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Complesso macromolecolare responsabile dell'endocitosi dell'albumina: un ruolo a livello glomerulare? Studio di espressione genica di CLCN5 e megalina in biopsie microdissezionate di nefropatie proteinuriche
No full textClC-5 and Megalin are part of the same macromolecular complex involved in the re-uptake of albumin in the proximal tubuli. To understand the relationship between this mechanism and proteinuric kidney diseases, we have performed gene expression study of CLCN5 and Megalin genes in glomerular (gl) and tubular interstitial (ti) compartments of patients with type 2 diabetes (NIDDM) and IgA nephropathy (IgAN).
Gene expression of CLCN5 and Megalin was investigated by Real-Time PCR in microdissected biopsies (mpb) (under a stereomicroscope) from patients with IgAN (n 10) and with NIDDM (n 9). Both groups had similar level of proteinuria. As controls, we used cortical tissues obtained from sites remote from tumor bearing renal tissue (n 9). Moreover, we analyzed human mesangial cells (HMC), endothelial cells (HuVEC), tubular cells (HK-2) and podocytes (HP) in basal conditions. HMC and HK-2 were also examined in high glucose and albumin conditions respectively.
We found that: 1) CLCN5 and Megalin were expressed in all mbp both at gl and ti levels, and their expression did not differ between gl and ti of NIDDM and IgAN; 2) CLCN5 and Megalin expression levels were significantly higher in proteinuric nephropathies than in controls both at gl and ti compartment. In order to exclude ti contamination in microdissected glomeruli, we performed gene expression analysis of CLCN5 and Megalin also on laser microdissected glomeruli from 28 NIDDM patients and 14 controls that confirmed our previous results. In these mbp a direct correlation between CLCN5 and Megalin was evidenced (r=0,50 p=0,0039); 3) CLCN5 transcript was evidenced in all cells analyzed, on the contrary, very low levels of Megalin were detected; 4) HK-2 treated with albumin showed the same level of CLCN5 expression as untreated cells; 5) HMC treated with high glucose for 24 and 48 hours showed the same level of CLCN5 expression as untreated cells.
Our study reveals, for the first time, that CLCN5 and Megalin genes are expressed in human glomeruli, and that all the cell types constituting the glomerulus express in vitro CLCN5. The overexpression of CLCN5 and Megalin in diabetic and IgA nephropathy biopsies suggests that proteinuria might regulate their expression. The in vitro experiments on HMC exclude the role of glucose in the up-regulation of ClC-5 expression in diabetic glomerulopathy. A role might be hypothesized for podocytes since podocyte endocytosis of proteins does occur in proteinuric patients.ClC-5 e Megalina sono due delle proteine che compongono il complesso macromolecolare coinvolto nel riassorbimento dellâalbumina a livello del tubulo prossimale. Per comprendere meglio se ci fosse una relazione tra questo meccanismo e le patologie proteinuriche abbiamo effettuato uno studio di espressione per i geni CLCN5 e Megalina nei compartimenti glomerulare e tubulo interstiziale di pazienti con diabete di tipo II (NIDDM) e nefropatia a depositi di IgA (IgAN).
Lâespressione di CLCN5 e Megalina à ̈ stata investigata mediante Real-Time PCR in biopsie microdissezionate manualmente grazie allâausilio di uno stereomicroscopio. Queste sono stete ottenute da pazienti con diabete di tipo II (n°9) e nefropatia a depositi di IgA (n°9). Come controllo à ̈ stato utilizzato tessuto corticale ottenuto da polo renale indenne in corso di nefrectomia per tumore. Entrambi i gruppi di pazienti analizzati presentavano livelli simili di proteinuria. Abbiamo inoltre analizzato cellule mesangiali umane (HMC), cellule endoteliali umane (HuVEC) cellule tubulari umane (HK-2) e podociti umani (HP) in condizioni basali. HMC e HK-2 sono state anche analizzate rispettivamente in presenza di alte concentrazioni di glucosio e a diverse concentrazioni di albumina.
Abbiamo trovato che: 1) CLCN5 e Megalina sono entrambi espressi in tutte le biopsie microdissezionate sia a livello glomerulare che a livello tubulo interstiziale e i loro livelli di espressione erano simili nei due compartimenti in entrambe le patologie; 2) i livelli di espressione sono risultati maggiori nelle nefropatie proteinuriche rispetto ai controlli sia a livello tubulo interstiziale che a livello glomerulare. Per escludere unâeventuale contaminazione del compartimento glomerulare da parte del tubulo prossimale abbiamo chiesto la collaborazione del Dott. J.J.Baelde del Leiden University Medical Center che ha effettuato lâanalisi di espressione di CLCN5 e Megalina su glomeruli microdissezionati mediante laser ottenuti da biopsie di pazienti NIDDM (n°28) e su glomeruli sani di controllo (n°14), confermando i nostri precedenti risultati. In queste biopsie microdissezionate à ̈ inoltre emersa una correlazione diretta tra CLCN5 e Megalina (r=0,5, p=0,0039); 3) la presenza di CLCN5 à ̈ stata evidenziata e quantificata in tutte le cellule analizzate, mentre per Megalina sono stati rilevati livelli molto bassi di espressione; 4) le cellule HK-2 stimolate con albumina hanno mostrato gli stessi livelli di espressione di CLCN5 delle cellule non trattate; 5) le cellule HMC stimolate con glucosio hanno mostrato gli stessi livelli di espressione di CLCN5 delle cellule non trattate.
Il nostro studio evidenzia per la prima volta la presenza di CLCN5 e Megalina a livello del compartimento glomerulare nellâuomo ed inoltre che tutti i tipi cellulari costituenti il glomerulo esprimono in vitro CLCN5. La sovrespressione di CLCN5 e Megalina nelle biopsie dei pazienti diabetici e con nefropatia da IgA suggerisce un loro ruolo nella fisiopatologia della proteinuria e la loro correlazione diretta, emersa tra lâespressione genica delle due proteine nel glomerulo, fa ipotizzare un loro meccanismo dâazione coordinato simile a quello presente nel tubulo prossimale. Gli esperimenti in vitro sulle HMC escludono un ruolo del glucosio nella modulazione dellâespressione di CLCN5 nella patologia diabetica. Un ruolo in questo processo potrebbe essere ipotizzato per i podociti in quanto i risultati da noi ottenuti bene si affiancano ai dati in letteratura che mostrano che i podociti, nei pazienti proteinurici, sono in grado di endocitare proteine
The Officina Emilia Initiative:Innovative Local Actions to Support Education and Training Systems
No full textThe issue of the regeneration of skills, in particular in the light engineering industry, is addressed by Officina Emilia (henceforth OE) as a crucial one in order to re-examine the interweaving of education, innovation and local development in the SMEs production systems. The project, aimed at the education and training systems, is designed to enhance the industrial culture in order to strengthen technical and scientific education. First sponsored in 2000 by the University of Modena & Reggio Emilia (Italy), over the last years OE has gathered the support of local actors dealing with the themes of training, culture, and local development. In 2009 it opened its museolaboratorio (“workshop-museum”) in which teaching activities promote an interest in the themes of work, technologies and the socio-economic development of the territory among the students and teachers of schools of all types and levels. The involvement of class groups, of teachers and other visitors takes place through active learning practices that foster motivation and develop a sense of belonging which is likely to lead to a more profitable educational experience, both secondary and tertiary, as well as to contribute to improving career prospects. Officina Emilia proposes innovative action on a local level, allowing for the implementation of effective teaching practices as well as the broadening and consolidation of best practices which might support a society-wide trend towards maintaining a high demand for a better quality of education and the ability to provide it. Ten years after the beginning of the initiative, with this paper we intend to open up the discussion on the various research issues and on the actions undertaken, focusing on the analytical tools and the main critical areas in the further implementation of the Officina Emilia initiative.Analysis of Education; Education Policy; Regional Development Policies; Innovation
Molecular characterization of the promoter region of the CLCN5 gene and expression study of 5'UTR isoforms in healthy and diseased kidneys
No full textPOSSIBILE RUOLO DEL CANALE DEL CLORO CLC-5 E DELLE SUE ISOFORME NELLE MALATTIE RENALI PROTEINURICHE: STUDIO DI ESPRESSIONE IN BIOPSIE MICRODISSEZIONATE DI PAZIENTI CON DIABETE DI TIPO II
No full textPOSSIBLE ROLE OF ClC-5 CHLORIDE CHANNEL IN PROTEINURIC KIDNEY DISEASES: EXPRESSION STUDY IN MICRODISSECTED BIOPSIES OF PATIENTS WITH TYPE II DIABETES
No full textStudio dell’espressione del canale del Cloro ClC-5 in biopsie renali microdissezionate di nefropatie proteinuriche e in cellule renali in coltura.
No full textEmilia Pardo Bazán and the fight for women’s rights: an analysis of her non-fiction production and of Morriña
No full textopenLa presente tesi si propone di analizzare il ruolo della donna nella Spagna del XIX secolo, un ruolo essenzialmente limitato all’ambiente domestico e che attribuisce alla donna una posizione di sottomissione rispetto alla figura maschile. Nella società spagnola del XIX secolo, la donna non gode degli stessi diritti dell’uomo e l’unica sua aspirazione è il matrimonio. Nel panorama letterario a cavallo tra XIX e XX secolo emerge la figura di Emilia Pardo Bazán, un’autrice che, nel corso della sua vita e della sua produzione letteraria, ha lottato per la difesa dei diritti della donna. L’autrice sostiene la causa femminista e crede fermamente che l’accesso delle donne all’istruzione e al mondo del lavoro consentirebbero il progresso della nazione e permetterebbero inoltre alle stesse di raggiungere l’emancipazione. Il romanzo Morriña (1889) di Emilia Pardo Bazán, attraverso la storia della domestica Esclavitud Lamas, descrive la condizione della donna dell’epoca e i pregiudizi tipici di una società patriarcale.The aim of the present thesis is to analyze the role of the woman in the 19th century Spain, a role mainly limited to the home environment and which attributes to the woman a position of submission to the male figure. In the 19th century Spanish society the woman does not enjoy the same rights as man and her only aspiration is marriage. In the literary scenario between the 19th and the 20th century stands out the figure of Emilia Pardo Bazán, an author who, throughout her life and her literary production, has fought for women’s rights. The author supports the feminist cause and she firmly believes that women’s access to education and work would provide the country’s progress and would help women achieve emancipation. The novel titled Morriña (1889) by Emilia Pardo Bazán, through the history of the maid Esclavitud Lamas, describes the condition of the woman during that time and the prejudices of a patriarchal society
Emilia Salvioni
No full textThe headword explains the biography and the contribution of the author Emilia Salvioni to the children's literatur
Emilia Formìggini Santamaria
No full textThe headword explains the biography and the contribution of the author Emilia Formìggini Santamaria to the children's literatur
Cellule staminali mesenchimali residenti: un diverso punto di vista sull’origine della nefrocalcinosi
No full text- …
