108 research outputs found
Оптимизация диагностики и повышение эффективности лечения туберкулеза
No full textStructura tezei: introducere, șase capitole, concluzii, bibliografia din 307 surse, 29 de
figuri, 17 de tabele, Rezultatele studiului au fost publicate în 51 de lucrări științifice.
Cuvinte cheie: TB, MDR, diagnostic de laborator, M. tuberculosis, tratament
antituberculos.
Domeniul de studiu: Medicină generală. Pneumoftiziologie.
Scopul cercetării: Evaluarea intervențiilor clinice și de laborator cu potențial de optimizare
a diagnosticului și de eficientizare a tratamentului bolnavilor de tuberculoză.
Obiectivele cercetării: Aprecierea eficacității determinării răspunsului celular periferic
specific prin interferon-γ și interleukina-2 în diferențierea statutelor clinice ale infecției prin M.
tuberculosis; Evaluarea acurateței diagnostice a citirii automatizate a frotiurilor de microscopie în
colorație fluorescentă prin platforma Fluorobot în diagnosticul tuberculozei pulmonare la adulți;
Determinarea impactului implementării tehnicii GeneXpert MTB/Rif asupra managementului
terapeutic la bolnavii cu tuberculoză pulmonară mutlidrog rezistentă în Republica Moldova;
Determinarea rolului evaluării specimenelor de aspirat bronșic în diagnosticul tuberculozei
pulmonare la pacienții cu specimene paucibacilare ale sputei liber expectorate; Aprecierea
eficacității includerii badaquilinei în schemele de tratament al tuberculozei multidrog rezistente în
condițiile managementului programatic al bolnavilor de tuberculoză; Evaluarea raționalității
includerii izoniazidei în doze mari în schemele terapeutice utilizate la bolnavii cu tuberculoza
multidrog rezistentă; Aprecierea impactului funcției respiratorii la momentul diagnosticului asupra
rezultatelor tratamentului la bolnavii cu tuberculoză pulmonară; Evaluarea opțiunilor de apreciere
a rezultatelor tratamentului la bolnavii de tuberculoză.
Noutatea și originalitatea științifică. Noutatea cercetării este dată de evaluarea eficacității
aplicării de noi biomarkeri (profilul citokinic IL-2/INF-γ al limfocitelor din sângele periferic),
specimene alternative (aspirat bronșic) și soluții tehnologice originale (FluoroSpot, Fluorobot,
Xpert MTB/Rif) în scopul diagnosticării infecției tuberculoase în practica clinică. La fel, noutatea
studiului este asigurată de aprecierea eficacității și/sau raționalității aplicării în condițiile clinice
de rutină din cadrul sistemului de sănătate din Republica Moldova a unor medicamente noi precum
badaquilina sau dozelor mari de izoniazidă, de rând cu identificarea de noi factori predictivi ai
eficacității tratamentului antituberculos și aplicării unor abordări mai obiective, din punct de
vedere clinic, în aprecierea rezultatelor tratamentului antituberculos Rezultatele noi pentru știință și practică: Fluorospot - ul reprezintă o metodă alternativă
pentru diagnosticul infecției tuberculoase latente cu acuratețe diagnostică similară cu cea a
tehnicilor IGRA-EliSpot; Aplicarea tehnologiilor pe bază de deep learning algorithm precum
Fluorobotul permite citirea automatizată a frotiurilor microscopice în colorație fluorescentă cu o
acuratețea comparabilă cu cea obținută la citirea manuală; Aplicarea la scară națională a tehnicii
Xpert MTB/Rif în diagnosticul tuberculozei a permis reducerea întârzierii terapeutice de 6 ori la
bolnavii cu tuberculoză pulmonară MDR; Utilizarea specimenelor de aspirat bronșic testate prin
teste molecular-genetice (Xpert MTB/Rif) la bolnavii cu tuberculoză pulmonară cu
paucibacilaritate înaltă (microscopie și Xpert MTB/Rif negative în probele de spută liber
expectorată) permite confirmarea microbiologică adițională la o pătrime dintre acești bolnavi.;
Badaquilina utilizată în schemele de tratament la bolnavii cu tuberculoză MDR, inclusiv la cei cu
eșec a tratamentelor anterioare, în condițiile oferirii îngrijirilor medicale în mod programatic
asigură o rată înaltă de vindecare și reducerea mortalității; Rezistența față de izoniazidă la bolnavii
cu tuberculoză MDR în Republica Moldova este în majoritatea covârșitoare a cazurilor
determinată de mutații în gena katG (asociate cu niveluri înalte ale concentrațiilor minime
inhibitorii față de acest medicament), fapt care exclude administrarea empirică a dozelor mari de
izoniazidă (15-20 mg/kg) în schemele de tratament la acești bolnavi; Pattern-ul restrictiv al funcției
pulmonare la bolnavii cu tuberculoză pulmonară, apreciat la inițierea tratamentului antituberculos,
este un factor predicitv negativ, potențial modificabil, al rezultatelor tratamentului la bolnavii de
tuberculoză; Aprecierea rezultatelor tratamentului antituberculos după o perioadă de supraveghere
posterapie reprezintă o abordare mai rațională din punct de vedere clinic de evaluare a
tratamentului antituberculos, fezabilă în condițiile de îngrijire programatică a bolnavilor de
tuberculoză.
Semnificația teoretică. Cercetarea oferă argumentarea teoretică necesară luării deciziilor de
optimizare a algoritmelor diagnostice curente de confirmare a infecției tuberculoase prin
includerea potențială în acestea a testelor serologice de apreciere a INF-γ și IL-2 secretate de
limfocitele T, citirii automatizate a frotiurilor de microscopie în colorație fluorescentă și testării
prin teste molecular-genetice a specimenelor de aspirat bronșic la bolnavii cu spută paucibacilară.
Argumentarea intervențiilor menționate poate fi efectuată din perspectiva sensibilității,
specificității, raportului de probabilitate pozitivă și cel de probabilitate negativă demonstrate în
prezenta lucrare. La fel, a fost argumentat impactul implementării la nivel național a tehnicii Xpert
MTB/Rif prin aprecierea efectul global asupra reducerii întârzierii terapeutice la bolnavii cu
tuberculoză pulmonară MDR. În cardul evaluării intervențiilor de eficientizare a tratamentului
antituberculos a fost argumentată eficacitatea includerii în schemele de tratament în condiții
programatice la bolnavii cu tuberculoză MDR a badaquilinei prin demonstrarea unei rate de vindecarea mai mare și a mortalității mai reduse la utilizarea acestui medicament precum și
ineficacitatea includerii empirice (fără aprecierea determinatei genetice) a izoniazidei în doze mari
în schemele de tratament la bolnavii cu tuberculoză MDR. În același context, a fost argumentată
raționalitatea și fezabilitatea supravegherii postterapeutice în evaluarea rezultatelor tratamentului
antituberculos.
Valoarea aplicativă. Aplicarea intervențiilor evaluate în cadrul lucrării permite reducerea
întârzierii diagnostice la bolnavii cu tuberculoză pulmonară MDR, creșterea semnificativă a
confirmării microbiologice a tuberculozei pulmonare la bolnavii cu spută paucibacilară, precum și
optimizarea citirii frotiurilor de microscopie în colorație fluorescentă. La fel, utilizarea soluțiilor
terapeutice evaluate sunt eficiente în creșterea vindecării și reducerea ratei de mortalitate la
bolnavii cu tuberculoză MDR, precum și evitarea tratamentelor neargumentate cu doze mari de
izoniazidă cu potențial efect hepatotoxic la acești bolnavi. Utilizarea aprecierii eficacității
tratamentului după supravegherea postratament oferă o evaluare mai obiectivă din punct de vedere
clinic al eficacității terapeutice.
Implementarea rezultatelor științifice. Recomandările studiului sunt utilizate în procesul
didactic de pregătire a cadrelor medicale la Disciplina de Pneumologie și Alergologie, precum și
în secțiile de ftiziopneumologie a IMSP IFP “Chiril Draganiuc”. Au fost înregistrate 3 certificate
de inovator și 3 acte de implementare a rezultatelor.Структура диссертации: введение, шесть глав, выводы, библиография из 307
источников, 29 рисунков, 17 таблиц, результаты исследования опубликованы в 51 научной
работе.
Ключевые слова: ТБ, МЛУ, лабораторная диагностика, M. tuberculosis,
противотуберкулезное лечение.
Область исследования: Общая медицина. Фтизиопульмонология.
Цель исследования: Оценка клинических и лабораторных вмешательств, способных
оптимизировать диагностику и улучшить лечение больных туберкулезом.
Задачи исследования: Оценить эффективность определения специфического ответа
интерферона-γ и интерлейкина-2 периферических клеток в дифференциации клинического
статуса M. tuberculosis; Оценить диагностическую точность автоматизированного чтения
мазков в флуоресцентном окрашивании с помощью платформы Fluorobot в диагностике
туберкулеза легких у взрослых; Определить влияние внедрения методики GeneXpert
MTB/Rif на ведение пациентов с множественно лекарственно устойчивым туберкулезом
легких в Республике Молдова; Определить роль оценки образцов бронхиального аспирата
в диагностике туберкулеза легких у пациентов с малобациллярной мокротой; Оценка
эффективности включения бедакиллина в схемы лечения туберкулеза с множественной
лекарственной устойчивостью в контексте программного ведения больных туберкулезом;
Оценка рациональности включения высоких доз изониазида в схемы лечения пациентов с
туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью; Оценка влияния параметров
респираторной функции на результаты лечения пациентов с туберкулезом легких; Оценка
разных подходов определения результатов лечения у пациентов с туберкулезом.
Научная новизна и оригинальность. Новизна исследования заключается в оценке
эффективности применения новых биомаркеров (IL-2/INF-γ цитокиновый профиль
лимфоцитов периферической крови), альтернативных образцов (бронхиальный аспират) и
оригинальных технологических решений (FluoroSpot, Fluorobot, Xpert MTB/Rif) для
диагностики туберкулезной инфекции в клинической практике. Также новизна
исследования заключается в оценке эффективности и/или рациональности применения в
повседневных клинических условиях в рамках системы здравоохранения Республики
Молдова новых препаратов, таких как бедакилин или изониазида в высоких дозах. В том
числе новизна обусловлена выявлением новых предикторов эффективности противотуберкулезного лечения и применением более объективных, с клинической точки
зрения, подходов в оценке результатов противотуберкулезного лечения.
Новые результаты для науки и практики: Fluorospot представляет собой
альтернативный метод диагностики латентной туберкулезной инфекции с диагностической
точностью, сходной с точностью методов IGRA-EliSpot; Применение технологий на основе
алгоритмов глубокого обучения, таких как Fluorobot, позволяет автоматизированное чтение
микроскопических мазков в флуоресцентном окрашивании с точностью, сравнимой с
точностью, получаемой при ручном чтении; Общенациональное внедрение метода Xpert
MTB/Rif в диагностике туберкулеза позволило в 6 раз сократить задержку терапии у
пациентов с МЛУ туберкулезом легких; Использование образцов бронхиального аспирата,
протестированных молекулярно-генетическими тестами (Xpert MTB/Rif) у пациентов с
туберкулезом легких малобацилярной мокротой (микроскопия и Xpert MTB/Rif
отрицательны) позволяет получить дополнительное микробиологическое подтверждение
заболевания у четверти этих пациентов; Использование бедакилина в схемах лечения
пациентов с МЛУ ТБ, включая тех, кто ранее не получал лечения, при программном
оказании помощи обеспечивает высокий процент излечения и снижение смертности;
Резистентность к изониазиду у больных МЛУ ТБ в Республике Молдова в подавляющем
большинстве случаев обусловлена мутациями в гене katG (ассоциированными с высокими
уровнями минимальных ингибирующими концентрациями этого препарата), что исключает
эмпирическое назначение высоких доз изониазида (15-20 мг/кг) в схемах лечения этих
пациентов; Рестриктивный паттерн функции легких у пациентов с туберкулезом легких,
оцененный в начале противотуберкулезного лечения, является потенциально
модифицируемым негативным предиктором результатов лечения пациентов с
туберкулезом; Оценка результатов противотуберкулезного лечения после периода
постлечебнаго наблюдения является более клинически рациональным подходом в оценке
противотуберкулезного лечения, осуществимым в условиях программного ведения
пациентов с туберкулезом.
Теоретическая значимость. Исследование дает теоретическое обоснование для
принятия решений по оптимизации текущих диагностических алгоритмов подтверждения
туберкулезной инфекции путем потенциального включения серологических анализов для
оценки INF-γ и IL-2, секретируемых Т-лимфоцитами, автоматизированного чтения
микроскопии мазков в флуоресцентной окраски, и молекулярно-генетического
тестирования образцов бронхиального аспирата у пациентов с малобациллярной мокротой.
В представленной работе аргументация указанных вмешательств проведена с точки зрения
чувствительности, специфичности, отношениях правдоподобия положительного и отрицательного результатов. Также, в диссертации было доказанно положительный эффект
общенационального внедрения метода Xpert MTB/Rif на ведение больных с туберкулезом
путем оценки общего влияния на снижение задержки терапии у пациентов с МЛУ
туберкулезом. При оценке мероприятий по повышению эффективности лечения
туберкулёза эффективность таких как включения бедакилина в схемы лечения в
программных условиях у больных с МЛУ туберкулезом были доказанны более высокая
частота излечения и более низкая смертность при использовании этого препарата, а также
неэффективность, эмпирического включения (без оценки генетических детерминант),
высоких доз изониазида в схемы лечения больных МЛУ туберкулёзом. В этом же контексте
была аргументирована рациональность и целесообразность постлечебного наблюдения при
оценке результатов лечения туберкулёза.
Практическое значимость. Внедрение интервенций, исследованных в данной
работе, позволяет сократить диагностическую задержку у пациентов с МЛУ туберкулезом
легких, значительно увеличить микробиологическое подтверждение туберкулеза легких у
пациентов с малобациллярной мокротой и оптимизировать чтение микроскопии мазков в
флуоресцентной окраске. Также, использование исследованных терапевтических
вмешательств эффективно для увеличения излечения и снижения смертности у пациентов
с МЛУ туберкулёзом, а также позволяет избежать неоправданного лечения высокими
дозами изониазида с потенциальным гепатотоксическим эффектом у больных
туберкулёзом. Использование оценки эффективности лечения после постлечебного
наблюдения обеспечивает более объективную, с клинической точки зрения, оценку
эффективности лечения.
Внедрение результатов. Научно-практические результаты исследования
используются в учебном процессе на Кафедре Пульмонологии и Аллергологии ГУМФ
«Николае Тестемицану», а также в отделениях Института фтизиопульмонологии "Кирилл
Драганюк". По результатам работы зарегистрировано 3 сертификата рационализации и 3
акта внедрения результатов.Thesis structure: introduction, six chapters, conclusions, bibliography containing 307
sources, 29 figures, 17 tables, results of the study were published in 51 scientific papers.
Keywords: TB, MDR, laboratory diagnosis, M. tuberculosis, antituberculosis treatment.
Field of study: General medicine. Pulmonology.
Research aim: Evaluation of clinical and laboratory interventions with the potential to
optimise diagnosis and to improve treatment of tuberculosis patients.
Research objectives: To assess efficacy of assessment of the interferon-γ and interleukin-2
peripheral cell response in differentiating the clinical statuses of M. tuberculosis infection; To
assess the diagnostic accuracy of automated reading by Fluorobot platform of the fluorescent
stained smears in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in adults; To determine the impact of
the implementation of GeneXpert MTB/Rif technique on the therapeutic management of patients
with mutlidrug-resistant pulmonary tuberculosis in the Republic of Moldova; To determine the
role of bronchial aspirate specimen evaluation in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in
patients with paucibacillary free expectorated sputum specimens; To assess the effectiveness of
including bedaquiline in multidrug-resistant tuberculosis treatment regimens in the conditions of
programmatic management of tuberculosis patients; To assess the rationality of including highdose isoniazid in treatment regimens used in patients with multidrug-resistant tuberculosis in the
Republic of Moldova; To determine the impact of respiratory function assessed at diagnosis on
treatment outcomes in patients with pulmonary tuberculosis; To evaluate alternative approaches
in assessment of treatment outcomes in tuberculosis patients.
Scientific novelty and originality. The novelty of the research is given by the evaluation of
the efficacy of applying new biomarkers (IL-2/INF-γ cytokine profile of peripheral blood
lymphocytes), alternative specimens (bronchial aspirate) and original technological solutions
(FluoroSpot, Fluorobot, Xpert MTB/Rif) for the diagnosis of tuberculosis infection in clinical
practice. Similarly, the novelty of the study is provided by the assessment of the effectiveness
and/or rationality of the application in routine clinical conditions in the health system of the
Republic of Moldova of new drugs such as bedaquiline or high-dose isoniazid, together with the
identification of new predictors of the effectiveness of antituberculosis treatment and the
application of more objective approaches, from a clinical point of view, in the assessment of
antituberculosis treatment outcomes. New results for science and practice: Fluorospot represents an alternative method for the
diagnosis of latent tuberculosis infection with diagnostic accuracy similar to that of IGRA-EliSpot
techniques; Application of deep learning algorithm-based technologies such as Fluorobot allows
automated reading of microscopic smears in fluorescent staining with an accuracy comparable to
that obtained at manual reading; Nationwide application of the Xpert MTB/Rif technique in the
diagnosis of tuberculosis has allowed a 6-fold reduction in therapeutic delay in patients with MDR
pulmonary tuberculosis; The use of bronchial aspirate specimens tested by molecular-genetic tests
(Xpert MTB/Rif) in patients with pulmonary tuberculosis with highly paucibacillary sputum
(microscopy and Xpert MTB/Rif negative) allows additional microbiological confirmation in a
quarter of these patients; Bedaquiline used in treatment regimens in patients with MDR
tuberculosis, including those with previous treatment failure, under programmatic care delivery
ensures a high cure rate and reduced mortality; Resistance to isoniazid in MDR tuberculosis
patients in the Republic of Moldova is overwhelmingly due to mutations in the katG gene
(associated with high levels of minimum inhibitory concentrations against this drug), which
precludes empirical administration of high doses of isoniazid (15-20 mg/kg) in treatment regimens
for these patients; Restrictive pattern of pulmonary function in patients with pulmonary
tuberculosis, assessed at initiation of antituberculosis treatment, is a potentially modifiable
negative predictor of treatment outcome in patients with tuberculosis; Assessment of
antituberculosis treatment outcome after a period of post-therapy surveillance is a more rational
approach to antituberculosis treatment evaluation, feasible in conditions of programmatic care of
tuberculosis patients.
Theoretical significance. The research provides the rationale for decisions on optimisation
of current diagnostic algorithms on diagnosis of M. tuberculosis infection by potentially including
serological assays to assess INF-γ and IL-2 secreted by T lymphocytes, automated reading of
microscopy of fluorescent stained smears and molecular-genetic testing of bronchial aspirate
specimens in patients with paucibacillary sputum. Argumentation of the mentioned interventions
is done considering sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratios. Similarly, the
impact of the nationwide implementation of the Xpert MTB/Rif technique has been argued by
assessing the overall effect on reducing therapeutic delay in patients with MDR pulmonary
tuberculosis. In the evaluation of interventions for the improvement of tuberculosis treatment, was
argued the effectiveness of including bedaquiline in treatment regimens under programmatic
conditions in MDR tuberculosis patients by demonstrating a higher cure rate and lower mortality
when using this drug, and the ineffectiveness of empirical inclusion (without assessment of genetic
determinants) of high-dose isoniazid in treatment regimens in MDR tuberculosis patients. In the same context, the rationality and feasibility of post-therapy surveillance in assessing TB treatment
outcomes was argued.
Applicative value. The application of the interventions evaluated in this work allows to
reduce the diagnostic delay in patients with MDR pulmonary tuberculosis, to significantly increase
the microbiological confirmation of pulmonary tuberculosis in patients with paucibacillary
sputum, and to optimize the reading of fluorescent stained smears. Likewise, the use of the
evaluated therapeutic solutions has been shown to be effective in increasing cure rate and reducing
mortality rate in MDR tuberculosis patients, as well as avoiding empirical use of high-dose
isoniazid treatments with potential hepatotoxic effect in these patients. The use of treatment
assessment after post-treatment surveillance provides have been shown to be more, from clinical
point of view, for the assessment of therapeutic efficacy.
Implementation of scientific results. The theoretical and practical results of the study are
used in training of medical students at the Department of Pulmonology and Allergology, as well
as in the departments of "Chiril Draganiuc" Phthisiopneumology Institute. There were registered
3 certificates of innovator and 3 acts of implementation of results
Optimisation of the diagnosis and improvement of the treatment of tuberculosis: Summary of the habitation thesis in medical sciences: 321.07 – Phthisiopneumology
No full textThesis structure: introduction, six chapters, conclusions, bibliography
containing 307 sources, 29 figures, 17 tables, results of the study were published in
51 scientific papers.
Keywords: TB, MDR, laboratory diagnosis, M. tuberculosis,
antituberculosis treatment.
Field of study: General medicine. Pulmonology.
Research aim: Evaluation of clinical and laboratory interventions with the
potential to optimise diagnosis and to improve treatment of tuberculosis patients.
Research objectives: To assess efficacy of determination of the
interferon-γ and interleukin-2 peripheral cell response in differentiating the clinical
statuses of M. tuberculosis infection; To assess the diagnostic accuracy of automated
reading by Fluorobot platform of the fluorescent stained smears in the diagnosis of
pulmonary tuberculosis in adults; To determine the impact of the implementation of
GeneXpert MTB/Rif technique, on the therapeutic management of patients with
mutlidrug-resistant pulmonary tuberculosis in the Republic of Moldova; To
determine the added value of the bronchial aspirate specimen testing in the diagnosis
of pulmonary tuberculosis in patients with paucibacillary free expectorated sputum
specimens; To assess the effectiveness of including bedaquiline in multidrugresistant tuberculosis treatment regimens in the conditions of programmatic
management of tuberculosis patients; To assess the rationality of including high-dose
isoniazid in treatment regimens used in patients with multidrug-resistant
tuberculosis in the Republic of Moldova; To determine the impact of respiratory
function, assessed at diagnosis, on treatment outcomes in patients with pulmonary
tuberculosis; To evaluate alternative approaches in assessment of treatment
outcomes in tuberculosis patients.
Scientific novelty and originality.
The novelty of the research is given by the evaluation of the efficacy of
applying new biomarkers (IL-2/INF-γ cytokine profile of peripheral blood
lymphocytes), alternative specimens (bronchial aspirate) and original technological
solutions (FluoroSpot, Fluorobot, Xpert MTB/Rif) for the diagnosis of tuberculosis
in clinical practice. Similarly, the novelty of the study is ensured by the assessment
of the effectiveness and/or rationality of the application in routine clinical conditions in the healthcare system of the Republic of Moldova of new drugs such as
bedaquiline or high-dose isoniazid, together with the identification of new predictors
of the effectiveness of antituberculosis treatment and the application of more
objective approaches, from a clinical point of view, in the assessment of
antituberculosis treatment outcomes.
Results that led to the solution of a major scientific or applied problem.
Fluorospot represents an alternative method for the diagnosis of latent tuberculosis
infection with a diagnostic accuracy like that of EliSpot-IGRA techniques;
Application of deep learning algorithm-based technologies such as Fluorobot allows
automated reading of microscopic smears in fluorescent staining with an accuracy
comparable to that obtained at manual reading; Nationwide application of the Xpert
MTB/Rif technique in the diagnosis of tuberculosis has allowed a 6-fold reduction
in therapeutic delay in patients with MDR pulmonary tuberculosis; The use of
bronchial aspirate specimens tested by molecular-genetic tests (Xpert MTB/Rif) in
patients with pulmonary tuberculosis with highly paucibacillary sputum
(microscopy and Xpert MTB/Rif negative) allows additional microbiological
confirmation in a quarter of these patients; Bedaquiline used in treatment regimens
in patients with MDR tuberculosis, including those with previous treatment failure,
under programmatic care delivery ensures a high cure rate and reduced mortality;
Resistance to isoniazid in MDR tuberculosis patients in the Republic of Moldova is
overwhelmingly due to mutations in the katG gene (associated with high levels of
minimum inhibitory concentrations against this drug), which precludes empirical
administration of high doses of isoniazid (15-20 mg/kg) in treatment regimens for
these patients; Restrictive pattern of pulmonary function in patients with pulmonary
tuberculosis, assessed at initiation of antituberculosis treatment, is a potentially
modifiable predictor of negative treatment outcome in patients with pulmonary
tuberculosis; Assessment of antituberculosis treatment outcome after a period of
post-therapy surveillance is a more rational approach to antituberculosis treatment
evaluation, feasible in conditions of programmatic care of tuberculosis patients.
Theoretical significance.
The research provides the rationale on optimisation of current diagnostic
algorithms on diagnosis of M. tuberculosis infection by potentially including
serological assays to assess INF-γ and IL-2 secreted by T lymphocytes, automated
reading of microscopy of fluorescent stained smears and molecular-genetic testing
of bronchial aspirate specimens in patients with paucibacillary sputum.
Argumentation of the usefulness of the mentioned interventions is performed
considering sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratios. Similarly, the impact of the nationwide implementation of the Xpert MTB/Rif technique has
been argued by assessing the overall effect on reducing therapeutic delay in patients
with MDR pulmonary tuberculosis. As part of the valuation of interventions for the
improvement of tuberculosis treatment, was argued the effectiveness of including
bedaquiline in treatment regimens under programmatic conditions in MDR-TB
patients by demonstrating a higher cure rate and lower mortality when using this
drug, and the ineffectiveness of empirical inclusion (without assessment of genetic
determinants) of high-dose isoniazid in treatment regimens in MDR tuberculosis
patients. In the same context, the rationality and feasibility of post-therapy
surveillance in assessing TB treatment outcomes was argued.
Applicative value.
The application of the interventions evaluated in this work allows to
reduce the diagnostic delay in patients with MDR pulmonary tuberculosis,
significantly to increase the microbiological confirmation of pulmonary tuberculosis
in patients with paucibacillary sputum, and to optimize the reading of fluorescent
stained smears. Likewise, the use of the evaluated therapeutic solutions has been
shown to be effective in increasing cure rate and reducing mortality rate in MDR
tuberculosis patients, as well as avoiding irrational empirical use of high-dose
isoniazid treatments with potential hepatotoxic effect in these patients. The use of
treatment assessment after post-treatment surveillance have been shown to be more
rational, from clinical point of view, for the assessment of therapeutic efficacy.
Implementation of scientific results.
The theoretical and practical results of the study are used in training of
medical students at the Department of Pulmonology and Allergology, as well as in
the clinical departments of "Chiril Draganiuc" Phtisiopneumology Institute. There
were registered 3 certificates of innovator and 3 acts of implementation of results
Optimizarea diagnosticului și eficientizarea tratamentului tuberculozei: Rezumatul tezei de doctor habilitat în științe medicale: 321.07 - Ftiziopneumologie
No full textStructura tezei: introducere, șase capitole, concluzii, bibliografia din 307
surse, 29 de figuri, 17 de tabele, Rezultatele studiului au fost publicate în 51 de
lucrări științifice.
Cuvinte cheie: TB, MDR, diagnostic de laborator, M. tuberculosis, tratament
antituberculos.
Domeniul de studiu: Medicină generală. Pneumoftiziologie.
Scopul cercetării: Evaluarea intervențiilor clinice și de laborator cu potențial
de optimizare a diagnosticului și de eficientizare a tratamentului bolnavilor de
tuberculoză.
Obiectivele cercetării: Aprecierea eficacității determinării răspunsului
celular periferic specific prin interferon-γ și interleukina-2 în diferențierea statutelor
clinice ale infecției prin M. tuberculosis; Evaluarea acurateței diagnostice a citirii
automatizate a frotiurilor de microscopie în colorație fluorescentă prin platforma
Fluorobot în diagnosticul tuberculozei pulmonare la adulți; Determinarea impactului
implementării tehnicii GeneXpert MTB/Rif asupra managementului terapeutic la
bolnavii cu tuberculoză pulmonară mutlidrog rezistentă în Republica Moldova;
Determinarea rolului evaluării specimenelor de aspirat bronșic în diagnosticul
tuberculozei pulmonare la pacienții cu specimene paucibacilare ale sputei liber
expectorate; Aprecierea eficacității includerii bedaquilinei în schemele de tratament
al tuberculozei multidrog rezistente în condițiile managementului programatic al
bolnavilor de tuberculoză; Evaluarea raționalității includerii izoniazidei în doze mari
în schemele terapeutice utilizate la bolnavii cu tuberculoza multidrog rezistentă;
Aprecierea impactului funcției respiratorii la momentul diagnosticului asupra
rezultatelor tratamentului la bolnavii cu tuberculoză pulmonară; Evaluarea
opțiunilor de apreciere a rezultatelor tratamentului la bolnavii de tuberculoză.
Noutatea și originalitatea științifică. Noutatea cercetării este dată de
evaluarea eficacității aplicării de noi biomarkeri (profilul citokinic IL-2/INF-γ al
limfocitelor din sângele periferic), specimene alternative (aspirat bronșic) și soluții
tehnologice originale (FluoroSpot, Fluorobot, Xpert MTB/Rif) în scopul
diagnosticării infecției tuberculoase în practica clinică. La fel, noutatea studiului este
asigurată de aprecierea eficacității și/sau raționalității aplicării în condițiile clinice
de rutină din cadrul sistemului de sănătate din Republica Moldova a unor
medicamente noi precum bedaquilina sau dozelor mari de izoniazidă, de rând cu
identificarea de noi factori predictivi ai eficacității tratamentului antituberculos și
aplicării unor abordări mai obiective, din punct de vedere clinic, în aprecierea
rezultatelor tratamentului antituberculos.
Rezultatele noi pentru știință și practică: Fluorospot - ul reprezintă o
metodă alternativă pentru diagnosticul infecției tuberculoase latente cu acuratețe
44
diagnostică similară cu cea a tehnicilor EliSpot-IGRA; Aplicarea tehnologiilor pe
bază de deep learning algorithm precum Fluorobotul permite citirea automatizată a
frotiurilor microscopice în colorație fluorescentă cu o acuratețea comparabilă cu cea
obținută la citirea manuală; Aplicarea la scară națională a tehnicii Xpert MTB/Rif în
diagnosticul tuberculozei a permis reducerea întârzierii terapeutice de 6 ori la
bolnavii cu tuberculoză pulmonară MDR; Utilizarea specimenelor de aspirat bronșic
testate prin teste molecular-genetice (Xpert MTB/Rif) la bolnavii cu tuberculoză
pulmonară cu paucibacilaritate înaltă (microscopie și Xpert MTB/Rif negative în
probele de spută liber expectorată) permite confirmarea microbiologică adițională la
o pătrime dintre acești bolnavi.; Bedaquilina utilizată în schemele de tratament la
bolnavii cu tuberculoză MDR, inclusiv la cei cu eșec a tratamentelor anterioare, în
condițiile oferirii îngrijirilor medicale în mod programatic asigură o rată înaltă de
vindecare și reducerea mortalității; Rezistența față de izoniazidă la bolnavii cu
tuberculoză MDR în Republica Moldova este în majoritatea covârșitoare a cazurilor
determinată de mutații în gena katG (asociate cu niveluri înalte ale concentrațiilor
minime inhibitorii față de acest medicament), fapt care exclude administrarea
empirică a dozelor mari de izoniazidă (15-20 mg/kg) în schemele de tratament la
acești bolnavi; Pattern-ul restrictiv al funcției pulmonare la bolnavii cu tuberculoză
pulmonară, apreciat la inițierea tratamentului antituberculos, este un factor predictiv
negativ, potențial modificabil, al rezultatelor tratamentului la bolnavii de
tuberculoză; Aprecierea rezultatelor tratamentului antituberculos după o perioadă de
supraveghere posterapie reprezintă o abordare mai rațională din punct de vedere
clinic de evaluare a tratamentului antituberculos, fezabilă în condițiile de îngrijire
programatică a bolnavilor de tuberculoză.
Semnificația teoretică. Cercetarea oferă argumentarea teoretică necesară
luării deciziilor de optimizare a algoritmelor diagnostice curente de confirmare a
infecției tuberculoase prin includerea potențială în acestea a testelor serologice de
apreciere a INF-γ și IL-2 secretate de limfocitele T, citirii automatizate a frotiurilor
de microscopie în colorație fluorescentă și testării prin teste molecular-genetice a
specimenelor de aspirat bronșic la bolnavii cu spută paucibacilară. Argumentarea
intervențiilor menționate poate fi efectuată din perspectiva sensibilității,
specificității, raportului de probabilitate pozitivă și cel de probabilitate negativă
demonstrate în prezenta lucrare. La fel, a fost argumentat impactul implementării la
nivel național a tehnicii Xpert MTB/Rif prin aprecierea efectul global asupra
reducerii întârzierii terapeutice la bolnavii cu tuberculoză pulmonară MDR. În cardul
evaluării intervențiilor de eficientizare a tratamentului antituberculos a fost
argumentată eficacitatea includerii în schemele de tratament în condiții programatice
la bolnavii cu tuberculoză MDR a bedaquilinei prin demonstrarea unei rate de
vindecarea mai mare și a mortalității mai reduse la utilizarea acestui medicament
precum și ineficacitatea includerii empirice (fără aprecierea determinatei genetice) a
izoniazidei în doze mari în schemele de tratament la bolnavii cu tuberculoză MDR.
45
În același context, a fost argumentată raționalitatea și fezabilitatea supravegherii
postterapeutice în evaluarea rezultatelor tratamentului antituberculos.
Valoarea aplicativă. Aplicarea intervențiilor evaluate în cadrul lucrării
permite reducerea întârzierii diagnostice la bolnavii cu tuberculoză pulmonară
MDR, creșterea semnificativă a confirmării microbiologice a tuberculozei
pulmonare la bolnavii cu spută paucibacilară, precum și optimizarea citirii frotiurilor
de microscopie în colorație fluorescentă. La fel, utilizarea soluțiilor terapeutice
evaluate sunt eficiente în creșterea vindecării și reducerea ratei de mortalitate la
bolnavii cu tuberculoză MDR, precum și evitarea tratamentelor neargumentate cu
doze mari de izoniazidă cu potențial efect hepatotoxic la acești bolnavi. Utilizarea
aprecierii eficacității tratamentului după supravegherea post-tratament oferă o
evaluare mai obiectivă din punct de vedere clinic al eficacității terapeutice.
Implementarea rezultatelor științifice. Recomandările studiului sunt
utilizate în procesul didactic de pregătire a cadrelor medicale la Disciplina de
Pneumologie și Alergologie, precum și în secțiile de ftiziopneumologie a IMSP IFP
“Chiril Draganiuc”. Au fost înregistrate 3 certificate de inovator și 3 acte de
implementare a rezultatelor
Infecţia gripală 2009 A H1N1 ca factor de risc pentru resorbţia lentă a infiltratelor pulmonare din pneumonia comunitară
No full textÎn lucrare a fost studiată dinamica resorbţiei infiltratelor
pulmonare în pneumoniile asociate gripei 2009 A H1N1 şi comparată cu cea din pneumoniile comunitare non-H1N1. În rezultat a fost demonstrată resorbţia mai lentă a modifi cărilor radiografi ce la pacienţii cu pneumonii H1N1 şi rolul infecţiei gripale 2009 A H1N1 ca factor de risc independent pentru resorbţia tardivă
To predict influenza related pneumonia - a continuous challenge during pandemics
No full textBackground: The last influenza pandemic showed the importance of the early beginning of antiviral
therapy for a successful outcome of influenza related to pneumonia (IRP). Thus the ability to differentiate the influenza pneumonia from the bacterial one, during the first hours after the patients admission,
is crucial for further management of the case. A study was performed to investigate whether adults with
severe pneumonia could be distinguished clinically form patients with n o n - H ^ community acquired pneumonia (CAP).
Methods: Clinical and epidemiological data of 75 adults admitted for severe H Nj IRP were compared with a prospective study cohort of 127 adults with severe n o n - H ^ CAP admitted during interpandemic period. A multivariate logistic regression model was generated for prediction of H N influenza related pneumonia.
Results: In-hospital mortality in both cohorts was pretty similar, to 20% in H N | IRP cohort compared with 19,7% in n o n - H ^ CAP cohort. A diagnostic prediction model was derived by assessing one
point for each of the seven criteria: demographic (age< 65 years), clinical (presence of myalgia/arthralgia, absence of hypotension, absence of pathological bronchial breathing), laboratory (leucocyte count
< 12*109/1) and radiological (presence of bilateral involvement, extension to superior pulmonary areas).
The threshold yield of the model was obtained for 4 points value of that, with a negative predictive value
of 92,4% and 88% of sensibility.Accuracy of the obtained model was appreciated using the value of area
under receiver operatingcurve, which corresponds to a very good one - 0,93 (95%CI 0,89 - 0,96).
Conclusion: There are substantial clinical differences between HjNpnfluenza related to pneumonia
and inter-pandemic CAP. A model based on seven accessible criteria allows the early identification of
adults with severe influenza related pneumonia
2009 AH1N1 - associated pneumonia, clinical, microbiological and pathological analysis of 15 fatal cases
No full textThe objective of the study was to describe clinicopathological, microbiological and
radiological characteristics of 15 patients who died following 2009 AH1N1 - associated pneumonia.
As materials and methods were reviewed clinical, radiological, microbological, and pathological
datas (with emphasis on the pulmonary pathology findings) of 15 fatal cases of 2009 A I41N1
associated pneumonia hospitalised between November 2009 and January 2010 in Republican Clinical
Hospital (RCH), Chisinau, Republic of Moldova. Most of the 15 decedents - 13 (86,6%) - were
women (2 of whom were pregnant and 2 postpregnant). The mean age in the reviewed cases was 37,4 years. Comorbidities were presents in 10 cases, most frequent being hypertension (6 cases) and
obesity (4 cases). The mean time from onset of symptoms to admission RCH was 6,5 days (range 3
13). The mean time from onset of symptoms to death, and from hospitalization to death was
16,91 (range 3-27 days) and 10,39 days (range 3 hours-23 days) days respectively. All patients had
clinical criteria for SDRA and required mechanical ventilation during the first 24 hours of
hospitalization. Chest radiographs demonstrated, in all cases, bilateral, confluent, patchy opacities
with subtotal or total extent. In 3 cases was detected spontaneous pneumotorax. Bacteriological exam
in 7 of 8 sputum specimen revealed Pseudomonas aeruginosa. Histopathologic changes consist of
focal to extensive diffuse alveolar damage (DAD) in 12 patients often associated with marked hyaline
membrane formation. Four of these 12 DAD cases showed only acute DAD. Three of 12 cases
showed acute and organizing DAD. Five of 12 cases had fibrosing and organizing DAD. Autopsy
evidence of mixed bronchopneumonia (viral + bacterial), predominantly with total extent, were
observed in all decedents. In 11 cases was present predominantly a purulent exudate and in 4 cases -
predominantly hemorrhagic. Acute desquamative tracheobronchitis was observed in all patients. In 10
of these cases was found a serohemorrhagic component, in 3 cases a fibrinopurulent component and
necrotizing one in 2 cases. Desquamative bronchiolitis with metaplasia of bronchial epithelium were
observed in 3 cases. Serofibrinous pleurisy was found in 6 decedents. In conclusion we say that
pulmonary pathological changes in fatal cases, caused by 2009 A H1N1 influenza virus, were similar
to those described in the past pandemics. Superimposed bacterial infection of the respiratory tract
was common. Comorbidities and pregnancy can be risk factors for death
Particularităţile infecţiei tuberculoase în condiţiile creşterii incidenţei rezistenţei la medicamente în Republica Moldova
No full textConferinţa naţională în medicina internă din Republica Moldova cu participare internaţională, 19-20 mai 2011, Chişinău, Republica MoldovaSummary. Republic of Moldova (RM) is among countries
with the highest burden of tuberculosis (TB) in
European region. Results of the implementation, of
few national TB programs suggest the necessity to find
new approaches in control of tuberculosis. We have
hypothesized that the burden of TB differs significantly
in different districts of RM thus different regions could
require different efforts for TB control. We designed
this study to identify epidemiological differences of TB
infection in different regions of RM.Introducere. Republica Moldova se situează
printre ţările cu cea mai mare povară a tuberculozei
în regiunea europeană. Deşi pe parcursul ultimilor
ani s-au implementat mai multe programe naţionale
de control al tuberculozei, rezultatele obţinute în
cadrul acestora sugerează necesitatea găsirii unor
noi abordări, în vederea diminuării impactului infecţiei
tuberculoase.
Scopul lucrării: studierea particularităţilor
demografico-teritoriale ale dinamicii indicatorilor
epidemiologici ai tuberculozei în RM, în vederea
stabilirii direcţiilor prioritare de implementare a
măsurilor de control al tuberculozei.
Material şi metode. În studiu au fost analizate
datele Sistemului informaţional de monitorizare şi
evaluare a tuberculozei (SIME TB) din RM, colectate în
perioada 2006-2010. Au fost studiate particularităţile distribuţiei teritoriale, caracteristicile demografice şi
dinamica principalilor indici epidemiologici.
Rezultate. Analiza datelor existente a pus în
evidenţă diferenţe semnificative a principalilor indici
epidemiologici în diferite teritorii ale RM. Creşterea
continuă, pe parcursul ultimilor ani, a incidenţei cazurilor
de tuberculoză multidrogrezistentă a înregistrat
ritmuri diferite în raioanele republicii, în unele teritorii
acestea având un trend invers celui al tuberculozei
sensibile. Pe parcursul perioadei analizate, în structura
morbidităţii şi mortalităţii prin tuberculoză au
predominat persoanele tinere apte de muncă, o cotă
semnificativă dintre acestea revenindu-le femeilor în
vârstă reproductivă. Dinamica principalilor indicatori
epidemiologici ai infecţiei tuberculoase, în ultimii
ani, este una mult prea lentă pentru asigurarea unui
control eficient al tuberculozei, în ţară s-a înregistrat
chiar o uşoară dinamică pozitivă a acestora.
Concluzii. Tuberculoza rămâne o problemă
majoră de sănătate publică. Diferenţele principalilor
indicatori epidemiologici ai infecţiei tuberculoase în
diferite regiuni ale republicii sugerează necesitatea
abordării diferite a măsurilor de control al tuberculozei
în diferite teritorii, cu focalizarea în special pe
cele cu o povară maximă a tuberculozei
Compensatory mutations associated with multidrug-resistant M. tuberculosis strains in the Republic of Moldova
No full textUniversitatea de Stat de Medicină şi Farmacie „Nicolae Testemiţanu”, Chişinău, Republica MoldovaIntroducere. Mutațiile care conferă rezistență la medicamentele antituberculoase ar putea determina o creștere mai lentă și o adaptabilitate mai redusă a tulpinilor de M. tu berculosis complex . Bacteriile reușesc să acumuleze mutații secundare (mutații compensatorii - MC) care contribuie la restabilirea cel puțin parțială a funcțiilor compromise. Scopul lucrării. De a descrie spectrul MC în liniile genotipice de Mycobacterium tuberculosis complex multi-drog rezistente (MTBC MDR) circulante în Republica Moldova (RM). Material și metode. A fost realizată secvențierea întregului genom (WGS) a unui set de tulpini de MTBC MDR stocate în Biobanca Laboratorului național de referință în tuberculoză din RM izolate în anul 2018. În baza datelor de secvențiere a fost caracterizat spectrul mutațiilor compensatorii asociate mutațiilor din gena rpoB, care determină rezistența la rifampicină. Rezultate. În studiu au fost incluse 137 de tulpini MTBC MDR. Conform datelor WGS acestea au aparținut liniilor genotipice L2 - 58,4% și L4 41,6%. 86,1% (118/137) dintre tulpinile analizate au avut cel puțin câte o mutație compensatorie în una dintre genele rpoA (5,1%), rpoB (5,9%) și rpoC (81,7%). Dintre tulpinile L4 90,2% (46/51) au prezentat aceeași mutație compensatorie V483G (gtg/gGg) în gena rpoC. În același timp, tulpinile L2 au fost caracterizate de o eterogenitate semnificativă a mutațiilor compensatorii din rpoC (10 mutații diferite), cele mai frecvente fiind I491V (atc/Gtc) - 23,7% (19/80) și E1137G (gag/gGg) - 11,3% (9/80). Mutațiile compensatorii din gena rpoA au fost identificate exclusiv la tulpinile L2, cea mai frecventă mutație (66,7%) fiind E184D (gag/gaT). Con cluzii. Majoritatea tulpinilor MTBC MDR din RM prezintă mutațiilor compensatorii cu diferențe semnificative între cele 2 linii genotipice L2 și L4.Introduction. Mutations that confer resistance to antitu berculosis drugs may lead to slower growth and reduced adaptability of Mycobacterium tuberculosis complex strains. Bacteria can accumulate secondary mutations (compensatory mutations - CM) that help restore at least partially the compromised functions. Aim of the study. To describe the spectrum of CMs in the genotypic lines of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC MDR) circulating in the Republic of Moldova (RM). Material and methods. Whole genome sequencing (WGS) was performed on a set of MTBC MDR strains stored in the Biobank of the National Tuberculosis Reference Laboratory in RM, isolated in 2018. Based on sequencing data, the spectrum of compensatory mutations associated with mutations in the rpoB gene, which determine rifampicin resistance, was characterized. Results. The study included 137 MTBC MDR strains. According to WGS data, they belonged to genotypic lines L2 - 58.4% and L4 - 41.6%. 86.1% (118/137) of the analyzed strains had at least one compensatory mutation in one of the rpoA (5.1%), rpoB (5.9%), and rpoC (81.7%) genes. Among the L4 strains, 90.2% (46/51) exhibited the same compensatory mutation V483G (gtg/gGg) in the rpoC gene. At the same time, L2 strains were characterized by sig nificant heterogeneity of compensatory mutations in rpoC (10 different mutations), the most frequent being I491V (atc/Gtc) - 23.7% (19/80) and E1137G (gag/gGg) - 11.3% (9/80). Compensatory mutations in the rpoA gene were identified exclusively in L2 strains, the most frequent mutation (66.7%) being E184D (gag/gaT). Conclusions. The majority of MTBC MDR strains from RM exhibit compensatory mutations with significant differences between the two genotypic lines L2 and L4
- …
