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Identificación y caracterización de las propiedades biológicas de péptidos de alpiste: cereal empleado para el tratamiento de diabetes e hipertensión.
Get PDFTesis (Maestría en Ciencias en Biología Molecular)"La diabetes así como la hipertensión y la obesidad se han incrementado significativamente en México y en el mundo. Estas enfermedades se asocian principalmente al cambio en los hábitos nutricionales. Por tal motivo, existe gran interés en identificar y caracterizar nuevas moléculas bioactivas provenientes de alimentos, especialmente los biopéptidos obtenidos de la hidrólisis enzimática de proteínas, son los de mayor potencial para el desarrollo de alimentos funcionales. El alpiste (Phalaris canariensis L.) tradicionalmente se consume como tratamiento de la diabetes e hipertensión, sin embargo, a la fecha no existen reportes científicos que identifiquen los bioactivos responsables de estas propiedades, por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue caracterizar y evaluar los péptidos encriptados en las proteínas del alpiste. Las proteínas de reserva fueron fraccionadas en base a su solubilidad y se caracterizaron electroforéticamente. Las prolaminas (37%) y glutelinas (35%) fueron las fracciones mayoritarias. El patrón electroforético mostró similitud con el de cereales como cebada, avena y maíz. Los péptidos encriptados (biopéptidos) fueron liberados mediante digestión tríptica y empleando el método de simulación de digestión gastrointestinal in vitro. Los péptidos menores de 10 kDa mostraron inhibición del 43.5% sobre la actividad de la dipeptidilpeptidasa IV (DPPIV) y del 73.5% sobre la actividad de la enzima convertidora de angiotensina (ECA). Para evaluar el efecto vasoactivo de los biopéptidos se utilizó un bioensayo de corazón aislado y perfundido de rata, en donde se evaluó la presión de perfusión como un índice del tono vascular, y la magnitud de la contractilidad del miocardio, de forma simultánea. También se cuantificó la producción de óxido nítrico (NO) en el efluente venoso del corazón aislado. La producción de NO de los biopéptidos de alpiste fue de 12.24 μM. Estos hallazgos apoyan científicamente el empleo del alpiste en la prevención de diabetes e hipertensión y el alto potencial de este cereal como alimento funcional.""Diabetes, hypertension, and obesity have increased significantly in Mexico and worldwide, diseases associated mainly to the change in diet. Therefore, there is great interest in identifying and characterizing new bioactive molecules from food; especially biopeptides obtained and isolated from the enzymatic hydrolysis have the higher potential for development of functional foods. The canary grass (Phalaris canariensis L.) is a cereal that in Mexico is used as traditional food for the treatment of diabetes and hypertension, however, up to date there are no scientific reports that describe the bioactive responsible for these functions. Therefore, the aim of this work was to characterize and evaluate the bio-peptides of bird seed. The flour and grain of canary grass were purchased at the supermarket. Storage proteins were fractionated based on their solubility and characterized electrophoretically. Prolamins (37%) and glutelins (35%) were the main fractions. The electrophoretic pattern showed similarity with that of cereals such as barley, oat and maize. The peptides encrypted (bio-peptides) were released by tryptic digestion and by the method of simulated in vitro gastrointestinal digestion. Peptides below 10 kDa showed 43.5% inhibition of the activity of dipeptidylpeptidase IV (DPPIV) and 73.5% of the angiotensin converting enzyme (ACE). To evaluate the effect vasoactive of bio-peptides a bioassay isolated perfused heart rat was used, where the perfusion pressure was evaluated as an indication of vascular tone, and the extent of myocardial contractility, simultaneously quantifying the production of nitric oxide (NO) in the venous effluent of the isolated heart. NO production with birdseed bio-peptides was 12.24 μM. These findings support scientifically the use of bird seed in the prevention of diabetes and hypertension and the high potential of this cereal as a functional food.
Estudio de la costra biológica de suelo y su contribución al carbono orgánico del suelo en un pastizal semiárido en la región Central, México
Get PDF"A nivel mundial, los pastizales semiáridos son importantes almacenadores de carbono orgánico (CO) de suelo. En este bioma, los líquenes, algas y cianobacterias que forman la costra biológica del suelo (CBS) colonizan los interespacios entre las gramíneas C4, asimilan CO2 y contribuyen potencialmente al almacenamiento de CO en suelo. En México el sobrepastoreo y los periodos prolongados de sequía han modificado la cobertura de la CBS. El objetivo del estudio fue cuantificar la contribución de CO al suelo por cianobacterias y líquenes de la CBS en sitios con pastoreo. Se compararon diferentes especies y estadios de desarrollo de líquenes en un mismo sistema de pastoreo y en CBS abundantes (D. diacapsis, A. socialis-juvenil, cianobacterias) se realizó la comparación entre los distintos sistemas de pastoreo. Se colectó el tejido de diferentes tipos de CBS y el suelo asociado en tres profundidades hasta 3.0 cm en los interespacios de un pastizal abierto formado por gramíneas C4. Mediante información de abundancia natural de 13C en las CBS y gramíneas C4 y aplicando modelos mixtos de isótopos se determinó la cantidad de CO aportada por la CBS en las distintas profundidades de suelo. Las CBS en diferentes sistemas de pastoreo no presentaron diferencias en su contribución al CO del suelo; sin embargo las especies de líquenes en un mismo sistema de pastoreo sí presentaron diferencias. Algunos estadios juveniles de líquenes contribuyen más al CO del suelo que los adultos. En general, la CBS contribuyó con 50% del CO total en los primeros 3.0 cm de suelo, equivalente a casi 3 tC ha-1. Los resultados demuestran que la CBS juega un papel importante en la distribución espacio-temporal de CO en el suelo en pastizales semiáridos, por lo que la riqueza de especies de las mismas podría aumentar el potencial del almacenamiento de CO en estos ecosistemas.""Globally, semiarid grasslands are important stocks of soil organic carbon (SOC). In this biome, lichen, algae and cyanobacteria are constituents of the biological soil crust (BSC), which colonize vegetation-free interspaces between tussocks of C4 grasses and assimilate CO2 and contribute potentially to carbon sequestration in soils. In Mexico, overgrazing and extended periods of drought have modified BSC cover and function. The objective of this study was to quantify the contribution of cyanobacteria y different lichen species to the organic C pool in soil of different grazing systems. In particular, different species and developmental stages of some lichen were compared within certain grazing system and in case of high abundance of some species/groups (Diploschistes diacapsis, Acarospora socialis juvenile, cyanobacteria) their SOC contribution was compared among grazing systems. In the interspaces of open grasslands with C4 grasses, CBS tissue was collected as well as soil beneath at three soil depths as far as 3.0 cm. Using natural abundance of 13C stable isotope information of BSC and C4 grasses and mixing models, the quantity of carbon contributed by different BSC species/types to different soil layers was determined. When comparing certain BSC across grazing systems no clear differences in carbon sequestration were observed, however, within grazing systems, lichen species differed significantly in their contribution to soil carbon. Depending on lichen species, the juvenile stage contributed with more carbon to soil than the adult stage. Overall, BSC contributed about 50% to the soil carbon occurring in the top 3 cm of the soil, which corresponds to about 3 tC ha-1. The results demonstrate that BSC play an important role in the spatio-temporal distribution of SOC in soils of semiarid grasslands and that species richness of BSC could increase the potential of organic C sequestration in these ecosystems.
Construcción de familias infinitas de nudos no alternantes con alt (K)=1
Get PDFTesis (Maestría en Control y Sistemas Dinámicos)"Buscando extender propiedades particulares de los nudos alternantes se han hecho generalizaciones del concepto. En [8] Kawauchi introdujo el número de alternancia de un enlace L y se denota como alt(L), el cual mide que tan lejos esta L de los enlaces alternantes con el mismo número de componentes. En esta tesis se encontraron nudos de 2-puentes a partir de los cuales se generaron conjuntos infinitos de nudos no alternantes. Tales nudos tienen la característica de tener número de alternancia igual a uno, es decir, con el cambio de un determinado cruce se vuelven alternantes. Para mostrar que los conjuntos generados son infinitos y no alternantes, se construyeron fórmulas para calcular los polinomios de Conway y de Alexander de los habitantes de un 3-cuarto dado y de los enlaces formados con ellos. Para el caso particular de calcular el polinomio de Alexander de los conjuntos infinitos se proporcionan fórmulas, no recursivas, mediante las cuales es fácil determinar el polinomio de los nudos en los conjuntos.""In order to extend particular properties of non alternating knots, generalizations of the concept had been made. In [8] Kawauchi introduced the alternation number of a link, denoted by alt(L), which measures how far is L of alternating links with the same number of components. In this thesis, certain 2-bridge knots, from which infinity sets of non-alternating knots have been generated, are shown. These non-alternating knots have the characteristic of having alternation number one, i.e., by changing one crossing an alternating knot is obtained. In order to demonstrate that the generated knots are different and non alternating, formulas are derived. With these formulas it is posible to calculate the Conway and Alexander polynomials of the knots that are formed. In the case of the Alexander polynomials no recursive formulas are supplied.
Virus del Papiloma Humano tipo 16 con una deleción de 2.4 Kilobases.
Get PDFTesis (Maestría en Ciencias en Biologia Molecular)"Los genomas de virus del papiloma humano (VPH) que infectan células epiteliales del cuello del útero se replican como episomas de DNA circular de cadena doble de 7,900 pares de bases (pb). Al cuantificar la carga de los genes virales E2 y E6 nuestro laboratorio obtuvo evidencia indirecta de que en las infecciones del cérvix ocurren deleciones aleatorias del genoma de VPH tipo 16 (VPH16). Mediante amplificación por círculo rodante (RCA, rolling circle amplification) los episomas circulares pueden ser copiados como concatémeros lineales -moléculas de DNA constituidas por múltiples copias en tándem de los genomas monoméricos- y el análisis electroforético de los monómeros lineales liberados de los concatémeros por restricción con endonucleasas que reconocen un sitio único podrían distinguirse deleciones genómicas (i.e., copias de tamaño menor al silvestre unitario). Los concatémeros generados mediante RCA también podrían servir de molde para aumentar la amplificación de genomas lineales unitarios mediante PCR de largo alcance (LPCR) con parejas de oligonucleótidos iniciadores divergentes tipo-específicos. MÉTODOS. En este estudio probamos si la RCA seguida de restricción con Bam HI —para la cual hay un sitio único en el genoma de VPH16— o seguida de LPCR –empleando una pareja de oligos divergentes VPH16-específicos y localizados respectivamente al final de la región larga de control y al principio del ORF E6 del genoma de VPH16— permite identificar deleciones de VPH16 en raspados cervicales con infección única por VPH16 diagnosticados mediante PCR multiplex anidada (PCRMA) del oncogén viral E6. RESULTADOS. Después de restringir con Bam HI los concatémeros generados por RCA a partir del DNA de ocho raspados cervicales VPH16-positivos, sólo uno generó productos de amplificación con dos bandas, de 5.5 kilobases (kb) y >10 kb. Al emplearlas por separado en la PCRMA, la banda de 5.5 kb generó el amplicón esperado para VPH16 y la >10 kb los amplicones de VPH16 y VPH18. Dos de las tres mezclas de LPCR con concatémeros preamplificados por RCA —a partir de tres raspados cervicales adicionales VPH16-positivos— dieron la banda única de 7.9 kb esperada para genomas de VPH16 completos. CONCLUSIONES. El raspado con la banda de 5.5 kb está infectado por una deleción de VPH16 de 2.4 kb que no afecta el oncogén E6, el sitio Bam HI y la secuencia de los iniciadores divergentes VPH16-específicos. La banda >10 kb generada en la misma muestra contiene concatémeros de VPH16 y VPH18 no restringidos que identifican una infección por ambos tipos virales. Por lo tanto, la preamplificación del DNA de raspados cervicales VPH16-positivos mediante RCA 1) efectivamente distingue deleciones de los genomas de VPH16 y 2) aumenta la detección de infecciones múltiples; además 3) la RCA seguida de LPCR con iniciadores divergentes tipo-específicos también aumenta la detección de formas episomales de VPH16.""Human papillomavirus (HPV) genomes infecting epithelial cells of the uterine cervix replicate as double-stranded circular DNA episomes of ~7,900 base pairs. Quantifying the load of the E2 and E6 viral genes our laboratory obtained indirect evidence that random deletions of the HPV type 16 (HPV16) genome occur in cervical infections. By means of rolling circle amplification (RCA) circular episomes may be copied as concatemers —linear DNA molecules consisting of multiple tandem copies of monomeric genomes— and electrophoretic analysis of the linear monomeric genomes released from concatemers by restriction endonucleases recognizing a single site could distinguish genome deletions (i.e., monomer copies smaller that the wild type unitary genome). RCA generated concatemers could also serve as templates to increase amplification of linear unitary genomes by means of long-range PCR (LPCR) with divergent type-specific oligonucleotide primer pairs. METHODS. In this study we tested whether RCA followed by Bam HI restriction —for which there is a single site in the HPV16 genome— or followed by LPCR —using a pair of divergent HPV16-specific primer oligonucleotides located respectively at the end of the long control region and the beginning of the E6 ORF— could identify deletions in cervical scrapes with HPV16 single infection diagnosed by nested multiplex PCR (NMPCR) of the viral oncogene E6. RESULTS. After Bam HI restriction of RCA-generated concatemers from DNA of eight VPH16-positive cervical scrapes, only one generated amplification products and had two DNA bands, of 5.5 kilobase (kb) and >10 kb. Used separately in NMPCR the 5.5 kb band generated the expected HPV16 amplicon and the >10 kb band the HPV16 and HPV18 amplicons. Two of the three LPCR mixtures with RCA-preamplified concatemers —from three additional HPV16-positive cervical scrapes— generated the single DNA band of 7.9 kb expected for complete HPV16 genomes. CONCLUSIONS. The cervical scrape with the 5.5 kb band is infected by a 2.4 kb HPV16 deletion that does not affect the E6 oncogene, the Bam HI site and the HPV16-specific divergent primer sequences. The >10 kb band generated by the same sample corresponds to unrestricted HPV16 and HPV18 concatemers and identifies infection with both viral types.
Functional properties of Ditaxis heterantha proteins
Get PDF"Ditaxis heterantha is a plant of the Euphorbiaceae family that grows in semiarid regions of Mexico. It produces yellow pigmented seeds that are used for coloring of foods. The seeds contain about 20% of proteins. Proteins of D. heterantha were extracted and fractionated on the basis of solubility. Three main protein fractions were obtained: glutelins, 488 ± 0.5; albumins, 229 ± 2; and total globulins, 160 ± 1 g/kg. The amino acid profile was evaluated for each fraction and protein isolated, where the protein isolate contains essential amino acids such as Val, Phe, Tyr, and Leu. A calorimetric study showed that globulins and glutelins have a high denaturing temperature between 100 and 106°C, while albumins showed a denaturing temperature at 76°C. The protein isolate and its fractions exhibited functional properties: the isolated protein demonstrated good oil‐holding capacity of 40.7 g/kg. Foam capacity (FC) and foam stability (FS) were observed principally in glutelins and globulins where FC maximum was 330% and the FS was 28 min. The emulsifying capacity was observed in the same fractions of glutelins and globulins, followed by albumins. However, the glutelin fraction in particular was the only fraction that exhibited emulsifying stability at pH 5, 6, and 7. Gelling capacity was observed in albumins and globulins. This study indicated that protein isolated from D. heterantha could be used in food formulations due to its essential amino acid profile. Glutelin could be used as an emulsifying additive. Additionally, glutelin and globulin were stable at temperatures above 100°C; this is an important factor in food industry, principally in heat processes.
Wavelet multifractal detrended fluctuation analysis of encryption and decryption matrices
Get PDF"In this paper, we study in detail the multifractal features of the main matrices of an encryption system based on a rule-90 cellular automaton. For this purpose we consider the scaling method known as the wavelet transform multifractal detrended fluctuation analysis (WT-MFDFA). In addition, we analyze the multifractal structure of the matrices of different dimensions, and find that there are minimal differences in all the examined multifractal quantities such as the multifractal support, the most frequent singularity exponent, and the generalized Hurst exponent.
Preservation of a two-wing Lorenz-like attractor with stable equilibria
Get PDF"In this paper, we present the preservation of a two-wing Lorenz-like attractor when in the Lorenz system a feedback control is applied, making two of its equilibria a sink. The forced system is capable of generating bistability and the trajectory settles down at one stable equilibrium point depending on the initial condition when the forced signal is zero. Due to a variation in the coupling strength of the control signal the symmetric equilibria of the Lorenz system move causing the basins of attraction to be the dynamic bounded regions that change accordingly. Thus, the preservation of a two-wing Lorenz-like attractor is possible using a switched control law between these dynamic basins of attraction. The forced switched systems also preserve multistability regarding the coupling strength and present multivalued synchronization according to the basin of attraction in which they were initialized. Bifurcations of the controlled system are used to exemplify the different basins generated by the forcing. An illustrative example is given to demonstrate the approach proposed.
Effect of seed density in the germination of three species of Astrophytum (Cactaceae)
Get PDF"Se colectaron frutos de poblaciones naturales de Astrophytum capricorne, A. myriostigma y A. ornatum en Coahuila, Durango e Hidalgo, respectivamente, con el objetivo de evaluar el efecto de la agrupación de semillas en la germinación, comparando tratamientos de 10 semillas agrupadas y 10 semillas no agrupadas (individuales). Las tres especies mostraron mayor porcentaje de germinación en semillas individuales. La germinación fue igual de rápida en semillas agrupadas e individuales para las tres especies. Estos resultados contrastan con el fenómeno de "rivalidad entre hermanos" que plantea la inhibición de la germinación en altas densidades como un mecanismo para evitar la competencia entre semillas hermanas con el fin de disminuir la competencia entre plántulas.""Fruits were obtained from wild populations of Astrophytum capricorne, A. myriostigma and A. ornatum in Coahuila, Durango and Hidalgo, respectively, in order to evaluate the effect of grouping on seed germination, comparing treatments of 10 individual seeds and 10 grouped seeds. All three species showed higher germination for individual seeds. Germination speed was not related to seed density. These results are in contrast with "sibling rivalry" hypothesis in which competition between sister seeds can inhibit germination to avoid competition due to a high density of seedlings.
Lithostratigraphic analysis and geochemistry of a vitric spatter-bearing ignimbrite: the Quaternary Adeje Formation, Cañadas volcano, Tenerife
Get PDF"The 1.5-Ma Adeje Formation in SW Tenerife contains an ignimbrite sheet with remarkable textural and chemical complexity. A basal Plinian pumice-fall layer is overlain by a partly welded compound ignimbrite in which phonolitic pumice lapilli and dense obsidian spatter rags with irregular, fluidal-shaped margins are supported in a poorly sorted tuff matrix. The lower ignimbrite flow-unit contains accretionary lapilli in its upper part, overlain by an ash-pellet-bearing fallout layer from a co-ignimbrite plume. The upper ignimbrite flow-unit comprises a locally welded massive lapilli-tuff that grades up into lithic breccia containing juvenile obsidian blocks and both cognate and vent-derived lithic blocks. Geochemically, the Adeje Formation shows two distinct juvenile populations that relate to crystal-poor and crystal-rich magma types. Crystal-rich juvenile clasts contain multiple compositions of ilmenite and magnetite, and crystal aggregates of bytownite (An79-86). The varied assemblage of juvenile clasts reflects an eruptive style that may have involved rapid changes in magma chamber pressure associated with caldera collapse, and possibly the disruption of a lava lake. The Adeje eruption started with a Plinian explosive phase that rained ash and pumice lapilli across SW Tenerife; followed by pyroclastic fountaining feeding density currents with explosive ejecta of juvenile glassy material producing the coarse, spatter-bearing ignimbrite facies. A short pause between pyroclastic density currents is recorded by the co-ignimbrite ash and pellet-fall bed. The climactic phase of the eruption probably involved caldera subsidence as recorded by a widespread massive heterolithic breccia.
Optimización de la producción de vasostatina 30 y su proteína de fusión VS_VI en biorreactor
Get PDF"La angiogénesis es la formación de nuevos vasos sanguíneos a partir de los
preexistentes y juega un papel clave en el desarrollo y progresión de
enfermedades crónico-dependientes como la retinopatía diabética, artritis
reumatoide, cáncer, entre otras. Actualmente, se ha generado gran interés por el
diseño y estudio de nuevos péptidos antiangiogénicos que contribuyan a la
inhibición del crecimiento y metástasis tumoral con los menores efectos adversos.
Las vasoinhibinas (Vi) y la vasostatina (Vs) son péptidos aminoterminales
inhibidores de la angiogénesis que son generados por proteólisis de la prolactina
(PRL) y la calreticulina (CALR), respectivamente, y que además son prometedores
agentes terapéuticos en el tratamiento contra el cáncer. La vasoinhibina de 14.1
kDa (Vi-II-14.1), la vasostatina de 30 residuos de aminoácidos que comprende de
135-164 a.a. de la CALR (Vs30) y su respectiva proteína de fusión denominada
VS_VI, han demostrado tener una significativa actividad antiproliferativa de células
endoteliales estimuladas con Bradicidina.
Debido a que se conoce muy poco del mecanismo de acción de la Vs30 y por
consiguiente de su proteína de fusión VS_VI, el objetivo del presente trabajo fue
optimizar la producción de las proteínas Vs30 y VS_VI en biorreactor mediante el
uso de diseños experimentales y la metodología de superficie de respuesta
(RSM), para así contar con una cantidad suficiente de éstas proteínas y
caracterizarlas posteriormente.
Los genes que codifican las proteínas Vs30 y VS_VI fueron clonados en el vector
pGVR (pET22b lacI-) bajo el promotor de T7. Las construcciones fueron
transformadas en E. coli BL21-SI y BL21-SI/pLysSRARE, respectivamente. Se
realizaron dos diseños experimentales, el diseño Box-Behnken para la
optimización de Vs30 y el diseño compuesto central para optimizar la proteína de
fusión VS_VI. En la producción de las proteínas recombinantes se evaluó el efecto
de los factores de temperatura de inducción (Ti), tensión de oxígeno disuelto
(TOD) y pH a tres niveles cada uno. Mediante modelos de segundo orden se
encontró que las mejores condiciones para la producción total de Vs30
recombinante fueron: pH 7, TOD 20% y 28.8 ºC de Ti; y para VS_VI recombinante
total fueron: pH 6.97 y 27.82 ºC Ti; mientras que para Vs30 soluble fueron: pH 7,
TOD 20% y 27.1ºC de Ti; y para VS_VI soluble fueron: pH 7.0 y 28.5ºC de Ti.
El diseño compuesto central es el mejor diseño experimental para optimizar la
producción de proteínas recombinantes, ya que con este diseño se obtuvieron las
condiciones óptimas para la producción de rVS_VI, objetivo que no se logró al
utilizar el diseño Box-Behnken para la producción de rVs30. El uso de
biorreactores es una herramienta muy útil en la optimización de la producción de
proteínas de interés terapéutico debido al mantenimiento de condiciones
controladas durante todo el cultivo.""Angiogenesis is the formation of new blood vessels from preexisting ones and
plays a key role in development and progression of angiogenic-dependent
diseases such as diabetic retinopathy, arthritis rheumatoid, and cancer, among
others. The design and study of new antiangiogenic peptides that contribute to
inhibition of tumor growth and metastasis with the minimum secondary effects, has
generated a considerable interest. Vasoinhibins (Vi) and vasostatin (Vs) are Nterminal
peptides released by proteolysis of human prolactin (hPRL) and
calreticulin (CALR), respectively, that inhibit angiogenesis besides to be promising
therapeutic agents in cancer treatment. The vasoinhibin of 14.1 kDa (Vi-II-14.1),
the vasostatin of 30 amino acids residues from 135-164 a.a. of CALR (Vs30) and
their fusion protein VS_VI, have shown a significant antiproliferative activity on
endothelial cells in presence of Bradykinin.
Most of the mechanism of action Vs30 remains unknown, and also of its fusion
protein VS_VI, therefore, the aim of this study was to optimize the production of the
antiangiogenic proteins Vs30 and VS_VI in bioreactor, by using experimental
designs and the response surface methodology (RSM) to have enough quantity of
these proteins to further characterization.
The Vs30 and VS_VI genes were cloned into pGVR (pET22b lacI-) vector under T7
promoter. The constructions were transformed into E. coli BL21-SI and BL21-
SI/pLysSRARE, respectively. Two experimental designs were used, the Box-
Benhken design to optimize Vs30 and the central composite design to optimize the
fusion protein VS_VI. In the recombinant protein production, the effect of post
induction temperature (Ti), dissolved oxygen tension (DOT), and pH factors were
evaluated at three levels each. By second order models we found that the best
culture conditions for total rVs30 were: pH 7, DOT 20% and 28.8ºC of Ti; and for
total rVS_VI were: pH 6.97 and 27.82ºC of Ti; meanwhile, for rVs30 soluble the
best conditions were: pH 7, DOT 20% and 27.1ºC of Ti; and for rVS_VI soluble
were: pH 7.0 and 28.5ºC of Ti.
The central composite (CC) design is the best experimental design to optimize
recombinant protein production. With the CC design was posible to obtain the
optimum conditions for rVS_VI production, aim that was not posible to reach by
using Box-Behnken design. The use of bioreactors in optimization matters is a very
useful tool due to the maintenance of controlled culture conditions, which leads to
improve production of recombinant proteins of therapeutic interest.