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リソソームの崩壊機構とGTP結合蛋白質
Get PDFリソソーム指向性の塩基性薬物はリソソームに蓄積し顆粒内pHを上昇させるとともに空胞化を起こす。この塩基性薬物による効果をセルフリー系で確認する目的で単離リソソームを塩基で処理したところリソソームはATP依存的に崩壊した(塩基性薬物依存性リソソーム崩壊)。空胞形成機構として,リソソーム間や他の空胞系顆粒の融合が考えられた。そこでリソソーム膜融合機構の解析を行った。その過程でGTPγSで処理したサイトゾルによりリソソームが崩壊することをみいだした(GTPγS依存性リソソーム崩壊)。(1)塩基性薬物依存性リソゾーム崩壊はプロトンポンプ依存的に,リソゾーム内にプロトン付加型塩基の塩が高濃度に蓄積するために,リソゾーム内の浸透圧が上昇し崩壊するものと考えられた。このリソゾームの崩壊はサイトゾルの添加で顕著に抑えられた。この機構はサイトゾル因子はによりリソソーム内に塩基の蓄積が阻害された結果と考えられた。このサイトゾル因子ラット肝臓から単離されたグルココルチコイド受容体の核内移行促進因子と同じであることを明らかにした。(2)リソソーム膜融合機構について,融合によるリソソームの比重変化を指標とした。in vitroでのリソソーム間膜融合のアッセイ系を用いた、リソソーム間膜融合はサイトゾル及びATP要求性で,かつ温度依存性であった。この融合機構は,(a)サイトゾル因子の他,リソソーム膜蛋白質の関与がある。(b)細胞内小胞輸送の融合装置の普遍的なコンポーネントと考えられているNSFや,GTP結合蛋白質の関与はない。(c)IP_3受容体チャンネルからの動員による一過性のカルシウムイオン濃度の上昇が必要である,などが示唆された。(3)GTPγS依存性リソソーム崩壊は,(i)GTPγSによるサイトゾルのGTP結合蛋白質の活性化(ii)活性化GTP結合蛋白質によるATP要求性のリソソームの崩壊,の2段階の部分反応によっていることが考えられた。GTP結合蛋白質によって活性化される標的蛋白質としてPLA_2が示唆された。研究課題/領域番号:06807167, 研究期間(年度):1994出典：研究課題「リソソームの崩壊機構とGTP結合蛋白質」課題番号06807167
（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））
（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-06807167/）を加工して作成金沢大学薬学部research repor
リソソームのホモティピカルな膜融合機構の解析
Get PDFリソソームの主たる役割である様々な生体内高分子の分解の際,リソソームにタンパク質が移行する重要なステップは,基質タンパク質を含む膜小胞がリソソームと融合して,その内容物をリソソームへ受け渡すことである.そこで本研究ではホモティピカルなリソソーム間膜融合に注目し,そのin vitroのアツセイ系の確立を試みた.リソソーム膜融合の検出には,抗原抗体複合体形成を利用した.抗原としてFluorescein isothiocyanate(FITC)を西洋わさびペルオキシダーゼ(horseradish peroxidase:HRP)で標識したもの,抗体として抗FITC抗体を用いた.またリソソームへのリガンドの取り込み効率を上げるため,それぞれをアシアロフェチュインまたはガラクトースで修飾した.両リガンドを取り込んだリソソームの調製は,それぞれのリガンドを別々のマウスに静脈内投与した後,40分後に肝臓からパーコール密度勾配遠心法を用いた.このリガンドを取り込ませたリソソームを試験管の中でサイトゾル,ATP存在下,37℃でインキュベートした.その後,融合によって形成した抗原抗体複合体をprotein A-Sepharoseで回収し,そのHRP活性を発光法によって測定しリソソーム膜融合の指標とした。
その結果,リソソームの膜融合はエンドソームやゴルジ体の膜融合反応と同じ温度依存性を示し20℃以下では起こらなかった.さらに,サイトゾル,ATP濃度依存性を示し,膜融合阻害剤として用いられているN-エチルマレイミドおよびGTγSに対する感受性も示した.また,リソソーム膜融合は,エンドソーム膜融合にはみられないGTP要求性を示した.ln vivo系においてリソソーム酵素のリソソームへの輸送の阻害や,リソソームの形態変化を起こすことが報告されているウォルトマニンやノコダゾールに対する感受性を検討した結果,リソソーム膜融合はウォルトマニンで阻害されたが,ノコダゾールでは阻害されなかった.従って,in vitroにおけるリソソーム膜融合には,PI3キナーゼが関与するが,細胞骨格は関与しない可能性が示唆された.研究課題/領域番号:09877434, 研究期間(年度):1997出典：研究課題「リソソームのホモティピカルな膜融合機構の解析 」課題番号09877434
（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））
（https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877434/）を加工して作成金沢大学薬学部research repor
リソゾーム膜に電子伝達系は存在するか?
Get PDF研究課題/領域番号:02857344, 研究期間(年度):1990出典：研究課題「リソゾーム膜に電子伝達系は存在するか?」課題番号02857344
（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））
（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-02857344/）を加工して作成金沢大学薬学部research repor
Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis
Get PDFThe present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation
counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings
are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that
only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into
account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed
Variations on the Author
Get PDF“Variations on the Author” discusses two of Eduardo Coutinho’s recent films (Um Dia na Vida, from 2010, and Últimas Conversas, posthumously released in 2015) and their contribution to the general question of documentary authorship. The director’s filmography is characterized by a consistent yet self-effacing form of authorial self-inscription: Coutinho often features as an interviewer that rather than express opinions propels discourses; an interviewer that is good at listening. This mode of self-inscription characterizes him as an author who is not expressive but who is nonetheless markedly present on the screen. In Um Dia na Vida, however, Coutinho is completely absent form the image, while Últimas Conversas, on the contrary, includes a confessional prologue that moves the director from the margins to the center of his films. This article examines the ways in which these works stand out in the filmography of a director who offers new insights into the notion of cinematic authorship
Appropriate Similarity Measures for Author Cocitation Analysis
Get PDFWe provide a number of new insights into the methodological discussion about author cocitation analysis. We first argue that the use of the Pearson correlation for measuring the similarity between authors’ cocitation profiles is not very satisfactory. We then discuss what kind of similarity measures may be used as an alternative to the Pearson correlation. We consider three similarity measures in particular. One is the well-known cosine. The other two similarity measures have not been used before in the bibliometric literature. Finally, we show by means of an example that our findings have a high practical relevance.information science;Pearson correlation;cosine;similarity measure;author cocitation analysis
Dispelling the Myths Behind First-author Citation Counts
Get PDFWe conducted a full-scale evaluative citation analysis study of scholars in the XML research field to explore just how different from each other author rankings resulting from different citation counting methods actually are, and to demonstrate the capability of emerging data and tools on the Web in supporting more realistic citation counting methods. Our results contest some common arguments for the continued
use of first-author citation counts in the evaluation of scholars, such as high correlations between author rankings by first-author citation counts and other citation
counting methods, and high costs of using more realistic citation counting methods that are not well-supported by the ISI databases. It is argued that increasingly available digital full text research papers make it possible for citation analysis studies to go beyond what the ISI databases have directly supported and to employ more
sophisticated methods
koamabayili/VECTRON-author-checklist: VECTRON author checklist
No full textWe have done our best to complete the author checklist relating to the use of animals in the hut study. Note that the objective for the hut study was to evaluate the IRS treatment applications for residual efficacy against Anopheles mosquitoes, including the local An. coluzzii mosquito population. Cows were only used to attract mosquitoes into the huts and no tests were carried out directly on the cows. The author checklist is intended for use with studies where experiments are carried out on animals, which is why we have had such difficulty in completing this for the hut study, as many of the questions do not relate to how the cows were used
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