18 research outputs found
Manipulating the proximal triad His-Asn-Arg in human myeloperoxidase
No full textIn mammalian peroxidases the proximal histidine is in close interaction with a fully conserved asparagine which in turn is hydrogen bonded with an arginine that stabilizes the propionatesubstituent of pyrrol ring D in bent conformation. In order to probe the role of this rigid proximal architecture for structural integrity and catalysis of human myeloperoxidase (MPO), the variants Asn421Asp, Arg333Ala and Arg333Lys have been recombinantly expressed in HEK cell lines. The standard reduction potential of the Fe(III)/Fe(II) couple of Asn421Asp was still wild-type-like (-50 mV at pH 7.0) but the spectral properties of the ferric and ferrous forms as well as of higher oxidationstates showed significant differences. Additionally, rates of ligand binding and oxidation of both one and two-electron donors were diminished. The effect of exchange of Arg333 was even more dramatic. We did not succeed in production of mutant proteins that could bind heme at the active site. The importance of this His-Asn-Arg triad in linking the heme iron with the propionate at pyrrol ring D for heme insertion and binding as well as in maintenance of the architecture of the substrate bindingsite(s) at the entrance to the heme cavity is discussed
Influence of the Covalent Heme−Protein Bonds on the RedoxThermodynamics of Human Myeloperoxidase
No full textMyeloperoxidase (MPO) is the most abundant neutrophil enzyme and catalyzes predominantly the twoelectron oxidation of ubiquitous chloride to generate the potent bleaching hypochlorous acid, thus contributing to pathogen killing as well as inflammatory diseases. Its catalytic properties are closely related with unique posttranslational modifications of its prosthetic group. In MPO, modified heme b is covalently bound to the protein via two ester linkages and one sulfonium ion linkage with a strong impact on its(electronic) structure and biophysical and chemical properties.Here, the thermodynamics of the one-electron reduction of the ferric heme in wild-type recombinant MPO and variants withdisrupted heme−protein bonds (M243V, E242Q, and D94V) have been investigated by thin-layer spectroelectrochemistry. Itturns out that neither the oligomeric structure nor the N-terminal extension in recombinant MPO modifies the peculiar positivereduction potential (E°′ = 0.001 V at 25 °C and pH 7.0) or the enthalpy or entropy of the Fe(III) to Fe(II) reduction. Bycontrast, upon disruption of the MPO−typical sulfonium ion linkage, the reduction potential is significantly lower (−0.182 V).The M243V mutant has an enthalpically stabilized ferric state, whereas its ferrous form is entropically favored because of the loss of rigidity of the distal H-bonding network. Exchange of an adjacent ester bond (E242Q) induced similar but less pronouncedeffects (E°′ = −0.094 V), whereas in the D94V variant (E°′ = −0.060 V), formation of the ferrous state is entropically disfavored.These findings are discussed with respect to the chlorination and bromination activity of the wild-type protein and the mutants
Disruption of the aspartate to heme ester linkage in human myeloperoxidase: Impact on ligand binding, redox chemistry and interconversion of redox intermediates
No full textIn human heme peroxidases the prosthetic group is covalentlyattached to the protein via two ester linkages between conservedglutamate and aspartate residues and modified methyl groupson pyrrole rings A and C. Here, monomeric recombinantmyeloperoxidase (MPO) and the variants D94V and D94N wereproduced in Chinese hamster ovary cell lines. Disruption of theAsp94 to heme ester bond decreased the one-electron reductionpotential E0 [Fe(III)/Fe(II)] from 1 to 55 mV at pH 7.0 and25 °C, whereas the kinetics of binding of low spin ligands and ofcompound I formation was unaffected. By contrast, in both variantsrates of compound I reduction by chloride and bromide(but not iodide and thiocyanate) were substantially decreasedcompared with the wild-type protein. Bimolecular rates of compoundII (but not compound I) reduction by ascorbate and tyrosinewere slightly diminished in D94V and D94N. The presentedbiochemical and biophysical data suggest that the Asp94 to hemelinkage is no precondition for the autocatalytic formation of theother two covalent links found in MPO. The findings are discussedwith respect to the known active site structure of MPOand its complexes with ligands
Reducing excessive toxicity in ovarian cancer treatment: a personalized approach
No full text The management of ovarian cancer is not only multifactorial, but also patient-specific. Different treatment modalities lead to varying levels of toxicity and individual patient responses, necessitating a personalized approach to each treatment plan. Surgical treatment along with first-line and salvage chemotherapies, are standard modalities but recent innovations in chemotherapy delivery and innovative therapy with mechanism of action are reviewed in this article. Extensive experience with standard chemotherapy has outlined algorithms for managing various toxicities. The focus of treatment may ultimately point towards palliative care and clinicians must be comfortable and well versed in addressing this important option. Overall, management of ovarian cancer requires a multi-faceted approach, keeping the patients’ overall health, curative goals and well-being at the forefront. It is nearly impossible to detail exact management plans for every possible toxicity for every patient; formulating personalized treatment plans should be based on evidence and clinician experience, all part of the art of medicine. The objective of this article is to highlight the most frequently encountered and most limiting toxicities of current standard therapies for epithelial ovarian cancer. </jats:p
Desenvolvimento de um método para o controle da utilização de gordura trans no processo produtivo de refeições
No full textDissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Nutrição.Como resultado do aumento do consumo das gorduras trans e dos estudos que o associam a reflexos negativos na saúde dos indivíduos, a Organização Mundial da Saúde (OMS) lançou, em 2004, a Estratégia Global para Promoção da Alimentação Saudável, Atividade Física e Saúde, tendo a eliminação do consumo dessas gorduras como uma das metas. Nesse enfoque, este estudo objetivou desenvolver um método de controle da utilização de gorduras trans no processo produtivo de refeições - CGTR. Trata-se de uma pesquisa qualitativa descritiva em desenvolvimento, tendo sido o método delineado e testado por meio de um estudo de caso. As etapas da pesquisa foram: identificação de informações sobre a utilização e a formação de gorduras trans no processo produtivo de refeições na literatura científica; identificação de grupos e/ou subgrupos de preparações que podem vir a conter gorduras trans em sua composição, a partir de processos produtivos facilitadores para a adição e/ou formação dessas gorduras; concepção de um modelo de método de controle de gorduras trans na produção de refeições; definição do local do estudo de caso; aplicação do método no local escolhido; revisão do método a partir da experiência no estudo de caso e elaboração de estratégias para a aplicação do método desenvolvido. Os dados foram coletados em uma Unidade Produtora de Refeições de Florianópolis - SC, por meio do acompanhamento das refeições de desjejum, almoço e coffee break. Como resultados, foram definidas as etapas do processo produtivo que demandam controle para evitar um cardápio rico em gorduras trans. Dentre essas etapas destacam-se: a seleção de fornecedores que não utilizem produtos industrializados com gordura vegetal parcialmente hidrogenada, a conferência da lista de ingredientes dos rótulos dos alimentos, o controle de tempo e temperatura dos óleos vegetais utilizados para frituras de imersão. O CGTR é apresentado em etapas de aplicação, formulários com instruções para a coleta de dados, análise dos dados e glossário. Ressalta-se que este é um instrumento de gerenciamento do processo produtivo de refeições que pode facilitar a oferta de refeições mais saudáveis sob o ponto de vista nutricional, auxiliando para que as Unidades Produtoras de Refeições, comerciais e coletivas, cumpram o seu papel como promotoras de saúde
NOIVAS POR ENCOMENDA: ATUALIZANDO ESTEREÓTIPOS
No full textTCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Sócio-Econômico. Relações Internacionais.A indústria de noivas por encomenda tem-se expandido consideravelmente a partir dos anos de 1990 devido ao advento da internet. O seu crescimento e a ligação com casos de violência contra a mulher de grande repercussão midiática trouxeram à luz a necessidade de uma regulamentação mundial sobre a indústria. O objetivo deste trabalho consiste em analisar o discurso aplicado nos sites das agências de noivas por encomenda e sua possível relação com a violação dos direitos humanos das mulheres. O trabalho abordará também as iniciativas de regulamentação já elaboradas, em especial nos EUA, mostrando que o caminho pela regulamentação se apresenta como uma alternativa mais eficiente do que a proibição. Além disso, evidencia-se a necessidade de mais estudos sobre o tema para que se possa ter uma evolução no aspecto legal
Estudo caso-controle de fatores de risco para doença arterial coronariana aterosclerótica, manifestada como infarto agudo do miocárdio.
No full textTrabalho de Conclusão de Curso - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Departamento de Clínica Médica, Curso de Medicina, Florianópolis, 199
