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Kang, So Young
학위논문(석사)----아주대학교 일반대학원 :의학과,2008. 2목적: TIS21 (TPA inducible sequences 21)는 mouse, BTG2 (B-cell translocation gene-2)는 human, PC3 (pheocromocytoma clone-3)는rat에 존재하는 동등 유전자이고, anti-proliferative gene family에 속한다. TIS21BTG2/PC3는 세포 내에서 전사보조인자, 신경세포 분화인자 및 성장 억제인자로서 thymocyte 의 stage-specific expansion 을 매개하는 중요인자이고 조혈모세포 증식억제인자로 보고된 바 있다. 사람과 생쥐에서 암 억제유전자이고 세포증식을 억제하는 pan-cell cycle regulator로서의 기능을 하는 사실 등은 TIS21 유전자가 세포노화에 관련이 있음을 시사한다. 본 연구실에서는 이미 293 세포에서 TIS21 과발현을 유도하면 세포증식이 떨어지고 세포의 크기가 증가하는 현상을 보고한 바도 있다. 이때 그 기전으로서는 TIS21 과발현에 의하여 cyclin E와 cyclin-dependent kinase (cdk) 4 의 합성이 감소할 뿐만 아니라 G1-S transition때 cdk activity도 현저하게 감소함이 널리 인정되었다. 본 연구에서는 세포의 자연노화 및 유도노화 과정 중에 TIS21BTG2/PC3의 발현이 증가하는 현상을 통해서 TIS21BTG2/PC3 에 의해 노화 현상이 유도되는 것인지 아니면 유지되는 것인지, 또한 이런 현상은 어떤 기전을 통해서 이뤄지는 것인지 알아보고자 하였다.
재료 및 방법: 젊은 HDF 세포를 계대배양하면서 replicative senescence를 유도하고, Huh7 세포에 200 μM H₂O₂의 농도로 한 번 또는 반복적으로 처리하여 조기노화세포를 만들었다. 정상 생쥐와 TIS21-/- 생쥐의 태아에서 MEF세포를 분리하였다. 세포노화의 진행 정도는 Senescence associated-β-galactosidase assay (SA-β-gal)와 세포성장율 측정으로 표현하였다. 단백질의 발현과 세포 내 위치변화는 immunoblotting과 면역형광염색을 수행하여 측정하였다. 세포 내 TIS21BTG2 발현양은 RT-PCR, Real-time PCR로 측정하였다. 활성산소양은 2’7’-dichlorofluorescin diacetate로 염색하여 fluorescence activated cell sorter (FACS)로 측정하였으며, 미토콘드리아 막의 전위차는 JC-1 염색 후 FACS 형광 측정을 하였다.
결과:
1. 젊은 HDF 세포를 계대배양하여 replicative senescence가 진행되는 세포에서 SA-β-gal 활성이 증가하고, 세포성장율이 떨어지는 것을 관찰할 수 있었고, 노화표지자인SA-p-Erk1/2의 발현이 노화된 HDF 세포에서 증가하는 것을 확인하였으며, 이때 BTG2 mRNA의 발현이 증가하는 것을 관찰하였다.
2. H₂O₂ 를 단독 또는 반복적으로 처리한 경우 Huh7세포의 크기가 증가하였고, 세포성장율이 떨어지면서 SA-β-gal 활성과 핵 내 actin의 축적양이 증가하는 것을 면역형광법으로 관찰하였으며, BTG2 mRNA의 발현이 증가하는 것을 RT-PCR로 측정하였다.
3. TIS21 유전자를 발현하는 Huh7 세포에서 성장율이 현저하게 감소하였으며, SA-β-gal 활성이 증가하였고, SA-p-Erk1/2의 발현도 증가되어 있는 것을 관찰하였다.
4. 정상생쥐와 TIS21-/- 생쥐의 태아에서 각각 TIS21+/+ MEF와 TIS21-/- MEF를 분리해서 TIS21-/-된 것을 RT-PCR로 확인하였고, TIS21-/- MEF는 TIS21+/+ MEF보다 성장율이 좋은 것을 관찰하였다. 또한, SA-β-gal 활성도 감소되어 있었다. H₂O₂를 처리하였을 때 SA-β-gal 활성이 TIS21-/- MEF에서 TIS21+/+ MEF보다 감소되어 있었다.
5. Adenovirus로 TIS21을 과발현시킨 Huh7세포 내에 활성산소의 양은 차이가 없었지만, 미토콘드리아 막의 전위차가 감소되어 있었으며, MnSOD의 발현이 증가되어 있는 것을 관찰하였다. 이때, Huh7 세포에 doxorubicin을 처리하면 SA-β-gal 활성과 활성산소의 발현양이 증가되는 것을 관찰하였다.
결론: 젊은 HDF 세포를 계대배양으로 노화시키는 경우와 Huh7 세포에 H₂O₂ 를 처리하여 조기노화를 유도한 세포에서 노화가 진행되었음을 여러 가지 노화표지자로 측정하였고, 이러한 세포에서 BTG2TIS21/PC3 발현이 증가되어 있는 것을 관찰함으로써 노화과정과 BTG2^(TIS21/PC3)의 기능 사이에 관계가 있음을 알게 되었다. 이러한 기전은TIS21 유전자가 계속적으로 발현되는 세포와 TIS21-/- MEF를 이용해서 BTG2^(TIS21/PC3)발현증가와 노화과정진행이 연관되어 있음을 알 수 있었다. BTG2^(TIS21/PC3)에 의해서 노화과정이 유도될 때 어떠한 변화가 생기는지 알아보고자 세포 내 활성산소의 양과 미토콘드리아 막의 전위차를 측정한 결과, adenovirus를 이용해 TIS21을 과발현 시켰을 때 세포 내 활성산소의 양은 대조표준과 차이가 없었지만, 미토콘드리아 막의 전위차가 약간 감소하였으며 MnSOD 발현양이 증가되었다. Adenovirus를 이용해 TIS21을 과발현 시키고 doxorubicin을 처리하였을 때 SA-β-gal 활성이 대조표준보다 증가되었고, 세포 내 활성산소의 양이 약간 증가하였다. 이를 통해서 BTG2TIS21/PC3 에 의해서 세포노화가 유도되고, 이러한 현상은 BTG2TIS21/PC3 단독 효과만으로는 부진하지만, doxorubicin이나 H₂O₂와 같은 DNA손상유도물질을 동반 처리하면 세포노화유도가 촉진되는 것을 알 수 있었다. 결과적으로, BTG2^(TIS21/PC3) 과발현을 유도하여 암세포 노화를 촉진함으로써, 암세포의 빠른 증식을 지연 또는 억제시켜 암세포 치료의 효과에 도움이 될 것이라 기대된다.국문요약 ― = ⅰ
그림 차례 = ⅵ
I. 서론 = 1
A. 세포노화 = 1
B. TIS21^(BTG2/PC3) = 3
II. 재료 및 방법 = 6
A. 사람 포피 세포 분리, Human Diploid Fibroblast (HDF) 세포 = 6
B. 생쥐 태아 섬유모세포 분리, Mouse Embryo Fibroblast (MEF) 세포 = 7
C. Huh7세포에 TIS21 complementary DNA (cDNA) transfection = 7
D. 세포 수 집계 (Cell number counting) = 8
E. TIS21 adenovirus = 8
F. Doxorubicin-induced senescence = 8
G. Senescence associated-β-galactosidase (SA-β-gal) assay = 9
H. 면역형광세포염색 (Immunocytochemistry) = 9
I. RNA분리와 RT-PCR = 10
J. Real-time PCR = 11
K. 세포 내 활성산소 (ROS)의 양 측정 = 12
L. 미토콘드리아 막 전위차 (mitochondrial membrane potential) 측정 = 13
M. 미토콘드리아 염색 = 13
N. Western blot analysis = 14
O. 통계처리 = 15
III. 결과 = 16
A. 노화된 세포에서 BTG2^(TIS21)의 발현증가 = 16
B. TIS21^(BTG2)과발현에 의한 노화현상유도 = 17
C. TIS21^(BTG2) 과발현에 의한 노화현상유도로 나타나는 생화학적 변화 = 18
IV. 고찰 = 33
V. 결론 = 37
참고문헌 = 38
―ABSTRACT― = 47MasterTIS21^(BTG2/PC3) regulates G1-S and G2-M progressions of cell division cycle through the inhibition of G1 phase cyclin biosynthesis, and the delayed degradations of cycin B1 and cyclin A, respectively. Therefore, we earlier suggested that TIS21 might play a role as a pan-cell cycle regulator and an important factor for cellular senescence. However, there has been no experimental evidence to confirm TIS21 as a regulator of cellular senescence. In this study, we observed the changes of TIS21 expression in the replicative senescence of human diploid fibroblast (HDF) cells. Furthermore, when we treated Huh7 hepatoma cells with H₂O₂, the expression of BTG2 mRNA was highly induced, accompanied with senescence phenotypes. To investigate a role of TIS21 in the process of cellular senescence, Huh7 cells were transfected with TIS21 cDNA construct. The followings were observed; Growth of the Huh7 cells was significantly decreased, cell shapes were changed from small and cylindrical young cell-like to large and flat cells, and percentages of the cells with senescence associated (SA)-β-galactosidase activity were significantly increased after adeno-TIS21-HA virus infection to Huh7 cells. Mouse embryonic fibroblast (MEF) cells derived from TIS21+/+ and TIS21-/- mice showed that the SA-β-gal activity was significantly increased in TIS21+/+ MEF cells of passage 10 compared with that of TIS21-/- MEF cells. And growth of the MEF cells was significantly increased in TIS21-/- MEF cells of passage 3 compared with that of TIS21+/+ MEF cells. Furthermore, over-expression of TIS21 induced MnSOD expression and decreased mitochondrial membrane potential (MMP) difference in Huh7 cells after combined treatment with doxorubicin. The above data suggest that TIS21 might induce cellular senescence phenotypes both in HDF and Huh7 cells
Kang, So In
학위논문(석사)--아주대학교 교육대학원 :교육행정,2005. 821세기의 세계화, 정보화 사회는 지식기반 사회임을 감안할 때 사회의 요구는 국제 경쟁력에 걸 맞는 교육의 역할을 강조하고, 교육 개혁의 초점이 교사의 자질과 전문성 향상을 통해 학교 교육의 질을 높이는 것에 집중되면서 교사평가제도는 중요한 교육 정책 과제가 되고 있다.
그러나 현재 시행되고 있는 교사평가 제도로서 근무성적평정제도는 단순히 승진을 위한 평가도구로 이용되고 있는 실정으로 평정 기준에 있어 구체성이 결여되고 있고, 평정자의 주관에 흐를 소지가 많아 승진에 관심을 둔 소수만이 관심을 가질 뿐, 승진과 관련이 없는 교사들은 현행의 교사평가에 대해 부정적이고 무관심하다.
교사평가는 무엇보다도 교사의 자질 향상과 업무수행 개선과 발전에 목적을 두어야 한다. 이에 교사평가에 대한 관심을 갖고 현행 승진위주의 교사평가제도의 문제점과 외국의 교사평가제도 사례 등을 비교 해보고 경기도내 중학교 교사들의 교사평가 제도를 바라보는 인식 조사를 통하여 개선 방향을 제시하는데 목적을 두고자 한다.
연구대상은 경기도 소재 공립 중학교 교사 350명을 표집 대상으로 하여 현행 교사평가에 관한 인식, 개선 방향에 관한 인식, 교사 전문성 신장을 위한 평가에 대한 인식, 교사평가에 대한 일반적 인식도의 4개영역으로 설문내용을 구성, 323명이 응답하였다. 본 연구의 조사항목들에 대한 인식의 차이에 대한 분석 결과는 다음과 같다.
첫째, 현행 교사평가제도에 대해서 교사들이 가지고 있는 전반적인 인식과 평가제도의 운영 및 인식에 대한 불만이 상당한 것으로 확인되었다.
둘째, 교사평가 제도의 개선방안 관련한 분석 결과에서 교사평가 제도는 교사 개개인의 자질 향상을 위한 자료로 활용해야 한다는 의견과 교사 전문성 신장을 위한 목적을 가장 중요한 방향으로 인식하고 있었다.
셋째, 교사 전문성 신장을 위한 평가에 대한 인식에서는 과반수 이상이 찬성한다는 의견을 형성하고 있었다. 하지만 그 효과를 기대하기 어려울 것이라는 의견이 절반 이상을 차지하고 있었다.
넷째, 교사평가에 대한 일반적인 인식 분석에 있어서는 전반적인 관점에서 부정적인 의견을 표출하거나 우려의 목소리를 내고 있다고 정리할 수 있을 것이다. 교사의 사기 저하를 유발하고 교사의 심리적 부담감을 증대시키며, 교사를 통제하는 수단으로 작용되며 교사간의 유대와 협동을 저해하고 갈등과 혼란만을 초래할 것이라는 의견이 지배적임을 알 수 있다.
다섯째, 변인별 특성에 따른 인식의 차이에 대한 분석에서 성별에 따라 관심정도, 자질 및 근무능력 향상의 기여도에 대한 견해, 근무성적 강제배분에 대한 견해와 상급자 평가방식 근무성적 평정에 대한 견해에 차이를 보이고 있는 것으로 나타났다.
여섯째, 보직여부에 따른 인식 차이의 분석에서 전체 항목 중 대부분의 항목에서 보직간 인식차이를 보이고 있지 않았다. 다만, 평가제도의 비공개 운영에 대한 견해, 강제배분방식, 상급자 평정방식 대한 인식에서 어느 정도의 차이를 보였다.
일곱째, 근무 연수에 따른 견해 차이 분석에서는 관심정도나 전반적 견해 등을 포함한 여러 항목 간에는 차이가 없는 것으로 나타났지만, 평정요소의 구성, 교사자질 및 근무능력 향상에 대한 인식, 평가제도 비공개 운영, 근무성적 강제배분, 상급자의 근무평정 방식에 대한 견해에서는 근무연수에 따른 의견 차이를 보였다.
여덟째, 가입단체에 따른 인식 차이는 조사 항목 모두가 매우 유의미한 차이를 보이고 있음이 확인되고 있다. 개선방안에 대한 인식 차이에서 교사평가의 중요한 목적과 4가지 목적의 중요성 정도, 그리고 학부모 및 학생의견에 의한 교사평가 방안에 대한 의견에서 차이를 형성하고 있었다.
본 연구의 결과와 결론을 바탕으로 다음과 같이 제언하고자 한다.
첫째, 평가의 목적을 교사의 전문성 신장에 두고 교직사회의 자긍심을 길러줄 수 있는 교육환경 개선이 전제되어야 할 것이다.
둘째, 평가내용의 구체화, 평가과정과 결과의 객관화, 다양한 평가방법의 개발·연구를 통한 신중한 도입이 필요할 것이다.
셋째, 평가자와 피평가자와의 상호협의, 능력개발을 위한 다양한 자료로서의 활용 등이 이루어져야 할 것이다.목차
1. 서론 = 1
1. 연구의 필요성 및 목적 = 1
2. 연구 문제 및 내용 = 5
3. 연구의 제한점 = 5
Ⅱ. 이론적 배경 = 7
1. 교직의 전문성과 교사의 역할 = 7
2. 교사평가제도 = 11
3. 현행 교사평가제도의 현황과 문제점 = 27
4. 외국의 교사평가제도 사례 분석과 시사점 = 37
5. 선행연구의 고찰 = 47
Ⅲ. 연구 방법 = 54
1. 연구대상 및 표집 = 54
2. 조사 도구 구성 및 내용 = 56
3. 자료 처리 = 58
Ⅳ. 연구의 결과 및 해석 = 59
1. 인구 통계적 및 일반적 특성에 관한 통계 = 59
2. 현행 교사평가에 관한 인식 = 61
3. 교사평가제도의 개선 방향에 관한 인식 = 67
4. 교사 전문성 신장을 위한 평가에 대한 인식 = 71
5. 교사평가에 대한 일반적 인식 = 77
6. 성별에 따른 인식 차이의 분석 = 79
7. 보직여부에 따른 인식 차이의 분석 = 82
8. 근무년수에 따른 인식 차이의 분석 = 86
9. 가입단체에 따른 인식 차이의 분석 = 92
Ⅵ. 요약 및 결론 = 99
1. 요약 = 99
2. 결론 및 제언 = 105
참고문헌 = 107
부록 중학교 교사평가에 관한 설문지 = 110Maste
Expositions : Lee Kang-So et Choi Byung-So
Choi Byung-So, "Untitled" (Sans titre), 2005. Stylo à bille sur papier journal. 54,5 x 40,2 cm. Courtesy de l'artiste et de la Wooson Gallery. Expositions : Lee Kang-So et Choi Byung-So Musée d'art moderne et contemporain - Saint-Étienne Jusqu’au 16 octobre 2016 À l’occasion de l’année France-Corée 2015-2016, le Musée poursuit son ouverture sur la scène artistique coréenne et accueille deux expositions temporaires consacrées à Lee Kang-So et Choi Byung-So. Depuis 2005, le Musée a accueilli d..
A novel nickel-containing superoxide dismutase from Streptomyces spp.
A novel type of superoxide dismutase (SOD) was purified to apparent homogeneity from the cytosolic fractions of Streptomyces sp. IMSNU-1 and Strep. coelicolor ATCC 10147 respectively. Both enzymes were composed of four identical subunits of 13.4 kDa, were stable at pH 4.0-8.0 and up to 70 degrees C, and were inhibited by cyanide and H2O2 but little inhibited by azide. The atomic absorption analyses revealed that both enzymes contain 0.74 g-atom of nickel per mol of subunit. Both enzymes were different from iron-containing SOD and manganese-containing SOD from Escherichia coli, and copper- and zinc-containing SODs from Saccharomyces cerevisiae and bovine erythrocytes, with respect to amino acid composition, N-terminal amino acid sequence and cross-reactivity against antibody. The absorption spectra of both enzymes were identical, exhibiting maxima at 276 and 378 nm, and a broad peak at 531 nm. The EPR spectra of both enzymes were almost identical with that of Nim in a tetragonal symmetry of Ni-III-oligopeptides especially containing histidine. The apoenzymes, lacking in nickel, had no ability to mediate the conversion of superoxide anion radical to hydrogen peroxide, strongly indicating that Ni-III plays a main role in these enzymes.N
Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis
The present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation
counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings
are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that
only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into
account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed
Liu Yong's Ci Poetry
柳永可謂是中國文學史上第一位「專業」詞人,也是宋代詞壇上第一位大量製作新聲、創作慢詞長調的詞人。柳永對詞體的發展有很大的影響。可是,自宋以來對柳永詞的評價往往褒貶不一。釵h詞論者披評柳永詞為俗,好像「俗」為柳永詞風格特徵的標誌。柳永詞中這些令評論者不滿的「俗」是甚麼?而且為甚麼他們認為柳永詞為「俗」?詞論者所說的俗,能涵賑h永的所有作品嗎?人們公論柳永大量創作慢詞長調,是柳永詞在詞史上的貢獻。慢詞長調取代小令,是奠定詞體的獨立、發展上很重要的一件事。一般形式有變化,其內容自然而然跟著演變。然而,只肯定柳永在詞形式方面的影響,是否不公平?
至今有關柳永的研究,他的生平及家世之考證,柳永在慢詞長調上的貢獻,專門研究詞作,論柳永與其他詞家相比等等,各方面很多。而且全面論柳永及其詞的專著也不少。可是以整體的柳永詞為範圍的全面研究專著,已經問世十多年;對學位論文來說,已經問世二十多年了。其間釵h學者吸取了已經有的研究成果,作了不少新的探索,提共不少新的材料,因此,對整體的柳永詞全面探討,仍然是直得研究。本論文的目的是重新審視柳永的所有作品,切實地瞭解其內容及表現特色,檢視前學者的一些資料,希望從中能有比較客觀公平的論斷,在中國詞史上,指出柳永詞究竟有何貢獻與影響,以表彰其不同凡響的成就。
本論文共分六章,各章安排如下:
第一章為前言。闡明研究動機與目的、研究範圍與章節分配。
第二章,探討柳永在當時文人承襲五代詞風的潮流中,卻走不同蹊徑的背景。
本章首先從外在的北宋初時代背景、政治狀況、文化傾向和其特色;之後探索柳永個性、氣質、才華、經歷和藝術修養的創作內在的背景。
第三章,柳永現存二百十二首詞,依內涵主題做深入分析與歸納,把柳詞分為四大類:豔情男女、羈旅愁懷、承平氣象、詠物與詠史懷古。除了對以往研究柳詞的論文、期刊及箋注分析柳詞的各種資料加以整理與討論之外,並提出己見。
第四章,據前章的內容進一層分析探討,柳詞在內容、形式、風格諸方面,獨特的藝術風貌。
第五章,首先綜合之前各章的論述,探討柳永詞在詞史上承先啟後之處。其次,柳詞之內容、形式、手法、風格對後世詞人和後代中國文學的影響。
第六章為結語。綜合以上內容,闡明柳詞的內容及表現特色,評價其在詞史上和文學史上的意義。目 錄
第一章 前言··········································1
第一節 研究動機·······································1
第二節 研究範圍與章節分配·····························6
一、 研究範圍······································6
二、 章節分配······································7
第二章 柳永詞之環境背景······························9
第一節 宋初社會·······································9
第二節 市井文化興起···································11
第三節 世俗品味·······································14
第四節 柳永生涯·······································15
第三章 柳永詞之內涵情境······························24
第一節 豔情男女·······································24
一、 冶遊之樂··········································24
二、 應歌之詞··········································26
(一)歌妓舞妓的容貌與才藝·····························28
(二)歌妓舞妓的期盼與情思·····························31
(三)對歌妓舞妓的相思眷戀·····························33
三、 閨思怨情··········································35
四、 男子的相思········································37
五、 男女的歡愛········································38
第二節 羈旅愁懷·······································41
一、 羈旅愁思··········································42
(一)思念佳人·········································42
(二)懷想故舊·········································44
(三)留戀京城·········································46
(四)離愁別恨·········································48
二、 仕官情懷··········································50
(一)世俗願望、身世之感·······························50
(二)飄泊落寞、遊宦之悲·······························53
第三節 承平氣象·······································58
一、 慶賞佳節··········································59
二、 都市風物··········································63
三、 歌旦|德··········································65
第四節 詠物與詠史懷古·································67
一、 詠物之章··········································67
二、 詠史懷古··········································73
第四章 柳永詞之藝術風貌······························78
第一節 慢詞長調·······································78
一、以賦為詞···········································81
二、上景下情···········································85
三、善用領字···········································87
第二節 俗語俚詞·······································91
一、寫情如真···········································92
二、明白如話···········································94
(一) 俗言俚語······································96
(二) 典故運用······································97
第三節 雅俗融合······································100
第五章 柳永詞之文學地位·····························107
第一節 承傳與創新····································107
一、題材內容的拓展····································108
二、慢詞長調的創建····································112
三、明白家常的語言····································113
四、雅俗融合的風格····································115
第二節 定位與影響····································116
第六章 結語·········································122
附錄一 柳永詞主題分類表······························131
附錄二 柳永詞主題比例表······························140
附錄三 柳永詞長調、小令比例表························140
參考書目··············································14
Variations on the Author
“Variations on the Author” discusses two of Eduardo Coutinho’s recent films (Um Dia na Vida, from 2010, and Últimas Conversas, posthumously released in 2015) and their contribution to the general question of documentary authorship. The director’s filmography is characterized by a consistent yet self-effacing form of authorial self-inscription: Coutinho often features as an interviewer that rather than express opinions propels discourses; an interviewer that is good at listening. This mode of self-inscription characterizes him as an author who is not expressive but who is nonetheless markedly present on the screen. In Um Dia na Vida, however, Coutinho is completely absent form the image, while Últimas Conversas, on the contrary, includes a confessional prologue that moves the director from the margins to the center of his films. This article examines the ways in which these works stand out in the filmography of a director who offers new insights into the notion of cinematic authorship
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