32 research outputs found
Einfluss von G-Protein vermittelten Signalkaskaden auf die Wanderung von Muskelvorläuferzellen
No full textEin wichtiger Prozess der Zellmigration ist die Entwicklung und Regeneration der Skelettmuskulatur. Ziel dieser Arbeit war es, Signalkaskaden, die Einfluss auf die Wanderung von Muskelvorläuferzellen haben, zu untersuchen. Rho- GTPasen über ihren G- Protein geregelten Signalweg stellen dabei die Hauptregulatoren dar. In dieser Arbeit wurden die Rho- GTP asen Rac, Ral , Ras , Cdc42 und Rho in „ in vivo“ Experimenten untersucht. Eine zentrale Fragestellung der experimentellen Arbeit war es , festzustellen , welche Rolle die Rho- GTPasen bei der Migration von Muskelvorläuferzellen im Rahmen der Entwicklung der Extremitätenmuskulatur in vivo spielen und ob diese auch für Fehler in der Entwicklung und für potentielle spätere Regenerationsprozesse verantwortlich sein können.One important process of cell migration is the development and regeneration of skeletal muscles. The aim of this study was to research signal cascades that influence the migration of muscle precursor cells. At that, Rho-GTPases via their G-protein-regulated signal path are the main regulators. In this study the Rho-GTPases Rac, Ral, Ras, Cdc42 and Rho were examined in in vivo experiments. One central focus of the experimental work was to determine what role the Rho-GTPases play in the migration of muscle precursor cells during the development of limb muscles in vivo and whether these can also be responsible for abnormal development and for faults in potential later regeneration processes
Purpurogallin als Inhibitor der Thrombozytenaggregation - Untersuchungen zur Signaltransduktion
No full textIm Rahmen dieser Arbeit wurden 79 Naturstoffe aus Pflanzen, Pilzen und Flechten hinsichtlich evtl. Einflüsse auf die Thrombozytenfunktion untersucht. Es stellte sich heraus, dass nur einer dieser Naturstoffe, das Purpurogallin, eine signifikante Hemmung der Aggregation nach Stimulation mit Thrombin auslösen kann. Weiteres Interesse galt dem Permethylpurpurogallin, der methylierten Form des Purpurogallins. Es zeigte sich, dass keine der nachgewiesenen Wirkungen des Purpruogallins auf das Permethylpurpurogallin übertragen werden kann. Der erstmalige Nachweis der Polo-Like-Kinase 1 ist im Rahmen dieser Arbeit gelungen. Ebenfalls konnte nachgewiesen werden, dass die PLK-1 in Thrombozyten in phosphorylierter Form vorliegt. Da ein Zusammenhang zwischen der PLK-1 und den MAPKinasen im Rahmen des Primings der PLK-1 beschrieben wird, haben wir auch untersucht, ob sich die Aktivität der MAPKinasen durch Purpurogallin hemmen lässt. Es konnte nachgewiesen werden, dass Purpurogallin einen hemmenden Einfluß auf die Aktivität auf die MAPKinasen ERK und p38 in Thrombozyten hat.Within the scope of this work, 79 natural products from plants, mushrooms and lichens were examined with regard to possible effects on the platelet function. It turned out, only the purpurogallin, can trigger a significant inhibition of aggregation after stimulation with thrombin. Another drug was the permethylpurpurogallin, the methylated form of purpurogallin. It was shown that none of the detected effects of purpruogallin can be transferred to the permethylpurpurogallin. The first-time detection of polo-like kinase 1 has been successful in this work. It has also been shown that PLK-1 is present in platelets in phosphorylated form. As a link between the PLK-1 and the MAPKinases is described in the context of the priming of PLK-1, we also investigated whether the activity of the MAPKinases can be inhibited by purpurogallin. Purpurogallin has been shown to have an inhibitory effect on the activity on MAPKinases ERK and p38 in platelets.vorgelegt von Rabea-Sophie Söffke
Zn2+ enhances protein tyrosine kinase activity of human platelet membranes
No full textAbstractIn human platelet membranes enhanced tyrosine phosphorylation of certain proteins was observed when Zn2+ instead of Mg2+ or Mn2+ was used as a divalent cation for the kinase reaction. An enhanced level of phosphate incorporation into tyrosine residues occurred into a 68 kDa polypeptide besides the 45 kDa and 105 kDa proteins. Preincubation of platelet membranes with TBR-IgG showed a concentration-dependent inhibition of the phosphorylation of the 45, 68 and 105 kDa proteins. Moreover, pp60c-src, representing the major protein tyrosine kinase activity in platelets, was found to be stimulated by Zn2+. The data, thus, support the assumption that pp60c-src kinase is responsible for Zn2+ stimulated tyrosine phosphorylation
Die Wirkung von Clopidogrel auf die Expression inflammationsrelevanter Gene im Endotoxin-Modell der Maus
No full textDie Sepsis ist das Ergebnis einer Infektion gepaart mit der komplexen systemischen Entzündungsreaktion des Wirtsorganismus auf dieselbe. Es gibt verschiedene Mechanismen, in deren Folge die systemische Entzündungsreaktion zum Versagen multipler Organsysteme führen kann. Thrombozyten spielen eine entscheidende Rolle für die Pathogenese des SIRS und der Sepsis. In tierexperimentellen und retrospektiven Studien konnte ein Benefit für die Gabe von Thrombozytenaggregationshemmern, wie Clopidogrel, bei systemischer Entzündung gezeigt werden. Ziel der vorliegenden Arbeit ist die Untersuchung eines möglichen Einflusses von Clopidogrel auf die Expression inflammationsrelevanter Gene im Endotoxin-Modell der Maus. Die zu untersuchenden Mäuse wurden randomisiert vier Versuchsgruppen zugeteilt: 1. K-Gruppe: i.p. NaCL 2. S-Gruppe: i.p. LPS 3. CK-Gruppe: Clopidogrel+i.p. NaCl 4. CS-Gruppe: Clopidogrel+i.p. LPS. Analysiert wurden fünf ausgewählte Gene (Il-6, Il-10, Hif1a, Myd88, PAI-1) mittels Real-Time-PCR in Herz, Leber und Gehirn. Versuchstiere mit LPS-Injektion zeigen geringere Thrombozytenzahlen als Tiere ohne LPS-Injektion. Dieser LPS-induzierte Thrombozytenabfall kann durch die Gabe von Clopidogrel verhindert werden. Weiterhin zeigt sich bei fast allen Genen in Herz, Leber und Hirn eine massive Zunahme der Transkriptionsaktivität nach LPS-Injektion. Clopidogrel führt nur bei einzelnen Genen in Herz und Leber zu geringen Veränderungen der Genexpression. Nur bei Hif1a in der Leber führt Clopidogrel zu einer geringen Abschwächung der, durch LPS-Injektion, gesteigerten Transkriptionsaktivität. In der vorliegenden Arbeit hat Clopidogrel fast keine Wirkung auf die organspezifische Genexpression. Somit scheinen Thrombozyten bzw. Thrombozyten-Leukozyten-Interaktionen keine Auswirkung auf die Genexpression in den Organen zu haben. Der Benefit von Clopidogrel bei Sepsis ist demnach möglicherweise vor allem auf die antithrombotische Wirkkomponente der Medikamente zurückzuführen
Rapid protein tyrosine phosphorylation in the cytoskeleton of stimulated human platelets
No full textAbstractUpon activation platelets show elevated protein tyrosine phosphorylation, and translocation of the protein tyrosine kinase pp60c-src from the plasma membrane to the cytoskeleton occurs. We therefore investigated whether tyrosine phosphorylation also increases in the cytoskeletal compartment. Here we show that almost identical patterns of phosphotyrosine-containing proteins are detectable in the cytoskeleton after platelet stimulation with compounds that directly (phorbol 12-myristate, 13-acetate) or indirectly (thrombin, vasopressin, collagen, ADP) activate protein kinase C. The apparent molecular masses of the proteins phosphorylated at tyrosine residues are 145, 130, 100, 85, 80, 60, 56, 54 and 38 kDa. Elevation of cyclic AMP by prostaglandin E1 had no effect. Concentrations of thrombin as low as 0.01 units per ml are able to cause tyrosine phosphorylation of multiple proteins. The time course of protein tyrosine phosphorylation for thrombin- and vasopressin-stimulated platelets revealed a rapid increase in the cytoskeleton within 5 to 20 s following activation consistent with a role in early events of platelet function
Elektronske publikacije i biblioteke - presek stanja
No full textThe paper begins from the definition, characteristics and possibilities of
e-publications that indicate complex demands towards a librarian as the
responsible person in the acquisition of e-resources or in the instruction of
users for their use. The author reminds of a fast development of the
e-publishing during past five years, as well as of the questions following
it: copyright protection, acquisition methods, different types of licenses library investments problems whether it is about subscription to the
e-editions bought by the library or those created by digitizing items of the
own holdings. Some experiences related to the acquisition of the
e-publications in France, Switzerland and Serbia, with special attention to
the consortium acquisition, are described. The problems of the acquisition
growth on one side and inadequate use of the e-resources on the other side
are presented, as well as user desires towards the contents of the
e-resources and their access to uniform catalogue and interface. Student
problems in information searching indicate the need for teachers and
librarians to be included together in the user education. The author opposes
the abundance of the e-publications offers to selectivity and pedagogic role
of the librarians and libraries
Veränderung der Hämoxygenase-1-Konzentration bei Patienten mit Hirninfarkt und Hirnblutung
No full textDie Hämoxygenase-1 (HO-1) ist das Schlüsselenzym des Hämabbaus. Sie ist in Tiermodellen durch zerebrale Ischämie, Hämorrhagie sowie durch HMG-CoA-Reduktasehemmer (Statine) induzierbar. Hier wurde der Verlauf der Konzentration der HO-1 im Serum von 55 Patienten untersucht, darunter 19 mit Hirninfarkt und 36 mit Hirnblutung. Bei akutem Schlaganfall kommt es bis zum dritten Tag nach Symptombeginn zu einem Anstieg der Konzentration der HO-1. Die vorherige Einnahme von Statinen war bei Infarktpatienten mit einem niedrigeren NIHSS bei Aufnahme assoziiert. Bei Hirnblutungspatienten gab es keinen Unterschied in der Höhe der HO-1 zwischen Patienten mit und ohne Statinmedikation. Es zeigten sich Zusammenhänge zwischen der Schwere des Schlaganfalls und dem Infarkt- bzw. Blutungsvolumen. Die Beziehung zwischen geringerer Schwere des Schlaganfalls bei Patienten mit Statintherapie vor dem Insult bestätigt das Konzept einer konsequenten Statintherapie bei Patienten mit hohem kardiovaskulären Risiko.Heme oxygenase-1 (HO-1) is the key enzyme in heme breakdown. In animal models, it can be induced by cerebral ischemia, hemorrhage and by HMG-CoA reductase inhibitors (statins). In this study, we examined the course of the concentration of HO-1 in the serum of 55 patients, including 19 with cerebral infarction and 36 with cerebral haemorrhage. In the case of an acute stroke, the concentration of HO-1 increases up to the third day after the onset of symptoms. Prior statin use was associated with a lower NIHSS on admission in infarct patients. In cerebral haemorrhage patients, there was no difference in the level of HO-1 concentration between patients with and without statin medication. There was a correlation between the severity of the stroke and the infarct or bleeding volume. The relationship between lower stroke severity in patients on statin therapy prior to the stroke confirms the concept of consistent statin therapy in patients at high cardiovascular risk
Platelet membrane glycoproteins IIb and IIIa are substrates of purified pp60c-src protein tyrosine kinase
No full textAbstractHuman platelet glycoproteins IIb and IIIa form the receptor for fibrinogen, von Willebrand factor and fibronectin. Isolated human glycoproteins IIb-IIIa are phosphorylated by purified pp60c-src protein tyrosine kinase. Analysis of the phosphorylated proteins on SDS-PAGE showed that under reducing conditions both phosphoproteins change their relative molecular masses from 135 to 120 kDa and from 97 to 105 kDa, which are characteristic properties of glycoproteins IIb-IIIa. Phosphorylated proteins could be immunoprecipitated with an antiserum against glycoproteins IIb-IIIa but not by control serum. Some kinetic properties of the glycoprotein phosphorylations are also investigated. How the glycoprotein IIb-IIIa complex acquires its receptor activity in stimulated platelets is unknown; however, phosphorylation could be an important mechanism
Pyruvate kinase type M2 is phosphorylated at tyrosine residues in cells transformed by Rous sarcoma virus
No full textAbstractChicken embryo cells (CECs) contain pyruvate kinase (PK) type M2 (M2-PK). Transformation of CECs by Rous sarcoma virus (RSV) leads to a reduction in the affinity of PK for the substrate phosphoenolpyruvate. In vitro, M2-PK can be phosphorylated at tyrosine residues by pp60v-src, the transforming protein of RSV. To study tyrosine phosphorylation of M2-PK in intact RSV-transformed cells, the protein was immunoprecipitated from 32P-labeled normal and RSV-SR-A-transformed CECs. Phosphoamino acid analysis of immunoprecipitated M2-PK revealed that M2-PK of both normal and transformed CECs contained phosphoserine and small amounts of phosphothreonine. Only M2-PK of transformed CECs contained phosphotyrosine in addition. For enzyme kinetic studies M2-PK was partially purified by chromatography upon DEAE-Sephacel and hydroxyapatite. A decreased affinity for phosphoenolpyruvate was observed 3 h after the onset of transformation using the temperature-sensitive mutant of RSV, ts-NY 68. The kinetic changes were correlated with tyrosine phosphorylation of M2-PK, but there is no direct evidence that they are caused by post-translational modification of the enzyme
