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DNA based biosensors for environmental and medical applications
In the present thesis two electrochemical DNA based biosensors were developed using screen printed electrode as transducers.
Biosensors are defined as a self-containing integrated devices, capable of providing specific quantitative or semi-quantitative analytical information using a biological recognition element which is in contact with a transduction element.
The first DNA biosensor realized was applied to the rapid screening of toxic substances. The biosensor was constructed immobilizing a double helix DNA (Calf Thymus DNA) onto screen-printed electrodes. Subsequently, the biosensor was used for the determination of the toxicity of different kinds of common surfactants.
Surfactant interactions with double stranded DNA were evaluated measuring the height of the guanine oxidation peak. Indeed, the interactions with toxic substances raises structural and conformational modifications of DNA causing decrease of guanine peak. The intensity of the guanine oxidation peak, was measured through Square Wave Voltammetry (SWV).
Moreover, the toxicity of some selected surfactants was investigated both in sea water and tap water, and data were compared to those obtained in acetate buffer. The interaction between surfactants and Calf Thymus DNA in solution and adsorbed on the sensor surface was also investigated through FTIR and FTIR-ATR spectroscopy respectively.
The second kind of biosensor studied was a Genosensor, that is an analytical device where the biological recognition element is a single strand oligonucleotide sequence. These sequences referred as capture probe are capable to recognize selectively a complementary sequence (RNA or DNA), named target, by a hybridization reaction. Among the sequence probes, modified locked nucleic acid (LNA) and the peptide nucleic acid (PNA) were used. In this case the screen printed electrode
Abstract
iv
was used only as transducer while the hybridization assay was conducted onto paramagnetic micro beads.
The genosensor was used for the analytical detection of DNA and RNA sequences. In particular, the analytical properties of PNA and LNA capture probes with classical DNA sequences were compared. Hybridization with RNA target as well as with the corresponding DNA sequence was also performed. Differential pulse voltammetry (DPV) was used to perform the electrochemical measurements
Sviluppo di una piattaforma di indagine genetica applicata alla scelta della terapia psicofarmacologica e studio delle varianti alleliche del citocromo P450 nella popolazione sarda
Preparazione, caratterizzazione e studio di stabilità di nuovi Drug Delivery Systems: magnetoliposomi e nanoparticelle di chitosano
Use of electrokinetic and reactive barriers to treat heavy metals-contaminated soils
The combined use of electrokinetic (EK) and reactive barrier (RB) of transformed red mud (TRM) (a
by-product of bauxite refinement for alumina production) for the remediation of low permeability
contaminated soils by chromium and arsenic was investigated. The combination of EK with RB is a
possible way in order to enhance EK removal of Cr and As that are reported to be among the more
difficult elements to remove by electrokinetics.
The goal and the novelty of the research consisted of evaluating the synergic interaction between
the EK system and the RB and to compare the efficiency of such combined treatment with usual,
unenhanced EK remediation process. From the joint application of EK and a TRM reactive barrier
the following advantages were expected:
-- the acid neutralizing capacity of the TRM RB should suppress acidification of the
contaminated soil promoting the desorption of oxyanions under the influence of the
alkalinity produced at the cathode and, in turn, enhancing their electromigration towards
the anodic zone and the TRM RB;
-- hydrogen ions generated at the anode during the EK process should provide the acidity
required to increase the capacity of the nearby TRM RB to adsorb oxyanions.
In the second part of the research, an in situ electrokinetic fence was compared with the
performance of different permeable reactive barriers made of TRM, sodium-treated zeolite,
magnesium oxide and biochar. The aim of the study was to compare the efficiency of each barrier
system on the containment of the copper in order to withstand the spread of contaminant
through the soil due to diffusion or hydraulic gradient.
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L'uso combinato dell’elettrocinesi (EK) e delle barriere reattive (RB) costituite da fanghi rossi
trasformati (TRM) (residuo industriale del processo di produzione dell’allumina) è stato studiato
per la bonifica di suoli caratterizzati da bassa permeabilità contaminati da cromo e arsenico.
L’applicazione combinata di EK e RB consentirebbe di migliorare la rimozione elettrocinetica di Cr
e As che sono segnalati essere tra gli elementi più difficili da rimuovere utilizzando l’elettrocinesi.
L'obiettivo e la novità della ricerca è stato quello di valutare l'interazione sinergica tra il sistema
elettrocinetico e la barriera reattiva, confrontando l'efficacia di tale trattamento combinato con il
classico processo di bonifica elettrocinetica. Dall'applicazione congiunta erano previsti i seguenti
vantaggi:
-- la capacità di neutralizzazione acida dei TRM, sopprimendo l'acidificazione del suolo
contaminato, promuoverebbe il desorbimento dei contaminanti anionici sotto l'influenza
dell’alcalinità prodotta al catodo, migliorando la loro elettromigrazione verso la zona
anodica dove è inserita la barriera reattiva;
-- gli ioni idrogeno generati all'anodo durante il processo elettrocinetico fornirebbero l'acidità
necessaria per aumentare la capacità di adsorbimento della TRM RB.
Nella seconda parte della ricerca, la prestazione di una barriera elettrocinetica è stata confrontata
con quella di barriere permeabili reattive costituite da TRM, Na-zeolite, ossido di magnesio e
biochar. Lo scopo dello studio era di confrontare l'efficienza di ogni “sistema barriera” per il
contenimento del rame, al fine di contrastare la diffusion
Comparazione fra metodiche per la valutazione della vulnerabilità all’inquinamento degli acquiferi. Applicazione all’acquifero del Sulcis Iglesiente
The assessment of the vulnerability of aquifers is a key instrument for planning the
methods of environmental resources protection. This research compares three scoring and
weighting methods to assess the intrinsic vulnerability of the carbonate type aquifer
systems. In particular, we have applied the SINTACS method (Civita, 1994), the EPIK
method (Doerfliger N., Jeannin PY, Zwahlen F., 1999) and the COP method (Vias et al.,
2006) to the carbonate Sulcis Iglesiente aquifer. The study focused on the area of the socalled
"small Metal ring”, near the town of Iglesias, in the south of Sardinia. The
peculiarity of this area lies in the fact that for millennia it has been exploited by mining of
lead-zinc mines, among the most productive in the world. These activities have left a
precarious environment, as potentially polluting landfill opencast mining sites are scattered
throughout the area. The analysis of the results has led to develop a methodology for
assessing the vulnerability more effective than the others and to highlight the critical issues
of each method.
With the identification of those areas inherently more vulnerable, we laid the ground for
the strategic planning of reclamation of the most vulnerable sites.
The study is also preparatory to a larger scale research aimed at the protection and
sustainable exploitation of the environment and water resources in the area.
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------La valutazione della vulnerabilità degli acquiferi è uno strumento determinante per la
pianificazione di metodi di salvaguardia delle risorse ambientali. In questa ricerca si è
effettuata una comparazione fra tre metodi a punteggi e pesi per la valutazione della
vulnerabilità intrinseca dei sistemi acquiferi di tipo carbonatico. In particolare si sono
applicati il metodo SINTACS (Civita,1994), il metodo EPIK (Doerfliger N., Jeannin P.Y.,
Zwahlen F., 1999) ed il metodo COP (Vias et al. , 2006) all’acquifero carbonatico del
Sulcis Iglesiente. Lo studio si è incentrato sulla zona del cosiddetto “piccolo anello
metallifero”, in prossimità del comune di Iglesias, situato nel sud della Sardegna. La
peculiarità di questa zona risiede nel fatto che per millenni è stata sfruttata dalle attività
estrattive delle miniere piombo-zincifere, tra le più produttive al mondo. Queste attivitàhanno lasciato una situazione di precarietà ambientale, in quanto tutto il territorio è
disseminato di discariche minerarie a cielo aperto potenzialmente inquinanti.
L’analisi dei risultati ottenuti ha portato a definire una metodologia di valutazione della
vulnerabilità più efficace delle altre e a mettere in evidenza le criticità di ogni metodo. Con
l’individuazione delle zone del territorio intrinsecamente più vulnerabili si sono poste le
basi per la pianificazione strategica di bonifiche dei siti maggiormente vulnerabili.
Lo studio inoltre è propedeutico ad una ricerca a scala più vasta tesa alla tutela e ad un
possibile sfruttamento ecosostenibile dell’ambiente e delle risorse idriche del territorio
Il divieto dei Patti successori tra passato e presente
Il divieto dei patti successori è stato oggetto di forti critiche sia in passato che in tempi più recenti, da ultimo le recenti riforme legislative hanno introdotto il nuovo istituto del Patto di Famiglia ed il trust, che per gli operatori hanno dischiuso nuove ciance di contrattualistica in ambiti c.d. para successori.
Il progetto di ricerca prende si le mosse dal divieto dei patti successori, “formalmente” a tutti ben noto ma, attraverso le considerazioni svolte dalla dottrina più risalente, muove verso la disamina tra tutti gli altri istituti che si trovano in quella c.d.“zona grigia”, di confine, tra la nullità e la liceità del contratto avente ad oggetto disposizioni non “mortis causa”vietate, ma “post mortem”e/o “transmorte”.
Lo studio di istituti quali il contratto di donazione “mortis causa” ed il contratto di mantenimento saranno affrontati attraverso le più recenti posizioni dottrinali e giurisprudenziali, per vagliare non solo l'attualità o l'anacronisticità del divieto de quo, ma anche per verificare gli strumenti a disposizione del privato in alternativa al testamento, per regolare la propria successione.
Fine ultimo del presente lavoro è quello di analizzare il tema del “trapasso generazionale dell'impresa”, alla luce della recente riforma del divieto dei patti successori, che ha introdotto il nuovo istituto del Patto di Famiglia, da molti salutato come l'ennesima occasione mancata del legislatore. A tal fine anche attraverso la riforma del diritto societario che, con i rinnovati sistemi di amministrazione e con l'accrescimento dell'autonomia privata arricchito della possibilità di creare degli statuti sociali ad hoc ( la deroga espressa contenuta nell'art. 2355bis, terzo comma, all'art. 458 del codice civile) offre dei validi strumenti atti a tutelare l'integrità del patrimonio aziendale, preservandolo dal rischio di disgregazione da un lato e, consentendo la continuazione dell'attività imprenditoriale nonché il mantenimento del controllo in capo all'imprenditore, dall'altro. Brevi cenni saranno svolti, infine, alla luce dei nuovi trends contrattuali, ma di recente acquisizione e studio, sui vari tipi di Trusts e su alcune esperienze di diritto comparato, quali il patto di famiglia olandese ed il contratto successorio svizzero.
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------The prohibition of mutual wills was the subject of strong criticism in the past and in more recent times, most recently the recent legislative reforms have introduced a new institute of the Family Agreement and the Trust, and the industry have opened up new nonsense of contracts in para successors areas.
The research project will take the moves from the prohibition of mutual wills, "formally" well known to all, but through the considerations of the doctrine dates back more, moves the discussion of all other institutions that are in the so-called "gray zone "border between the void and the legality of the contract for the provisions do not" mortis causa "banned, but" post mortem "and / or" “transmorte”.
The study of institutions such as the contract of donation "upon death" and the maintenance contract will be addressed through the most recent case law and doctrinal positions, to consider not only the timeliness by the ban, but also to check the tools available to the private alternative to a will, to adjust his own succession.
The ultimate goal of this study is to analyze the theme of "passing of the generation" in the light of the recent reform of the prohibition of mutual wills, which introduced the new institute of the Family Agreement, hailed by many as yet another opportunity failure of the legislature. To this end, including through the reform of company law, with the renewed management systems and the growth of private enriched the possibility of creating ad hoc statutes (the express derogation contained in Art. 2355bis third paragraph , art. 458 of the Civil Code) offer valid tools to protect the integrity of corporate assets, protecting them from the risk of disruption on the one hand and allowing the continuation of business as well as maintaining control in the hands of all ' entrepreneur on the other. Brief will be carried out, finally, in the light of the new trends of contract, but of recent acquisition and study the various types of trusts and some experience of comparative law, which the family pact Dutch and Swiss contract of inheritance
Biostratigrafia a conodonti attorno al limite Siluriano-Devoniano in alcune aree del Nord Gondwana
L'infanzia abbandonata nella Sardegna moderna: il padre d'orfani
La ricerca condotta nella presente tesi, frutto di un’impegnativa indagine della documentazione archivistica, affronta una problematica, sul piano storiografico del tutto nuova; infatti per quanto si riferisce alla realtà sarda, mancano a tuttora studi esaustivi relativi al problema dell’infanzia abbandonata, e non solo per l’età moderna.
La riflessione storiografica si concentra sul fenomeno dell’abbandono e dell’esposizione dei neonati, che affonda le sue origini in epoche remote, ma è ancora oggi, all’inizio del terzo millennio, un problema quanto mai attuale e sulla figura del Padre d’Orfani, funzionario prima di nomina regia e poi civica, al quale era affidata la tutela dell’infanzia più debole e derelitta, con compiti di assistenza ai trovatelli, orfani e poveri, nel difficile cammino dalla deposizione nella ruota di Sant’Antonio, dall’accoglimento nell’omonimo ospedale, all’affidamento alla nutrice a pagamento, al collocamento presso una bottega di un maestro artigiano per l’apprendimento di un mestiere e al loro inserimento nel mondo del lavoro e nella società.
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The research conducted in this thesis, the result of an exacting investigation of archival documents, addresses an issue completely new on historiography, because as far as it relates to the reality of Sardinia, still lacks comprehensive studies on the problem of abandoned childhood, and not only for the modern age. The historiographical debate has focused on the phenomenon of abandonment and exposure of newborns, which has its origins in ancient times, but it's still today, early in the third millennium, a very topical issue. The figure of the Father's Orphans, officer appointed first by the King and then by the citizenship authority, to which was entrusted with the protection of the weakest and most destitute providing support assistance to foundlings, orphans and the poor, on the difficult path from the deposition in the wheel of St. Anthony, from accepting the homonymous hospital, to the nurse in charge custody, until to the placement at a workshop of a master craftsman for learning a job and their integration into the workplace and in the society