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ヒト破骨細胞の生存延命・骨吸収機能に対する抗Siglec-15抗体の効果
Get PDF松本歯科大学博士（歯学）2018甲第212号application/pdf[要旨]破骨細胞は高度に石灰化した骨組織を破壊・吸収する唯一の細胞である．その起源は，生体に広く分布するマクロファージ系の細胞である．そして，骨組織は骨吸収と骨形成のバランスにより調節されている．それらのバランス調節は，互いにあたかも連絡を取り合っているかのようにみえるため，この現象は骨代謝共役（カップリング）と呼ばれている．Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif （ITIM）は，T細胞やB細胞の受容体と会合する細胞膜アダプター分子の細胞内ドメインに共通してみられるモチーフとして発見された．破骨細胞では，DNAX-activating protein 12 （DAP12）とFc receptor common γ subunit（FcRγ）の発現が高く，これらのダブル欠損マウスは骨吸収不全を呈する大理石骨病を惹起する．最近，DAP12と会合する免疫グロブリンスーパーファミリー分子として，シアル酸受容体タンパク質であるSialic acid-binding immunoglobulin-like lectin 15（Siglec-15）が同定された．Siglec-15は破骨細胞の分化に伴って誘導され，Siglec-15遺伝子欠損マウスは骨吸収が抑制され骨量が増加するが，破骨細胞数はほとんど減少しない．また，骨形成に対しては，骨形態計測の結果から，骨芽細胞数や骨形成速度などの骨形成パラメーターが野生型正常マウスと較べ，ほとんど差が無いと報告されている．この実験結果は，破骨細胞の存在が骨芽細胞の活性を支え，骨吸収と骨形成がカップリングしていることを示唆している．本研究では，ヒト末梢血液由来の破骨細胞の分化と延命に対する抗Siglec-15中和抗体の効果について検討した．健常人ボランティアより採取した末梢血から調製した単球を含む細胞画分からCD14抗体ビーズを用いてCD14陽性細胞を単離した．CD14陽性のヒト単核細胞を，破骨細胞分化因子であるreceptor activator of nuclear factor κB ligand（RANKL）とマクロファージコロニー刺激因子であるmacrophage colony-stimulating factor（M-CSF）の存在下で，7日間培養することによりTRAP陽性のヒト多核破骨細胞が形成された．培養7日目で形成された多核破骨細胞は，RANKLとM-CSFの非存在下で，その後死滅傾向を示すが，抗Siglec-15抗体を添加することにより，濃度依存的および経時的に破骨細胞の延命は阻害された．抗Siglec-15抗体によるヒト破骨細胞の生存延命阻害作用は，オステオプロテゲリン（OPG），RANKL中和抗体またはビスホスホネート（アレンドロネート）処理ではほとんど認められなかった．更に，単離したCD14陽性細胞をRANKLとM-CSFの存在下において，象牙切片上で培養し，破骨細胞が形成された培養7日目にコントロールIgG，抗Siglec-15抗体もしくはビスホスホネート（アレンドロネート）をそれぞれ添加し，象牙切片上での破骨細胞の生存と吸収窩形成を解析した．その結果，抗Siglec-15抗体を添加した群は，象牙切片上のTRAP陽性細胞数が減少し，ヘマトキシリン染色における吸収窩形成も阻害された．また，アレンドロネートを添加した群は，アポトーシスに至っていると考えられるTRAP陽性多核細胞を認め，ヘマトキシリン染色における吸収窩は強く阻害された．一方，RANKLとM-CSFによるヒト破骨細胞の分化過程においては，抗Siglec-15抗体は形成されたTRAP陽性多核細胞数を減少させなかった．以上の実験結果から，抗Siglec-15抗体はヒト末梢血液由来の破骨細胞の分化誘導過程では阻害効果を示さなかったが，多核破骨細胞の延命と骨吸収機能には阻害活性を示した．doctoral thesi
歯髄における破歯／破骨細胞の分化抑制のメカニズム解析
Get PDF松本歯科大学大学院歯学独立研究科博士（歯学）学位申請論文;硬組織疾患制御再建学講座（主指導教員:宇田川 信之教授）application/pdfothe
歯周組織の状態とフレイル，ソーシャルキャピタルの関連性に関する疫学研究
Get PDFapplication/pdfFrailty is a cause of a nursing care status for the elderly people. Generally, elderly people get aged by various diseases such as Non–Communicable Diseases, stress, and lifestyle diseases overlap, and go through a period of frailty to necessary support, state of longterm care required stages. Therefore, efforts to stop weakness during the frailty period which can return to a healthy state, that is, to extend healthy life span is very important in future medical care.Social capital is characterized as a capital of a social organization that leads cooperative action to achieve the objectives of “social connection: network”, “norm”, “trust”, and has been reported a deep relationship with healthy life.Therefore, by examining the relationship between the health condition of the periodontal tissue, and the frailty and social capital, we focused on the influence on the healthy life from the health condition of the periodontal tissue. In other words, in this study, through the hypothesis that the health condition of periodontal tissue correlates with the frailty, and that individualsʼ social capital deteriorates due to frailty, it was aimed to elucidate whether the health condition of the periodontal tissue affects the healthy life span or not. A correlation tendency between the pre frailty state and the number of present teeth and the feeling of oral health of social capital was observed. When the pre frailty state worsened, the number of present teeth increased, and if the oral health condition at the questionnaire was bad, pre frailty state worsened. Further studies are needed to increase the number of cases in the future to determine whether oral condition due to periodontal disease is associated with frailty.journal articl
Clinical investigation of ideal incisor proportion for anterior tooth alignment in mongolian female adults
Get PDFapplication/pdfThe goal of dental esthetic treatment is to restore mastication and esthetics. Dental esthetic treatment differs from prosthodontic treatment due to the fact that the former considers the relationship between the anterior teeth and the entire facial configuration, especially around the mouth, to provide a beautiful smile. Rufenacht, in his textbook “Fundamental of Esthetics” in 1₉₉0, advocated 10 factors to create a beautiful smile. One of the factors states that “The shape of the anterior teeth has to be in Golden Proportion”. Although the factors make sense, the factor regarding the golden proportion raises a question. Hence, we measured the width of the maxillary anterior teeth and compared them to the ʻgolden proportionʼ. A total of 162 Japanese female, with an average age of 31 years old were examined. They were treated by orthodontists who are boardcertified by the Japanese Orthodontic Association. The subjects underwent orthodontic treatment with an initial diagnosis of Angle class 1, ANB2 to 4 malocclusions with no skeletal involvement.Photographs of the maxillary anterior after orthodontic treatment were used for measurements. Three dentists with more than 5 years of clinical experience measured the width of the maxillary anterior from the photos enlarged by 3.8 times. The crown width obtained from the two–dimensional photographs was 32.48 ± 1.01 mm for central incisors, 23.83 ± 0.8₉ mm for lateral incisors, and 1₉.₉0 ± 1.04 mm for cuspids. The average width of central incisor was 1.36 and the cuspid was 0.84 with the lateral incisor as 1. It is common that the width of the tooth increases from lateral incisor followed by the cuspid, and the central incisor. However, the harmony of anterior teeth should not be based on the actual width of each tooth, but on the two–dimensional tooth proportion viewed from the anterior, which can be affected by the shape of the dental arch, the angle of each tooth, and so on. According to our results, the ratio of the central to the lateral incisor did not coincide with the golden ratio of 1:1.618 but rather to the silver ratio of 1: √2 (1.414), a traditional beautiful proportion in Japanese culture. To compare of results, we used the textbook “Anteriores”, by Dr. Jan Hajto and examined the two–dimensional measurement of the maxillary anterior teeth in 32 European female. We concluded that the ideal incisor proportion before and after orthodontic treatment in Asian women is closer to the silver ratio. Even for European female, the ideal incisor proportion is not necessarily the golden ratio, contrary to popular belief.journal articl
吸収性縫合糸Vicryl® とVicryl rapide® に対する ラット皮下組織反応の比較検討
Get PDF松本歯科大学博士（歯学）application/pdf2019甲第216号緒言 歯科口腔領域において，時として外科処置における縫合時に吸収性縫合糸が用いられる．その代表としてグリコール酸／乳酸ポリエステルがある．しかし，その生体組織内での詳細は明らかにされていない．そこで埋入部に増殖する肉芽組織細胞の詳細な消長と細胞供給元を追究するためにGFP骨髄移植ラットの実験系を用いて検討した．材料と方法実験動物にはGFP骨髄移植ラットを用いた．用いた吸収性縫合糸は，グリコール酸／乳酸ポリエステル縫合糸 2 種Vicryl®（以後Vと記す）と，Vicryl rapide®（以後Vrと記す）”である． ラットの背部皮下組織内に縫合糸を束状にして埋入した後，最大6か月後まで病理組織学的に検討した．さらに一部の標本については免疫組織化学的染色（以後IHCと記す）も行った．結果Vicryl® に対する組織反応としては，2週例では，縫合糸は空隙として観察され，周囲にマクロファージ（以後Mφと記す）と異物巨細胞（以後FBGC と記す）が増殖していた．増殖組織の最外層には線維性被膜が形成されていた．1か月後においては，縫合糸の空隙は小さくなり，代わってその部をMφが埋めていた．さらにFBGCは細胞1つの大きさはより大きく，核の数も増加していた．3か月では，Mφの塊があった．6か月でも，増殖した細胞塊が残っていた．IHCではGFPについて，埋入2週の増殖したMφとFBGCはすべてGFP陽性であった．埋入1か月後にはMφともに一部の線維芽細胞がGFP陽性を示した． 3か月後，Mφの残渣はGFPに陽性を示した．6か月においても同様であった．Vicryl rapide® では，2週間後では縫合糸の形状の空隙があり，周囲にはMφが増殖していた．そしてFBGCと線維芽細胞は疎らに認められた．1か月ではMφが泡沫状を呈しており，大小様々な白く抜けた空隙があった．そして線維芽細胞の数は減少しFBGCはほとんどみられなかった．3か月では多少縫合糸に対して増殖した細胞残渣が存在していた．6か月では明確な組織を摘出することができなかった．IHCはGFP については埋入2週の縫合糸の形状の空隙の周囲にあるMφとFBGCはすべてGFP陽性であった． 1か月では泡沫状を呈したMφがGFP陽性を示した．3か月では多少縫合糸に対して増殖した細胞の残渣と考えられる塊がGFPに対して陽性を示した.考察今回の実験において，埋入した吸収性の縫合糸に対して，そのいずれにおいても肉芽組織の増殖があった．しかし，この反応はVにおいて強く現れ，Vrでは極めて弱かった．これはVが生体内で徐々に分解される時に時間が掛かり，少なくとも一部で貪食によって処理される為であることが推察された．一方，Vrは貪食ではなく，その初期から加水分解によって低分子化され生体内で溶解し，吸収によって処理されるからであろう．VとVrは同じ化学構造かつ糸の立体的構造であるにも関わらず吸収速度が異なる．これは両者で滅菌過程が異なっているためだと考えられる．Vはガス滅菌であるのに対してVrは放射線滅菌が施されている．放射線を照射されることにより縫合糸が分解されやすくなり，その結果吸収速度が速くなっていると推測される．GFPについてIHCに検討した結果，縫合糸を埋入した部位に増殖した肉芽組織の細胞はほぼすべてGFP陽性であった．そして肉芽組織内には，極めて少量の線維芽細胞と膠原線維が介在しており，その線維芽細胞の一部はGFP陽性だったが，大半は陰性であった．これらの細胞は短期間に多量に増殖したので，その場での分裂・増殖だけでなく，骨髄から供給されていることが明らかとなった．結論今回の実験においてVとVrのいずれにおいてもMφ主体の組織増殖があった．この反応はVの方が強く現われ，Vrでは弱かった．これはVとVrの滅菌方法が異なり，Vrは滅菌過程において放射線を照射されるため分解・吸収されやすいためである．そしていずれにおいても発現した肉芽組織のMφとFBGC，さらに一部の線維芽細胞はGFPに対して陽性を示したことから骨髄から供給されていることが明確となった．doctoral thesi
生体における微小領域組織のpH測定ーニードル型pHマイクロセンサー応用の報告
Get PDFapplication/pdfEven today, pH measurement of living tissue in a clinical environment has been difficult. In this study, we succeeded in measuring the pH of living tissue and observing changes over time using an optical fiber coated with a newly developed pH–reactive fluorescent substance. A standardized hole was made in the rat tibia, Poly Ether Ether Ketone (PEEK) and Commercially₇ days. As a result, it was confirmed that the pH of the tissue was increased with CP–tita-nium, in which osseointegration was confirmed, and with PEEK, which imparted surface wettability. In addition, a decrease in pH over time due to tissue damage was also confirmed. From the above, it was confirmed that a needle–type pH microsensor is suitable for measuring the pH of living tissue over time. With this method, the development of new implant materials can be expected. Pure (CP)–titanium were implanted, and the pH change was measured afterjournal articl