Matsumoto Dental University Repository
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Migration and Differentiation of GFP-transplanted Bone Marrow-derived Cells into Experimentally Induced Periodontal Polyp in Mice.
Get PDFapplication/pdfPerforation of floor of the dental pulp is often encountered during root canal treatment in routine clinical practice of dental caries. If perforation were large, granulation tissue would grow to form periodontal polyp. Granulation tissue consists of proliferating cells however their origin is not clear. It was shown that the cells in granulation tissue are mainly from migration of undifferentiated mesenchymal cells of the bone marrow. Hence, this study utilized GFP bone marrow transplantation mouse model. The floor of the pulp chamber in maxillary first molar was perforated using ½ dental round bur. Morphological assessment was carried out by micro CT and microscopy and GFP cell mechanism was further assessed by immunohistochemistry using double fluorescent staining with GFP-S100A4; GFP-Runx2 and GFP-CD31. Results of micro CT revealed alveolar bone resorption and widening of periodontal ligament. Histopathological examination showed proliferation of fibroblasts with some round cells and blood vessels in the granulation tissue. At 2 weeks, the outermost layer of the granulation tissue was lined by squamous cells with distinct intercellular bridges. At 4 weeks, the granulation tissue became larger than the perforation and the outermost layer was lined by relatively typical stratified squamous epithelium. Double immunofluorescent staining of GFP and Runx2 revealed that both proteins were expressed in spindle-shaped cells. Double immunofluorescent staining of GFP and CD31 revealed that both proteins were expressed in vascular endothelial cells in morphologically distinct vessels. The results suggest that fibroblasts, periodontal ligament fibroblasts and blood vessels in granulation tissue were derived from transplanted-bone marrow cells. Thus, essential growth of granulation tissue in periodontal polyp was caused by the migration of undifferentiated mesenchymal cells derived from bone marrow, which differentiated into fibroblasts and later on differentiated into other cells in response to injury.journal articl
歯髄細胞に関する分子生物学的研究．
Get PDFapplication/pdf歯髄は正常な組織では石灰化しない.しかし,歯髄線維芽細胞は,生体から取り出して培養すると,骨芽細胞や骨髄間葉細胞よりも自身の産生する細胞外基質を石灰化する能力が高いことがわかった.培養歯髄線維芽細胞は破骨細胞形成支持能を有し,遺伝子発現プロファイルも骨芽細胞や骨髄間葉細胞と酷似していた.また,歯髄線維芽細胞を免疫不全マウスに移植すると骨髄を伴った骨を形成した.本稿では,われわれの行った歯髄線維芽細胞の分子生物学的性状解析結果を基に,硬組織再生医療における材料としての歯髄線維芽細胞の有用性について考察したい.journal articl
病理組織学的検査により腺性歯原性嚢胞と診断された1 例
Get PDFapplication/pdfGlandular odontogenic cyst (GOC) is a rare odontogenic cyst, classified as a developmental odontogenic cyst by the WHO histological typing of odontogenic tumours in 1992. GOC generally occurs in the mandible and arises in each age. The clinical differential diagnosis of odontogenic tumor and cyst is important however, it is difficult to discriminate between them in clinical and radiographical findings. Thus, pathological searches become an essential step for the definite diagnosis. We report a case of GOC, that primary diagnosis was dentigerous cyst by biopsy, but the definite diagnosis was GOC after total extirpation of cyst. Because of a high recurrence rate of GOC, the patients should be followed for a long term.journal articl
Overview of Cytological Dynamics of Periodontal Ligament Inflammatory Lesions
Get PDFapplication/pdfCyto-pathological features of the periodontal ligament tissue inflammatory lesions have somehow been carried out but detailed cellular dynamics remain unclear. Therefore, in this review, we overviewed mainly our recent experimental model studies. That is performed using using ordinary ddY mice and BMP bone marrow transplanted mouse model. Regaring the experimental apical inflammatory periodontitis, at four weeks, micro-CT confirmed the presence of a radiolucent image at the apex of the tooth, which was then removed for histological examination. The results showed granulation tissue with fibrosis gradually formed at the periphery of an abscess. Next, if perforation were large, granulation tissue would grow to form periodontal polyp. Results of micro-CT revealed alveolar bone resorption and widening of periodontal ligament. Histopathological examination showed proliferation of fibroblasts with some round cells and blood vessels in the granulation tissue. Double immunofluorescent staining of GFP and Runx2 revealed that both proteins were expressed in spindle-shaped cells. Double immunofluorescent staining of GFP and CD31 revealed that both proteins were expressed in vascular endothelial cells in morphologically distinct vessels. The results suggest that fibroblasts, periodontal ligament fibroblasts and blood vessels in granulation tissue were derived from transplanted-bone marrow cells. Thus, essential growth of granulation tissue in periodontal polyp was caused by the migration of undifferentiated mesenchymal cells derived from bone marrow, which differentiated into fibroblasts and later on differentiated into other cells in response to injury.journal articl
骨格性下顎前突者のスマイル時の口唇運動の三次元解析
Get PDF松本歯科大学博士（歯学）2014甲第166号application/pdf【要旨目的】ヒトの正面の顔において，ヒトは目と口唇に視線が集まることが報告されている。そして，不正咬合者の口唇では正常咬合者に比べ上下口唇の形態のバランスが崩れ，矯正治療により改善することから口唇の形態変化が注目されてきた。一方，顎偏位症例の正貌軟組織については静的な口唇の非対称が示されているが，スマイルの対称性および正面顔面形態との関連について明らかにされていない。そこで，本研究では，偏位を伴う骨格性下顎前突患者のスマイル時の口唇の動きの変化を三次元的に調べ，正面顔面形態のバランスとの関連について検討することを目的とした。方法被験者として，松本歯科大学病院矯正歯科を受診した骨格性下顎前突患者11名（平均年齢 21.0±4.7歳，ANB -4.9±2.0°，Me偏位量 3.7±2.6mm，overjet -3.1±2.4mm，overbite +2.5±3.0mm）を対象とした。被験者の顔面の上唇中央，下唇中央，左右口角，左右頬，左右額，鼻尖の9カ所にレトロターゲットを貼付し，頭部固定は行わず安静時とスマイル時の写真をステレオカメラで撮影し，三次元解析ソフトウェアを用いて立体構築した。左右額，鼻尖の3点を基準点とし，これら3点で構成される三角形の平面を基準に用いて頭部の動きを補正した。上唇中央部，下唇中央部，左右口角，左右頬における安静時とスマイル時の動きについて，ステレオ画像計測法を用いて三次元的に解析した。また，正面顔面形態は，正面頭部エックス線規格写真を用いて評価した。統計解析は，スマイル時の軟組織移動量と正面顔面形態の関連をPearsonの相関係数を用いて検討した。【結果と考察】1.被験者の平均的スマイル運動安静時からスマイル時の口唇頬部軟組織の移動方向は，上唇中央部は上後方，偏位方向に，下唇中央部は下後方，偏位方向に移動し，下唇中央部は上唇中央部より有意に後方へ移動した。下顎前突では下唇の方が上唇よりも前方へ突出しているため，スマイル時に口唇をラバーバンド状に被う口輪筋が下唇を後方へ牽引した可能性が推察された。偏位側と非偏位側の頬部は上外側および前方に，偏位側と非偏位側の口角は上外側および後方に移動したが，偏位側と非偏位側で差はみられなかった。これは，本研究の被験者の平均Me偏位量が3.6mmと，あまり大きな偏位を示さなかったため，偏位側と非偏位側の口角部と頬部の動きは，スマイル時に差を示さなかったと推察された。2.スマイル時の軟組織の動きと正面顔面形態の関連1) 上下唇の中央部では，下唇中央部の安静時からスマイル時の垂直的な移動距離は，偏位側と非偏位側の上顎骨および下顎骨の幅の差，下顎骨偏位量と有意な正の相関を示したが，上唇中央部では関連は示さなかった。2) 口角部では，非偏位側口角の安静時からスマイル時の垂直的な移動距離は，下顎骨偏位量と有意な正の相関を示したが，偏位側口角では関連は示さなかった。3) 頬部では，非偏位側頬部の安静時からスマイル時の水平的な移動距離は，偏位側と非偏位側の下顎骨高差と有意な正の相関を示した。非偏位側頬部の安静時からスマイル時の垂直的な移動距離は，下顎骨偏位量と有意な正の相関を示した。一方，偏位側頬部では関連は示さなかった。以上の結果から，非偏位側の口角では上方に移動し，非偏位側頬部では上方と非偏位側に移動することで，スマイル時に口唇の偏位側への移動を補償し，バランスを保とうとしているものと推察された。口角の上方への移動には大頬骨筋が，頬部の水平方向および垂直方向の移動には小頬骨筋と大頬骨筋が関連していることから，これらの筋肉が偏位症例においてスマイル運動時の補償に関連している可能性が推察された。また，非偏位側口角部さらには非偏位側頬部の上方移動量が偏位の増加とともに増加した結果，口唇を囲むラバーバンド全体が非偏位側上方に引っ張られ，下唇中央部の下方への移動量が減少している可能性が推察された。以上の結果より，骨格性下顎前突症では，顎顔面形態の非対称性と安静時からスマイル時の軟組織の変化が関連することが示された。【結論】骨格性下顎前突症では，スマイル時に軟組織の移動と正面顔面形態が関連し，スマイルの非対称を補償する運動が示された。doctoral thesi
インプラントのチタン製アバットメントスクリューの破折危険因子に関する検討
Get PDF松本歯科大学博士（歯学）2014乙第030号application/pdf【目的】チタン製インプラントは今日では欠損補綴治療の１つとして，信頼され普及し取り入れられてきている．インプラント治療は，プラークコントロールや咬合調整等の定期的なメインテナンスの継続が長期安定につながると考えられているが，長期間の使用に伴い偶発症が報告されている．申請者らは，上部構造装着後５年経過したインプラント補綴装置におけるアバットメントスクリューの頭部と首部の間での破折を経験した．アバットメントスクリュー破折の原因として，上部構造の適合不良，スクリューの緩みによる可動性の発現，強い咬合力などが考えられるとの報告はあるが詳細な原因について客観的に確証されていない．またインプラントが存在する口腔内環境は，常に唾液に囲まれており飲食物によって温度やpH が変動することによる腐食の可能性も考えられるが，その関連性も明らかではない．そこで申請者らは，チタン合金製アバットメントスクリュー破折の原因および詳細な物理的因子や環境因子について，破折したアバットメントスクリュー破断面の観察，三次元非線形有限要素法による応力解析，および口腔内環境に類似させた腐食反応実験を行った．【材料と方法】１．破断面の観察および元素分析：走査型電子顕微鏡を用いてアバットメントスクリューの破断面のSEM 画像の観察とエネルギー分散型X 線分析（EDS）による元素分析を行った．２．三次元非線形有限要素法による応力解析：破折インプラントと同一のインプラントを樹脂包埋し正中線にて切断し寸法を測定して解析モデルを作製した．解析にはANSYSVer.13 を使用して非線形解析を行った．３．口腔内類似環境下における腐食反応：アバットメントスクリューと同じ組成である，Ti-６Al-４V のチタン合金板に耐力相当の曲げ応力を負荷し，Na2SO4 水溶液，生理的食塩水に浸漬し37℃恒温槽内において腐食試験を行った．標準試料として無負荷板のNa2SO4 水溶液の浸漬も行った．1 週間，2 週間，3 週間，4 週間浸漬後の試験片のSEM 観察とEDS による元素分析を行った．【結果】１．破断面の観察および元素分析：破断面には腐食孔と疲労破壊の様相が認められ，表面にはS などの付着物が検出された．２．三次元非線形有限要素法による応力解析：インプラントの上部構造物辺縁隆線部に垂直方向へ応力を負荷させた場合に，アバットメントスクリュー破折部位と同一部位に応力集中が認められた．３．口腔内類似環境下における腐食反応：すべての試験片で孔食などの腐食所見はみられなかった．浸漬４週間後の応力を負荷した試験片中央部と端部には，膜状の付着物が観察されたがS は検出されなかった．【考察】本症例は天然歯である下顎左側第１小臼歯が頬側に転位しており，下顎左側第２小臼歯の咬合面近心頬側にファセッテが認められる．これらのことから，左側側方運動時に下顎左側第２小臼歯に過度に咬合力の負担が繰り返し負荷され破折に至ったと考えられる．破折したアバットメントスクリューの破断面に孔食が見られ，またEDS 分析でSが存在した．三次元非線形有限要素解析の結果は，上部構造物の辺縁隆線部に垂直方向へ応力を負荷させた場合，アバットメントスクリュー頭部への応力が集中することが明らかになり、これが破折の原因と考えられた．また本症例で使用しているアバットメントスクリューの座面部の形状は，頭部の下丸みと呼ばれる形状が付与されておらず，応力が集中しやすい形となっており，その形態も破折原因の一つであると考えられた．本研究の腐食実験では，明らかな孔食および応力腐食割れ所見はなく，S も検出されなかったことより、破折面の孔食原因は硫化物によるものと予想されたが，その原因を特定することはできなかった．応力腐食割れが起こるための条件は「材料」・「環境」・「応力」の三要素が重複する特定の条件で発生することより，本腐食実験ではこの三要素の特定の条件が揃わなかったのではないかと考え、腐食については今後さらなる検討が必要であるとしている．thesi
Comparing immunocompetent and immunodeficient mice as animal models for bone tissue engineering
Get PDF松本歯科大学博士（歯学）2015甲第172号application/pdfObjectives To understand the differences and similarities between immunocompetent and immunodeficient mice as ectopic transplantation animal models for bone tissue engineering. Materials and Methods Osteogenic cells from mouse leg bones were cultured, seeded on β- TCP granules, and transplanted onto the backs of either immunocompetent or immunodeficient nude mice. At 1, 2, 4, and 8 weeks postoperatively, samples were harvested and evaluated by hematoxylin-eosin staining, tartrate-resistant acid phosphatase ( TRAP) staining, and immunohistochemical staining and quantitative PCR. Results In immunocompetent mice, inflammatory cell infiltration was evident at 1 week postoperatively and relatively higher expression of TNF- α and IL-4 was observed. In immunodeficient mice, new bone area and the number of TRAP-positive cells were larger at 4 weeks than in immunocompetent mice. The volume of new bone area in immunodeficient mice was reduced by 8 weeks. Conclusions Bone regeneration was feasible in immunocompetent mice. However, some differences were observed between immunocompetent and immunodeficient mice in the bone regeneration process possibly due to different cytokine expression, which should be considered when utilizing in vivo animal models.thesi
Pathological Examination of Experimentally Induced Periodontal Polyp in Mice
Get PDFapplication/pdfThe mechanism in the formation of periodontal polyp has been established in several histological studies but details on cell differentiation and/or proliferation have not been elucidated. In the present study, we established a convenient and possible experimental system using ddY mice. Briefly, pentobarbital sodium (Somnopentyl) was injected into the abdominal cavity of the mouse followed by access cavity preparation on maxillary first molar using low speed ½ round bur (Merufa Inc), exposing the pulp and then allowed to perforate the floor of the pulp chamber. Observation was done over time until 6 months using micro CT (m_CT) image photography. Results with transmission image using m_CT showed the
expansion in the width of the periodontal ligament in the furcation area. The lesion was excised as one mass and examined histopathologically. The granulation tissue was covered with stratified squamous epithelium. The present experimental technique has been confirmed to be effective in analyzing the formation of periodontal polyp induced by mechanical perforation.journal articl