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Estudos funcionais in vitro de variantes no gene LDLR
No full textTese de Mestrado, Biologia Humana e Ambiente, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasA Hipercolesterolemia Familiar (FH) é uma doença autossómica semi-dominante. Alterações no gene
do recetor da LDL (LDLR) são a principal causa de FH. Indivíduos diagnosticados com esta doença
apresentam valores elevados de colesterol LDL (c-LDL) desde o nascimento, podem desenvolver
xantomas tendinosos, bem como um risco elevado de desenvolver doença coronária prematura. A FH é
das doenças genéticas mais comuns, afetando cerca de 20 milhões de pessoas mundialmente. Na maior
parte dos casos a doença é causada por variantes do tipo loss-of-function no gene LDLR, mas também
devido a outros genes, tais como APOB e PSCK9. Recentemente foi criado um conjunto de diretrizes
especificas para a classificação de variantes no gene LDLR. Nestas diretrizes um dos elementos-chave
na classificação é a caracterização funcional das variantes, permitindo um diagnóstico mais definitivo.
O objetivo deste trabalho foi realizar o estudo funcional de variantes no gene LDLR, bem como a
confirmação e validação de resultados de estudos funcionais em variantes estudadas anteriormente por
microscopia eletrónica e por citometria de fluxo.
De forma a realizar o estudo funcional, foram obtidas variantes através de mutagénese dirigida. Para se
realizar os ensaios funcionais, as variantes foram transfetadas em células CHO-ldlΔ7. Foram realizados
em triplicado três tipos de ensaios, expressão, ligação e internalização, utilizando citometria de fluxo.
Foram caracterizadas funcionalmente oito variantes: p.(Cys89Arg), p.(Glu277Lys), p.(Phe403del),
p.(Val429Met), p.(Pro608His), p.(Pro608Ser), p.(Leu654Phe) e p.(Val827Ile). Após o estudo funcional,
a classificação de 2 variantes alterou passando de variante de significado incerto (VUS) para Patogénica,
e de provavelmente patogénica para Patogénica, com base no seu estudo funcional.
Este trabalho mostra a importância do estudo funcional, para um diagnóstico definitivo das variantes
que afetam o gene LDLR e consequentemente o seu ciclo celular. Permitindo que com o diagnóstico
definitivo, possa ser iniciado um tratamento mais adequado, melhorando a qualidade de vida do doenteFamilial Hypercholesterolemia (FH) is a semi-dominant autosomal disease. Changes in the LDL
receptor (LDLR) gene are the main cause of FH. Individuals diagnosed with this disease have high LDL
cholesterol (c-LDL) values since birth, may develop tendon xanthomas, as well as a high risk of
developing premature coronary disease. FH is one of the most common genetic diseases, affecting
around 20 million people worldwide. In most cases, the disease is caused by loss-of-function variants in
the LDLR gene, but also due to other genes, such as APOB and PSCK9. Recently, a set of specific
guidelines was created for the classification of variants in the LDLR gene. In these guidelines, one of
the key elements in the classification is the functional characterization of the variants, allowing a more
definitive diagnosis.
The objective of this work was to performed functional study of variants in the LDLR gene, as well as
the confirmation and validation of results from functional studies on variants previously studied by
electron microscopy and flow cytometry.
In order to carry out the functional study, variants were obtained through directed mutagenesis. To
perform functional assays, the variants were transfected into CHO-ldlΔ7 cells. Three types of assays
were performed in triplicate, expression, binding and internalization, using flow cytometry.
Eight variants were functionally characterized: p.(Cys89Arg), p.(Glu277Lys), p.(Phe403del),
p.(Val429Met), p.(Pro608His), p.(Pro608Ser), p.(Leu654Phe) and p. (Val827Ile). After the functional
study, the classification of two variants changed from variant of uncertain significance (VUS) to
Pathogenic, and from probably pathogenic to Pathogenic, based on their functional study.
This work shows the importance of functional studies for a definitive diagnosis of variants that affect
the LDLR gene and consequently its cell cycle. Allowing that with the definitive diagnosis, more
appropriate treatment can be initiated, improving the patient's quality of life
Retrospective analysis of quality of care bundles in MSSA bacteraemia management : a retrospective cohort study
No full textTrabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2024Contexto: A bacteriemia causada por Estafilococos aureus é uma causa importante de morbilidade e mortalidade, tanto na comunidade, como nos cuidados de saúde. A implementação de um conjunto padronizado de indicadores de qualidade de cuidados (QoC bundle) parece melhorar a sua abordagem e taxa de sobrevivência. Objetivo: O principal objetivo deste estudo foi avaliar a necessidade, eficácia e adesão a um QoC bundle para a abordagem à bacteriemia por Estafilococos aureus meticilina-sensível (MSSA). Métodos: Este estudo observacional de coorte, utilizou uma análise retrospetiva dos registos eletrónicos dos doentes com hemoculturas positivas a MSSA, no Hospital Prof. Doutor Fernando Fonseca (HFF), entre 1 de janeiro de 2022 e 31 de dezembro de 2023. Posteriormente, foi realizada uma análise descritiva, razões de chances (OR) e o seu intervalo de confiança (IC), para avaliar o impacto da adesão ao QoC bundle, na mortalidade. Resultados: Foram incluídos 152 doentes com bacteriemia por MSSA. A taxa de mortalidade por todas as causas foi de 34,2%. A maioria dos doentes recebeu tratamento adequado (80,9%), enquanto a adesão às hemoculturas de seguimento, ao controlo precoce de foco e à duração adequada do tratamento foi baixa (32,9%, 47,3% e 36,3%, respetivamente). Foi observada uma alta adesão (75%) ao QoC bundle em apenas 30,9% dos casos. As variáveis associadas a maior mortalidade foram: idade igual ou superior a 65 anos (OR=3,16; IC95%: [1,46-6,86]), doença cardiovascular (OR=2,78; IC95%: [1,13-6,87]), neoplasia (OR=3,26, IC95%: [1,59-6,70]), bacteriemia complicada (OR=3,87; IC95%: [1,87-8,04]), e endocardite infecciosa (OR=7,97; IC95%: [2,08-30,45]). O controlo precoce de foco foi o único indicador de qualidade de cuidados que reduziu significativamente as chances de morte (OR=0,27; IC95%: [0,09-0,79]). Conclusão: A adesão ao QoC bundle proposto foram baixas, especialmente a realização de hemoculturas de seguimento, controlo precoce de foco e duração adequada do tratamento. O controlo precoce do foco infeccioso foi um fator crítico na melhoria dos outcomes dos doentes. São necessários estudos prospetivos multicêntricos nesta área, para validar estes resultados e explorar estratégias para melhorar a adesão ao QoC bundle.Background: Staphylococcus aureus bacteraemia (SAB) is an important cause of morbidity and mortality in both community and healthcare settings. There is evidence that the implementation of a standardised quality of care (QoC) bundle improves its management and survival rates. Objectives: This study mainly aimed to assess the need, effectiveness, and adherence to a QoC bundle for the management of methicillin-sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) bacteraemia. Methods: In this observational cohort study, a retrospective analysis was made to the electronic medical records of patients with positive blood cultures in Hospital Prof. Doutor Fernando Fonseca (HFF), between the 1st of January of 2022 and the 31st of December of 2023. A descriptive analysis, odds ratios (OR), and its confidence interval (CI), were performed to evaluate the impact of adherence to QoC indicators on mortality. Results: A total of 152 patients with MSSA bacteraemia were included. The all-cause mortality rate was 34.2%. The majority of patients received appropriate treatment (80.9%), while adherence to follow-up blood cultures, early source control and adequate treatment duration was low (32.9%, 47.3% and 36.3%, respectively). High adherence (75%) to the QoC bundle was observed in only 30.9% of cases. The variables significantly associated with death were: age equal or above 65 years (OR=3.16; 95%CI: [1.46-6.86]), cardiovascular disease (OR=2.78; 95%CI: [1.13-6.87]), malignancy (OR=3.26, 95%CI: [1.59-6.70]), complicated bacteraemia (OR=3.87; 95%CI: [1.87-8.04]), and infective endocarditis (OR=7.97; 95%CI: [2.08-30.45]). Early source control was the only QoC indicator that significantly reduced the odds of death (OR=0.27; 95%CI: [0.09-0.79]). Conclusion: Adherence rates to the proposed QoC bundle for the management of SAB were low, especially to the performance of follow-up blood cultures, early source control and appropriate treatment duration. Early source control was critical in improving patient’s outcomes. Further prospective multi-centre studies are needed to validate these findings and explore strategies to improve QoC bundle adherence
Padrão microbiológico das infeções associadas aos cuidados de saúde numa unidade de cuidados intensivos pediátrica
No full textTrabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2024Introdução: As infeções associadas aos cuidados de saúde (IACS) são um problema contínuo em ambiente hospitalar que, apesar de um controlo e medidas de prevenção constantes, continuam a ter uma prevalência elevada. Estas infeções ocorrem após um internamento superior a 48 horas e contribuem para o aumento da morbimortalidade.
Objetivo: Estudar o padrão microbiológico da Unidade de Cuidados Intensivos Pediátrica do Hospital Santa Maria de forma a caracterizar as IACS nos últimos dois anos, assim como o perfil de resistências aos antibióticos das bactérias identificadas.
Material e métodos: Estudo observacional retrospetivo, com base na consulta dos processos clínicos e base de dados da unidade, das infeções associadas a cuidados de saúde adquiridas na Unidade de Cuidados Intensivos Pediátricos do Hospital Santa Maria, no período compreendido entre 1 de janeiro 2022 e 31 de dezembro de 2023.
Resultados: No período estudado ocorreram 737 admissões na UCIPed do HSM, sendo elegíveis 550 por apresentarem um internamento de duração igual ou superior a 48 horas. Ocorreram 71 IACS em 57 crianças e a incidência global de IACS foi de 12,9%, das quais 85,9% foram infeções respiratórias, 8,5% bacteriemias, 4,2% infeções urinárias; houve um caso de infeção por Clostridium difficile. Foram isoladas 83 bactérias, das quais 19,3% correspondiam a bactérias Gram+ e 81,9% a Gram-. Foram detetadas 2,4% (2/83) de bactérias MRSA, 21% (7/33) Enterobactereáceas produtoras de ESBL e a resistência a carbapenemes registou-se em 4,8% (4/83) dos isolamentos.
Não se encontrou associação entre ocorrência de IAC e doença crónica, mas quase todos os doentes com IAC tinham um dispositivo médico invasivo. A duração de internamento e de ventilação invasiva, bem como a taxa de mortalidade, foram significativamente superiores nos doentes com IAC, relativamente aos restantes.
Conclusão: A presença de pelo menos uma IAC associou-se a maior duração de internamento e mortalidade. Os isolamentos realizados neste período de tempo permitiram-nos concluir que os valores de MRSA, resistências a vancomicina e a carbapenemes assim como a presença de bactérias produtoras de carbapenemases são inferiores quando comparadas com Portugal e Europa.Introduction: Healthcare-associated infections (HAIs) are an ongoing problem in hospital environments which, despite constant control and prevention measures, continue to have a high prevalence. These infections occur after hospitalization for more than 48 hours, thus contributing to an increase in morbidity and mortality.
Objectives: To study the microbiological pattern of the Pediatric Intensive Care Unit at Santa Maria Hospital in order to characterize HAIs in the last two years, as well as the antibiotic resistance profile of the identified bacteria. Material and methods: Retrospective review of healthcare related infections in patients hospitalized for at least 48 hours in the Pediatric Intensive Care Unit at Hospital Santa Maria, between 2022 and 2023.
Results: During the study period, there were 737 admissions to the PICU, 550 of which were eligible for inclusion. There were 71 HAIs in 57 children and the overall incidence of HAIs was 12.9%, of which 85.9% were respiratory infections, 8.45% bacteremia, 4.2% urinary infections; there was one case of Clostridium difficile infection. Eighty-three microorganisms were isolated - 19.3% were Gram+ bacteria and 81.9% Gram-. In this unit, 2.4% (2/83) of the microorganisms corresponded to MRSA; 21% (7/33) of Enterobacteriaceae were ESBL and resistance to carbapenems was registered in 4.8% (4/83) of the isolates. No association was found between the occurrence of HAI and chronic disease, but almost all patients with HAI had an invasive medical device. The length of stay and invasive ventilation, as well as the mortality rate, were significantly higher in patients with HAI compared to the rest.
Conclusion: The presence of at least one HAI was associated with longer length of stay and mortality. The isolations carried out during this period of time allowed us to conclude that the values of MRSA, resistance to vancomycin and carbapenems as well as the presence of carbapenemase-producing bacteria are lower when compared to Portugal and Europe
Uma marca hoteleira de turismo rural, de natureza e sustentável
No full textEsta investigação aborda a criação de uma identidade visual para um hotel no centro de Portugal, que se situa em Pedreiras, Porto de Mós, uma área rodeada de natureza, monumentos históricos, o maior epicentro da cerâmica em Portugal e bastante perto de trilhos, ecopistas e praias.
Este estudo analisa o contributo que uma boa identidade visual pode dar para o reconhecimento e coerência de um espaço. Neste sentido, foi efetuada uma pesquisa por diversos métodos de recolha e análise de informação e analisados diversos casos de referência em Portugal Continental, que visam trazer conhecimento do mercado e, consequentemente, direcionam a investigação e o projeto e contribuem para o sucesso de um negócio.
A metodologia de investigação está assente em métodos intervencionistas e não intervencionistas.
Assim, foi desenvolvido um projeto prático, que passou pela nomeação e criação de uma marca gráfica que represente um estabeleci- mento hoteleiro, cujos valores passam pelo turismo rural e sustentável, bem como uma série de objetos de comunicação, essenciais ao dia a dia de um hotel.This research addresses the creation of a visual identity for a hotel in central Portugal, which is in Pedreiras, Porto de Mós, an area surrounded by nature, historical monuments, the largest epicenter of ceramics in Portugal and quite close to trails, eco paths and bea ches.
This study analyzes the contribution that a good visual identity can give to the recognition and coherence of a space. In this sense, research was carried out by various methods of information collection and analysis and several reference cases in mainland Portugal were analyzed, which aim to bring knowledge of the market and, consequently, direct the research and the project and contribute to the success of a business.
The research methodology is based on interventionist and non-interventionist methods.
Thus, a practical project was developed, which included the naming and creation of a graphic brand that represents a hotel establish- ment, whose values are rural and sustainable tourism, as well as a series of communication objects, essential to the daily life of a hotel.N/
O contributo do design de comunicação na formação sobre educação sexual em contexto familiar a crianças entre os 6 e os 10 anos
No full textA Sexualidade define a nossa personalidade, define-nos enquanto pessoas, por isso é de todo o interesse e da maior relevância a Educação Sexual na formação das crianças sem a presença de tabus e preconceitos. Deve ser encarada com naturalidade para que a sua instrução seja o mais completa possível, de forma a traduzir-se em melhores decisões de proteção no futuro. Sem educação sexual as crianças são mais vulneráveis, logo estão mais expostas a sofrerem de alguma forma de Violência Sexual.
Falar sobre a sexualidade é ainda um tema tabu nas conversas familiares, por acharem que sexualidade se trata apenas de sexo ou relações sexuais. Porém, a sexualidade é um conceito abrangente que inclui diversos temas que devem ser trabalhados desde a infância, de modo que a criança adquira conceitos que contribuam para a sua proteção e felicidade.
Por essa razão, pretendeu-se desenvolver um Jogo, a ser utilizado em contexto familiar, com o intuito de facilitar e auxiliar a comunicação entre os pais e as crianças sobre assuntos relacionados com a Educação Sexual, em particular na questão da Violência Sexual.
Esta investigação, que se constitui como um projeto final, possui uma abordagem prática que se situa na interseção do design de comunicação com a área da educação sexual – como facilitador da formação sobre a Violência Sexual.
Na primeira fase deste estudo, é desenvolvido um enquadramento teórico sobre os diferentes temas relacionados com a área, destacando-se a importância da educação sexual, a violência sexual infantil e as suas consequências, o jogo como objeto de interatividade, entre outros. Na segunda fase do estudo foi desenvolvido um protótipo físico de jogo didático. Foi aplicada uma abordagem metodológica que centra o processo de desenvolvimento nas necessidades e capacidades cognitivas do utilizador. Numa fase final, o objeto desenvolvido foi revisto através dos testes de usabilidade, permitindo assim aceder-se a uma pré-conclusão do Jogo criado.
O projeto final, o Jogo, pretende promover atividades desafiantes e inovadoras, sem respostas imediatas, para que as crianças possam construir e desenvolver conhecimentos, atitudes e comportamentos seguros sobre a temática em desenvolvimento.Sexuality defines our personality, it defines us as people, so it is of great interest and of the greatest relevance to Sexual Education in the education of children without the presence of taboos and prejudices. It should be taken naturally so that your education is as complete as possible, to translate into better protection decisions in the future. Without sex education, children are more vulnerable, so they are more exposed to some form of Sexual Violence.
Talking about sexuality is still a taboo subject in family conversations because they think that sexuality is only about sex or sexual relations. However, sexuality is a broad concept that includes several themes that should be worked on from childhood, so that children acquire concepts that contribute to their protection and happiness.
For this reason, we intend to develop a Game, to be used in a family context, in order to facilitate and help communication between parents and children on issues related to Sexual Education, in particular on the issue of Sexual Violence.
This investigation, which is a final project, has a practical approach that is located at the intersection of communication design with the area of sex education – as a facilitator of training on Sexual Violence.
In the first phase of this study, a theoretical framework is developed on the different themes related to the area, highlighting the importance of sexual education, child sexual violence and its consequences, the game as an object of interactivity, among others. In the second phase of the study, a physical prototype of a didactic game was developed. A methodological approach was applied that focuses the development process on the user's needs and cognitive abilities. In a final phase, the developed object was reviewed through usability tests, thus allowing access to a pre-conclusion of the Game created.
The final project, the Game, aims to promote challenging and innovative activities, without immediate answers, so that children can build and develop knowledge, attitudes, and safe behaviours on the theme under development.N/
Splicing regulation in heart failure
No full textTrabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2024O splicing alternativo, um dos responsáveis pela enorme diversidade do proteoma celular, é essencial para a diferenciação celular, organização de tecidos e desenvolvimento de órgãos. Devido aos avanços no conhecimento acerca da biologia do RNA, impulsionados pela sequenciação de larga escala e pelas ferramentas bioinformáticas utilizadas para analisar os dados obtidos por estas tecnologias, é cada vez mais evidente que o splicing desempenha um papel importante no desenvolvimento, na homeostase e na doença cardíaca. Apesar deste progresso, ainda não são totalmente compreendidos os mecanismos moleculares que contribuem para o desenvolvimento e perpetuação da insuficiência cardíaca, em particular o papel e a função das várias isoformas de proteínas originadas através do splicing alternativo. Também a regulação do splicing por proteínas de ligação ao RNA e sua organização em redes complexas não se encontra completamente esclarecida. Compreender a influência do splicing nos transcritos cardíacos é essencial para caracterizar os processos fisiopatológicos e de desenvolvimento normal do coração. Isto oferece também a possibilidade de desenvolver novas ferramentas de diagnóstico, biomarcadores e terapias moleculares com aplicação na insuficiência cardíaca. Esta revisão sumariza conceitos básicos de insuficiência cardíaca e splicing, e explora a associação entre as variantes originadas pelo splicing e a insuficiência cardíaca.Alternative splicing, responsible for generating protein diversity, is essential for cell differentiation, tissue organization and organ development. Due to advancements in our knowledge in the field of RNA biology, boosted by next generation sequencing and bioinformatics, it is increasingly evident that splicing plays an important role in cardiac development, homeostasis and disease. Despite this progress, a complete understanding of the molecular mechanisms that contribute to heart failure development and perpetuation remains elusive, particularly the role and regulation of transcript isoforms generated by alternative splicing. Also not completely uncovered is the regulation of splicing by RNA-binding proteins and their organization in complex networks. Understanding the influence of splicing on cardiac genes is crucial for unravelling the processes that the heart undergoes during development and disease, with the possibility of offering novel insights into diagnostic tools, biomarkers and molecular therapy for heart failure. This review recapitulates basic heart failure concepts and splicing mechanisms, and explores how splicing variants and their regulation are associated to heart failure
Perturbação de acumulação : estudo retrospetivo dos doentes internados no centro hospitalar psiquiátrico de Lisboa nos últimos 5 anos
No full textTrabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2024A Perturbação de Acumulação corresponde a uma perturbação psiquiátrica estabelecida pela American Psychiatric Association, no DSM-5, em 2013.
Este transtorno caracteriza-se pela aquisição excessiva de bens e pela dificuldade persistente do indivíduo em descartar objetos, independente do seu valor real, condicionando um armazenamento exagerado com prejuízo para o próprio, para a sua família e para a comunidade em casos extremos de desarrumação.
É uma perturbação subdiagnosticada, sendo a sua prevalência estimada em 2.5% na população adulta. Na maioria dos casos a instalação dos sintomas surge na adolescência, com evolução do quadro de forma progressiva.
Embora ainda não exista um tratamento padronizado, de acordo com a literatura mais recente, a Psicoterapia Cognitivo-Comportamental aparenta constituir a melhor abordagem terapêutica na redução dos comportamentos de acumulação. Entre os fatores de mau prognóstico configuram, a sintomatologia em idades precoces, a ocorrência de eventos traumáticos, a relação emocional com os objetos, a ausência de crítica para o estado mórbido e a presença de comorbilidades psiquiátricas, nomeadamente a Perturbação Depressiva Major, a Perturbação de Ansiedade Generalizada e a Perturbação de Ansiedade Social.
Pretendeu-se com este trabalho realizar um estudo retrospetivo dos utentes internados no Centro Hospitalar Psiquiátrico de Lisboa nos últimos 5 anos com o diagnóstico principal ou secundário de Perturbação de Acumulação, explorando a epidemiologia, as características clínicas, neuroimagiológicas e terapêuticas e depois integrando os resultados na evidência científica atualizada relativa a esta temática.Hoarding Disorder corresponds to a psychiatric disorder established by the American Psychiatric Association, in the DSM-5, in 2013.
This disorder is characterized by the excessive acquisition of goods and the individuals persistent difficulty in discarding objects, regardless of their real value, resulting in excessive storage, which is detrimental to themselves, their family and the community in extreme cases of clutter.
It is an underdiagnosed disorder, with its prevalence estimated at 2.5% in the adult population. In most cases symptoms appear during adolescence, with the condition evolving progressively.
Although there is still no standardized treatment, according to the most recent literature, cognitive behavioral psychotherapy appears to be the best therapeutic approach in reducing hoarding behaviors. Among the poor prognostic factors configure symptoms at early ages, the occurrence of traumatic events, the emotional relationship with objects, the absence of criticism for the morbid state and the presence of psychiatric comorbidities, namely major depressive disorder, generalized anxiety and social anxiety disorder.
The aim of this work was to carry out a retrospective study of patients admitted to Centro Hospitalar Psiquiátrico de Lisboa in the last 5 years with a primary or secondary diagnosis of Hoarding Disorder, exploring the epidemiology, clinical, neuroimaging and therapeutic characteristics and then integrating the results into the updated scientific evidence on this subject
Imágenes prohibidas: exilio, represión y censura en la creación artística en el espacio ibérico - siglos XX y XXI
No full textSurge do esforço colectivo no sentido de reflectir e articular novas perspectivas sobre os processos culturais do século XX em Espanha e Portugal. O volume reúne um conjunto de contributos sobre as questões e dificuldades que os criadores culturais enfrentaram no quadro das ditaduras franquista e salazarista-marcelista, ambas caracterizadas pela repressão e perseguição das ideias e da divulgação artística e cultural. O percurso que apresentamos no livro aborda o trabalho de autores reconhecidos e canónicos, bem como a necessidade de recuperar outras autorias invisibilizadas, olhares de conjunto, estudos de caso e reflexões sobre a representações da repressão e da violência no passado recente.Surge del esfuerzo colectivo por pensar y articular nuevas miradas en torno a los procesos culturales del siglo XX en España y Portugal. Recoge un conjunto de contribuciones acerca de las vicisitudes que enfrentó la creación cultural en el marco de las dictaduras franquista y salazarista-marcelista, periodos ambos caracterizados por la represión y persecución de las ideas y de la difusión artística y cultural. El recorrido que presentamos en el libro aborda tanto la obra de autores reconocidos y canónicos como la necesidad de rescate de otras autorías postergadas e invisibilizadas, miradas de conjunto, estudios de caso y reflexiones en torno a las representaciones de la represión y la violencia en el pasado reciente.Este trabalho é financiado por fundos nacionais através da FCT – Fundação para a Ciência e a Tecnologia, I.P., no âmbito do projeto UIDB/00509/2020info:eu-repo/semantics/publishedVersio
Milk preservation by ultrasound technology: Thermosonication and thermal inactivation of Staphylococcus aureus
No full textMestrado em Engenharia Alimentar / Instituto Superior de Agronomia, Universidade de LisboaMilk, while being a very nutritive liquid, is also extremely perishable. In addition, if not properly preserved, milk can endanger consumer’s health due to the potential growth of pathogenic microorganisms that might be present. Heat is the most common method used by the dairy industry for microbial inactivation and milk pasteurization. However, thermal treatments have negative effects on milk nutrients and structure, which are important for human nutrition and to produce other dairy products. Therefore, non-thermal technologies are being developed and studied for the inactivation of microorganisms. Ultrasound utilizes soundwaves that are above the hearing range for humans. When acoustic waves pass through a liquid, food cavitation occurs, with lethal effects on microorganisms. Ultrasound can be combined with heat (thermosonication, TS) for more efficient microbial inactivation. The main objective of this study was to evaluate the efficacy of thermosonication treatments for Staphylococcus aureus pathogen inactivation in whole milk. Thermal inactivation alone was also assessed. The thermal and TS inactivation kinetics were modeled, and thermal resistance parameters were determined. TS treatments using 10 W/mL and isothermal temperatures (58 ºC, 63 ºC, and 66 ºC) were carried out. Exclusively thermal inactivation was investigated for 58 ºC, 63 ºC, 66 ºC, and 72 ºC. Thermosonication demonstrated a significant advantage over conventional thermal inactivation for all tested temperatures. Ultrasound at 58 ºC was much more efficient for S. aureus inactivation, reducing the D-value from 27.93 ± 1.73 to 1.99 ± 0.07 minutes. Reductions in the D-values of much lower magnitude were observed at higher temperatures: at 63 ºC, the D-value decreased from 2.12 ± 0.15 to 1.20 ± 0.07 minutes, and at 66 ºC, it dropped from 1.02 ± 0.06 to 0.14 ± 0.02 minutes. Ultrasound is a promising technology to speed up microbial inactivation and reduce temperatures or times required for milk pasteurization.O leite é um alimento rico em nutrientes, extremamente perecível. A pasteurização do leite cru evita o crescimento de microrganismos de alteração e patogénicos, sendo o calor o método convencional mais utilizado na indústria dos lacticínios para a sua conservação e segurança. Os tratamentos térmicos afetam negativamente os nutrientes e a estrutura do leite. Neste contexto, é pertinente investigar a aplicação de tecnologias não térmicas de pasteurização. Os ultrassons utilizam ondas sonoras acima do alcance auditivo do ser humano. As ondas acústicas quando atravessam um alimento líquido geram a cavitação, que provoca danos letais nos microrganismos. Os ultrassons podem ser combinados com calor (TS, termossonicação) para uma inativação microbiana mais eficiente. O principal objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia da TS na inativação do microrganismo patogénico Staphylococcus aureus no leite. A inativação exclusivamente térmica foi também avaliada. As cinéticas de inativação por TS e inativação térmica foram modeladas e os parâmetros de resistência térmica foram determinados. Os tratamentos TS, com uma densidade de potência acústica de 10 W/mL, foram combinados com temperaturas de 58 ºC, 63 ºC e 66 ºC, enquanto a inativação exclusivamente térmica foi investigada para 58 ºC, 63 ºC, 66 ºC e 72 ºC.
A TS demonstrou uma vantagem significativa sobre a inativação térmica convencional para todas as temperaturas testadas. Ultrassons a 58 ºC foi mais eficiente na inativação de S. aureus, reduzindo o valor D de 27,93 ± 1,73 para 1,99 ± 0,07 minutos. A temperaturas mais elevadas foram registadas reduções no valor D de menor magnitude: de 2,12 ± 0,15 para 1,20 ± 0,07 minutos (a 63 ºC), e de 1,02 ± 0,06 para 0,14 ± 0,02 minutos (a 66 ºC). Os resultados demonstram que os ultrassons são uma tecnologia promissora para acelerar a inativação de microrganismos e reduzir temperaturas e tempos da pasteurização.N/
The role of mesenchymal stem cells in the treatment of temporomandibular disorders
No full textTrabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2024A articulação temporomandibular (ATM) é uma articulação complexa, revestida por cartilagem não hialina, que tem capacidade de reparação limitada. A ATM pode apresentar patologias de etiologia diversa, levando a disfunção da ATM (DTM). A patologia da ATM é muito frequente e o tratamento da DTM é um desafio. As terapêuticas regenerativas surgiram como uma potencial solução para DTM mais complexas ou refratárias. As células estaminais mesenquimatosas (CEM) são células estromais adultas com capacidade de auto-renovação e diferenciação em múltiplas linhagens, com diferentes propriedades, como imunomodulação, efeitos pro-angiogénicos, anti-apoptóticos e antioxidantes. As CEM foram encontradas pela primeira vez na medula óssea, mas sabese atualmente que estão presentes em outros tecidos, como o tecido adiposo, o tecido derivado dos dentes, o tecido derivado do cordão umbilical e os tecidos derivados das articulações. As CEM demonstraram capacidade para regenerar cartilagem, in vitro mas também in vivo. Este trabalho final de mestrado é uma revisão narrativa da literatura, no que respeita ao potencial terapêutico das CEM na DTM. Para além disso, serão apresentados casos clínicos de pacientes com DTM grave, tratados com CEM.Temporomandibular Joint (TMJ) is a complex joint covered by non-hyaline cartilage with limited repair capacity. The TMJ can have different pathologies of various etiologies, leading to TMJ disorders (TMD). The TMJ pathology is highly prevalent pathology and the treatment of TMD can be challenging. Regenerative therapies appeared as a potential solution to more complex or refractory TMD. Mesenchymal stem cells (MSC) are adult stromal cells with the ability to selfrenewal and multilineage differentiation, with different properties, like immunomodulation, proangiogenic, antiapoptotic, and antioxidant effects. MSC were first found in the bone marrow but it is known that they are present in other tissues, like adipose tissue, dental-derived tissue, umbilical cord-derived tissue, and joint-derived tissues. MSC have shown the capacity to regenerate cartilage, in vitro but also, in vivo. This master’s thesis is a narrative review of the literature, concerning the therapeutic potential of MSC in TMD. In addition, we will present clinical cases of patients with advanced TMD, treated with MSC