，運営を管理し，利潤を配分しよ
うとする生産協同組合形態は，協同組合運動の中でも賃
労働関係を抜本的に克服しようという魅力的な「労働者
の夢」であった。この夢を実現すべく，生産協同組合の
先進国としてフランスでは，19世紀からその思想と実
践において幾多の蓄積が残った。資本と販路という古典
的な難問と，市場競争による競合という困難に直面しな
がらも，この潮流を支持する人々によってフランスの生
産協同組合（労働者協同組合）は今日なお活動と模索が
続いているのである。
現在，「ビオ・コープ」のような新しい形の消費協同
組合が少しづつフランス全土に店舗展開を広げていると
はいえ，1912年に創設された中央会である「全国消費
協同組合連盟」（FNCC）と大規模な地域組合が 1980年
代に相次いで崩壊してしまい，旧来のものは一部しか残
存していないフランスの消費協同組合運動についても，
過去には想像しえないような輝く時代があった。しか
も，「よりよいものをより安く」という存在に留まらず
社会運動の一角を占め，はるかに一般に意識される
存在であったのである。
ところで，これまで日本におけるフランス協同組合史
の研究は，生産協同組合に関しては 2月革命（1848年）
以前の時期に極めて偏しており，それ以降のものは
局所的なテーマを扱ったものや，日本語による翻訳書の
出版を別として，包括的な研究はない。消費協同組合に
ついても詳細な検討は殆どなされていない。さらに理論
上も実践例としても一部に焦点を当てたもの以上の研究
はなされてこなかった。この看過されてきた研究の大き
な空白期を埋めるものとして，少なからず意義を有する
ことと考え，本論文を執筆するに至った次第である。
─ 147─
＊一橋大学 名誉教授
本論文の目次概要は次のとおりである。
序章 本研究の目的，先行研究，方法および構成
第 I部 生産協同組合運動と消費協同組合運動の展開
第 1章 生産協同組合運動の展開
第 2章 消費協同組合運動の展開
第 II部 協同組合の理論展開
第 3章 シャルル・ジードの協同組合論
第 4章 エルネスト・ポワソンの協同組合論
第 5章 ベルナール・ラヴェルニュの協同組合公社論
第 6章 ジョルジュ・フォーケの協同組合セクター論
第Ⅲ部 協同組合の具体的実践
第 7章 J.-B.A.ゴダンとファミリステール・ド・ギュ
イーズの実践
第 8章 アルビ・ガラス労働者工場の創設をめぐって
第 9章 サン・クロードにおける協同組合運動とアン
リ・ポナール
第 IV部 理論と実践の到達点
第 10章 エコノミ・ソシアルの思想と理論
終章 むすび──本論文の要点・今後の課題と展望
参考文献
本論文の概要は次のとおりである。
序章では，第 1に本研究が 19世紀後半から 20世紀前
半のフランスの協同組合の理論と実践を生産協同組合と
消費協同組合を中心に解明する目的を明示している。第
2に，日本のみでなくフランス，英国等での先行研究
は，とくに生産協同組合と消費協同組合の包括的な研究
が空白となっている点を明示している。第 3に，本論文
の研究方法は，協同組合論の分析手法で考察している点
を明示している。第 4に，論文構成は，上述の目次構成
の通りである。
第 I部第１章では，19世紀後半から 20世紀初めにか
けてのフランスにおける生産協同組合運動について，そ
の組織と運動の状況や政府や労働者との関係などを中心
に諸潮流を検討した。生産協同組合は実際に十分な実践
を積み，紆余曲折を経ながらも全体としては緩やかな成
長を続ける一方で，正組合員と補助雇員の格差の問題，
資本と販路の問題，民主的な経営管理の問題等が生じた
が，これらを本章で分析した。
第 2章では，元来は地味な運動であったものの第 3共
和政期に発展し始め，さらにさまざまな論争と論議を含
んだフランスの消費協同組合運動について，包括的に検
討した。とりわけ，1885年の「協同組合連盟」の設立
と大会の開催，ジードらニーム派の台頭とブルジョワ
派，社会主義派との対立と分裂，そして 1895年創設の
「協同組合取引所」，さらに 1912年に連盟と取引所が統
一した「全国消費協同組合連盟」（FNCC）の創設まで
を本章で分析した。
第 II部では，フランスの代表的な４人の協同組合指
導者・理論家を検討して分析した。
第 3章では，シャルル・ジードを検討した。彼は国際
協同組合史上，最も著名な人物の一人といっても過言で
はない。さらに近年，現代のエコノミ・ソシアルの系譜
を辿る上でも彼の見解は重要である。本章では，消費協
同組合論，協同組合共和国論，生産協同組合論，彼をめ
ぐる論争を包括的に分析し，彼の協同組合論の本質に
迫った。
第 4章では，連盟と取引所が統一した「全国消費協同
組合連盟」（FNCC）の指導者であったエルネスト・ポ
ワソンを検討した。同時代の社会主義運動における大き
な論争テーマであった所有・管理形態の問題と現実の協
同組合運動との関連にも常に目を向け，注目すべき見解
を表明していた。本章では，彼の共同体所有論と消費者
管理の優越論，さらにジードの協同組合共和国論より踏
み込んだポワソンの見解を分析した。
第 5章では，ベルナール・ラヴェルニュを検討した。
ジードの協同組合共和国論の限界が露呈し始めた時期，
公的企業に対しても協同組合原則が適用可能であり，そ
の適用による協同組合主義の実現を主張する提唱者がラ
ヴェルニュである。本章では，1920年代にラヴェル
ニュの公表した協同組合公社論について論究し，彼の特
異な消費協同組合観を示し，他の人々からの彼への評価
と批判と反論を含め，論点を提示し分析した。
第 6章では，ジョルジュ・フォーケを検討した。1980
年 ICA（国際協同組合同盟）大会で提起されたレイド
ローの報告書『西暦 2000年における協同組合』は，多
くの協同組合関係者に対して大きな反響をひき起こした
が，この報告の論拠として協同組合セクター論が活用さ
れていた。本章ではフォーケについて，協同組合セク
ター論とその周辺について，さらに 20年間のフォーケ
とラヴェルニュの論争を分析した。
第 III部では，具体的な協同組合運動について 3つの
実践例をそれぞれ検討し分析した。
第 7章では，J.-B.A.ゴダンと彼の設立した「ファミ
リステール・ド・ギュイーズ」を多角的に検討した。即
ち，彼の思想と背景，協同住宅，教育，工場，この賛否
両論の評価，国際協同組合運動の関わり等を本章で分析
した。
第 8章では，1896年に創設された「アルビ・ガラス
労働者工場」（VOA）を分析した。この創設と背景，資
─ 148─
本問題，立地問題，社会主義者の論争，開設と数々の困
難，事業の発展と内部問題の表出等を本章で分析した。
第 9章では，サン・クロードの協同組合運動を検討し
た。消費協同組合ラ・フラテルネル，生産協同組合の動
向，ベルギーのメゾン・デュ・プープル（人民の家）と
の関係性について，さらに指導者アンリ・ポナールの活
動を本章で分析した。
第 IV部第 10章では，協同組合をその概念の中軸に
含むエコノミ・ソシアルについて，かかる思想的背景と
状況を検討した。エコノミ・ソシアルの 4つの潮流，
1889年及び 1900年のパリ万国博覧会での状況，さらに
ジードの批評等を本章では分析した。
終章では，本論文のむすびとして，論文の要点・今後
の課題と展望を明らかにしている。ここから主に次の 5
点を要点として提示した。
第 1に，フランスの生産協同組合について，時代を
追って検討し解明した。1848年の 2月革命におけるア
ソシアシオンの高揚の時期を経て程なく弾圧の時代と
なった後，これまではその存在が消滅したという認識が
あったせいか，19世紀後半以降の状況の実態について
は社会主義運動が詳細に検討された一方，生産協同組合
は全く軽視されていた。しかし本論文では第 2帝政期に
も生き残った生産協同組合が存在していたこと，1880
年前後になるとむしろ国家の姿勢も生産協同組合に好意
的になり，法律や公的な助成制度も次第に整備されて
いったことを明らかにし，さらに，中央会となる生産協
同組合諮問評議会が創設された経緯および消費協同組合
の中央会や対外的な関係を解明した。
第 2に，フランスの消費協同組合について，時代を
追って検討し解明した。平實の研究によれば，フランス
の 17年間にわたる 2つの中央会（「協同組合連盟」と
「協同組合取引所」）の対立後，単純に連盟側の勝利とし
てその統一を結論づけている。しかし，実際にはそのよ
うな単純な構図ではなく，取引所側にもポワソンのよう
な卓抜した人物がおり統一後の消費協同組合運動を指導
していったこと，対立の時期も規模でみると連盟よりも
むしろ取引所側がより伸張していたことを数値で論証し
た。さらに国際的な関係として，19世紀末の英国の協
同組合では卸売組合派と利潤分配派が対立しており，そ
れゆえ英国の協同組合研究者は利潤分配派を進歩的な存
在と位置づけて国際協同組合運動の潮流を認識してき
た。が，フランスでは利潤分配派がむしろブルジョワ派
として社会主義派に位置づけられていたように，英国で
の状況とは利潤分配派の評価が異なることを示した。さ
らにベルギーの協同組合のフランスに与えた影響力を本
論文で解明した。
第 3に，フランスの指導的な 4人の協同組合論者であ
るジード，ポワソン，ラヴェルニュ，フォーケを検討
し，彼らの理論を解明した。ジードは従来の協同組合研
究者が認識したような単純な消費協同組合主義者ではな
く，生産協同組合にも十分な目配りをして評価と限界を
論じていたことを本論文で明示した。また，ともすれば
フォーケが協同組合セクター論の始祖と見なされるが，
実はジードやポワソンにも協同組合セクター論につなが
る思考を含んでいたことを示した。さらに協同組合と公
的セクターとの関係を考えるうえで極めて重要なフォー
ケの長年の論敵であるラヴェルニュの視点と影響が，既
存の研究では完全に抜け落ちていることが判明したた
め，この点を十分に検討し新たに解明した。
第 4に，協同組合運動の実践例であるゴダンとファミ
リステール，アルビ・ガラス，フラテルネルについて検
討して解明した。ファミリステール研究は社会学や建築
学からの分析は幾つかあるが，本論では協同組合論を軸
に社会思想と経済史の研究手法から包括的な分析を行っ
た。アルビ・ガラスについては村田光義の先行研究はあ
るが，これはジョレス研究の視点に留まる局所的なもの
であり，ジョレス以外の人々の関わりを殆ど踏まえては
いない。そのため，本論文ではむしろアルビ・ガラスの
全体像を分析している。また，フラテルネルについては
日本での研究自体，空白であったので，地域特性などの
背景にも配慮しながら分析している。
第 5に，エコノミ・ソシアルの思想と理論について検
討し解明した。ジードとエコノミ・ソシアルについては
類似の研究はあるが，実際の万国博覧会・展覧会におけ
るジードの果たした重要な役割についての具体的分析は
なされてこなかったため，この点を十分に検討した。そ
れとともに本論文ではこれまで看過されていたル・プ
レー派や社会主義派の果たした役割を解明した。
以上の研究によって，19世紀後半から 20世紀にかけ
てのフランスの生産協同組合と消費協同組合の理論と実
践が，実は，極めて先進的であり，かつ多様な動向が
あったことを本論文で明示した。
─ 149─
審査報告概要
本研究は，19世紀後半から 20世紀前半のフランスに
おける協同組合の理論と実践について生産協同組合と消
費協同組合を中心に分析している。その結果，第 1に，
問題意識が明確であること，先行研究をよく消化してい
ること，第一次史料を含め広範な史料を渉猟しているこ
と，叙述は論理的であることが評価できる。第 2に，日
本におけるフランス協同組合研究史において希薄であ
り，諸外国においても「社会的経済」発生史という独自
の観点から通史としてまとめた研究は希薄である。この
研究史上の間隙を埋める研究として，本研究は評価でき
る。第 3に，理論と実践の歴史的位置づけを明らかに
し，生産協同組合と消費協同組合との両者に研究対象を
置き，両者の関係を明らかにしたことは，研究史上の上
記の間隙を埋める研究として，評価されうる。第 4に，
本研究は，第Ⅳ部「理論と実践の到達点」において，
「19世紀後半から 20世紀前半のフランスにおける協同
組合の理論と実践」を現代社会の問題視点から捉え返
し，1970年代以降の世界の社会経済状況の変化を背景
にした今日の「社会的経済」の問題が各国で，また国連
のレベルで論じられているなかで，社会的経済発生史の
研究という視点からも，評価されうる。
よって，審査員一同は博士（学術）の学位を授与する
価値があると判断した。
─ 150─


19世紀後半から20世紀前半のフランスにおける協同組合の理論と実践

東京農業大学博士（食品栄養学

鈴木, 孝子

3640

SUZUKI, Takako

3641

亜鉛過不足食投与時における骨代謝機構に関する研究

東京農業大学博士（生物産業学

芝野, あゆみ

3618

SHIBANO, Ayumi

3619

氏 名 芝 野 あ ゆ み
学位（専攻分野の名称） 博 士（生物産業学）
学 位 記 番 号 甲 第 707 号
学 位 授 与 の 日 付 平成 28 年 3 月 17 日
学 位 論 文 題 目 A study of accuracy and precision of length composi-
tion date based on effective sample size with consid-
eration to cluster sampling
論 文 審 査 委 員 主査 教 授・水産学博士 塩 本 明 弘
教 授・博士（獣医学） 小 林 万 里
教 授・博士（農学） 吉 田 穂 積
准 教 授・博士（学術） 金 岩 稔
論文内容の要旨
Chapter 1. General introduction
Fisheries stock assessments produce estimates of
stock abundance to provide fisheries managers with
advice on the relative merits of alternative manage-
ment strategies (Hilborn and Walters, 1992 ; King,
2007). In the recent development of fisheries stock as-
sessment modeling, stock dynamics have been esti-
mated through integrated analysis using multiple
data sources simultaneously (Maunder and Punt,
2013). The amount of information on a stock in each
dataset is therefore important in achieving reliable
estimates of stock dynamics. Given the limitation on
sampling resources, optimization of sampling is es-
sential to obtain informative data.
In integrated analysis, weighting factors assigned to
each dataset are important because they affect the
model outputs (Francis, 2011). Since reasonable weight-
ing factors should be determined based on the amount
of information in each dataset (Shibano et al., 2016), it
is necessary to conduct an objective evaluation of the
amount of information that the datasets provide.
Catches, along with abundance indices, generally
provide direct information on the trends and scale of a
population (Magnusson and Hilborn, 2007). Length
composition and tagging data can reveal changes in
population structure, growth, natural mortality, and
recruitment (Chen et al., 2003 ; Magnusson and
Hilborn, 2007). Length composition data in particular
is a source of indirect information on stock abundance
(Folmer and Pennington, 2000).
Most of the length composition data is obtained
through port samplings (ICCAT, 2006), and the
sampling structure results from a two-step process :
(1) catching fish from the population at sea, and (2)
collecting samples from the landing. This type of
selection is called cluster sampling, and it is known
that the amount of information obtained this way
decreases due to the homogeneity of fish lengths
within each cluster (Cochran, 1977). Considering this
structure, the homogeneity of fish lengths within a
landing is essential for sampling optimization. For
example, since longliners catch non-schooling fish in
one operation, the range of fish lengths is relatively
wide. Purse seiners, on the other hand, catch rela-
tively small schooling fish whose lengths are highly
homogeneous. Given the considerable variation in the
lengths of fish taken from different schools, even if the
same total sample size is to be measured, increasing
the number of landings while reducing the sample size
per landing should lead to more reliable estimates
(ICCAT, 2006).
The amount of information in a length composition
dataset should be measured from the viewpoint of how
exactly the dataset describes the true length composi-
tion of an exploitable stock which is accessible to a
fishery, and the multinomial likelihood function is
frequently used as a measure (e.g., Methot andWetzel,
2013). In likelihood methods, the true length composi-
tion must be known, and this is possible through com-
puter simulation. Unfortunately, however, it is never
─ 19 ─
known in practice. Effective sample size (ESS ; Pen-
nington and Vølstad, 1994 ; Pennington et al., 2002) is
a measure of an amount of information, which is an
estimate of the number of fish randomly sampled to
obtain the same accuracy and precision of the mean
length estimated from actual samples. The method to
estimate ESS presented by Pennington et al. (2002)
was focused on in this study because it can be applied
to a raw survey or fishery length composition data
without information on the true length composition. If
ESS can be used as an indicator of likelihood, it would
be helpful when determining weighting factors for
length composition data. However, the uncertainty of
ESS is expected to increase when sample sizes are
small, and this uncertainty will invalidate the ap-
propriate use of ESS as an indicator of likelihood.
This study was conducted assuming actual length
sampling at a purse seine fishery in the Sea of Japan
(PS-SoJ) targeting Pacific bluefin tuna (PBF) and a
Hawaii-based longline fishery (HL) targeting sword-
fish. The objectives were (1) to clarify the relationship
between likelihood and ESS, (2) to investigate the
minimum number of landings and sample size per
landing required to ensure the relationship, (3) to
explore efficient sampling methods to improve the
amount of information, and (4) to suggest methods of
applying ESS to weighting factors for length composi-
tion data used in the actual integrated analysis of
PBF.
Chapter 2. A simulation study of the relation-
ship between sampling methods and amount of
information
A virtual fishery and sampling model was developed
to imitate the actual process from catching fish to
collecting samples from a landing. Based on the
length composition data from PS-SoJ, an infinite
population was simulated as the exploitable stock.
The length composition of fish was assumed to be
determined as the joint distribution of the exploitable
stock and age/length selectivity. Five selectivity sce-
narios were set to mimic the actual fishing methods.
Model configurations, representing the number of
landings from which samples were drawn and the
total sample size, were set over a range from the
minimum number of samples required to calculate
ESS to the maximum number in the current sampling
methods at PS-SoJ and HL. The sample size per
landing was determined as the total sample size
divided by the number of landings. In each trial, the
amount of information in data obtained from a
simulated stock was evaluated by likelihood assuming
multinomial probability and ESS. The trial was re-
peated 1,000 times in each scenario. The central
tendencies of each likelihood and ESS were observed
using the medians, and the uncertainty of ESS was
measured using the IQR divided by the median
(standardized IQR) of the 1,000 runs of the trial.
In the results, 6 or more landings and sample sizes
of 2 or more per landing seemed to be the thresholds at
which positive correlations of LL and ESS could be
ensured under the situations considered here. The
uncertainty of ESS was small with 6 landings. These
results indicate that ESS can be appropriately used as
an indicator of the amount of information when the
sampling methods met the thresholds. When the SDs
of selectivity were small, increases in the number of
landings improved the amount of information more
than simply increasing the sample size per landing.
When the SDs of selectivity were relatively large,
however, increases in the number of landings scarcely
contributed to the amount of information.
Chapter 3. An application to actual length sam-
pling
The approach detailed in the preceding chapter was
applied to actual length composition data of PS-SoJ
(1987-2012) and HL (2005-2012) to suggest efficient
sampling methods for each fishery. Since the exploit-
able stock is unknown, the overall length composition
of the fish landed in a year (estimated as the sum of
length samples in each landing weighted by the
number of fish in the landing) was assumed as the
exploitable stock to calculate likelihood. The landings
were randomly resampled with replacement retaining
the original length composition. The number of land-
ings scenario and the total sample size scenario were
set following those in Chapter 2. The sample size of
each landing was determined as the total sample size
divided by the number of landings. The trial was
─ 20 ─
repeated 1,000 times in each scenario, and the results
were compared to those in Chapter 2.
In general, the results showed that ESS could be
appropriately used as an indicator of likelihood with 6
or more landings and sample sizes of 2 or more per
landing across the length samplings of both PS-SoJ
and HL. At PS-SoJ, the relationship between sam-
pling methods and likelihood was similar to the re-
sults of selectivity with a relatively small SD, and in-
creasing the number of landings was a more efficient
way to obtain a higher amount of information. At HL,
although the average range of fish lengths within each
landing was wider than at PS-SoJ, the relationship
between sampling methods and likelihood was similar
to the results obtained from selectivity with an ex-
tremely small SD. This finding indicates that the
contribution of the number of landings to the amount
of information in the sampling was greater at HL than
at PS-SoJ. At HL, most landings consisted of larger
fish and only a few comprised smaller fish. Increasing
the number of landings from which samples are drawn
seems to be necessary to cover the landing patterns of
both small fish and large fish.
Chapter 4. Optimal sampling method to obtain a
specific target of accuracy and precision : a case
study of a purse seine fishery in the Sea of Japan
From 2004, new vessels entered the PS-SoJ fishery
and the annual number of landings increased, re-
sulting in an increase in the annual total sample size.
This placed a heavy burden on port samplers. Opti-
mization therefore became a necessity in length sam-
pling at this fishery.
In Chapter 3, it was shown that, with the current
annual numbers of landings (over 26) and the growth
in total sample size (from 2,328 to 20,603) since 2004 at
PS-SoJ, ESS could be appropriately used as a measure
of amount of information. The results in Chapter 3
also showed that increasing the number of landings
would be a more efficient way to obtain a higher
amount of information. If samplers desire to maintain
the current amount of information, reducing the sam-
ple size per landing would be a more recommendable
approach to optimization. Chapter 4 thus provides
more detailed and concrete suggestions for the opti-
mization of sampling that will continue to yield the
current amount of information for this fishery.
This study focuses on a simulation analysis that was
conducted where the upper limit of the sample size for
each landing was changed while the original length
composition and the original number of landings each
year were retained. The trial was repeated 10, 000
times in each scenario. The results showed that
reductions in the amount of information were small
when the upper limit was 50 or higher. However, the
cold storage capacity of the average vessel at this
fishery is limited to around 100 to 900 fish, depending
on the size of fish (TPFES and TIIT, 2010). If 50 fish
are collected from one landing, there is a possibility
that they will all be drawn from a single storage unit.
Whether the 50 fish will represent random samples
from the overall landing is dependent on how the fish
are unloaded. Considering the situation at this
fishery, an adequate upper limit of sample size for
each landing to cover multiple storage units would be
100.
Chapter 5. An evaluation of initial weighting
factors for length composition data used in in-
tegrated stock assessment models
In stock analysis using integrated models, weight-
ing factors of each likelihood component (e.g., for
abundance indices and size composition data) directly
affect the estimation of the model (Francis, 2011). Two
weighting factors are determined in stages : (1) the
initial weighting factor and (2) the adjusted weighting
factor that is used to maximize the sum of each like-
lihood component (Francis, 2011). The initial weight-
ing factors for length composition data are fixed, and
proportional values are assigned to the adjusted
weighting factor. The setting of the initial weighting
factor thus affects the stock assessment results
(Francis, 2011). In a stock assessment of PBF con-
ducted in 2012, point estimates of ESS were used as
initial weighting factors with an upper limit, and
conflicts were observed between the length composi-
tion data at the PS-SoJ fishery and the abundance
indices derived from other fisheries. After careful con-
sideration, the initial weighting factor for the length
composition data at PS-SoJ was reduced.
─ 21 ─
This study provides further analysis of a procedure
for determining the initial weighting factor of the
likelihood component for length composition data at
PS-SoJ used in the stock assessment model for PBF.
First, ESS was estimated as an initial weighting factor
considering the inherent amount of information from
the length composition data in the context of cluster
sampling. Next, five scenarios were tested : (1) ap-
plying the method that was used in the stock as-
sessments in 2012, (2) applying the point estimates of
ESS without upper limits, (3) using the point esti-
mates of ESS except for highly uncertain years, (4)
applying the number of landings, and (5) setting equal
weights across all years. To suggest optimal methods,
the partial likelihood of the estimated key parameter
(i.e., virgin recruitment R0) was observed as an indi-
cator of the model fit for the tested scenarios.
In the results, the model fit improved in the scenario
where the point estimate of ESS except for highly
uncertain years was used. The difference in estimates
of spawner stock biomass between the current stock
assessment and the optimal method in this study was
2.3%. The differences between the statistical point
estimates of stock dynamics in each scenario would
have a significant effect on management considering
the current situation of PBF. A discussion on appro-
priate methods of setting initial weighting factors for a
variety of data conditions was also provided.
Chapter 6. General conclusion
Length sampling is fundamental to many aspects of
fisheries science and involves vast human and eco-
nomic resources. Without formal guidance on the opti-
mization of sampling, sampling methods in many
cases were determined from the viewpoint of cost and
did not necessarily result in the optimum allocation of
limited sampling resources among clusters, i.e., land-
ings or trips (Gerritsen andMcGrath, 2007). However,
data collection is becoming increasingly important,
and budget constraints are becoming stricter each
year. Optimization is essential for sampling to con-
tinue under such conditions.
Classical stock assessment methods (e.g., VPA or
production model) often use a two-step approach ; the
raw data are first summarized in a separate analysis,
often in the form of parameter estimates, and then
used when fitting the population dynamics (Maunder,
2004). Integrated analysis (e.g., SS3 ; Methot & Wetzel
2013), on the other hand, combines all available data
into a single model utilizing a joint likelihood for
observed data (Maunder, 2004). The amount of infor-
mation in an individual dataset thus has a direct
influence on stock assessment output (Maunder and
Punt, 2013), and sampling methods that can be used to
obtain informative data are desired (Ono et al., 2014).
In this study, the methodology to investigate opti-
mum sampling methods was described in a systematic
and theoretical manner. A fishery and sampling
model was constructed to imitate the actual process
from catching fish to collecting samples from landings.
The results indicated that efficient sampling methods
that contributed to the amount of information varied
with the assumed selectivity. This simulation method
of changing sampling factors was applied to actual
length composition data, and this method made it
possible to estimate the inherent selectivity of a
fishery. Knowledge of selectivity would be helpful in
the planning of appropriate sampling, and extending
this method to other fisheries could benefit the entire
field of fisheries science. This method can be applied
to surveys on fisheries stocks affected by sudden
events such as the 2011 Tohoku earthquake and
tsunami. Monitoring in such situations requires effi-
cient sampling methods with consideration given to
the characteristics of fish species landed at each port
(Shibano and Kanaiwa, 2014). Utilizing the simula-
tion method described in this study to consider
changes in the amount of information caused by
sampling methods would provide useful information
for planning surveys.
In integrated analysis, the determination of weight-
ing factors directly affects stock assessment results
(Francis, 2011), and correct relative weighting among
likelihood components is crucial to attain good model
performance and good estimates of the variances of the
model results (Methot and Wetzel, 2013). This study
examined performance when the point estimate of
ESS was set as an initial weighting factor except for
highly uncertain years. First, relative differences in
the amount of information between years were eval-
─ 22 ─
uated by ESS. Next, concerning the method used to
determine an initial weighting factor that is appropri-
ate for the length composition data, the influence on
the model fit in each scenario was investigated
through a simulation analysis by setting five scenar-
ios, including a scenario that utilizes the method used
in the actual stock assessment. The results demon-
strated that the model fit improved in the scenario
where the point estimate of ESS except for highly
uncertain years was used, indicating the merits of
objectively evaluating the amounts of information in
various datasets. Extending the study to other fish-
eries and assessments would be helpful in setting
more reasonable weighting factors for each length
composition dataset.
Efficient sampling methods and appropriate evalua-
tion of amounts of information are common issues in
stock assessments at all fisheries. The methods pre-
sented in this study are expected to foster the de-
velopment of sampling techniques and reliability of
stock assessments.
審査報告概要
水揚げなどのクラスター単位で得られることが多い体
長組成データは水産資源量の動向を把握するうえで良い
指標の一つであるが，精度を適切に評価する方法が必要
とされる。尤度により精度の評価は可能であるが，入手
不可能な真の体長組成が必要となる。そこで申請者は，
真の体長組成が未知の場合にも算出可能であり，クラス
ターサンプリングを考慮した精度の指標である有効サン
プル数（ESS）に着目した。まず，クロマグロなどの体
長組成データを用いて，ESSを精度の指標として適用
できる条件を検討し，6回以上の水揚げから一回当たり
2匹以上の体長を計測することが必要であることを明ら
かにした。また，計測する水揚げ回数を増やすことが精
度の向上に寄与することを明らかとした。さらに，様々
なデータを実際の資源解析に用いる場合の ESSによる
各データの重みづけの手法を具体的に提案した。本研究
の成果は，魚類資源量推定の精度向上に大いに寄与する
ことが期待される。
よって，審査員一同は博士（生物産業学）の学位を授
与する価値があると判断した。
─ 23 ─


A study of accuracy and precision of length composition data based on effective sample size with consideration to cluster sampling

東京農業大学博士（バイオサイエンス

有賀, 裕剛

3624

ARIGA, Hirotaka

3625

AQUOS determines the natural variation in osmotolerance among Arabidopsis thaliana accessions

後藤, 大也

3630

GOTO, Hiroya

3631

氏 名 後 藤 大 也
学位（専攻分野の名称） 博 士（畜産学）
学 位 記 番 号 乙 第 909 号
学 位 授 与 の 日 付 平成 28 年 2 月 20 日
学 位 論 文 題 目 ウシの加齢が卵子のミトコンドリアと受精能力に及ぼす影響
論 文 審 査 委 員 主査 教 授・博士（農学） 岩 田 尚 孝
教 授・博士（畜産学） 桑 山 岳 人
助 教・博士（農学） 白 砂 孔 明
非常勤講師・博士（農学） 橋 本 周
論文内容の要旨
哺乳類において，加齢に伴い卵の質が低下することは
広く知られている。畜産では優良な家畜の長期利用，ヒ
トでは高齢期での妊娠などの観点から母体の加齢に伴う
卵の変化やその対処方法を理解することは重要である。
本研究では，最初にウシ卵を用いて加齢が卵の質にど
のような影響を与えるのかについて検討を行い，加齢に
伴い卵の受精能，発生能が低下すること，若齢牛由来卵
と老齢牛由来卵で発現に差が見られる遺伝子がミトコン
ドリア異常に関連付けられること，卵子の活性酸素含量
が老齢牛由来卵で多くなることを示した。次に，卵のミ
トコンドリア DNAコピー数をリアルタイム PCRで測
定し，老齢牛由来卵ではミトコンドリア DNAコピー数
が減少することを明らかにした。さらに同一個体内では
卵のミトコンドリア DNA数が似通っていることを利用
し，卵子の受精率やミトコンドリアの機能と DNA コ
ピー数の間の関係性について調べた。その結果，若齢牛
由来卵の受精率と ATP含量との間に正の相関がみられ
るが，老齢牛由来卵では見られないこと，老齢牛由来卵
では，ミトコンドリア数の減少が起きている反面，卵の
異常受精率とミトコンドリア数との間に有意な正の相関
がみられることを示した。最後に，老齢牛由来卵の特徴
として，ヒストンのアセチル化について検討し，老齢牛
由来卵ではヒストン H4K12のアセチル化状態がM2期
卵で高く，この高アセチル化状態は老齢牛由来卵に多く
含有されている活性酸素によって惹起されていること，
抗酸化剤の添加によりこの高アセチル化状態が若齢と同
程度に戻ることを示した。一方で高い異常受精率は抗酸
化剤では回復しなかったが，ミトコンドリアの更新を促
す効果があるレスベラトロールの添加処理では，老齢牛
由来卵の受精率を有意に改善できることを明らかにし
た。
1）．母体の加齢が卵の質に与える影響
母体の加齢に伴う異常の概要を把握するために，加齢
に伴う卵子の受精能と発生能の変化を検討し，また，加
齢に伴い成熟卵の遺伝子発現がどのように変化するのか
を網羅的に解析した。老齢牛由来卵では若齢牛由来卵に
比べ正常受精率が減少し，異常受精が有意に増加した。
また，老齢牛卵由来の胚盤胞では老齢牛由来卵の胚盤胞
に比べ，その細胞数が有意に減少していることが観察さ
れた。さらに，遺伝子の網羅的発現解析では，若齢牛由
来卵と老齢牛由来卵で変化する遺伝子の多くが，酸化的
リン酸化反応やミトコンドリア機能障害に関連付けられ
た。そして，老齢牛由来卵では活性酸素の量が有意に増
加していた。このことから老齢牛由来卵ではミトコンド
リアに異常が起きていることが考えられたため，次の実
験では，ミトコンドリアの数と機能が加齢ウシに特徴的
に異常が認められた受精率とどのような関係にあるのか
について検討した。
2）．母体の加齢が卵のミトコンドリアに与える影響
卵に含まれるミトコンドリア DNA コピー数，ATP
量とドナー月齢の間の関係について検討した結果，個体
の加齢に伴い卵に内包されるミトコンドリア DNA コ
ピー数が減少することが観察された。また，同一の個体
から卵を大量に採取するとその中の個性が似通っている
ことを利用し，採取した卵を 2群に分け，それぞれのパ
ラメーター間の相関を比較した。卵子の含有する ATP
量に関しては，老齢牛由来卵において異常に高い ATP
を含有するものが多いことが分かった。またミトコンド
リア DNAコピー数と ATP量の相関を調べたところ，
これらの要因間には相関が観察されず，卵子の ATP量
はミトコンドリア DNAコピー数が直接関与しているわ
けではないことが明らかになった。ATP量と受精率の
─ 120─
関係では，若齢牛由来卵において ATP量と正常受精に
正の相関があったが，老齢牛由来卵では ATP量と受精
能の間には相関は観察されなかった。ミトコンドリア
DNA コピー数と受精率との間の相関を検討したとこ
ろ，異常受精率とミトコンドリア DNAコピー数との間
に正の相関が観察され，一方で若齢牛由来卵では，この
ような相関は観察されなかった。これらのことからウシ
では個体の加齢に伴いミトコンドリア DNAコピー数が
減少し，機能的にも異常が起きていることが推測され
た。また卵子の受精能力は加齢に伴い低下することを明
らかにした。
これらの結果より，加齢個体では異常ミトコンドリア
を減少させるメカニズムがあり，それが破綻している個
体では異常受精が高頻度に起こっているのではないかと
推測された。次章ではミトコンドリア異常により卵子の
活性酸素含量が多いことや，活性酸素やエネルギー状態
が細胞のヒストンアセチル化に影響することが知られて
いるため，卵子中の加齢に伴うヒストンのアセチル化に
ついて検討した。
3）．母体の加齢がヒストンのアセチル化状態に与える影
響
母体の加齢がヒストンのアセチル化状態に与える影響
について検討した。さらに，ミトコンドリアの機能低下
に起因すると考えられる活性酸素の除去とヒストンアセ
チル化の関係および体外受精との関係について検討し
た。結果として，老齢，若齢牛由来卵共に卵成熟中にア
セチル化状態が有意に低下することが観察された。一方
で，老齢牛由来卵では，若齢牛由来卵に比べて GV期で
H4K12のアセチル化状態が有意に低く，逆に M2期で
高いことが明らかになった。次に老齢牛由来卵の体外成
熟培地に対し，抗酸化剤である Nアセチルシステイン
（NAC）を添加したところ，成熟卵の活性酸素量が有意
に減少し，ヒストンアセチル化状態も有意に減少したた
め，老齢牛由来成熟卵の高アセチル状態は活性酸素に由
来すると考えられた。一方で，成熟培地への NACの添
加は老齢牛由来卵の異常受精率には影響しなかった。し
かし，ミトコンドリアの合成や分解を伴う更新を促す作
用が報告されているレスベラトロールの卵成熟培地への
添加効果を検討したところ，活性酸素の有意な除去効果
は認められなかったにもかかわらず，老齢牛由来卵の高
い異常受精率を有意に改善することが分かった。
これらの結果より母体の加齢に伴うミトコンドリアの
異常や活性酸素の増加は，ヒストンのアセチル化状態に
影響し，抗酸化剤の成熟培地への添加は成熟卵子のヒス
トンのアセチル化状態を若齢と同程度に低下させる効果
があること，一方で細胞質の高い活性酸素が，高い異常
受精の原因ではないことが明らかになった。また，レス
ベラトロールの加齢ウシ卵子の受精能改善効果を考える
と，SIRT1を介したミトコンドリアの更新の誘起が，
老齢牛由来卵の発生能力を改善することにつながるので
はないかと推測した。
審査報告概要
大動物の加齢に伴う卵子の変化は明らかにされておら
ず，その解明は卵子異常に対する対処法を考える上で重
要である。本研究では，加齢と若齢ウシの卵子を比較
し，網羅的な遺伝子解析と培養試験より受精能力とミト
コンドリアに異常がある可能性を明らかにした。さらに
卵子のミトコンドリアの DNAコピー数が加齢に伴い減
少すること，DNAコピー数，受精率そして卵子の ATP
の含有量の間の相関関係が加齢と若齢度異なることを示
した。また，ミコンドリア異常に起因する活性酸素は加
齢個体の卵子に多く，これが加齢個体で卵子のヒストン
アセチル化亢進の原因となっていることを示した。また
活性酸素の除去は加齢ウシ卵子の受精率の改善には寄与
せず，ミトコンドリアの更新を促すレスベラトロールが
受精能力の改善効果を持つことを示した。本研究ではヒ
トと同様の卵胞形成パターンをもつ大動物を用いて，加
齢に伴う卵子の異常の原因に関する新規性のある知見を
得た。
よって，審査員一同は博士（畜産学）の学位を授与す
る価値があると判断した。
─ 121 ─


ウシの加齢が卵子のミトコンドリアと受精能力に及ぼす影響

SHAMS, Hayat Khan

3650

3651

Study on Effective Utilization of Irrigation Water in Afghanistan

東京農業大学博士（国際農業開発学

鵜家, 綾香

3654

UKE, Ayaka

3655

氏 名 鵜 家 綾 香
学位（専攻分野の名称） 博 士（国際農業開発学）
学 位 記 番 号 甲 第 719 号
学 位 授 与 の 日 付 平成 28 年 3 月 20 日
学 位 論 文 題 目 東アフリカ産 Rice yellow mottle virusの性状解析および
検出法の開発
論 文 審 査 委 員 主査 教 授・農 学 博 士 夏 秋 啓 子
教 授・博 士（農 学） 高 根 務
客員教授・博士（生物環境調節学） 眞 岡 哲 夫
農 学 博 士 池 田 良 一＊
論文内容の要旨
近年，アフリカにおいて稲作が拡大しているが，Rice
yellow mottle virus（RYMV）による被害が大きい。本
研究では RYMV防除を目的とし，東アフリカのウガン
ダおよびタンザニアを対象に，ウガンダにおける発生調
査，ウガンダ産およびタンザニア産 RYMV の系統解
析，伝搬経路の検討，および，検出用ペプチド抗体の開
発を行った。
ウガンダ東部で行った発生調査では，稲作地帯での
RYMV蔓延を認め，さらに実験圃場における日本品種
コシヒカリでの自然発病例を発見し，感染が確認され
た。この結果より，アフリカ稲作地帯での防除の必要性
のみならず，現在はアフリカのみに発生している RYMV
であるが，アジアの稲作地帯への侵入を警戒すべきであ
ることを示した。
ウガンダおよびタンザニア分離株の塩基配列解析で
は，両分離株とも既報の東アフリカ各国由来の分離株お
よびマダガスカル分離株と高い相同性を示した。一方
で，採集地によって特異なアミノ酸変異が見られたこと
から，高い相同性の中にも，わずかであるが地域による
特異性があることを示した。系統学的解析では，ウガン
ダ分離株は，S4-ug 遺伝子型および，S4-mg 遺伝子型
に，タンザニア分離株は既報の S4分離株とは異なるキ
リマンジャロ山付近を由来とする S4-mk遺伝子型（新
称）を形成していた。ウガンダ分離株と異なり，タンザ
ニア分離株は，S4だけでなく，S5，S6に属する分離株
が報告されており，多様性に富むことが知られている
が，本研究で解析したタンザニア分離株が新たな遺伝子
型を形成していたことにより，改めてタンザニアにおけ
る RYMVの遺伝的多様性が示された。
血清型については，従来のようにモノクローナル抗体
による判定ではなく，外被タンパク質（CP）領域アミ
ノ酸配列の解析により推定したところ，タンザニア分離
株，ウガンダ分離株は，既往の Ser 4に分類されている
分離株と同じ配列を示し，血清型は Ser 4であると判定
された。このことから，入手困難なモノクローナル抗体
を用いる必要はなく，特定領域のアミノ酸配列で
RYMVの血清型を推定する方法を採用できる可能性を
示した。
RYMVはハムシによる半永続伝搬および接触伝搬す
るが，本研究では，人工的に RYMV汚染させた水，土
壌，ハサミを介した伝搬に加えて，バッタ類の汚染口器
を介したと考えられる伝搬も認めた。これにより，農機
具，土壌，水，さらに，ハムシ以外の昆虫による RYMV
の伝搬可能性を示し，本研究の結果を踏まえた耕種的防
除の必要性を示した。
簡易検出法として，FTA®カードを用いた RYMVの
RNA抽出を行ったところ，イネウイルスで初めての成
功例となった。また，迅速免疫濾紙検定法（RIPA法）
の利用を RYMVでは初めて検討し，検出技術の改良の
ため Thermo社製ラテックス粒子の新たな採用と RYMV
に最適化した抗体濃度の決定により，検出に成功した。
加えて，CP領域のアミノ酸配列からペプチド抗体を作
成し，各種血清学的手法での利用可能性を示した。ペプ
チド抗体の二次抗体利用すれば，健全イネ葉での非特異
反応が軽減され，より実用性が上がることを示した。植
物ウイルスでは例の少ないペプチド抗体作成に RYMV
でも初めて成功し，抗体の安定供給に道を開いた。
以上より，本研究では，東アフリカ産 RYMVについ
て，植物ウイルス学的に重要な新知見に加えて，防除や
診断について有用な新知見や手法を示した。
─ 67 ─
＊JAICAF技術参与
審査報告概要
本研究では RYMV防除を目的とし，ウガンダにおけ
る発生調査，系統解析，伝搬経路の検討および，検出用
ペプチド抗体の開発を行った。ウガンダの稲作地域で
RYMVの蔓延を確認し，ウガンダおよびタンザニア分
離株の塩基配列の解析では，既報の東アフリカ産
RYMV分離株と高い相同性を認めた。さらに，従来の
モノクローナル抗体を用いる方法ではなく，外被タンパ
ク質領域のアミノ酸配列の解析により血清型の推定を行
い，タンザニアおよびウガンダ分離株の血清型を Ser 4
と推定した。また，RYMVに汚染した水，土壌および
ハサミや，バッタ類などによる伝搬を認めた。ペプチド
抗体を RYMVでは初めて作成し，ELISA法，Western
blot法，DIBA法での利用可能性を示して検出技術を改
良した。本研究では，東アフリカ産 RYMVについて植
物ウイルス学的な新知見を得たのみならず，その知見に
基づいて防除や診断についての情報を提供するに至っ
た。
よって，審査員一同は博士（国際農業開発学）の学位
を授与する価値があると判断した。
─ 68 ─


Characterization and development of detection technology of Rice yellow mottle virus in East Africa

稲橋, 正明

3828

INAHASHI, Masaaki

3829

氏 名 稲 橋 正 明
学位（専攻分野の名称） 博 士（醸造学）
学 位 記 番 号 乙 第 918 号
学 位 授 与 の 日 付 平成 28 年 10 月 20 日
学 位 論 文 題 目 有機酸生成に特徴を持つ清酒酵母の育種と清酒醸造への応用
に関する研究
論 文 審 査 委 員 主査 教 授・博士（農学） 柏 木 豊
准 教 授・博士（醸造学） 進 藤 斉
准 教 授・博士（醸造学） 門 倉 利 守
工 学 博 士 佐 藤 和 夫＊
論文内容の要旨
1． 研究の背景と目的
清酒はわが国独自の伝統醸造酒であり，アルコール飲
料として独特の呈味性を示すとともに，和食献立の呈味
を引き立てる役割を担い，わが国の伝統食との関連を持
ちつつ，優れた品質の製品が製造されてきた。清酒の呈
味には，糖，アミノ酸，有機酸が主要な作用を示すが，
有機酸は清酒に濃醇な呈味を与え，中でもリンゴ酸は冷
酒において爽やかで軽快なすっきりした酸味を示し，乳
酸は燗酒においてまろやかな酸味と旨味を示すことが知
られている。
近年 20∼30年の清酒品質の動向調査によれば，清酒
の製造技術の発展と消費者の嗜好の変化によって，市販
清酒の 70%の生産量をしめる一般酒（普通酒）では，
辛口淡麗が好まれ，酸度（総酸）及びアミノ酸度が低
く，エキス分が減少した，日本酒度が高い（＋の方に変
化）清酒が多く生産されてきた。しかし，酸度の減少
（乏酸）によって，清酒の味の「しまり」や「ふくらみ」
が欠けるようになり，ごく最近では辛口淡麗化から離れ
た濃醇な酒質を示す清酒が求められるようになってき
た。すなわち，冷酒では爽やかで軽快な酸味をもつリン
ゴ酸が，燗酒ではまろやかな酸味と旨味をもつ乳酸が主
体となる呈味を示す清酒が求められている。
清酒に含まれる有機酸の約 70%が醪中にて酵母によ
り生成されることから，有機酸の生成に特徴をもつ清酒
酵母を育種し，これを清酒醸造に利用することにより求
められる酒質を自在に製造するこれまでにない技術が開
発できると考えられた。
そこで，まずリンゴ酸を特異的に多量に生成する新規
の清酒酵母株を育種し，それらの醸造特性を明らかにし
た。続いて，新規の清酒酵母を実用化するためには，保
存菌株の管理や清酒醪中の菌株管理の観点から，使用菌
株を迅速に検出し判別する技術の開発が求められる。こ
のため，酵母判別法である TTC染色法における下層培
地組成や培養温度を改変すると，酵母の染色性が変化す
ることに着目し，醸造酵母の TTC 染色性の特徴及び
Burkholder培地における酸性ホスファターゼ活性の有
無に基づいて，各種の醸造酵母株の簡便な判別法を確立
した。
さらに，乳酸を特異的に生成する優良清酒酵母の育種
は難しいことから，ワイン醸造において汎用されている
マロラクティック発酵（MLF）を清酒醸造に応用する
ことを考え，清酒醪中にリンゴ酸高生産性清酒酵母と
MLF 能を有する乳酸菌を共存させて，MLF によりリ
ンゴ酸と乳酸の組成比を調整する技術の開発を目指し
た。このために，酒造における各工程から新規に分離さ
れた乳酸菌の中からMLFに適した菌株を選択し，酵母
／乳酸菌の初発菌数比と乳酸添加時期の検討により，リ
ンゴ酸／乳酸の組成比を調整する方法を確立し実用化し
た。
2． リンゴ酸を高生産する清酒酵母の育種
（1）リンゴ酸とカプロン酸エチルを高生産する清酒酵母
（No. 77）の育種
吟醸酒に用いることができる清酒酵母の育種を目指し
て，リンゴ酸及びカプロン酸エチルを高生産する清酒酵
母を作成した。
まず，協会酵母 K-1001（K-1001）を胞子形成させて
一倍体 K-1001-22C を取得した後，エチルメタンスル
フォネート（EMS）変異処理を行い，シクロヘキシミ
ド（CYH）耐性株を取得し，リンゴ酸が全有機酸の 60
─ 81 ─
＊元東京農業大学 教授
∼70% を占める CHp-18（MATa）を選抜した。次い
で，この株からセルレニン耐性による選択を行い CHp-
18-1（MATa）を得た。この株と協会酵母 K-7の半数体
株 Hp-1-7（MATa）とを交配し，さらに戻し交配を
行った後，泡なし化を行った。本酵母を用いた小仕込み
試験の結果，K-701及び K-1001（親株）より，長期醪
となり日本酒度はマイナスの酒となったが，アルコール
分は親株と比較して遜色なかった。醪 27日目で親株の
酸度がそれぞれ 2.8，2.4に対して 3.8，リンゴ酸含量 1,
423mg/mL（リンゴ酸含有比 68.0%）であり，親株を用
いた場合の 4∼5倍のリンゴ酸を含む製成酒が得られた。
また，本酵母は吟醸香成分であるカプロン酸エチル含量
も親株による場合の約 3倍量生成（4.8ppm）し，目的
とするリンゴ酸高生産，かつ高香気生成株であることか
ら清酒酵母「きょうかい No. 77」として実用化した。
（2）リンゴ酸高生産性で総酸度の低い清酒酵母（No.
25）の育種
リンゴ酸高生産株 CHp-18（MATa）を発酵力が強く，
胞子形成率の高い清酒酵母 KM1の半数体株（MATa）
と交配して，Dp-20を取得し，さらに半数体化し Dp-
20-5（MATa）を得た。これに，戻し交配を繰り返して
より発酵力の強いリンゴ酸高生産株を取得し，泡なし化
を行った。本酵母を用いた小仕込み試験の結果，親株と
遜色のない発酵力を示し，醪 19日目で酸度 3.0，リン
ゴ酸含量 700mg/mL（リンゴ酸含有比 50.0%）の製成酒
が得られた。本株は，リンゴ酸が親株の約 2.4倍生成し
たにもかかわらず，総酸度が親株や通常の清酒酵母
（K-7，K-9，K-10）と同等かやや低い醸造特性をもち，
清酒酵母「きょうかい No. 25」と命名した。本酵母は
通常の仕込みに近い酸度及び日本酒度甘酸バランスを採
り得る清酒酵母である。
「No. 25」を育種する過程で，Hp-20-5（MATa）を
CHp-18（MATa）と交配した株の中に，親株より醪は
長期醪となり，日本酒度はマイナスの酒となるが，アル
コール分は親株と比較して遜色ない酵母 Dp-12-28も得
られた。醪 27日目で親株 K-1001の酸度 2.4に対して
4.6，リンゴ酸含量 2,110mg/mL（リンゴ酸含有比 70.9
%）であり，親株の 7倍以上のリンゴ酸を生産し，総酸
度の高い株（Dp-12-28）であった。本株の醸造特性を
確認してリンゴ酸高生産性で総酸度の高いことから，清
酒酵母を「きょうかいNo. 28」と命名した。また，「No.
25」「No. 28」両清酒酵母とも，親株と同等の香気成分
生成量を示した。
（3）アデニン非要求性赤色色素生産・リンゴ酸高生産性
酵母（No. 5-2）の取得
有機酸生成に特徴をもつ酵母株 CHp-18（MATa）を
取得する過程において，アデニン非要求性で赤色色素を
生産する高リンゴ酸生産株 CHp-18A（MATa）を得た。
この株を KM1の半数体株（MATa）と交配，さらに戻
し交配によって高リンゴ酸生成赤色清酒酵母 No. 5-2を
造成した。本酵母を用いた小仕込み試験の結果，親株と
遜色のない発酵力を示し，酸度 6.9，リンゴ酸含量
3,683mg/mL（リンゴ酸含有比 81.7%）の製成酒が得ら
れ，リンゴ酸が親株 K-1001の 10倍以上生成した。こ
の酵母により，鮮紅色の清酒が醸造できることを確かめ
た。本酵母は酒質の多様化への適用が期待される。
（4）リンゴ酸高生産性として育種された酵母 No. 25，
No. 28及び No. 77のリンゴ酸生合成経路の推定
No. 25，No. 28及び No. 77の高リンゴ酸生成機構に
ついては，生成する有機酸組成，（リンゴ酸／コハク酸
比）を検討した結果，ピルビン酸が pyruvate carboxy-
laseにより CO2を付加されてオキザロ酢酸になり，こ
れがmalate dehydrogenaseにより還元され，リンゴ酸
が高生産されるという経路が想定された。また，No.
25，No. 28及び No. 77は，親株の K-1001と同様，pyru-
vate Carboxylaseとmalate dehydrogenase活性が高い
ものの，ミトコンドリアの活性が低く，細胞内のピルビ
ン酸やリンゴ酸等の有機酸代謝が低下することで，細胞
質内でのピルビン酸からリンゴ酸への生成経路が活性化
されることが強く示唆された。さらに，好気条件下で培
養すると，No. 25，No. 28では著量のコハク酸を生成
することから，ミトコンドリアの活性低下の程度が No.
25，No. 28と No. 77とでは異なる可能性があることを
グリセリン培地での生育性の違いから推察した。
3． 清酒醸造における微生物管理のための育種株の判別
法の開発
（1）醸造用酵母の培養条件（培養温度，C源及び N源）
と TTC染色性
各種清酒酵母それぞれの性質を把握し，簡便に判別で
きることは清酒醸造の微生物管理にとって重要である。
優良清酒酵母の識別法として TTC染色法が広く用いら
れているが，TTC下層培地の糖源（C源）あるいは窒
素源（N 源）を単一アミノ酸に変え，かつ培養温度を
30℃又は 35∼38℃にすることにより，清酒酵母を判別
できることを明らかにした。
清酒酵母 19種類の中でセルレニン耐性を有する No.
77，K-1601，K-1701及び K-1801は，セルレニン含有
─ 82 ─
培地で生育し，そのコロニーの TTC染色性は赤色を示
すが，これら 4株以外の非セルレニン耐性のうち，パン
トテン酸欠，b-アラニン含有培地 35℃における生育性，
TTC培地の糖源をグルコースからマルトース及びガラ
クトースに改変した培地を用いることにより酵母間での
判別が可能となった。すなわち，b-アラニン含有培地
35℃では，7号系酵母のみ生育できない。育種したリン
ゴ酸を高生産する清酒酵母 No. 25，No. 28はマルトー
ス培地 30℃で生育し，TTC 染色性が赤色を示すが，
No. 77はピンクに染色される。また，ガラクトース培
地 30℃で，No. 28のみがピンクに染色される。以上の
ことから，育種した酵母がそれぞれ判別できる。さら
に，9号系である K-9及び K-14（泡無し酵母も含む）
においても，アラニンを単一窒素源とする培地を用い
38℃での生育性と TTC染色性を確認することにより，
9号系酵母間の菌株でも本法により判別することができ
る。
清酒酵母の TTC染色試験において，セリン，チロシ
ン，アスパラギン及びアスパラギン酸をそれぞれ単一窒
素源とする培地を用い 35℃以上で培養すると，TTC染
色が白色となる株が高頻度で出現した。これら TTC 白
色株は，すべてグリセリン培地に生育出来ない呼吸欠損
菌であった。
（2）ジアゾカップリング法による判別
低リン酸培地（PO4
3−，0.07mM）では，いずれの酵
母もジアゾカップリング反応による酸性ホスファターゼ
活性が検出されるが，高リン酸培地（PO4
3−，7.7mM）
で活性が検出されるのは，K-1，2，3，4，5，K-8，No.
25及びNo. 28のみであった。以上の結果から，No. 25，
No. 28の 2株と No. 77との判別にジアゾカップリング
法が適応できることを明らかにした。
4． リンゴ酸高生産性酵母（No. 28）と乳酸菌のマロ
ラクティック発酵（MLF）を応用した乳酸高含量清酒
の製造
MLFへの利用を目指して，清酒製造各工程及び市販
清酒から 24株の乳酸菌を分離した。取得した菌株から
MLFに使える可能性のある菌として，No. 8株を選抜
した。本菌は山廃仕込み醪から分離した菌株であり，
16S rRNAの塩基配列から，Lactobacillus paracaseiで
あると同定された。
この Lactobacillus paracasei No. 8株（「No. 8」）を
リンゴ酸高生産性酵母の清酒醪に共存させてアルコール
発酵とともにMLFを生起させる条件を検討した。その
結果，酵母と No. 8の初発菌数比を変えること，あるい
は No. 8を発酵醪に添加する時期を変えることにより，
リンゴ酸の低減率を 3.6∼99.5%の間で変化させ，MLF
を応用した乳酸高含有清酒の醸造法により醪，製成酒の
リンゴ酸と乳酸の比率を広範囲にわたって調整・制御で
きることを明らかにした。
本法によるリンゴ酸を対照酒の 93.8%減少させた乳
酸高含有清酒は，酸度及び有機酸を除いて，日本酒度な
ど一般成分は対照酒と比較して大きな差は認められず，
アルコール生成は良好，酸度は対照酒より少なく，アミ
ノ酸度はやや多めの結果を得た。また，2点識別テスト
において，危険率 1%で両酒を識別でき，官能試験によ
り，MLF菌添加乳酸高含有清酒は，まろやかで爽快な
酸味を有すると評価された。
5． 総 括
リンゴ酸を特異的に高生産することにより，冷酒にお
いて爽快な酸味を与え，かつ吟醸香の成分カプロン酸エ
チルを高生産し，吟醸酒に用いることができる清酒酵母
の育種を目的として，醸造特性が優れた清酒酵母「きょ
うかい No. 77」を実用化した。さらに，リンゴ酸高生
産性で，かつ総酸度が低く，増殖性の良い酵母の育種を
行い，生成有機酸に占めるリンゴ酸比率が約 50%で，
コハク酸生成が少ない低総酸度の酵母を育種し，「きょ
うかい No. 25」を実用化した。本酵母は通常酒に近い
酸度及び日本酒度で甘酸バランスを採り得る酵母であ
る。この「No. 25」の育種過程において No. 25と同様
の有機酸組成であり，総酸度 4.0以上の高酸度株も得ら
れた。この株は「きょうかい No. 28」として実用化し
た。また，これらの多酸性清酒酵母の育種過程で，アデ
ニン非要求で赤色色素を生産する高リンゴ酸生産株を取
得した。
No. 77，No. 25及びNo. 28の高リンゴ酸生成機構は，
有機酸の生成パターン，特にリンゴ酸／コハク酸比か
ら，ピルビン酸がオキザロ酢酸を経て還元され，リンゴ
酸が高生産される経路に，ミトコンドリアの活性低下が
影響を与えることによってリンゴ酸を高生産し，コハク
酸が低生産性になると推定した。
新規清酒酵母の保存管理や醪における菌株管理の観点
から，実用酵母菌株の簡便判別する方法が求められた。
培地組成や培養温度によって TTC還元能が菌株で異な
ることに着目し，実用酵母菌株の体系的判別法を確立し
た。さらに培地中のリン酸含量による酸性ホスファター
ゼ活性の差異によって新規酵母菌株の判別が可能である
ことを明らかにした。
飲酒時の酒温が高温（燗酒）では，清酒中の乳酸の含
─ 83 ─
有比が高いと，爽やかで，かつまろやかな酸味を与える
が，乳酸を高生産する清酒酵母の育種はこれまでに報告
例がない。そこで，新規に清酒醪より分離した Lacto-
bacillus paracasei No. 8株をリンゴ酸高生産性清酒酵
母とともに共存させて仕込みに用い，マロラクティック
発酵（MLF）を生起させて乳酸含有比を調整するとと
もに，乳酸を主要有機酸とする清酒の醸造方法を確立し
た。
本研究による有機酸生成に特徴をもつ清酒酵母の育種
とその実用化及び MLF を応用した清酒醸造法によっ
て，製成酒に含まれる有機酸の比率を現行の醸造技術に
よる範囲を超えた領域に拡大することが可能となり，得
られた酵母株は，冷酒や燗酒といった広い飲酒温度に対
応する清酒を製造し，商品化を目指す現在の技術的ニー
ズに応えたものである。
審査報告概要
市販清酒の品質の経年変動調査から，消費ニーズによ
り淡麗辛口の傾向が強まり，酸度が低く（乏酸）味の薄
い清酒が多数を占めることが判明した。これに対して，
有機酸が高く濃醇な味の品質をもつ清酒が求められてい
る。そこで，清酒酵母について，リンゴ酸等の高い有機
酸生産性を持つ変異株の育種とともに，これを活用した
乳酸含量の高い清酒の製造技術を確立することをめざし
た。「きょうかい清酒酵母」を親株として，セルレニン，
シクロヘキシミド耐性を指標としてリンゴ酸高生産性酵
母変異株 No. 77，No. 28，No. 25株および赤色色素生
産性酵母 No. 5-2株を創出し，これらの醸造適性を解析
した。「きょうかい酵母 No. 77」および「同 No. 28」株
は，市販高級酒の生産に実用化された。続いて醸造酵母
管理のために，TTC染色とアミノ酸培地を組み合わせ
た「きょうかい清酒酵母」菌株判別法を確立した。ま
た，新規分離したMLF乳酸菌 No. 8株を用いた高乳酸
清酒の醸造技術を開発した。以上の様に，膨大な変異株
ライブラリーの作成により新規の清酒酵母株の創出・実
用化とともに高有機酸生成の機構の推定を行ったこと
は，実学的および学術的に価値の高い研究である。よっ
て，審査員一同は博士（醸造学）の学位を授与する価値
があると判断した。
─ 84 ─


有機酸生成に特徴を持つ清酒酵母の育種と清酒醸造への応用に関する研究

稲葉, 洋芳

3620

INABA, Hiroyoshi

3621

恐怖記憶制御に対するタンパク質翻訳後修飾の役割の解析

砂見, 綾香

3644

SUNAMI, Ayaka

3645

大学生アスリートにおける食物摂取頻度調査票の妥当性・有用性 ―上気道感染症の観点から―

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