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    Metabolismo glicidico em musculo soleo isolado de ratos : efeitos do oleato sobre a desnutrição proteica e do treinamento fisico na recuperação nutricional

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    Orientadores: Maria Alice Rostom de Mello, Eduardo KokubiunTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Mais do que a simples reposição dos estoques energéticos, a recuperação nutricional deve restaurar a funcionalidade orgânica, com a mobilização normal dos substratos energéticos. O principal objetivo desse estudo foi verificar o efeito dos ácidos graxos livres na desnutrição e do treinamento físico na recuperação nutricional no que se refere ao fluxo glicolítico de ratos. O experimento foi realizado em duas partes: na primeira, os animais foram separados em dois grupos: D, alimentados com uma dieta contendo baixo teor protéico (6%) do desmame aos 60 dias de idade e C, animais alimentados com dieta normoprotéica (17%) no mesmo período. Do 61Q ao 10_ dia de idade, os ratos foram novamente separados em dois grupos: C - ratos que foram sempre alimentados com a dieta normoprotéica e R - animais alimentados com a dieta hipoprotéica do desmame aos 60 dias, passando então a receber a dieta a 17% de proteína. C e R foram ainda subdivididos em sedentários (8) e treinados (T - natação 1 h/dia, 5 dias/semana, com carga equivalente a 5% do peso corporal). Ao final de cada uma das etapas, fatias de músculos sóleos (25-35 mg) foram incubadas em frascos contendo Krebs-Ringer bicarbonato com [3H]-2-deoxyglucose (0.5 _Ci/ml), [U_14C]glucose (25 _Ci/ml) e insulina para a determinação da captação de glicose e síntese de glicogênio. Na primeira fase, as fatias dos sóleos de ratos C e D foram ainda incubadas em meio com (P) e sem (N) oleato (0.8 mM), formando quatro grupos: CN ,CP, DN e DP. Após 60 minutos de incubação. a concentração de lactato foi determinada no meio. Todos os resultados foram expressos em /lmol.g-1.h-1. Na primeira fase, não foram observadas alterações na captação de glicose entre os grupos (CN=19.60 + 1.34; CP=21.19 + 1.15; DN=19.13 + 1.09; DP=18.45 + 1.03). Os animais desnutridos apresentaram menor síntese de glicogênio muscular, independente da presença ou não de AGL (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; N=2.29 + 0.22; DP=2.04+ 0.24). No meio N, a produção de lactato foi maior nos animais D do que nos C. Entretanto, ambos os grupos apresentaram menores concentrações no meio com AGL que os respectivos resultados das fatias musculares no meio N (CN=37.10+1.85; CP=19.36+ 1.91; DN=61.03+ 6.00; DP=25.32 + 2.24). Na segunda fase, os ratos I captaram mais glicose que os animais sedentários, com valores inferiores nos ratos R em relação aos C. (CS=29.91+1.10, CT=34.14+1.52, RS=25.88+1.28, RT=29.53+1.00). A síntese de glicogênio na incubação foi similar nos quatro grupos (CS=2.71+O.26, TC=3. 1 O:tO. 18, RS=2.42+O.14, RT=3.07+ O.26), mas os ratos CT apresentaram maior produção de lactato (15.22+O.66) em ralção aos ratos CS (12.29+O.67). Não houveram diferenças entre a produção de lactato entre os grupos RS (16.78+1.04) e RT (15.95 + 0.75), mas a concentração de lactato foi maior nos RS do que nos CS. Nossos resultados sugerem que a desnutrição leva a alterações no fluxo glicolítico, o qual não é totalmente restabelecido com a recuperação nutricional utilizada em nosso modelo. O treinamento físico parece melhorar a recuperação nutricionalAbstract: Carbohydrate metabolism in the rats isolated soleus muscle. Effects of the oleate on malnourished and the physical training on the nutritional recovery . The nutritional recovery must provide, beyond the simple reposition of the energetic fuels, also the restauration of the normal mobilization these substrates. This study was designed to verify the effects of free fatty acids on malnutrition and the physical training on the nutritional recovery in rats soleus glycolitic flux. The experiment was developed in two parts: First, the animais were separated into 2 groups: M, fed a low protein (6%) diet from weaning to 60 days of age and C, fed a normal protein (17%) diet on some period. From 61!h to 10o!h days of age, the rats were separated into 2 groups: C: rats allways fed the normal protein diet and R: rats fed the low protein diet from weaning to the 6o!h days of age and the normal diet from this day on. C and R animais were divided into 2 sub-groups: S (sedentary) and T (swimming 1 h/day, 5d/week supporting a. load equivalent to 5% of body weight). At the end of each part, soleus muscles were isolated for incubation procedures. Muscle strips (25-35 mg) were transferred to separate flasks countaining Krebs-Ringer bicarbonate solution with [3H]-2-deoxyglucose (0.5 I-ICi/ml), [U_14C]glucose (25 I-ICi/ml) and insulin for determination of glucose uptake and glycogen synthesis. Muscle slices from C and M animais (first period) were incubated in the presence (P) ar absence (N) of FFA (0.8 mM), forming four groups: CN, CP, MN and MP. After 60 minutes of incubation, the concentration of lactate in the medium was measured. Ali results were expressed as Jlmol.g-1.h-1. In the first part, no alterations in glucose uptake were observed among groups (CN=19.60+ 1.34; CP=21.19 +.15; MN=19.13 + 1.09; MP=18.45 + 1.03), although the malnourished animais presented lower glycogen synthesis than the control rats in medium with or without FFA (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; MN=2.29+ 0.22; MP=2.04 + 0.24). In medium N, lactate production was higher in M rats than C rats. However, both nutritional treatments showed lower lactate production in medium P than in medium N (CN=37.10 + 1.85; CP=19.36+1.91; MN=61.03+ 6.00; MP=25.32+ 2.24). In the second period, the T rats showed higher glucose uptake than S animais (SC=29. 91 :t1.1 O, TC=34.14+1.52, SR=25.88+1.28, TR=29.53+1.00), with lower values for R rats than C rats. The glycogen synthesis was similar for the four groups (SC=2.71+O.26, TC=3.10+O.18, SR=2.42+O.14, TR=3.07+O.26), but the TC rats showed greater lactate production (15.22:t0.66) than SC rats (12.29+O.67). There was no difference in the lactate production between SR (16. 78+1. 04) and TR (15.95+O.75) rats, but the lactate production was higher for SR than for SC rats. Our results suggest that malnutrition leads to alterations on glycolitic flux, wich do not totally disappear with the nutritional recovery, although physical training appears to improve the nutritional recoveryDoutoradoFisiologia e BiofisicaDoutor em Ciências Biológica

    Alterações metabolicas decorrentes do treinamento fisico em ratos previamente desnutridos e recuperados

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    Orientador: Maria Alice Rostom de MelloDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A proposta central deste estudo foi a de observar alguns efeitos do treinamento físico em ratos anteriormente desnutridos e recuperados. Para isso, foram analisados parâmetros como ganho de peso corporal, eficiência alimentar, ingestão relativa e determinações bioquímicas, incluindo variáveis plasmáticas como glicose, ácidos graxos dietas a 25% (C) e 6% (D) de proteína por cinco semanas; um protocolo de recuperação nutricional, no qual os animais anteriormente tratados com dieta a 6% de proteína passaram a receber 25% (R); e um programa de treinamento físico (natação 1h/dia, 5 dias/semana) de sete semanas. Na primeira fase os ratos D reduziram o ganho de peso corporal, a albuminemia e o glicogênio muscular e apresentaram elevada ingestão alimentar e teores de glicogênio muscular quando comparados aos ratos C. Na segunda fase todas as alterações foram normalizadas, exceto na maior ingestão alimentar verificada nos ratos R. Na última fase, os animais controles foram distribuídos em livres, albumina, proteínas totais, ácido láctico e teciduais como glicogênio hepático e muscular. O experimento consistiu de três fases: um protocolo de desnutrição protéica, com os ratos sendo alimentados com dois grupos: controles treinados (CT) e controles recuperado foi ganho de peso mas estiveram reduzidos nos ratos CT quando comparados aos animais CS. Os grupos treinados (RT e CT) apresentaram maior glicemia e menores concentrações séricas de ácidos graxos livres do que o grupo CS. Nos ratos CT, o valores de glicogênio hepático foram maiores que os observados nos ratos CS. Os teores de glicogênio muscular foram semelhantes em todos os grupos estudados. Em testes de cargas progressivas (exercício agudo) , durante a fase de treinamento, os animais CT e RT apresentaram valores séricos semelhantes de lactato. Finalizando, nossos resultados, na primeira fase experimental, mostraram alterações em algumas variáveis estudadas, caracterizando a desnutrição. Essas alterações se restabeleceram durante as fases de recuperação nutricional e treinamento físico, sendo que as análises realizadas nesses períodos demonstraram que a deficiência protéica inicial não causou interferência sobre os parâmetros bioquímicos observados em repouso e durante o exercício agudoAbstract: This study was designed to determine if early malnutrition followed by nutritional recover and physical training can affect parameters as body weight gain, food intake and food efficiency; serum glucose, free fatty acids, albumin and total protein and 1iver and msccle glycogen in rest and after acute exercise. Research design consisted in three stages: a dieting protocol to produce protein malnutrition, where rats were fed a 25% (C) and 6% (D) protein diet for five weeks; a dieting protocol to recover the animais, where rats previously fed a 6% were fed a 25% protein (R) for six weeks; and seven weeks exercise training program (swimming lh/day, 5 day/week). On the first stage, the D-rats showed reduced body weight gain, albuminemia and muscle glycogen; and higher food intake and liver glycogen than C-rats. On the second stage, ali the alterations disapeared, except for the higher food intake in the R-rats. On the last stage, the C-rats were distributed into two groups: Trained (CT) and sedentary controls (CS), while the R-group were also submited to training (RT). The body weight gain was similar in RT and CS groups, but was lower in CT-rats than CS-rats. The trained groups (RT and CT) showed higher glycemia and lower serum free fatty acids than CS group. In the CT-rats, the liver glycogen content was higher than in CS-rats. Muscle glycogen content was similar in ali groups. During the training stage, the levels of the serum lactate during progressive load tests were similar between CT and RT. Indeed, our results, on the first stage, showed that the early malnutrition caused alterations in the variables observed. However, the dieting recover and exercise training protocols demonstrated that the initial protein deficiency caused no interference on biochemical variables, in rest and acute exerciseMestradoFisiologiaMestre em Ciências Biológica

    Predição da intensidade de corrida em máxima fase estável de lactato a partir da velocidade de crítica em atletas fundistas de alto rendimento: relações com performances

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    A corrida de longa distância é considerada um fenômeno sócio-esportivo recente e de grande impacto na vida moderna. No segmento dos atletas profissionais, a busca por índices confiáveis de avaliação aeróbia, bem como programas de treinamento eficazes e de fácil aplicabilidade é contínua. O tema central desse trabalho foi fornecer uma ferramenta adequada e precisa para se determinar o atual estado da forma do atleta de fundo de alto rendimento, bem como predizer intensidades de carga confiáveis para treinamento e competição. Para tanto, foi estabelecida uma relação matemática entre dois testes de avaliação aeróbia: Máxima Fase Estável de Lactato (MFEL) e Velocidade Crítica (Vcrit). Nove atletas fundistas de alto rendimento, que participaram de seleções nacionais em competições internacionais, tomaram parte no experimento. As melhores marcas pessoais desses atletas correspondem à média ± erro padrão de 91,54 ± 0,93 % da velocidade de corrida do recorde mundial (considerados até o ano de 2007) de sua prova específica. Os testes foram realizados na fase final do período de treinamento de preparação geral. Inicialmente foi aplicado o teste de Vcrit nas distâncias de 800m, 1500m, 3.000m e 5.000m, realizadas aleatoriamente e em dias subseqüentes. A seguir, foi aplicado o teste clássico de MFEL, com duração de 30 min de corrida contínua e coleta de amostras de sangue (25μL) a cada 5 min, para determinação das concentrações de lactato (YSI 1500 sport). Para oito atletas a MFEL ocorreu na intensidade correspondente a 98% da Vcrit, sendo o restante obtido a 90% da Vcrit. A Vcrit (19,1±0,1 km/h) superestimou (p=0,005) os valores de MFEL (18,7±0,2 km/h). Houve correlação significativa entre Vcrit e MFEL (p=0,002, r=0,88). A equação obtida pela regressão foi MFEL=0,9673*Vcrit+0,2061, com erro padrão da estimativa de 0,236...The purpose of this study was to establish a mathematical relationship between the MLSS and the critical speed (CS) in high performance distance runners. Nine male high performance athletes were tested (28±2years), with personal bests of their specific events corresponding a mean ± ESE of 91,54 ± 0,93 % of world record running speed (updated 2007). The athletes were submitted to the CS test, which is the linear regression of the distances (800, 1.500, 3.000 and 5.000m) and their respective time. The CS was determined by the angular coefficient of the linear regression. For all athletes, the regression coefficient (R2) was equal to 1,0. The predicted workloads for the MLSS determination were: 100, 98, 95 and 90% of the CS, randomized and in a continuous way in subsequent days. In this test, the athletes run for 30 min, and it was collected blood samples (25μL) at each 5 min, to determine the lactate concentration (YSI 1500 sport). It was determined stable the non lactate variation higher than 1,0 mmol/L between the 10th and 30th minute. The MLSS has occurred for 8 athletes on the 98% intensity of CS and for 1 athlete on the 90%. The CS (19,1±0,1 km/h) overestimated (p=0,005) the MLSS values (18,7±0,2 km/h). There was significant correlation between CS and MLSS (p=0,002, r=0,88). The regression equation was MLSS=0,9673*CS+0,2061, with estimated standard error of 0,236. There was excellent application of distances to determine the CS in elite distance runners, as well as the parameter accuracy to the “gold standard” intensity verified with the MLSS test. These responses, associated with the low standard estimated error, suggest safety at the MLSS determination through the predicted equation proposed.Universidade Estadual Paulista (UNESP

    Análise de parâmetros de força e padrão de nado de ratos controles e obesos, a partir de um sistema de aquisição de sinais em natação atada: Influência da intensidade do exercício e da densidade corporal

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    No modelo de natação para ratos, a associação das intensidades de exercício determinadas por meio da lactacidemia com as suas respectivas sobrecargas são passíveis de crítica, uma vez que a quantificação dos pesos atados ao animal pode não representar efetivamente o esforço real do animal para sua manutenção na superfície da água, devido a esta metodologia sofrer influência da densidade corporal e dos padrões de nado apresentados pelos animais. O principal objetivo desse estudo foi desenvolver um modelo de natação atada para roedores o qual permitiu a determinação direta e em tempo real da força de nado realizada pelo animal e verificar a possível existência de diferentes padrões de nado. Além disso, foi feita a discriminação da densidade corporal em animais controles e induzidos à obesidade, com intuito de destacar consistentemente a influência da flutuabilidade na natação. Foram utilizados 24 rattus norvegicus albinus, machos, com 150 dias de idade, divididos em animais controles e induzidos à obesidade por meio da redução de ninhada somada a uma dieta hiperlipídica. Os animais tiveram a densidade corporal determinada por meio de um aparato de pesagem hidrostática utilizando um sistema de aquisição de dados. Posteriormente todos os ratos foram avaliados no teste de máxima fase estável de lactato adaptado para natação atada. Por meio do modelo experimental de indução a obesidade, foi possível induzir aumento significativo do peso e volume corporal, alem da redução da densidade corporal dos animais no grupo obeso. As avaliações de animais controles e obesos revelaram a influência significativa da densidade corporal na determinação das intensidades de exercício, principalmente quando as cargas foram expressas em valores absolutos. Estudos que fazem uso do modelo de natação para ratos, principalmente de caráter longitudinal...In the swimming model for rats, the association between the blood lactate concentration with the exercise intensity could be criticized once the workload quantification could not represent effectively the effort performed by the rat to keep himself on the surface, due to it be affected by the body density and the swimming patterns present by the animals. Thus, the mainly objective of this study was develop a apparatus for tethered swimming for rats, that allows the monitoring of swimming force during all exercise time and to verify the existence of different sorts of swimming patterns. 24 male rattus novergicus albinus, with 150 days of age were used, divided in control and obese induced animals by a nest reduction and hyper-lipid diet. All animals had their body density determined by hydrostatic weighing with an acquiring data device. Later the animals were evaluated in maximal lactate steady state test adapted to the tethered swimming. Was possible to induce significant weight and body volume increase in the obese group beside the reduction of the body density. The assessment of control and obese animals reveled significant body density influence in the workload determination, mainly when the workload was expressed in absolute values. Tethered swimming model allowed the investigation of statistic parameters of the data signal, which showed that the signal amplitude varied in function of the intensity, however the dispersion did not. Also the visual analyses of the force kinetic allowed the identification of 4 swimming patterns and the speculation about the reason and consequences of it incidence. Therefore animals that present such swimming patterns which can influence the assessment should be removed from the sample. Studies that make use of the swimming model for rats, mainly those of longitudinal duration or that make use of interventions that may change the animal’s body composition...(Complete abstract click electronic access below
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