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Root canal filling materials for primary yeeth: evaluation of the in vitro antibacterial activity and in vivo tissue compatibility
Avaliou-se a atividade antibacteriana e a compatibilidade tecidual dos seguintes materiais obturadores de canais radiculares de dentes decíduos: cimento de óxido de zinco e eugenol, pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento EndoREZTM. A atividade antibacteriana foi avaliada in vitro, por meio do teste de difusão em ágar, frente a 5 microrganismos indicadores (Kocuria rizophila, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Escherichia coli e Staphylococcus aureus), sendo os resultados submetidos à análise de variância (ANOVA) e ao pósteste de Tukey. A compatibilidade tecidual foi avaliada in vivo, por implantação subcutânea, em camundongos isogênicos BALB/c, de tubos de polietileno contendo os materiais obturadores. Foram efetuadas análises descritiva e semi-quantitativa do fibrosamento e do infiltrado inflamatório e quantitativa da área e maior espessura do tecido reacional granulomatoso. Os resultados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes de Kruskal-Wallis, análise de variância (ANOVA) e pós-teste de Tukey. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à atividade antibacteriana, evidenciaram-se diferenças estatisticamente significantes (p<0,0001) entre os halos de inibição ocasionados pelos diferentes materiais, para todos os microrganismos avaliados. A Kocuria rizophila foi inibida mais eficazmente pelo cimento de óxido de zinco e eugenol (p<0,05), enquanto que o Enterococcus faecalis foi inibido mais eficazmente pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco (p<0,05). O Streptococcus mutans foi inibido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento de óxido de zinco e eugenol na mesma intensidade (p>0,05). A Escherichia coli foi inibida mais eficazmente pelo cimento de óxido de zinco e eugenol, seguido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco e pelo cimento Sealapex® (p<0,05). O Staphylococcus aureus foi inibido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco e pelo cimento de óxido de zinco e eugenol na mesma intensidade (p>0,05), e menos intensamente pelo cimento Sealapex® (p<0,05). O cimento EndoREZTM apresentou atividade antibacteriana apenas frente a Kocuria rizophila e ao Staphylococcus aureus. Com relação à compatibilidade tecidual, não observou-se diferença entre os materiais, com relação ao fibrosamento e à maior espessura do tecido reacional granulomatoso (p>0,05). A pasta Calen® espessada com óxido de zinco foi o material que apresentou infiltrado inflamatório de menor intensidade (p<0,05). A área do tecido reacional granulomatoso foi menor para a pasta Calen® espessada com óxido de zinco e para o cimento Sealapex® (p>0,05) em comparação aos cimentos EndoREZTM e óxido de zinco e eugenol (p<0,05). Com base nos resultados obtidos nas metodologias empregadas pôde-se concluir que: 1- A atividade antibacteriana, in vitro, em ordem decrescente foi: cimento de óxido de zinco e eugenol, pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento EndoREZTM; 2- A pasta Calen® espessada com óxido de zinco foi o material que apresentou a melhor compatibilidade tecidual, seguido pelos cimentos Sealapex® e de óxido de zinco e eugenol. O cimento EndoREZTM apresentou resposta tecidual insatisfatória.This study evaluated the antibacterial activity and tissue compatibility of the following root canal filling materials for primary teeth: zinc oxide and eugenol cement, Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and EndoREZTM sealer. The antibacterial activity of these materials against 5 indicator microorganisms (Kocuria rizophila, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus) was evaluated in vitro using the agar diffusion test. The results were analyzed statistically by the analysis of variance (ANOVA) and Tukeys post-hoc test. Tissue compatibility was evaluated in vivo by the implantation of polyethylene tubes containing the root canal filling materials in the subcutaneous tissue of isogenic BALB/c mice. Descriptive and semi-quantitative analyses of the rate of fibrosis and the inflammatory infiltrate were performed, as well as a quantitative analysis of the area and the greater thickness of the granulomatous reactionary tissue. The results were analyzed statistically by the Kruskal-Wallis test, ANOVA and Tukeys post-hoc test. For all tests, the significance level was set at 5%. Regarding the antibacterial activity, there were statistically significant differences (p<0.0001) among the zones of inhibition of microbial growth produced by the different materials for all target microorganisms. Kocuria rizophila was inhibited more effectively by the zinc oxide and eugenol cement (p<0.05), while Enterococcus faecalis was inhibited more effectively by the Calen® paste thickened with zinc oxide (p<0.05). Streptococcus mutans was inhibited by the Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and zinc oxide and eugenol cement in the same intensity (p>0.05). Escherichia coli was inhibited more effectively by the zinc oxide and eugenol cement, followed by the Calen® paste thickened with zinc oxide and Sealapex® sealer (p<0.05). Staphylococcus aureus was inhibited by the Calen® paste thickened with zinc oxide and by the zinc oxide and eugenol cement in the same intensity (p>0.05), and was less effectively inhibited by Sealapex® sealer (p<0.05). EndoREZTM sealer presented antibacterial activity only against Kocuria rizophila and Staphylococcus aureus. Regarding tissue compatibility, there was no statistically significant difference among the materials with respect to the rate of fibrosis or the greater thickness of the granulomatous reactionary tissue (p>0.05). The Calen® paste thickened with zinc oxide produced the inflammatory infiltrate with lowest intensity of all materials (p<0.05). The area of the granulomatous reactionary tissue was smaller for the Calen® paste thickened with zinc oxide and Sealapex® sealer (p>0.05) compared to EndoREZTM sealer and the zinc oxide and eugenol cement (p<0.05). Based on the results obtained with the methodologies employed in the present study, it may be concluded that: 1- The in vitro antibacterial activity in a decreasing order was: zinc oxide and eugenol cement, Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and EndoREZTM sealer; 2- The in vivo tissue compatibility in a decreasing order was: Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer, zinc oxide and eugenol cement and EndoREZTM sealer. The Calen® paste thickened with zinc oxide permitted the occurrence of an adequate tissue response, while Sealapex® sealer and the zinc oxide and eugenol cement produced a fair tissue response. EndoREZTM sealer did not induce tissue repair
Economic Impact of Rural Development Plan 2007 2013 in Tuscany
In 2007 in every European Union region, involved in the planning of Rural Development Plan (RDP), an independent evaluator should asses the impact of the plan in term of value added and productivity. Each region has adopted different methodologies but few of them have followed the indications of Common and Monitoring Evaluation Framework (CMEF) to evaluate the net value deriving by direct and indirect effect. IRPET, the Independent evaluator of Tuscany, utilising REMI-IRPET model has assed the impact of RDP on the main economic variables until 2020. Among 30 different measures it has been chosen only 5 of them that cover more than 54% of total amount of public and private investments. The economic impacts are also evaluated at provincial level.evaluation, regional model, rural development, Community/Rural/Urban Development,
Subcutaneous tissue response of isogenic mice to calcium hydroxide-based pastes with chlorhexidine
This study was evaluated the response of subcutaneous connective tissue of isogenic mice to calcium hydroxide-based pastes with chlorhexidine digluconate (CHX). Seventy isogenic male BALB/c mice aged 6-8 weeks and weighing 15-20 g were randomly assigned to 8 groups. The animals received polyethylene tube implants as follows: Groups I, II, and III (n=10) - Calen® paste mixed with 0.4% CHX (experimental paste; Calen/CHX) for 7, 21, and 63 days, respectively; Groups IV, V, and VI (n=10) - UltraCal™ paste mixed with 2% CHX (experimental paste supplied by Ultradent Products Inc.; Ultracal/CHX) for 7, 21, and 63 days, respectively; and Groups VII and VIII (n=5): empty tube for 7 and 21 days, respectively. At the end of the experimental periods, the implants were removed together with the surrounding tissues (skin and subcutaneous connective tissue). The biopsied tissues were subjected to routine processing for histological analysis. Using a descriptive analysis and a four-point (0-3) scoring system, the following criteria were considered for qualitative and quantitative analysis of the tissue around the implanted materials: collagen fiber formation, tissue thickness and inflammatory infiltrate. A quantitative analysis was performed by measuring the thickness (µm), area (µm²) and perimeter (µm) of the reactionary granulomatous tissue formed at the tube ends. Data were analyzed statistically by the Kruskal-Wallis test and Dunn's post-test (α=0.05). Calen/CHX showed biocompatibility with the subcutaneous and reactionary tissues, with areas of discrete fibrosis and normal conjunctive fibrous tissue, though without statistically significant difference (p>0.05) from the control groups. In Groups I to III, there was a predominance of score 1, while in Groups IV to VI scores 2 and 3 predominated for all analyzed parameters. UltraCal/CHX, on the other hand, induced the formation of an inflammatory infiltrate and abundant exudate, suggesting a persistent residual aggression from the material, even 63 days after implant placement. In conclusion, the Calen paste mixed with 0.4% CHX allowed an adequate tissue response, whereas the UltraCal paste mixed with 2% CHX showed unsatisfactory results.O objetivo do presente estudo foi avaliar a resposta do tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos isogênicos frente a pastas à base de hidróxido de cálcio, associadas ao digluconato de clorexidina (CHX). Setenta camundongos isogênicos BALB/c machos, com 6-8 semanas e pesando 15-20 g foram aleatoriamente divididos em 8 grupos. Os animais receberam implantes de tubos de polietileno contendo: Grupos I, II e III (n=10) - pasta Calen® associada à CHX a 0,4% (Calen/CHX), por 7, 21 e 63 dias, respectivamente; Grupos IV, V e VI (n=10) - pasta UltraCal™ associada à CHX a 2% (pasta experimental fornecida pela Ultradent Products Inc.; Ultracal/CHX), por 7, 21 e 63 dias, respectivamente; e Grupos VII e VIII (n=5) - tubo de polietileno vazio, por 7 e 21 dias, respectivamente. Decorridos os períodos experimentais, os implantes foram removidos juntamente com os tecidos circundantes (pele e tecido conjuntivo). Os tecidos foram submetidos ao processamento histotécnico de rotina, para análise histopatológica. Empregando um sistema de escores, os seguintes critérios foram considerados para a análise qualitativa e quantitativa: fibrosamento, espessura tecidual e infiltrado inflamatório. Foi efetuada, também, a análise quantitativa da medida da espessura (µm), área (µm²) e perímetro (µm) do tecido granulomatoso reacional formado na abertura dos tubos. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística, empregando o teste de Kruskal-Wallis e o pós-teste de Dunn. O nível de significância adotado foi de 5%. Os resultados demonstraram biocompatibilidade da pasta Calen associada à CHX a 0,4% com o tecido adjacente, com fibrosamento discreto, assim como tecido conjuntivo normal, sem diferença estatística significante com os controles (p>0,05). Nos Grupos I, II e III houve predominância do escore 1, enquanto que nos Grupos IV, V e VI houve predominância dos escores 2 e 3, em todos os parâmetros analisados. Em relação à pasta à base de hidróxido de cálcio associada à CHX a 2% (UltraCal™) observou-se infiltrado inflamatório e exsudato severo, sugerindo uma agressão residual persistente do material testado, mesmo após 63 dias da sua implantação. Em conclusão, a adição de CHX a 0,4% à pasta Calen permitiu adequada resposta tecidual, enquanto o hidróxido de cálcio associado à CHX na concentração de 2% (UltraCal/CHX) evidenciou resultados insatisfatórios
Histological study of the effect of some irrigating solutions on bacterial endotoxin in dogs
O objetivo deste estudo foi avaliar, histopatologicamente, o efeito do preparo biomecânico com diferentes soluções irrigadoras em dentes de cães preenchidos com LPS bacteriano após pulpectomia. Foram utilizados 120 canais radiculares de 6 cães, os quais foram preenchidos com solução de LPS após pulpectomia. As soluções irrigadoras usadas foram solução de hipoclorito de sódio a 1, 2.5 e 5% e solução de clorexidina a 2%. Nenhuma irrigação foi realizada no grupo controle. Os animais foram mortos após 60 dias, e os dentes foram fixados e desmineralizados. em seguida, cortes seriados de 6 µm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina e Tricrômico de Mallory para análise histopatológica e Brown e Brenn para verificação da contaminação bacteriana. A avaliação demonstrou que o infiltrado inflamatório foi estatisticamente menos intenso nos grupos cujos canais radiculares foram irrigados com solução de hipoclorito de sódio a 5% e de clorexidina a 2%. Contudo, nenhuma das soluções irrigadoras inativou completamente os efeitos deletérios do LPS. O preparo biomecânico coadjuvado por diferentes soluções irrigadoras não inativaram completamente a endotoxina.The aim of this study was to evaluate, histopathologically, the effectiveness of mechanical preparation of root canals using different irrigating solutions in dog teeth filled with LPS after pulpectomy. A total of 120 root canals of 6 mongrel dogs were filled with a solution of LPS after pulpectomy. The irrigating solutions used were saline, 1, 2.5, and 5% sodium hypochlorite, and 2% chlorhexidine. No irrigation was used in the control group. The animals were sacrificed after 60 days and the teeth were fixed and demineralized. Subsequently, serial 6-µm sections were stained with hematoxylin and eosin and Mallory's trichrome for histopathological analysis and Brown-Brenn for verification of bacterial contamination. Analysis showed that the inflammatory infiltrate was statistically less intense in the groups in which the root canals were irrigated with 5% sodium hypochlorite and 2% chlorhexidine. However, none of the irrigating solutions completely inactivated the harmful effects of LPS. Mechanical preparation associated with different irrigating solutions did not completely inactivate LPS.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)USP School of Dentistry of Ribeirão Preto Department of Clinical PediatricsUNESP School of Dentistry of Araraquara Department of EndodonticsUNESP School of Dentistry of Araraquara Department of Endodontic
Radiographic evaluation of the effect of endotoxin (LPS) plus calcium hydroxide on apical and periapical tissues of dogs
The aim of this study was the radiographic evaluation of the apical and periapical region of dog teeth submitted to intracanal bacterial endotoxin (lipopolysaccharide, LPS), associated or not with calcium hydroxide. After removal of the pulp, 60 premolars were divided into four groups and were filled with bacterial endotoxin (group 1), bacterial endotoxin plus calcium hydroxide (group 2), saline solution (group 3), or periapical lesions were induced with no treatment (group 4), for a period of 30 days. Similar periapical lesions were observed in groups 1 and 4. The lamina dura was intact in groups 2 and 3. Bacterial endotoxin (LPS) caused radiographically visible periapical lesions, but when associated with calcium hydroxide, this endotoxin was detoxified. Copyright © 2002 by The American Association of Endodontists.Department of Pediatric Dentistry School of Dentistry of Ribeirão Preto University of São Paulo, Rua Piauí, 426, Sumarezinho, 14055-040 Ribeirão Preto, SPDepartment of Endodontics School of Dentistry of Araraquara University of the State of São Paulo, Araraquara, S
Histological study of the effect of some irrigating solutions on bacterial endotoxin in dogs
O objetivo deste estudo foi avaliar, histopatologicamente, o efeito do preparo biomecânico com diferentes soluções irrigadoras em dentes de cães preenchidos com LPS bacteriano após pulpectomia. Foram utilizados 120 canais radiculares de 6 cães, os quais foram preenchidos com solução de LPS após pulpectomia. As soluções irrigadoras usadas foram solução de hipoclorito de sódio a 1, 2.5 e 5% e solução de clorexidina a 2%. Nenhuma irrigação foi realizada no grupo controle. Os animais foram mortos após 60 dias, e os dentes foram fixados e desmineralizados. em seguida, cortes seriados de 6 µm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina e Tricrômico de Mallory para análise histopatológica e Brown e Brenn para verificação da contaminação bacteriana. A avaliação demonstrou que o infiltrado inflamatório foi estatisticamente menos intenso nos grupos cujos canais radiculares foram irrigados com solução de hipoclorito de sódio a 5% e de clorexidina a 2%. Contudo, nenhuma das soluções irrigadoras inativou completamente os efeitos deletérios do LPS. O preparo biomecânico coadjuvado por diferentes soluções irrigadoras não inativaram completamente a endotoxina.The aim of this study was to evaluate, histopathologically, the effectiveness of mechanical preparation of root canals using different irrigating solutions in dog teeth filled with LPS after pulpectomy. A total of 120 root canals of 6 mongrel dogs were filled with a solution of LPS after pulpectomy. The irrigating solutions used were saline, 1, 2.5, and 5% sodium hypochlorite, and 2% chlorhexidine. No irrigation was used in the control group. The animals were sacrificed after 60 days and the teeth were fixed and demineralized. Subsequently, serial 6-µm sections were stained with hematoxylin and eosin and Mallory's trichrome for histopathological analysis and Brown-Brenn for verification of bacterial contamination. Analysis showed that the inflammatory infiltrate was statistically less intense in the groups in which the root canals were irrigated with 5% sodium hypochlorite and 2% chlorhexidine. However, none of the irrigating solutions completely inactivated the harmful effects of LPS. Mechanical preparation associated with different irrigating solutions did not completely inactivate LPS.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP
Surgical repositioning of traumatically intruded permanent incisor: case report with a 10‐year follow up
MTA and calcium hydroxide for pulp capping MTA e hidróxido de cálcio para proteção pulpar direta
This study evaluated the biocompatibility of mineral trioxide aggregate (MTA) after direct capping of exposed pulp tissue in dog's teeth. Class I cavities were prepared in 26 teeth from 3 adult dogs. MTA was applied over the exposed pulp in 13 teeth and paste of calcium hydroxide plus distilled water (control) was applied in the remaining 13 teeth. After 90 days, the animals were killed; the maxilla and mandible were dissected and sectioned to obtain individual roots. The samples were processed histologically. The pulp and periapical response observed with the use of MTA was similar to that of calcium hydroxide paste. In all specimens, there was a dentin bridge obliterating the exposure, an intact odontoblastic layer, no inflammatory cells, normal connective pulp tissue, normal apical and periapical regions and no bone tissue changes. Similar to calcium hydroxide, MTA presented excellent response when used for direct pulp capping.O objetivo deste trabalho foi avaliar a biocompatibilidade do agregado de trióxido mineral (MTA), após proteção pulpar direta em dentes de cães. Foram preparadas cavidades de Classe I, em 26 dentes de 3 cães adultos. O MTA foi aplicado sobre 13 dentes e a pasta de hidróxido de cálcio (grupo controle) foi aplicada sobre os 13 dentes remanescentes. Após 90 dias, os animais foram mortos, a maxila e a mandíbula foram dissecadas e os dentes foram seccionados para obtenção de raízes individualizadas. Os espécimes foram processados histologicamente. A resposta do tecido pulpar e periapical foi semelhante para o MTA e o hidróxido de cálcio. Em todos os espécimes havia ponte de dentina obliterando o local da exposição pulpar, camada odontoblástica íntegra, ausência de células inflamatórias, tecido pulpar normal, e ausência de alterações na região periapical e óssea. Da mesma maneira que o hidróxido de cálcio, o MTA apresentou excelente biocompatibilidade quando usado para proteção pulpar direta
Importance of bacterial endotoxin (LPS) in endodontics A importância da endotoxina bacteriana (LPS) na endodontia atual
New knowledge of the structure and biological activity of endotoxins (LPS) has revolutionized concepts concerning their mechanisms of action and forms of inactivation. Since the 1980's, technological advances in microbiological culture and identification have shown that anaerobic microorganisms, especially Gram-negative, predominate in root canals of teeth with pulp necrosis and radiographically visible chronic periapical lesions. Gram-negative bacteria not only have different factors of virulence and generate sub-products that are toxic to apical and periapical tissues, as also contain endotoxin (LPS) on their cell wall. This is especially important because endotoxin is released during multiplication or bacterial death, causing a series of biological effects that lead to an inflammatory reaction and resorption of mineralized tissues. Thus, due to the role of endotoxin in the pathogenesis of periapical lesions, we reviewed the literature concerning the biological activity of endotoxin and the relevance of its inactivation during treatment of teeth with pulp necrosis and chronic periapical lesion.O conhecimento mais aprofundado sobre a estrutura e atividade biológica das endotoxinas (LPS) revolucionou os conceitos sobre seu mecanismo de ação e formas de inativação. A partir da década de 80, os avanços tecnológicos na cultura e identificação microbiológica demonstraram que, em canais radiculares de dentes portadores de necrose pulpar e lesão periapical crônica, visível radiograficamente, predominam microrganismos anaeróbios, particularmente os gram-negativos. Como se sabe, os microrganismos gram-negativos, além de possuírem diferentes fatores de virulência e gerarem produtos e sub-produtos tóxicos aos tecidos apicais e periapicais, contêm endotoxina em sua parede celular. Esse conhecimento é particularmente importante, uma vez que a endotoxina é liberada durante a multiplicação ou morte bacteriana, exercendo uma série de efeitos biológicos relevantes, que conduzem a uma reação inflamatória e à reabsorção dos tecidos mineralizados. Tendo em vista o papel da endotoxina na patogênese das lesões periapicais, os autores realizaram uma revisão da literatura específica, abordando suas atividades biológicas e a importância de sua inativação durante o tratamento de dentes portadores de necrose pulpar e lesão periapical
Antibacterial effect of root canal preparation and calcium hydroxide paste (Calen) intracanal dressing in primary teeth with apical periodontitis Efeito antibacteriano do preparo biomecânico e do curativo de demora com pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen) em dentes decíduos com lesão periapical
The aim of this study was to evaluate the antibacterial action of root canal mechanical preparation using 2.5% sodium hypochlorite as the irrigating solution and a calcium hydroxide paste as the antibacterial intracanal dressing in human primary teeth root canals with pulp necrosis and apical periodontitis by means of microbial culture. A total of 26 root canals of human primary teeth with pulp necrosis and apical periodontitis were used. Samples were collected before, 72h after biomechanical treatment and 72h after removal of the intracanal dressing. Comparison by Wilcoxon test showed that root canal mechanical preparation effectively eliminated all microorganisms in 20% of the root canals, and the intracanal dressing in 62.5%; however, the cumulative action of biomechanical treatment and intracanal dressing eliminated the microorganisms of 70% of the root canals (pO objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio de cultura bacteriológica, a ação antibacteriana do preparo biomecânico utilizando como solução irrigadora o hipoclorito de sódio a 2,5% e da pasta Calen utilizada como curativo de demora em canais radiculares de dentes decíduos de humanos com necrose pulpar e lesão periapical. Foram selecionados 26 dentes decíduos de humanos portadores de necrose pulpar e lesão periapical. As colheitas microbiológicas foram efetuadas antes e 72 horas após o preparo biomecânico e 72 horas após a remoção do curativo de demora. A comparação por meio do teste de Wilcoxon mostrou que o preparo biomecânico foi eficaz na eliminação dos microrganismos dos canais radiculares em 20% dos casos e o curativo de demora em 62,5%, enquanto que a ação cumulativa do preparo biomecânico e do curativo de demora eliminou os microrganismos em 70,0% dos casos (p<0.001). Pôde-se concluir que o preparo biomecânico, isoladamente, apresentou resultados microbiológicos inferiores àqueles obtidos quando o mesmo foi associado ao curativo de demora, mostrando a necessidade de aplicação tópica de um curativo de demora entre sessões em dentes decíduos portadores de necrose pulpar e lesão periapical
