Repositório Científico de Acesso Aberto da ULisboa
Not a member yet
95032 research outputs found
Sort by
Preservice teachers' assessment decisions: exploring the role of fairness conceptions
No full text© 2025 British Educational Research Association.Teachers' conceptions of fairness influence their approaches to assessment. Perceptions of fair- ness underpin how teachers legitimate their values and provide reasons for teachers to defend assess- ment decisions and actions. This study therefore examined fairness conceptions at a critical stage in teachers' journey towards assessment capacity: their perceptions as teacher candidates. Specifically, we investigated 228 preservice teachers' concep- tions of assessment fairness using the Classroom Assessment Fairness Inventory (CAFI). The results of an exploratory factor analysis (EFA) showed four factors: assessment communication acts, grading de- cisions, responses to cheating and firm assessment decisions. These factors highlighted the domains and underpinning principles of fairness that participating preservice teachers used to evaluate issues of fair- ness in assessment. The results provide initial empir- ical foundations to promote nuanced understandings of fairness in assessment education.info:eu-repo/semantics/publishedVersio
Oxigenoterapia hiperbárica no tratamento da cistite rádica hemorrágica : a experiência de 30 anos do CMSH : um estudo retrospetivo
No full textTese de mestrado, Medicina Hiperbárica e Subaquática, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2024Devido à sua morbilidade e mortalidade consideráveis, a cistite rádica hemorrágica é uma importante complicação da radioterapia pélvica, tendo os atuais tratamentos conservadores uma eficácia muito limitada. O oxigénio hiperbárico tem vindo a demonstrar eficácia no tratamento de lesões induzidas por radiação, como a cistite rádica. Pretende-se analisar a eficácia e o perfil de segurança da oxigenoterapia hiperbárica na cistite rádica hemorrágica refratária. Material e métodos: Análise retrospetiva dos registos clínicos de 290 doentes com cistite rádica hemorrágica refratária tratados com oxigénio hiperbárico no Centro de Medicina Subaquática e Hiperbárica, entre 1994 e 2022. A evolução da hematúria macroscópica foi o parâmetro utilizado para analisar a eficácia do tratamento. Resultados: Em 14,8% dos doentes constataram-se outras lesões rádicas concomitantes, como proctite ou enterite rádicas. Após uma média de 37 sessões, 89,8% dos doentes apresentou resolução da hematúria. Foram identificados efeitos adversos em 5,5% dos doentes. A necessidade de suporte transfusional e tempo entre a radioterapia e o aparecimento de hematúria macroscópica tiveram uma correlação estatisticamente significativa (p value < 0,01) com a taxa de resolução da hematúria. Conclusões: A terapêutica com oxigénio hiperbárico foi segura e eficaz no tratamento da cistite rádica hemorrágica. A presença de lesões rádicas concomitantes foi relativamente frequente, o que torna o oxigénio hiperbárico uma opção como terapêutica inicial nesses doentes.Due to its considerable morbidity and mortality, radiation-induced hemorrhagic cystitis is an important complication of pelvic radiotherapy, with current conservative treatments having very limited effectiveness. Hyperbaric oxygen therapy has been shown to be effective in the treatment of radiation-induced injuries, such as radiation-induced hemorrhagic cystitis. The aim is to analyze the efficacy and safety profile of hyperbaric oxygen therapy in refractory hemorrhagic radical cystitis. Material and methods: Retrospective analysis of the clinical records of 290 patients with refractory hemorrhagic radical cystitis treated with hyperbaric oxygen at the Center for Underwater and Hyperbaric Medicine, between 1994 and 2022. The evolution of macroscopic hematuria was the parameter used to analyze the effectiveness of the treatment. Results: In 14.8% of patients, other concomitant radiation-induced lesions were found, such as proctitis or radical enteritis. After an average of 37 sessions, 89.8% of patients had resolution of hematuria. Adverse effects were identified in 5.5% of patients. The need for blood transfusion and the time between radiotherapy and the appearance of macroscopic hematuria had a statistically significant correlation (p value < 0.01) with the hematuria resolution rate. Conclusions: Hyperbaric oxygen therapy was safe and effective in the treatment of radiationinduced cystitis. The presence of concomitant radiation-induced lesions was relatively common, which makes hyperbaric oxygen an excellent choice as an initial therapy in these patients
The impact of the IL-17-microbiota crosstalk in peripheral nerve repair
No full textTese de mestrado, Investigação Biomédica, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2024As lesões nos nervos periféricos são uma complicação comum na clínica, geralmente resultando de eventos traumáticos e com uma incidência superior a 11 em cada 100.000 pessoas. O sistema nervoso periférico (SNP) possui um mecanismo intrínseco de reparação que permite a reconstituição de nervos lesionados. Contudo, este mecanismo no ser humano é defeituoso, resultando em morbilidades a longo prazo, tais como disfunção motora e dor crónica. O processo de regeneração envolve longas e numerosas intervenções terapêuticas, que podem levar a incapacidade prolongada, dificuldades motoras e compensações vitalícias, tornando estas lesões uma grande preocupação não só clínica como socioeconómica.
O processo de regeneração do SNP começa com a desintegração dos axónios lesionados num processo chamado degeneração walleriana, com concomitante desmielinização e desdiferenciação das células de Schwann (CS) para um fenótipo proliferativo. Durante este processo, as CS, juntamente com macrófagos residentes no nervo, secretam fatores pró-inflamatórios que por sua vez recrutam e ativam neutrófilos e monócitos, apoiando a remoção de mielina e detritos celulares. Essas células imunológicas secretam também fatores inflamatórios, fortalecendo assim o ambiente pró-inflamatório. À medida que o local da lesão é limpo, macrófagos pró-inflamatórios (tipo M1) polarizam-se para um fenótipo pró-reparador (tipo M2), estimulando a secreção de fatores neurotróficos que promovem o crescimento axonal. Simultaneamente, as CS guiam e remielinizam os novos axónios em crescimento, que re-inervam o tecido alvo.
Apesar dos macrófagos e neutrófilos estarem bem caracterizados neste processo, os linfócitos T, em particular os produtores de IL-17A (doravante IL-17), têm permanecido em grande parte inexplorados. A IL-17 é uma citocina produzida principalmente por células T auxiliares 17 (Th17) e células T γδγδ. Esta citocina pró-inflamatória tem sido associada à defesa contra infeções e a doenças inflamatórias crónicas, como esclerose múltipla, síndrome de Guillain-Barré e doença de Alzheimer. Mais recentemente, estudos têm mostrado que a IL-17 pode também regular a função dos tecidos em homeostasia e promover a regeneração.
Curiosamente, a microbiota do hospedeiro é necessária para a manutenção e função das células produtoras de IL-17. A microbiota, de facto, é capaz de regular ambos os papéis da IL-17 tanto em patologia como em homeostasia, promovendo doenças pró-inflamatórias e comportamentos semelhantes ao autismo, enquanto que estimula também a regeneração de tecido muscular e ósseo. Por outro lado, a IL-17 é capaz de selecionar as populações comensais do hospedeiro no trato intestinal, pele e mucosa pulmonar, moldando efetivamente a composição microbiana do hospedeiro. Com este contexto em mente, formulámos a hipótese de que a interação entre a IL-17 e a microbiota pode promover a reparação do nervo periférico após lesão.
Observações preliminares mostraram que as células T produtoras de IL-17 acumulam-se no nervo ciático após uma lesão por esmagamento, atingindo o seu pico 3 dias após a lesão. Para testar se esta acumulação é impulsionada pela microbiota do hospedeiro, tratámos murganhos C57BL/6 com um cocktail de quatro antibióticos de amplo espectro, com o intuito de eliminar a microbiota antes de induzir uma lesão por esmagamento do nervo ciático. Linfócitos do nervo e do nódulo linfático poplíteo, que o irriga, foram isolados, estimulados e corados para análise por citometria de fluxo 3 dias após a lesão. Observámos uma diminuição significativa, especificamente nas células T produtoras de IL-17 e nas células T regulatórias, sem efeito nas células T do tipo 1, tanto no nervo quanto no nódulo linfático drenante. Estes resultados foram congruentes com os obtidos no nódulo linfático contralateral, sugerindo que a microbiota regula a acumulação de células T produtoras de IL-17 de forma sistémica.
Além disso, e considerando que a IL-17 molda a microbiota, utilizámos murganhos geneticamente deficientes em IL-17 (Il17-/-) e competentes para IL-17 (Il17+/+) da mesma ninhada e estabelecemos dois sistemas de alojamento: um no qual os murganhos foram separados por genótipo, tendo assim microbiomas diferentes; e outro no qual os animais foram alojados em conjunto, compartilhando a mesma composição microbiana. Através da utilização do índice de função ciática (SFI) como indicador da função ciática, descobrimos que os animais Il17-/- separados não recuperam completamente a função motora (SFI=60%), contrariamente aos controlos Il17+/+ (SFI>80%). No entanto, quando alojados em conjunto, tanto os animais Il17+/+ quanto os Il17+/+ recuperam a função ciática em 20 dias. Estas observações sugerem que a IL-17 promove a recuperação da função motora da ciática por meio da microbiota.
Para entender os mecanismos moleculares envolvidos, obtivemos seções transversais do nervo ciático ao longo do processo de regeneração em ambas as condições de alojamento, a fim de testar a expressão relativa dos marcadores clássicos de regeneração: neurofilamento (NF) e proteína associada ao crescimento 43 (GAP43). Para isso, usámos imunocoloração e microscopia de fluorescência para analisar a expressão de proteínas específicas. Observámos que não há diferenças significativas na expressão de NF em murganhos Il17+/+ e Il17-/- em ambas as condições de alojamento, mostrando uma cinética de expressão esperada. De realçar, NF, como uma proteína do citoesqueleto axonal, não distingue axónios intactos de axónios em regeneração, podendo mostrar a mesma expressão em ambos os casos, mesmo que as fibras se encontrem em diferentes processos biológicos. Ainda assim, esses dados sugerem que a IL-17 não afeta o crescimento axonal.
Ao investigar a expressão de GAP43, presente tanto nos axónios como nas CS não mielinizantes, murganhos Il17-/- separados mostram um aumento de expressão ao dia 7 pós-lesão, quando comparados aos controlos. No entanto, quando os animais foram alojados em conjunto, ambas as linhagens apresentaram uma expressão similar. Estes dados suportam a hipótese de um papel indireto, através da microbiota, na expressão de GAP43. Para testar esta hipótese, tratámos animais de ambos os genótipos, alojados de forma separada, com um cocktail de antibióticos, e constatámos que os níveis de expressão de GAP43 não diferem entre os grupos. Curiosamente, os resultados em animais Il17-/- separados, sugere que, na primeira semana após lesão, a sobre-expressão de GAP43, resulta numa regeneração desregulada, o que pode traduzir numa recuperação motora disfuncional. Como a expressão de GAP43 pode não ser o único mecanismo pelo
qual o crosstalk IL-17-microbiota regula a recuperação motora, trabalhos futuros, por exemplo ao nível da junção neuromuscular e plasticidade sináptica, são necessários para compreender melhor este processo complexo.
Por fim, estudos recentes sugerem que as CS expressam o recetor de ligação da IL-17 e que a IL-17 pode afetar a mielinização das fibras após a lesão. Ao extrair nervos de animais alojados em conjunto, 28 dias após a lesão, realizámos cortes transversais e corámos o nervo ciático para analisar a morfometria geral do nervo e o estado de mielinização. Ao comparar os animais Il17+/+ e Il17-/-, observámos que a IL-17 não afeta o número de fibras e sua densidade dentro do nervo, restabelecendo totalmente a densidade e números dos nervos contralaterais. Da mesma forma, em relação aos parâmetros de tamanho das fibras, observámos uma diminuição expectável no calibre do axónio no nervo ipsilateral comparativamente ao contralateral em ambas as linhagens, embora não haja diferenças significativas entre elas. Além disso, a razão g (g-ratio), uma medida da espessura relativa da bainha de mielina, não difere entre murganhos Il17+/+ e Il17-/-. Globalmente, esses dados sugerem que a IL-17 não influencia a mielinização ou a morfometria do nervo após a lesão, em condições de coabitação. Contudo, não descartamos a hipótese de um efeito indireto por meio da microbiota e, portanto, no futuro, avaliaremos a bainha de mielina em animais separados.
Em suma, nesta dissertação mostramos que o crosstalk bidirecional IL-17-microbiota promove a regeneração do SNP após lesão. Por um lado, observámos que a acumulação de células T produtoras de IL-17 no nervo após a lesão é suprimida com tratamento com antibióticos, sugerindo que é dependente da microbiota. Ao mesmo tempo, mostramos que, por meio da microbiota, a IL-17 promove a recuperação motora e regulação da expressão de GAP43. Estas observações abrem novos caminhos a ser explorados, com intuito de aliviar o impacto clínico e socioeconómico destas lesões.Peripheral nervous system (PNS) injury is a major clinical and economical concern that leads to chronic pain and motor dysfunction. The immune system plays a critical role after PNS damage, clearing the site of injury and secreting growth factor for axonal regeneration. Although the role of macrophages and neutrophils is well known, the function of T cells in this process remains underexplored. Recent studies have highlighted a crosstalk between IL 17A (henceforth IL 17) producing T cells and the gut, with IL 17 shaping the microbiota, and the microbiota modulating IL 17 response in tissue. Prior evidence from the laboratory shows an accumulation of IL 17 producing cells in the sciatic nerve after surgical axonotmesis injury. In this thesis, we hypothesised that IL 17 accumulation is driven by the microbiota. Accordingly, we observed a significant reduction of IL 17 T cells and regulatory T cells in mice treated with broad spectrum antibiotics. To analyse the role of IL 17 in motor function after injury, we used IL 17 genetically deficient Il17 --//--) mice and their IL 17 competent ( Il17 +/++/+) littermates, in co housed or separated housing conditions. We found that, when separated, I l 17 mice did not fully recover motor behaviour, stagnating at 60% of the sciatic function. Though, when co housed, Il17 animals recover in just 20 days, akin to the controls. Mechanistic ally, we demonstrated that separated Il17 mice have a dysregulated expression of the regeneration marker growth associated protein 43 (GAP43), which was restored when co housed with Il17 mice or when treated with antibiotics. Overall, our data suggests a bidirectional pathway of the IL 17 microbiota crosstalk in regulating PNS regeneration. On one hand, the microbiota promotes IL 17 accumulation after injury, while on the other, IL 17 regulates functional repair through GAP43 expression in a microbiot a dependent manner
Contributo dos genes HPSE1 e TGFB1 na fisiopatologia de tumores ginecológicos
No full textTese de mestrado, Biologia Humana e do Ambiente , 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasO leiomioma uterino é o tumor ginecológico benigno formado de tecido fibroso e de tecido muscular
liso do miométrio, mais comum em mulheres em idade reprodutiva.
O cancro do colo do útero é considerado um dos cancros mais comuns nas mulheres e com elevados
riscos nas suas saúdes. O vírus do Papiloma Humano é a sua principal causa.
Os genes TGF-β1 e HPSE1 consistem em reguladores do crescimento celular, e estão associados à
inflamação, apoptose e angiogénese tumoral. Para cada gene foram selecionados polimorfismos, de
forma a avaliar as suas contribuições no desenvolvimento dos tumores ginecológicos em estudo; para o
TGF-β1 foram selecionados os rs1800469 e rs1800479; já no gene HPSE1 o polimorfismo selecionado
foi o rs4693608. O principal objetivo deste trabalho é encontrar associações entre os genes da HPSE1 e
TGF-β1 com infeção por HPV, a presença de leiomiomas e o seu tratamento por embolização.
Foram realizadas técnicas de quantificação e amplificação do DNA através de PCR convencional;
restrição e Endpoint Genotyping. Posteriormente foi feita uma análise estatística dos resultados obtidos,
através do software SPSS.
Através dos resultados obtidos é possível verificar que o TGF-β1 -509 tem um efeito protetor tanto
para o desenvolvimento de leiomiomas como para infeção por HPV, visto que o alelo T está associado
a um efeito de proteção para ambos. Já para o caso do TGF-β1 29 o alelo C está associado a um efeito
protetor para a infeção por HPV. Quanto ao gene HPSE1 não foi possível associá-lo ao desenvolvimento
de leiomiomas ou à infeção por HPV.
Nessa análise estatística foi permitido estudar as interações epistáticas. E neste estudo foi possível
verificar que existe um aumento de risco tanto para Leiomiomas como para HPV, quando é utilizada a
interação TGF-β1 -509 (rs1800469) e HPSE1 (rs4693608), na combinação CC e AA.Uterine leiomyoma is a benign gynecological tumor constituted by fibrous and smooth muscle
tissue of the myometrium, that is more frequent in women of reproductive age.
Cervical cancer is considered one of the most common cancers in women, with high health risks,
and Human Papilloma Virus infection is its main cause.
TGF-β1 and HPSE1 genes are associated with inflammation, apoptosis and tumor angiogenesis.
For each gene, specific polymorphisms were selected, in order to evaluate their contribution to the
development of the gynecological disorders under study. Considering TGF-β1, two were selected,
rs1800469 and rs1800470; in the HPSE1 gene, the selected polymorphism was rs4693608. The main
objective of this work is to find associations between HPSE1 and TGF-β1 genes and HPV infection,
various phenotypes related to leiomyomas and their treatment by embolization.
DNA quantification, DNA amplification trough conventional PCR, restriction of PCR products
and Endpoint Genotyping were performed. Statistical analysis of data was obtained using SPSS.
Through the results obtained, it is possible to verify that TGF-β1 -509 has a protective effect
regarding leiomyoma development and HPV infection, since the T allele is associated with a protective
effect. Concerning TGF-β1 29 the C allele is associated with a protective affect for HPV. As for the
HPSE1 gene, it was not possible to associate it with the development of leiomyomas or HPV infection.
In this statistical analysis, it was possible to study epistatic interactions. And in this study it was
possible to verify that there is an increased risk for both Leiomyomas and HPV, when occurs an
interaction of TGF-β1 -509 (rs1800469) and HPSE1(4693608), in the combination CC and AA
A systematic review of studies on cowpea (Vigna unguiculata) and other legumes extracts and their bioactive properties
No full textMestrado em Engenharia Alimentar / Instituto Superior de Agronomia. Universidade de LisboaProject CoHeSus aims to analyze the genetic diversity of cowpea (Vigna unguiculata), as well as its possible contribution to a more sustainable healthy diet, by selecting the varieties most adapted to hot and dry climates and that, at the same time, have a high content of bioactive compounds. Inserted in this project is this systematic review, that has the objective of revising existing literature on the characteristics and possible applications of cowpea extracts.
Cowpea presents a wide range of agronomic and environmental advantages, continuously contributing to the improvement of cropping systems used by subsistence farmers in all of Africa, Asia, and South America. Due to having a low-fat content and being rich in protein, minerals, vitamins and several bioactive compounds (mainly, phenolic compounds and peptides), cowpea is considered to have a high nutritional value.
There have been studies that show that plant extracts rich in peptides and phenolic compounds can display bioactive properties. Since cowpea seed and leaf extracts can also contain high yields of these bioactive compounds, they are expected to have the same properties.
The studies revised here showed that the cowpea extracts’ level of activity was dependent of the used cowpea variety and of the type of extract. In general, the extracts were successful in inhibiting microbial growth, protecting cells and DNA against oxidative stress, inhibiting the expression of proinflammatory proteins, regulating expression of glucose transporters and arresting cancerous’ cell cycles. These features prove the antimicrobial, anti-inflammatory, antidiabetic and anticancer properties of cowpea extracts, with potential to be used as functional food ingredientsN/
Evaluation of exhausted bentonite for pruning wound protection in grapevine
No full textMestrado em Engenharia de Viticultura e Enologia. Universidade de Lisboa, Instituto Superior de Agronomia. Universidade do Porto, Faculdade de CiênciasGrapevine trunk diseases (GTDs) are a group of fungal wood diseases caused by several pathogens that actively colonize the perennial vine organs causing wood necrosis, discoloration, vascular infections, and white decays. Among them, the esca complex is one of the most widespread and damaging grapevine diseases, causing great economic damages in terms of both yield quality and quantity, eventually leading to vine’s death. Symptoms are inconsistent in time and there are no effective known treatments, the only defence is prevention. Being pruning wounds one of the main infection sites, a considerable proportion of the undergoing research focuses on the search for pruning wound protective agents.
One of the recently studied wound protective agents is bentonite. Bentonite is a montmorillonite clay used in winemaking to prevent protein casse formation; thanks to its swelling ability and negative charge at the wine pH, it acts as a cation exchanger and adsorbs the positively charged (at the wine pH) haze forming proteins, mainly Pathogenesis-Related (PR) proteins. The PR proteins are synthesized both as part of the inducible (typically before veraison) and constitutive (typically after veraison) pathogen defence mechanisms. Using exhausted bentonite (typically containing PR proteins) in an attempt to protect grapevine pruning wounds, a systemic acquired resistance, an elicitor effect and an antifungal effect are expected.
This research main objectives are: (i) to evaluate the efficiency of exhausted bentonite as pruning wound protection agent against the esca disease pathogen Phaeomoniella chlamydospora, and (ii) to assess the changes in protein and phenolic profiles induced by treatments and disease.
A field trial was set up, testing three types of sodium bentonite as wound protector: exhausted bentonite after fininig a red wine, exhausted bentonite after fining a white wine and hydrated neutral bentonite as the control; and collecting a symptomatic pool as further control. None of the treatment was able to reduce the internal symptoms by a statistically significant amount. However, all treatments showed the ability to reduce the incidence (up to 33%) and severity (up to 40%) of the disease. Our results show that, with some improvements, bentonite might became an useful tool in GTD's management.
Protein and phenolic wood profiles were evaluated. The symptomatic pool displayed the highest content in total phenols due to the correlation between symptoms and phenolic production. The symptomatic pool and the positive control showed the highest relative non-flavonoids content, while the negative control showed the lowest. Highlighting a correlation between the infection and the production rate of flavonoids and non-flavonoids phenols. The sds-page showed differences between the controls, the treatments and the symptomatic pool, we can affirm that the infection interacts whit the protein metabolism.As doenças do lenho da videira (GTDs) são um grupo de doenças fúngicas da madeira causadas por vários agentes patogénicos que colonizam ativamente os órgãos perenes da videira, causando necrose da madeira, descoloração, infeções vasculares e podridões brancas. Entre elas, o complexo da esca é uma das doenças mais difundidas e prejudiciais da videira, causando grandes prejuízos económicos em termos de qualidade e quantidade de produção, levando à morte das plantas. Os meios de luta atuais não são efetivos e a única defesa é a prevenção. É um desafio claro no manejo da vinha, especialmente porque os sintomas são inconsistentes no tempo e não há tratamentos conhecidos que sejam eficazes. Sendo as feridas de poda uma das principais portas de entrada da infecção, um dos principais objetivos de investigação tem sido a procura de agentes protetores de feridas da poda.
Um dos compostos protetores de feridas muito recentemente estudados é a bentonite. A bentonite é uma argila de montmorilonite, frequentemente usada em vinificação para prevenir a formação da casse proteica; graças à sua capacidade de absorver água, pode adsorver electrostaticamente proteínas formadoras de turvações, especialmente as ‘pathogensis-related (PR) proteins’. As proteínas PR são sintetizadas como parte dos mecanismos indutivo e constitutivo de defesa da planta aos agentes patogénicos. No presente trabalho foi utilizada bentonite já aplicada em vinhos e, por isso, contendo proteínas PR, numa tentativa de proteger as feridas de poda de videira e de induzir uma resistência adquirida sistémica, um efeito eliciador e uma ação antifúngica.
Os principais focos desta pesquisa foram: (i) avaliar a eficiência da bentonite ‘esgotada’ como meio de proteção das feridas de poda contra o agente patogénico Phaeomoniella chlamydospora e (ii) avaliar as alterações nos perfias proteico e fenólico induzidos por tratamentos e doenças.
Foi realizado um teste de campo, testando três tipos de bentonite sódica como protetor de feridas: ‘bentonite exausta’ após aplicação num vinho tinto, ‘bentonite exausta’ após aplicação num vinho branco e bentonite neutra hidratada. Nenhum dos tratamentos foi capaz de reduzir os sintomas internos medidos de um modo estatisticamente significativo. Contudo, todos os tratamentos mostraram a capacidade de reduzir a incidência (até 33%) e a gravidade (até 40%) da doença. Os nossos resultados mostram que, com algumas melhorias, a bentonite poderá constituir uma ferramenta útil no gerenciamento das GTD.
Os perfis proteico e fenólico foram avaliados, evidenciando diferenças significativas entre os tratamentos e o controlo, abrindo perspetivas para novas investigações.N/
Evaluation of Laminaria Digitata and enzymatic supplementation on the post-weaning piglet nutrition: an holistic approach
No full textDoutoramento em Engenharia Agronómica. Universidade de Lisboa, Instituto Superior de AgronomiaLaminaria digitata is a brown seaweed with prebiotic properties for monogastrics. However, its cell wall can elicit anti-nutritional effects, preventing access of endogenous enzymes to intracellular nutrients. Enzymatic supplementation is a putative solution to this problem. The objective of this study is to evaluate the effect of a high level of dietary incorporation of L. digitata in weaned piglet diets through gut health, digestibility, meat quality, blood metabolites, and tissue metabolism.
A total of 40, 35-day old piglets (♂) were divided into four experimental diets (n=10): control, LA (10% L. digitata), LAR (LA + 0.005% Rovabio® Excel AP) and LAL (LA + 0.01% alginate lyase). Piglets were housed individually in metabolic cages and the trial lasted for two weeks.
Experimental diets did not influence growth performance. The digestibility of ADF was lower in seaweed-fed piglets, with LAL mitigating this decrease. The gut microbiome of seaweed-fed piglets was enriched with beneficial VFA-producing bacteria such as Prevotella and Prevotellaceae, which contributed to a lower pH in these contents. The ileum of control piglets had an increased abundance of glucose and glycolytic proteins, showing a putative higher reliance on seaweed-fed piglets in other sources of energy such as butyrate. The seaweed had anti-inflammatory and hypolipidemic effects in the blood of piglets, and reduced blood glucose, which was replenished to control-like levels by enzymatic supplementation. The meat and liver n-3 PUFA content was significantly improved by seaweed incorporation, which could be related to a putative increase in fatty acid oxidation in the liver, via PPARα signalling. Meat lipid oxidation was reduced by dietary seaweed, possibly in relation with improved muscle mannitol contents.
The seaweed improved many gut health, blood and tissue composition parameters. However, its use at such levels could prove too costly due to its poor nutritional composition.As algas castanhas como a Laminaria digitata têm propriedades prebióticas que podem beneficiar os monogástricos. No entanto, as suas paredes celulares podem provocar efeitos anti nutricionais pelo bloqueio do acesso de enzimas endógenas aos nutrientes intracelulares. A suplementação enzimática é uma possível solução para este problema. O objetivo deste estudo é avaliar o efeito de um nível alto de inclusão de L. digitata na dieta de leitões desmamados através da saúde intestinal, digestibilidade, qualidade da carne, metabolitos do sangue e metabolismo de tecidos.
Um total de 40 leitões (♂), com 35 dias de idade foram aleatoriamente distribuídos por quatro dietas (n=10): Controlo, LA (10% L. digitata), LAR (LA + 0.005% Rovabio® Excel AP) e LAL (LA + 0.01% alginato liase). Estes foram alojados individualmente em jaulas metabólicas durante duas semanas.
A performance zootécnica não foi influenciada pelas dietas. A digestibilidade da FDA foi mais baixa em leitões alimentados com alga, cujo decréscimo foi mitigado pela LAL. O microbioma do intestino grosso foi enriquecido com bactérias produtoras de AGVs, como as Prevotella e Prevotellaceae, que contribuíram para baixar o pH nestes conteúdos. O íleo do controlo teve maior abundância de glucose e proteínas glicolíticas, demonstrando uma maior dependência dos restantes em outras fontes energéticas como o butirato. A alga teve efeitos anti-inflamatórios e hipo-lipidémicos no sangue e reduziu a glucose circulante, cujos níveis foram reestabelecidos em LAR e LAL para níveis semelhantes aos do controlo. Os n-3 PUFA na carne e fígado foram significativamente aumentados, o que poderá estar relacionado com um aumento da oxidação de ácidos gordos no fígado, via sinalização da via PPARα. A oxidação lipídica da carne foi reduzida pela inclusão da alga, em possível relação com a abundância de manitol neste tecido.
A alga melhorou a saúde intestinal dos leitões, bem como a composição do sague e tecidos. No entanto, a sua inclusão nestes níveis pode ser proibitiva devido à pobre composição nutricional.N/
A inteligência artificial na vanguarda do marketing da indústria cosmética
No full textTrabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A indústria cosmética, especialmente no âmbito do marketing, tem evidenciado avanços devido
às mais recentes inovações tecnológicas. Este trabalho explora o impacto da Inteligência
Artificial (IA) nas estratégias de marketing implementadas no mercado da cosmética,
analisando diversas etapas do processo de desenvolvimento e comercialização do produto
cosmético, bem como as principais limitações e desafios decorrentes da sua adoção.
A IA, por meio das variadas oportunidades que proporciona, tem demonstrado ser uma
ferramenta (um conjunto de sistemas e softwares) bastante promissora, quer na fase inicial de
pesquisa e desenvolvimento, quer na otimização do processo de fabrico e do controlo de
qualidade, quer na aprovação regulamentar. Além disso, assume também bastante potencial no
processo criativo de construção da identidade visual do produto, bem como na melhoria
significativa da experiência do cliente durante a compra. Este avanço tecnológico demonstra
múltiplas vantagens associadas à redução do tempo, dos encargos financeiros e dos limites da
criatividade humana, mas também contribui para o aumento da proximidade entre a marca e o
cliente.
Contudo, a incorporação bem-sucedida desta tecnologia não está isenta de alguns desafios.
Questões relacionadas com a adaptação dos utilizadores, com os custos inerentes à sua
implementação e, ainda, variadas considerações éticas são alguns dos desafios que as
organizações enfrentam ao aderir aos sistemas de IA.
Com base na análise dos estudos mais recentes sobre o presente tema, são sugeridas algumas
medidas que devem ser adotadas, a fim de minimizar os principais obstáculos inerentes a esta
tecnologia, incluindo o desenvolvimento de sistemas específicos de domínio e sistemas
localizados, a avaliação crítica da informação apresentada e o esclarecimento de alguns
preconceitos estabelecidos em relação à IA.
Embora a adoção deste tipo de serviços exija responsabilidade e um esforço contínuo da
humanidade para minimizar as suas limitações, a indústria cosmética, especialmente nas suas
estratégias de marketing, detém valor nos serviços de IA, com essa valorização a perdurar no
futuro, com abordagens cada vez mais imersivas.The cosmetics industry, especially in the field of marketing, has shown advances due to the
most recent technological innovations. This work explores the impact of Artificial Intelligence
(AI) on marketing strategies implemented in the cosmetics market, analyzing various stages of
the cosmetic product development and commercialization process, as well as the main
limitations and challenges arising from its adoption.
AI, through the varied opportunities it provides, has demonstrated to be a very promising tool
(a set of systems and software), whether in the initial phase of research and development, or in
optimizing the manufacturing process and quality control, or in regulatory approval.
Furthermore, it also has a lot of potential in the creative process of building the product's visual
identity, as well as in significantly improving the customer experience during purchase. This
technological advance demonstrates multiple advantages associated with reducing time,
financial burdens and the limits of human creativity, but also contributes to increasing proximity
between the brand and the customer.
However, the successful incorporation of this technology is not without some challenges. Issues
related to user adaptation, the costs inherent to its implementation and also various ethical
considerations are some of the challenges that organizations face when adopting AI systems.
Based on the analysis of the most recent studies on this topic, some measures are suggested that
should be adopted in order to minimize the main obstacles inherent to this technology, including
the development of domain-specific systems and localized systems, the critical assessment of
information presented and the clarification of some established prejudices in relation to AI.
Although the adoption of this type of services requires responsibility and a continuous effort
from humanity to minimize its limitations, the cosmetic industry, especially in its marketing
strategies, holds value in AI services, with this value lasting in the future, with each approach
increasingly immersive
Rheological analysis of thermoresponsive hydrogels with bioadhesive polymers for enhanced drug delivery
No full textTrabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.Os sarcomas dos tecidos moles (STM) são tumores raros que surgem dos tecidos conjuntivos,
incluindo cartilagem, músculo, vasos sanguíneos, nervos e gordura. A cirurgia continua a ser
o tratamento primário, muitas vezes suplementada por quimioterapia e radioterapia.
Indicadores de mau prognóstico incluem tamanho grande do tumor, idade avançada, alto
grau, metástase ao diagnóstico, remoção incompleta, margens cirúrgicas positivas, invasão
profunda e necrose tumoral significativa. Abordar estes desafios requer uma estratégia de
tratamento abrangente. Recentemente, os hidrogeles termorresponsivos emergiram como
uma solução promissora para a administração localizada de medicamentos. Estes hidrogeles
transitam de líquido a gel à temperatura corporal, aumentando a retenção e a eficácia dos
agentes terapêuticos no local alvo. Ao incorporar propriedades bioadesivas, estes hidrogeles
garantem ação terapêutica prolongada com efeitos sistémicos mínimos, oferecendo uma
abordagem inovadora para melhorar os resultados do tratamento dos STM. Este projeto
explora o desenvolvimento de hidrogéis termorresponsivos para aplicação in situ nos STM.
Os principais aspetos investigados incluem o impacto das misturas de polímeros,
propriedades reológicas, otimização usando o design de experiências (DoE),
adesão/mucoadesão e testes de libertação in vitro. Os resultados destacam a eficácia do
polímero bioadesivo PVP na obtenção das propriedades reológicas desejadas e libertação
controlada de fármacos. As formulações de hidrogel contendo PVP exibiram propriedades
reológicas favoráveis, incluindo viscosidade controlada em diferentes taxas de cisalhamento
e temperaturas. Além disso, as formulações otimizadas demonstraram propriedades
mucoadesivas melhoradas, tornando-as particularmente adequadas para aplicações de
administração direcionada de fármacos. O hidrogel otimizado P407/P188/PVP exibiu
propriedades viscoelásticas e físico-químicas adequadas para eficácia pré-clínica, com
potenciais aplicações em sistemas de administração de medicamentos.
As direções futuras de pesquisa incluem a realização de estudos in vivo para avaliar a
biocompatibilidade, segurança e eficácia terapêutica do hidrogel. Adicionalmente, explorar a
integração de outros agentes bioativos e polímeros pode expandir a aplicabilidade do hidrogel
e aumentar seus benefícios terapêuticos. Esta pesquisa contribui significativamente para o
avanço na administração direcionada de fármacos, demonstrando o potencial dos hidrogeles
termorresponsivos para revolucionar o tratamento de doenças localizadas, particularmente
em oncologia, onde a administração direcionada e sustentada é crítica.Soft tissue sarcomas (STS) are rare tumors arising from connective tissues, including cartilage,
muscle, blood vessels, nerves, and fat. Surgery remains the primary treatment, often
supplemented by chemotherapy and radiotherapy. Poor prognosis indicators include large
tumor size, advanced age, high grade, metastasis at diagnosis, incomplete removal, positive
surgical margins, deep invasion, and significant tumor necrosis. Addressing these challenges
requires a comprehensive treatment strategy. Recently, thermoresponsive hydrogels have
emerged as a promising solution for localized drug delivery. These hydrogels transition from
liquid to gel at body temperature, enhancing the retention and effectiveness of therapeutic
agents at the target site. Incorporating bioadhesive properties, these hydrogels ensure
prolonged therapeutic action with minimal systemic side effects, offering an innovative
approach to improve STS treatment outcomes. This project explores the development of
thermoresponsive hydrogels for in situ application in STS.
Key aspects investigated include the impact of polymer mixtures, rheological properties,
optimization using design of experiments (DoE), adhesion/mucoadhesion, and in vitro release
tests. The findings highlight the effectiveness of the bioadhesive polymer PVP in achieving
desired rheological properties and controlled drug release. Hydrogel formulations containing
PVP exhibited favorable rheological properties, including controlled viscosity across different
shear rates and temperatures. Additionally, the optimized formulations demonstrated
enhanced mucoadhesive properties, making them particularly suitable candidates for targeted
drug delivery applications. The optimized P407/P188/PVP hydrogel exhibited suitable
viscoelastic and physicochemical properties for preclinical efficacy, with potential applications
in drug delivery systems.
Future research directions include conducting in vivo studies to assess the hydrogel´s
biocompatibility, safety, and therapeutic efficacy. Additionally, exploring the integration of other
bioactive agents and polymers could expand the hydrogel´s applicability and enhance its
therapeutic benefits. This research contributes significantly to the field of advanced drug
delivery systems, demonstrating the potential of thermoresponsive hydrogels to revolutionize
the treatment of localized diseases, particularly in oncology where targeted and sustained
delivery is critical.Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa
Age-dependent microglia inflammatory profile in the spinal cord of the ALS mSOD1G93A mice
No full textTrabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa fatal e heterogénea, caracterizada pela perda progressiva de neurónios motores e neuroinflamação. A microglia-associada-a-doença (MAD) desempenha um papel crucial, adotando fenótipos neurotóxicos ao longo da progressão de patologias. Além disso, existe evidência de que a disfunção microglial está relacionada com variações, dependentes da idade, em marcadores inflamatórios. Contudo, essa variação e os seus mecanismos moleculares subjacentes permanecem pouco compreendidos na patogénese da ELA.
Neste contexto, é essencial investigar os microRNAs (miRNAs) associados à inflamação, uma vez que são reguladores importantes da inflamação durante a progressão da doença e têm potencial terapêutico como alvos de modulação. O objetivo deste estudo é investigar o perfil inflamatório de miRNAs e os estádios reativos, dependentes da idade, na microglia espinhal de murganhos com mutação G93A no gene da superóxido dismutase-1, modelo mSOD1G93A de ELA. Assim, foram utilizadas culturas primárias de microglia espinhal de murganhos recém-nascidos mSOD1G93A (TG) e selvagens (WT) e analisados miRNAs inflamatórios (miR-21, miR-124, miR-125b, miR-146a e miR-155) e marcadores inflamatórios/fagocíticos (TNF-α, ARG1, iNOS, TREM2 e MFG-E8) aos 2, 10 e 16 dias in vitro (DIV), simulando as fases jovem/reativa, madura e envelhecida/senescentes, respetivamente. Os resultados obtidos revelam alterações dinâmicas na expressão de miRNAs com a idade, que se correlacionam com mudanças funcionais da microglia, de um estado reativo para um estado pouco responsivo. A microglia mSOD1 aos 2 DIV apresentou sobre-expressão do miR-124 e um fenótipo pró-inflamatório (sobre-expressão de iNOS e MFG-E8 e sub-expressão de ARG1). Aos 10 DIV, a microglia mSOD1 apresentou sub-expressão de miR-125b e miR-155a, associada à expressão aumentada de TNF-α e TREM2, possivelmente contribuindo para um perfil neurotóxico e inflamação crónica. Aos 16 DIV, encontrou-se um padrão misto na microglia mSOD1, caracterizado pela diminuição de miR-146a e sub-expressão de marcadores pró- e anti-inflamatórios, respetivamente TNF-α e ARG1.
Em suma, estes resultados demonstram um perfil complexo de miRNAs, dependente da idade, na microglia mSOD1, que transita de uma reatividade pró-inflamatória para um fenótipo mais disfuncional e de inflamação mista. A modulação específica destes miRNAs, regulando essas transições e restabelecendo a neuroprotecção, pode fornecer terapêuticas promissoras para a ELA.Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal and heterogeneous neurodegenerative disorder characterized by progressive motor neuron loss and related neuroinflammation. Disease-associated microglia (DAM) play an important role in the ALS pathogenesis, adopting neurotoxic phenotypes throughout disease progression, with microglial dysfunction linked to age-related shifts in inflammatory signaling; however, their underlying molecular mechanism is not-yet well-understood. In this context, inflammatory-associated-microRNAs (miRNAs) are key parameters to identify during disease progression since they are important regulators of inflammation and hold therapeutic potential as targets for modulation.
This study aims to investigate the age-dependent inflammatory miRNA signature and microglial reactivity stages in spinal microglia from the ALS mice (G93A mutation in the superoxide dismutase-1 gene, mSOD1G93A model). For that we used spinal microglial primary cultures from mSOD1G93A (TG) and aged matched wild-type (WT) mice pups and analyzed inflammatory miRNAs (miR-21, miR-124, miR-125b, miR-146a, and miR-155) and inflammatory/phagocytic markers [Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF-α), Arginase 1 (ARG1), Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS), Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 2 (TREM2), and Milk Fat Globule-Epidermal Growth Factor 8 (MFG-E8)] at 2, 10, and 16 days in vitro (DIV) microglia, to mimic young/reactive, mature and aged/senescent stage, respectively. Our findings reveal dynamic changes in miRNA expression with age that correlate with microglial functional shifts from a reactive state to an unresponsive state. mSOD1 microglia at 2 DIV were characterized by overexpression of miR-124 and a pro-inflammatory phenotype, as indicated by the upregulation of iNOS and MFG-E8 and downregulation of ARG1. At 10 DIV, mSOD1 microglia exhibited downregulation of both miR-125b and miR-155, coinciding with sustained expression of TNF-α and TREM2, likely contributing to chronic inflammation that may lead to a more neurotoxic profile. At 16 DIV, mixed microglial phenotypes seemed to emerge, characterized by the decline of miR-146a and an upregulation of both pro- and anti-inflammatory markers, respectively TNF-α and ARG1.
Overall, our results demonstrate a unique, age-dependent complex miRNA signature in mSOD1 microglia, shifting from pro-inflammatory reactivity to a more dysfunctional and mixed phenotypes. Targeting specific miRNAs to modulate these transitions could provide promising therapeutic avenues for re-establishing neuroprotection in ALS.Neuroregeneration Lab (NeuroSignal) at Research Institute for Medicines (iMed); La Caixa Foundation-Luzón Foundation