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    Efeito da testosterona na evolução do Strongyloides venezuelensisem camundongos

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    Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2016.Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo liberado: introdução.Estrongiloidíase é uma doença parasitária causada pelo Strongyloides sp., com distribuição mundial e maior prevalência em países tropicais e subtropicais. Objetivo: Verificar se a presença ou ausência de hormônio testosterona influência na evolução do S. venezuelensis (Sv) em camundongos e se altera as respostas imunes celulares e humorais em camundongos orquiectomizados e infectados com esse helminto. Metodologia: Usamos no estudo camundongos, linhagem Swiss, pesando entre 18 e 20 g, e ratos Rattus novergicus Wistar pesando cerca de 120 g, para manutenção do helminto, ambos provenientes da Seção de Expedição Animal/CECAL da Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), Manguinhos, Rio de Janeiro, Brasil. Grupos de animais: G1. Controle negativo; G2. Animais infectados; G3. Animais Sham negativos; G4. Animais Sham infectados; G5. Animais Operados negativos; G6. Animais Operados infectados; G7. Animais operados com reposição de uma dose de testosterona; G8. Animais operados com reposição de duas doses de testosterona. Os animais foram infectados com 1.500 larvas filarióides de Sv, via s.c. As doses de testosterona foram aplicadas nos dias 3, 7 e 14 via s.c. Os animais foram sacrificados por overdose de Ketamina/Xilazina nos dias 1, 3, 5, 7, 14 e 21 após infecção. Deles coletou-se o sangue para contagem de leucócitos totais e células diferenciais. Recolheram o intestino para contagens de parasitos fêmeas, baço, coração, fígado e pulmão para verificação da presença de formas evolutivas do helminto. Quantificaram anticorpos e citocinas no soro por ELISA, e fizeram exames histopatológicos do baço, coração, fígado, intestinos, e pulmões. Resultados: O número de vermes adultos, ovos e larvas recuperados dos animais orquiectomizados foram significativamente menores nos dias 5 e 7 após infecção, quando comparados com animais infectados e Sham. Porém, os animais operados com reposição de testosterona, essas formas evolutivas estavam aumentadas e o parasitismo nos camundongos foram maiores. A infecção por S. venezuelensis induz aumento de células inflamatórias no sangue ao longo da cinética, no entanto, nos dias 14 e 21 o aumento de leucócitos totais, eosinófilos e células mononucleares foram maiores, mas sem diferenças entre os grupos de animais analisados. Níveis de anticorpos (IgE e IgG1) e citocinas (IL-4, IL-5, IL-13) foram aumentados nos animais infectados, mas a concentração deles variaram ao longo da cinética experimental, e sem diferenças significantes entre os animais sem testosterona ou com reposição desse hormônio. A síntese de IL- 12 detectado nos animais infectados, operados, operados com reposição de testosterona e infectados foram semelhantes aos animais controles negativos. IFN-gama. IL-17 não foi detectado em nenhum grupo experimental. Infiltrado inflamatório de histiócitos estavam presentes nos animais Sv + Água, Sham + Sv, Op + Sv observado a partir do dia 3 da infecção e estendeu-se até o dia 7 após infecção, enquanto que nos animais operados com reposição da testosterona o processo inflamatório permaneceu até o dia 14. Presença de infiltrado de mastócitos e presença discreta de eosinófilos foram observadas na polpa branca de centro germinativo foi similar entre todos os grupos de animais infectados, operados e trados ou não com testosterona até o dia. Porém, no dia 14 nesses animais observaram infiltrados de neutrófilos associados a formação de granuloma (piogranuloma), sendo essas modificações no tecido hepático mais evidentes nos animais tratados com T indiferente no quantidade de doses. Infecção com Sv não induz alterações histopatológicas significativas no coração. Conclusões: A redução parcial de testosterona circulante nos animais orquiectomizados torna-os resistentes a infecção do S. venezuelensis, ao passo que níveis aumentados desse hormônio o parasitismo no hospedeiro, porém, não interferiu na fertilidade do parasito. Ausência ou concentração aumentada de testosterona circulante não induz síntese aumentada de anticorpos ou citocinas. Assim, esses resultados sugerem a testosterona possivelmente interfere em outras vias da resposta imune como: sistema complemento, quimiocinas, ou celular por nós não avaliados, que seja sinais entendido pelo Strongyloides permitindo a permanência no hospedeiro.Strongyloidiasis is a parasitic disease caused by Strongyloides sp. It’s distributed worldwide with higher prevalence in tropical and subtropical countries. Objective: To verify if the presence or absence of testosterone hormone influences the evolution of S. venezuelensis (Sv) in mice and if it alters the cellular and humoral immune responses in orchiectomized mice infected with this helminth. Methodology: We used in the study mice, Swiss strain, weighing between 18 and 20 g, and RattusnovergicusWistar weighing about 120 g, for helminth maintenance, both from the Section of Animal Expedition / CECAL of the Oswaldo Cruz Foundation (FIOCRUZ), Manguinhos, Rio de Janeiro, Brazil. Animal groups: G1. Negative control; G2. Infected animals; G3. Negativesham-operated animals; G4. Infectedsham-operated animals; G5. Negative operatedanimals; G6. Infected operated animals; G7. Animals operated with a replacement dose of testosterone; G8.Animals operated with replacement of two doses of testosterone.The animals were infected with 1,500 filarial larvae of Sv, bys.c. The doses of testosterone were applied on days 3, 7 and 14 by s.c. The animals were sacrificed by overdose of Ketamine / Xylazine on days 1,3,5,7,14 and 21 after infection. Blood was collected from they for total leukocyte count and of differential cells. They collected the intestines to count parasites females, spleen, heart, liver and lungs to verify the presence of evolutionary forms of the helminth. They quantified antibodies and cytokines by ELISA, and did histopathological examination of the spleen, heart, liver, intestines, and lungs. Results: The number of adult helminth, eggs and larvae recovered from the orchiectomized animals were significantly lower on days 5 and 7 after infection when compared to infected and sham animals. However, the operated animals with testosterone replacement, these evolutive forms were increased and the parasitsm in mice were bigger. The infection by S. venezuelensis induces an increase in inflammatory cells in the blood along the kinetics, however, on days 14 and 21, the increase of total leukocytes, eosinophils and mononuclear cells were larger, but without significant differences between the groups of animals analyzed. The antibodies levels (IgE and IgG1) and citokynes (IL-4, IL-5, IL-13) were increased in the infected animals, but their concentrations varied along the experimental kinetics, and without significant differences between the animals without testosterone or with replacement of this hormone. The IL-12 synthesis detected in infected animals, operated, operated with testosterone replacement and infected were similar to negative control animals. IFN-gama. IL-7 was not detected in no experimental group. Inflamatory infiltrate of histiocytes were present in the animals Sv + Water, Sham + Sv, Op + Sv observed from day 3 of the infection and extended until day 7 after infection, while in the operated animals with testosterone replacement the inflamatory process remained until day 14. Presence of mast cell infiltrate and discrete presence of eosinophils were observed in the white germinative center pulp was similar among all groups of infected animals, operated and with or without testosterone up to the day. However, on day 14 in these animals they observed neutrophil infiltrates associated with granuloma formation (piogranuloma), these changes in hepatic tissue being more evident in animals treated with indifferent T in the amount of doses. Sv infection does not induce significant histopathological changes in the heart. Conclusion: The partial reduction of circulating testosterone in orchiectomized animals makes them resistant to infection of S. venezuelensis, whereas increased levels of this hormone parasitism in the host, however, did not interfere in the fertility of the parasite. Absence or increased concentration of circulating testosterone does not induce increased antibody or cytokine synthesis. Thus, these results suggest that testosterone possibly interferes in other immune response pathways such as: complement system, chemokines, or cellular by unvalued nodes, which are signals understood by the Strongyloides allowing the stay in the host

    Prevalência de Trichomonas vaginalis em mulheres na idade fértil atendidas em equipe de saúde da família do Distrito Federal

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    Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2016.Tricomoníase é a doença sexualmente transmissível curável de maior prevalência no mundo. A infecção se associa a maior risco de transmissão do HIV e maus desfechos na gestação. Essa doença supera infecções por Neisseria gonorrhoeae e Chlamydia trachomatis e é pouco valorizada pelos profissionais de saúde. A distribuição e o impacto do T. vaginalis na população brasileira são pouco conhecidos. Objetivos: descrever as queixas ginecológicas mais frequentes entre mulheres na idade fértil atendidas em uma equipe de saúde da família; estimar a prevalência de T. vaginalis e fatores associados; avaliar o fluxograma de corrimento vaginal para o diagnóstico de tricomoníase; e comparar as prevalências de T. vaginalis e Candida albicans de acordo com variáveis sociodemográficas, resultado do pH vaginal, teste das aminas e práticas sexuais. Metodologia: estudo transversal com amostra consecutiva de população ambulatorial, composta por mulheres em idade fértil. Participaram do estudo mulheres entre 18 e 49 anos, que responderam a um questionário sobre as queixas ocorridas nas últimas quatro semanas. Elas foram examinadas com medição do pH vaginal e realização do teste das aminas. Coletaram-se amostras de secreção vaginal, as quais foram semeadas em meio TYM para isolamento de T. vaginalis e em meio Sabouraud para Candida spp. Os dados foram analisados usando testes de Qui-quadrado. O fluxograma de corrimento vaginal foi avaliado de acordo com a sensibilidade, especificidade, acurácia e valores preditivos; diferenças de proporções foram avaliadas com o teste Z unicaudal. Resultados: houve associação entre pH vaginal > 4,5 e as variáveis: corrimento, mau cheiro, teste positivo das aminas, tabagismo e realização de duchas vaginais. A prevalência de T. vaginalis foi de 16%, e de C. albicans, 20%, sendo que três mulheres (1,55%) portavam ambos os microrganismos. A média de parceiros sexuais entre as portadoras de T. vaginalis (9,4) foi maior que a média entre as positivas para C. albicans (5,6). Menor número de parceiros sexuais e uso consistente de preservativos foram protetores para infecção por T. vaginalis. O fluxograma de corrimento vaginal proposto pela abordagem sindrômica teve acurácia de 61%. Conclusões: queixas ginecológicas foram frequentes entre as participantes. A prática de duchas vaginais é muito difundida e teve associação com valores mais elevados de pH, ao passo que o uso de contraceptivos hormonais se associa a valores mais baixos de pH. A prevalência da infecção por T. vaginalis foi alta na amostra estudada e teve associação positiva com maior número de parceiros sexuais, e o uso de preservativos foi um fator protetor. A prevalência de T. vaginalis supera a de C. albicans entre mulheres com maior número de parceiros sexuais, ao passo que a prevalência de C. albicans foi superior à de T. vaginalis entre mulheres brancas. O diagnóstico de tricomoníase embasado apenas na queixa de corrimento tem baixa acurácia; o resultado do teste das aminas melhora a especificidade do diagnóstico da infecção por T. vaginalis, independentemente do valor do pH vaginal.Trichomoniasis is the most prevalent curable sexually transmitted disease in the world. The infection is associated with increased risk of HIV transmission and bad pregnancy outcomes. This disease exceeds Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatis infections, often being considered only a temporary “nuisance” and is undervalued by health professionals. The distribution and impact of T. vaginalis in the Brazilian population are not well known. Aims: to describe the gynecological complaints of reproductive age women attended in a primary health care unit; to estimate the T. vaginalis prevalence and associated factors; to evaluate the vaginal discharge flowchart for the diagnosis of trichomoniasis; to compare the prevalence of T. vaginalis and Candida albicans according to socio-demographic variables, the vaginal pH, whiff test and sexual practices. Methods: cross-sectional study with a consecutive sample of outpatient population consisting of women in reproductive age. The study enrolled women aged 18 to 49, who answered a questionnaire about the complaints in the last four weeks. The vaginal pH and whiff test were performed. Samples of vaginal secretions were collected, which were seeded in TYM medium for isolation of T. vaginalis and Sabouraud medium for growth of Candida spp. Data were analyzed using chi-square test. The vaginal discharge flowchart was assessed according sensibility, specificity, accuracy and predictive values; the difference in proportions were compared with the Z-tailed test. Results: there was no association between vaginal pH and the following variables: vaginal discharge, malodorous, positive whiff test, smoking and vaginal douching. The T. vaginalis prevalence was 16% and C. albicans was 20%; three women (1.55%) were coinfected with both microorganisms. The mean of sex partners among the T. vaginalis (9.4) carriers was greater than the mean of the positive for C. albicans (5,6). Fewer sexual partners and consistent use of condoms were protective for T. vaginalis infection. The vaginal discharge flowchart proposed by syndromic approach had an accuracy of 61%. Conclusions: vaginal complaints were common among participants. The practice of vaginal douches was widespread and was associated with higher pH values. The use of hormonal contraceptives is associated at lower pH values. The prevalence of T. vaginalis infection was high in the studied sample and had a positive association with a higher number of sexual partners and the use of condoms had a protective factor. The prevalence of T. vaginalis exceeds that of C. albicans among women with more sexual partners. The prevalence of C. albicans was higher than that of T. vaginalis among white women and those who practice active and receptive anilingus. The diagnosis of trichomoniasis based only in the discharge of complaint has low accuracy; the whiff test result improves the specificity of the diagnosis of T. vaginalis infection, regardless of the value of the vaginal pH.Faculdade de Medicina (FM)Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropica

    Protocolo para determinação de enteroparasitos em hortaliças.

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    O objetivo desse protocolo é divulgar uma metodologia já descrita na literatura com modificações para determinação de enteroparasitos em amostras de hortaliças, e mostrar a importância da padronização e implantação dela na rotina de Laboratórios de Microscopia de Alimentos. Portanto, eles não foram padronizados para esse tipo de trabalho

    Good manufacturing practices of minimally processed vegetables reduce contamination with pathogenic microorganisms

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    ABSTRACT Consumption of ready-to-eat (RTE) vegetables is quick, easy and healthy, especially when eaten without cooking. However, they might be a source of foodborne pathogenic microorganisms. The objective of this study was to evaluate the microbiological and parasitological contamination of fresh RTE vegetables produced in agroindustries in the Federal District of Brazil (FD), and to correlate contamination with good manufacturing practices (GMP). One hundred and three samples of RTE vegetables were collected from six agroindustries for microbiology and parasitology analyses and correlate with GMP; 54 samples were collected from three hypermarkets for parasitological evaluation. None of the samples analyzed were positive for Salmonella sp. and for thermotolerant coliforms, but they were contaminated with total coliforms. All analyzed samples were contaminated with at least one species of enteroparasistes or commensals, which were identified as Ascaris sp., Balantidium coli, Entamoeba histolytica/dispar, Hookworm, Strongyloides sp., Trichuris sp., Entamoeba sp., eggs and larvae of Nematoda, insects and fungi. Agroindustries that adopted GMP showed less contamination with helminths. RTE vegetables sold in hypermarkets of the FD are unfit for human consumption. It is important to guide farmers in the FD on the need to adopt good practices in the production and processing of vegetables to reduce the microbial contamination

    Detecção de Giardia duodenalis : separando os efeitos da eliminação irregular de parasitos nas fezes e a sensibilidade imperfeita do exame microscópico

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    Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical, 2023.Giardia duodenalis é uma das principais causas globais de diarreia. O diagnóstico geralmente envolve a detecção, usando microscopia óptica, de parasitos nas fezes. Contudo, nem todas as amostras de fezes de pessoas infectadas contêm parasitos (porque a eliminação de parasitos é irregular), e nem todos os testes detectam os parasitos presentes em amostras positivas (porque a sensibilidade dos testes é imperfeita). Isto dificulta a compreensão das dinâmicas de transmissão e a avaliação do desempenho dos testes diagnósticos. Neste trabalho, ilustramos uma abordagem desenhada para estimar separadamente as probabilidades de eliminação de parasitos nas fezes (θ) e de detecção de parasitos em amostras positivas (); esta informação permite derivar estimativas corrigidas da frequência de infecção (Ψ). Coletamos 1−3 amostras de fezes, em semanas consecutivas, de 276 crianças (4−76 meses) de oito creches em quatro setores do Distrito Federal, Brasil. As amostras foram processadas por sedimentação espontânea e analisadas por dois observadores independentes (um experiente, um inexperiente). Usando estes resultados replicados e modelos hierárquicos multi-nível, estimamos θ (θ̂ = 0.44 [IC95%0.24 − 0.66]); (̂Experiente = 0.64 [0.47 − 0.78]; ̂Inexperiente = 0.46 [0.33 − 0.66]); e Ψ (Ψ̂Meninas = 0.54 [0.28 − 0.77]; Ψ̂Μeninos = 0.34 [0.17 − 0.54]). Não encontramos evidência de que θ mudasse com o gênero ou a idade das crianças, ou entre dias de coleta; mudasse com a idade; ou Ψ mudasse com a idade ou entre setores urbanos. A probabilidade média de um observador experiente, usando um teste, detectar Giardia em uma amostra procedente de uma criança infectada foi Pr(|+, Experiente) = Ψ × θ̂ × ̂Experiente = 1.0 × 0.44 × 0.64 ≈ 0.28. O valor máximo de Pr(|+), caso existisse um Teste Perfeito, seria Pr(|+, TP) = Ψ × θ̂ × TP = 1.0 × θ̂ × 1.0 ≈ 0.44; portanto, para alcançar Pr(|+) > 0.44 é necessário aumentar θ usando amostras replicadas. Nossas análises sugerem que ~56% das amostras de fezes de crianças infectadas não continha cistos de Giardia. Como nenhum teste pode (ou deveria) detectar parasitos em amostras sem parasitos, ̂ ≈ 0.44 sinaliza o limite máximo da probabilidade de detectar Giardia em uma amostra procedente de um indivíduo infectado. A única estratégia capaz de levar Pr(|+) para além desse limite é usar amostras replicadas; com quatro amostras, θ̂ 4a ≈ 1 − (1 − 0.44) 4 ≈ 0.90, e Pr(| + ,4a, Experiente) = Ψ × θ̂ 4a × ̂Experiente = 1.0 × 0.90 × 0.64 ≈ 0.58. A abordagem que descrevemos abre novas perspectivas para o estudo tanto dos ciclos de transmissão quanto dos procedimentos diagnósticos das parasitoses intestinais.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).The parasitic protozoan Giardia duodenalis (‘Giardia’ hereafter) is a leading global cause of diarrhea. As with many other intestinal pathogens, Giardia diagnosis typically involves detecting parasite presence in stool samples. However, not all stool samples drawn from infected individuals contain parasites (due to irregular parasite shedding), and no test can detect the target parasites in 100% of the samples that indeed contain those parasites (due to imperfect test sensitivity). Disentangling the effects of irregular shedding and imperfect sensitivity on parasite detection would help us better understand both transmission dynamics (which heavily depend on parasite-shedding probabilities) and diagnostic-test performance (of which sensitivity is a critical component). Here, we illustrate an approach to separately estimating, under the assumption of no false-positives, the probabilities of Giardia shedding in the stool of infected hosts (denoted θ) and of Giardia detection in Giardia-positive stool samples (true test sensitivity, denoted p). With this information, we then derive corrected estimates of host-infection frequency (Ψ). We collected 1–3 stool samples, in consecutive weeks, from 276 children (4–73 months) attending 8 kindergartens in 4 urban sectors of the Federal District, Brazil. Samples were processed by the spontaneous-sedimentation method and examined via optical microscopy by two independent observers – an expert parasitologist and a graduate student. Using these replicate test results and multi-level hierarchical models, we estimated (i) the probability of Giardia shedding: θ̂ = 0.44 [CI95%0.24 − 0.66]; (ii) observer-specific test sensitivities: ̂Expert = 0.64 [0.47 − 0.78]; ̂Non−expert = 0.46 [0.33 − 0.66]; and (iii) gender-specific infection frequencies: Ψ̂Girls = 0.54 [0.28 − 0.77]; Ψ̂Boys = 0.34 [0.17 − 0.54]. We found no evidence that shedding changed with child gender or age, or between stool sample-collection days; that test sensitivity depended on child age; or that infection frequency changed with child age or varied among urban sectors. The average probability that an expert observer, using a single test, detects Giardia in a stool sample drawn from an infected child was estimated at Pr(|+) = Ψ × θ̂ × ̂Expert = 1.0 × 0.44 × 0.64 ≈ 0.28 (or 28%). The maximum value Pr(|+) could attain, if a Perfect Test (PT = 1.0) existed (it does not), would be Pr(|+, PT) = Ψ × θ̂ × ̂PT = 1.0 × 0.44 × 1.0 ≈ 0.44 (or 44%). Therefore, reaching Pr(|+) > 0.44 requires increasing θ, which in turn requires drawing, then pooling, replicate stool samples. Our analyses suggest, in sum, that ~56% of stool samples drawn from infected children did not contain Giardia cysts. As no specific test can (or should) detect parasites in parasite-free samples, θ̂ ≈ 0.44 measures the upper limit of the probability of detecting Giardia in a single stool sample drawn from an infected child. The only strategy capable of taking Pr(d|+) beyond this limit is to draw-and-pool replicate samples; with 4 pooled samples, for example, θ̂ 4s ≈ 1 − (1 − 0.44) 4 ≈ 0.90, and Pr(|+) = Ψ × θ̂ 4s × ̂Expert = 1.0 × 0.90 × 0.64 ≈ 0.58 (or 58%). By allowing estimation (and modeling) of pathogen-shedding probabilities (θ), the approach we illustrate paves the way to studying pathogen transmission cycles and dynamics in unprecedented detail. Separate estimation (and modeling) of true test sensitivity (p), moreover, may cast new light on the performance of many highlyspecific microscopy-based diagnostics used in routine practice to detect pathogens in biological samples.Faculdade de Medicina (FM)Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropica

    Associação entre os níveis de IgE total e Eosinofilia com parasitoses intestinais em crianças na faixa etária de zero a 07 anos, usuárias de creches do município de Uberlândia-MG, no ano de 1998

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    Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)A ocorrência de parasitoses intestinais em crianças representa um dos principais problemas de saúde pública principalmente em países em desenvolvimento. Alguns estudos sugerem que as infecções causadas por helmintos e protozoários podem estar associados ao aumento do número de eosinófilos e de níveis de lgE total no sangue periférico. O presente estudo teve como finalidade estabelecer a prevalência de parasitas intestinais, em crianças de zero a 07anos usuárias de creches do município de Uberlândia - MG e sua possível associação com a resposta imune em relação a influência que estas parasitoses exercem na produção de eosinofilia e imunoglobulina E (1gE). Foram escolhidas 04 creches sendo todas localizadas em bairros diferentes. Foram estudadas 170 crianças , e de cada criança colheram-se três amostras fecais com formal a 10% e conduzidas para o Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Uberlândia e analisadas pelo método de LUTZ (1919). Para cada criança foram preparadas nove lâminas e examinadas por três observadores. Após o diagnóstico copro-parasitológico foram colhidas duas amostras de sangue de cada criança e em seguida encaminhadas para o Laboratório de Análises Clínicas do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia para realização do hemograma Foram detectados 134 (78,82%) casos de positividade. A prevalência de parasitas intestinais foi: Giardia lamblia (82,09%), Entamoeba cai/ (38,80%), lodamoeba butchlii (17, 91°/o), Endolimax nana (15,67%), Enterobius vermicularis (5,22%), Hymnolepís nana (2,98%), Hymnolepis diminuta (2,98%),Ascaris lumbricoides (2,24%), Ancylostomatidae (2,24%), Stmngyloides stercoralis (1,49%), Trichutis trIchiura (0,74%). Houve 80 (59,70%) casos de crianças com monoparasitismo , 25 (18,66%) bi e 29 (21,64%) com poliparasitismo. Ao comparar estatisticamente os valores de eosinofilias com os níveis de lgE total nas 134 crianças enteroparasitadas comparada e o grupo controle, foi constatado que houve diferenças significativas entre as crianças enteroparasitadas. Ao correlacionar os valores de eosinofilias com os níveis de IgE total verificou-se que houve diferença significativa. Diante dos resultados obtidos conclui-se que o índice encontrado de enteroparasitas nas crianças na faixa etária de zero a 07 anos de idade é alto e nem todas as crianças que apresentaram eosinofilia e IgE total aumentada estavam parasitadas, portanto no caso de uma criança com exame hematólogico acusando eosinofilia e sorologia indicando lgE total aumentada, necessita de cuidados especiais, para verifica quais são os fatores que estão ocasionando alterações na resposta imune

    Avaliação da eficácia dos desinfetantes para controle de larvas de nematódea em hortaliças

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    Trabalho de Conclusão de Curso (especialização)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2017.Enteroparasitoses são doenças causadas por helmintos e protozoários que habitam o trato intestinal. A maioria dos parasitos intestinais tem a transmissão por via fecal-oral, tendo a ocorrência fortemente relacionada às precárias condições higiênico-sanitárias. A principal fonte contaminação do homem por enteroparasitos ocorrem pela ingestão de hortaliças ou água contaminadas com cistos de protozoários, ou ovos e larvas de helmintos. Estima-se que exista cerca de 3,5 bilhões de pessoas infectadas por enteroparasitos no mundo, especialmente em países subdesenvolvidos, com maiores prevalências em locais de níveis socioeconômicos baixos. Objetivo: Avaliar o efeito de sete sanitizantes popularmente usados na eliminação de larvas infectantes de Strongyloides venezuelensis em alfaces in vitro. Material e Métodos: Os desinfetantes foram usados após lavagem para desinfetar frutas, verduras, legumes e vegetais, cujas concentrações das soluções (1 L) e tempo de imersão das hortaliças variaram: 1: Qually Clor e 2. Hidroesteril, nas doses de 0,1 mL/L de água por 15 min.; 3: Pury vitta, na dose de 6 mL/L água durante 5 min.; 4. Use Clor na dose de 0,5 mL/L por 10 min.; 5: Sabão neutro Ypê, na dose de 0,2 mL/L de água por 20 min.; 6. Água sanitária (Qboa) na dose de 0,2 mL/L de água por 30 min.; 7. Vinagre de álcool composto uma colher de sopa/L de água por 30 min. Foram usadas 10 folhas de Lactuca sativa variedade Vera (Alface folha crespa), para cada teste realizado. Cada folha foi contaminada com cerca de cinco larvas infectantes de S. venezuelensis, deixadas em repouso durante 30 min. Findo cada tempo, as folhas foram recolhidas e lavadas com auxílio de uma escova em cuba contendo 250 mL de água destilada. Em seguida elas foram enxaguadas com 50 mL de água. As águas resultantes das imersões e das lavagens foram distribuídas em cálices previamente identificados e deixados em repouso por 18 horas. Em seguida o sobrenadante desprezado e 5 mL do sedimento examinado. Também, foi testada a ação dos desinfetantes sobre larvas infectantes de S. venezuelensis nos produtos puros (1 mL), e nas diluições: 0,5 mL, 0,1 mL, 0,05 mL para cada mL de água destilada, sendo o volume final de 1 mL. Todos os materiais foram examinados, usando microscópio ótico, com objetiva de 20x. Resultados e Discussão: Nenhum dos produtos matou 100% das larvas colocadas sobre a alface e mantidas por 18 horas em repouso. Todos os produtos testados nas concentrações e tempos sugeridos pelos fabricantes foram ineficazes para matar as larvas. Porém, quando testadas às substâncias puras por 15 min sobre o parasito, exceto o vinagre e sabão Ypê, todas mataram 100% dos vermes. Por outro lado, quando esses produtos foram diluídos em 50, 25 e 20% (v/v) e mantidos por 30, 45, e 60 min. de exposição, somente o produto Qboa 100% matou e degradou as larvas no tempo de exposição ao produto. Os demais desinfetantes mataram aproximadamente de 40% a 60% dos vermes. Os resultados mostram que os produtos comercializados para desinfecção de verduras não foram eficazes para matar larvas infectantes de S. venezuelensis na dosagem e tempo recomendado pelos fabricantes. Para serem eficazes, os produtos precisam ser usados puros, ou em doses muito maiores e permanecerem por muito mais tempo em contato com os parasitos, o que é inviável devido à ação deles sobre o vegetal degradando-o. Adicionalmente, altas concentrações dos produtos tornam oneroso o uso deles na higienização das verduras, e aumentam o risco à saúde do consumidor, devido à toxicidade, além de prejudicar as qualidades sensoriais do vegetal.Enteroparasitoses are diseases caused by helminths and protozoa that inhabit the intestinal tract. Most of the intestinal parasites have a fecal-oral transmission, there occurrence being strongly related to the precarious hygienic-sanitary conditions. The main source of contamination of humans by enteroparasitos occurs through the ingestion of vegetables or water contaminated with cysts of protozoa, eggs and larvae of helminths. It is estimated that there are about 3.5 billion people in the worldinfected with enteroparasites, especially in underdeveloped countries, with a higher prevalence in places of low socioeconomic levels. Objective: To evaluate the effect of seven popularly used sanitizers on the elimination of infective larvae of Strongyloides venezuelensis in lettuce in vitro?. Material and Methods: Disinfectants were used after washing to disinfect fruits, vegetables and plants, whereby concentrationper solution (1 L) and immersion time of vegetablesin solution varied:1: QuallyClor and 2. Hydroesterilin doses of 0.1 mL / L of water for 15 min.; 3: Puryvitta at the dose of 6 mL / L for 5 min; 4. UseClor at a dose of 0.5 mL / L for 10 min; 5: Neutral soap Ypê, at the dose of 0.2 mL / L for 20 min; 6. Sanitary water (Qboa) at a dose of 0.2 mL / L for 30 minutes; 7. Alcohol vinegar, one tablespoon per one Liter of water for 30 min. Ten leaves of Lactuca sativa variety Vera (Curly leaf lettuce) were used for each performed test. Each leaf was contaminated with about five S. venezuelensis infective larvae and allowed to rest for 30 min. Each time the leaves were collected, they have been washed with a brush in a contai? Containing 250 ml of distilled water. Then they were rinsed with 50 ml of water. The water from the immersions and washes were distributed in previously identified chalices and allowed to stand for 18 hours. Afterwards the supernatant was discarded and 5 mL of the sediment was examined.The effectiveness of disinfectants on S. venezuelensis infective larvae in pure products (1 mL) and dilutions: 0.5 mL, 0.1 mL, 0.05 mL for each mL of distilled water were tested, having a final volume of 1 mL. All materials were examined using an optical microscope with a 20x magnification. Results and Discussion: None of the products killed 100% of the larvae placed on lettuce and maintained for 18 hours at rest. All products tested at concentrations and times suggested by manufacturers were ineffective at killing the larvae. However, when the substances in a pure form were tested on the parasitefor 15 min, all, except for vinegar and soapYpê?, killed 100% of the worms. On the other hand, when these products were diluted by 50, 25 and 20% (v / v) and maintained for 30, 45, and 60 min, only Qboa1 00 killed and degraded the larvae at the time of exposure to the product. The other disinfectants killed approximately 40% to 60% of the worms. The results show that products commercialized for disinfection of vegetables were not effective to kill S. venezuelensis infective larvae at the dosage and time recommended by the manufacturers.To be effective, the products need to be used pure, or in much larger doses than recommended by the manufacturers, and have to stay longer in contact with the parasites, which is unfeasible due to their action degrading the vegetables.In addition, high concentrations of the products make it costly to clean the vegetables, and increase due to the toxicitythe health risk of the consumer, besides impairing the sensorial qualities of the vegetables

    Ocorrência de Strongyloides stercoralisa e outros enteroparasitos na área rural de Uberlândia - MG

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    Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Foram estudados 180 indivíduos através da colheita de 3 amostras de fezes, sem conservantes. Os exames foram realizados após a obtenção do termo de consentimento e aplicação de um questionário abordando questões sobre as condições sócio - econômicas e fatores epidemiológicos relacionados às enteroparasitoses, no período de setembro de 1996 a maio de 1997

    Estudo dos fatores determinantes do grau de infectividade de linhagens de Strongyloides venezuelensis e analise de antigenos heterologos no imunodiagnostico da estrongiloidiase humana

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    Orientadores: Marlene Tiduko Ueta, Lucia Helena FaccioliTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Neste estudo mostramos que camundongos infectados com as linhagens L-2 ou L-49 de Strongyloides venezuelensis induzem aumento de leucócitos totais, eosinófilos (EO) e células mononucleares (MO) no sangue, na cavidade peritoneal (LCP) e espaço broncoalveolar (LBA) de formas semelhantes. Ambas linhagens estimularam síntese de citocinas do padrão TH1 ou TH2 da resposta imune, com maior tendência para TH2. L-2 foi mais infectante que L-49, induzindo precocemente maior síntese de IL-4, IL-5 e IFNy e anticorpos. Houve correlação positiva entre indução de maior síntese de IL-4 e de IgG e maior expulsão do parasita pela L-2. Não houve correlação entre indução de maior síntese de IL-5 e maior proliferação e recrutamento de EO e MO. O tempo e a temperatura de manutenção das culturas influenciaram na infectividade do parasita. Com menor tempo de permanência das larvas nas culturas estas induziram resposta imune inata mais intensa no sangue e no LCP, com eliminação mais rápida dos parasitas. Larvas obtidas a temperatura mais alta induziram eosinofilia mais intensa e precoce no LCP, e sob temperatura mais baixa, a eosinofilia foi menor e tardia. Larvas mantidas por menor tempo nas culturas estimularam resposta imune celular capaz de expulsar mais rapidamente as fêmeas parasitas, e as mantidas por maior tempo e sob temperaturas mais altas induziram maior síntese de anticorpos e de IL-4 e IL-10. Larvas mantidas por menor tempo nas culturas induziram maior síntese de IL-12, e as de maior tempo, maior produção de IFN-y. O tempo e/ou temperatura não influenciaram a síntese de IL-5. Observamos que leucotrienos participam do aumento de leucócitos totais, EO e MO no sangue, no LCP e LBA na estrongiloidíase. A IL-5 também participa no aumento de leucócitos nesses compartimentos. IL-12 e IFN-y protegem o parasita contra as defesas do hospedeiro. Verificamos que as oito linhagens de S. venezuelensis apresentaram antigenicidade semelhante, detectada por imunofluorescência indireta, ELISA e "Immunoblot". O anticorpo IgG anti-S. stercotalis reconheceu a fração antigênica de peso molecular aparente de 45 kDa. Assim, antígenos destas linhagens podem ser usados no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. Palavras chave: Strongyloides venezue/ensis, estrongiloidíase, leuc6citos totais, eosinofilia, células mononucleares, citocinas, anticorpos, leucotrienos, imunodiagnósticoAbstract: In this study, we have shown that, in mice, L-2 and L-49 strains of S. venezuelensis induced an increase in the total number of leukocytes, eosinophils (EO) and mononuclear cells in blood, peritoneal cavity (LCP) and in the bronchoalveolar space (LBA), in a similar manner. Both strains stimulated synthesis of TH1 or TH2 type immune response cytokines, with a greater tendency to TH2. L-2 strain was more infective than L-49, inducing earlier synthesis of IL-4, IL-5 and IFN-y, and antibodies. In L-2, there was a direct correlation between greater production of IL-4 and IgG and expulsion of parasites, but no correlation to greater synthesis of IL-5 or proliferation and recruitment of EO and MO. Time and temperature had influence on parasite infectivity. Larvae that remained in the cultures for shorter periods of time had their infectivity affected, inducing a more intense innate immune response in blood and LCP, with rapid elimination of the parasites. Parasites kept in higher temperatures rapidly induced higher eosinophil levels in LCP, while for low temperatures, eosinophils appeared later and in lower numbers. When larvae were cultured for shorter periods of time, they stimulated a cellular immune response capable of quickly expelling female parasites, while those submitted to shorter periods and high temperatures induced a higher synthesis of antibodies, IL-4 and IL-10. Larvae kept in culture for short periods induced greater synthesis of IL-12, while longer periods lead to greater IFN-y production. Neither time nor temperature affected IL-5 synthesis. It was observed that, in strongyloidiasis, leukotrienes participate on the increase of total leukocyte numbers, EO, and MO in blood, LCP and LBA. IL-5 is also involved in the increase of leukocyte numbers in these compartments. 80th IL-12 and IFN-y protect the parasite against host defense. It was also verified, through indirect immunofluorescence, ELISA, and Immunoblot, that eight strains of S. venezuelensis presented similar antigenicity. The antibody anti-S. stercoralis IgG was able to recognize the antigenic fraction with apparent molecular weight of 45 kDa. Therefore, antigens to these strains may be used for the immunodiagnosis of human strongyloidiasis. Key words: S. venezue/ensis, strongyloidiasis, leukocytes, eosinophils, mononuclear cells, cytokines, antibody, leukotrienes, immunodiagnosis, miceDoutoradoDoutor em Parasitologi
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