Universidad Autónoma de Nuevo León

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    Diseño de un andamio a base de fibrina y matrices biológicas con potencial condrogénico

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    INTRODUCCIÓN: El cartílago articular es un tejido altamente especializado, avascular, aneural y alinfático, cuya función principal es facilitar el movimiento articular y absorber cargas mecánicas. Sin embargo, su limitada capacidad de regeneración lo hace vulnerable a lesiones focales que, si no se tratan, pueden progresar a patologías degenerativas como la osteoartritis. Ante la limitada eficacia de tratamientos convencionales, la ingeniería de tejidos ha emergido como una alternativa terapéutica que busca restaurar la función del cartílago mediante andamios biomiméticos que imiten la matriz extracelular (MEC) y mantengan el fenotipo condrogénico. OBJETIVOS: Diseñar, caracterizar y evaluar un andamio funcional compuesto por fibrina, matriz de cartílago articular descelularizado (MCAd) y membrana amniótica descelularizada (MMAd), con el fin de preservar el fenotipo condrogénico y promover la regeneración de cartílago hialino in vitro. MATERIALES Y MÉTODOS: Se obtuvieron cartílago articular humano y membrana amniótica, los cuales fueron descelularizados mediante protocolos físicos, enzimáticos y detergentes no iónicos, y posteriormente liofilizados y pulverizados. Se formularon andamios de fibrina mediante la combinación de trombina y fibrinógeno, incorporando concentraciones óptimas de MCAd y MMAd previamente determinadas mediante ensayos de viabilidad y proliferación celular. Los condrocitos humanos fueron aislados, cultivados, y sembrados sobre los andamios funcionalizados, evaluando su comportamiento durante 28 días de cultivo estático. Se aplicaron pruebas de viabilidad celular (Live/Dead), tinciones histológicas (Azul Alciano, Safranina-O y Hematoxilina-Eosina), y análisis de expresión génica mediante RT-qPCR para los marcadores SOX9, COL2A1, ACAN y RUNX2. Además, se analizó la morfología celular, la distribución de matriz extracelular y el mantenimiento del fenotipo condrogénico. RESULTADOS: Los andamios funcionalizados mostraron cerca del 99% de viabilidad celular y una distribución homogénea de condrocitos en el interior del hidrogel. Se observó un incremento mayor a 1.5 veces la expresión de genes asociados al fenotipo condrogénico (SOX9, COL2A1, ACAN) en comparación con los controles, así como una disminución de casi 3 veces en la expresión de RUNX2, indicador de diferenciación de hipertrofia. Las tinciones confirmaron una mayor acumulación de proteoglicanos sulfatados en los grupos con MCAd y MMAd. CONCLUSIONES: La incorporación simultánea de MCAd y MMAd a hidrogeles de fibrina permite generar un microambiente bioactivo y biomimético que favorece la expresión de marcadores condrogénicos, la síntesis de matriz extracelular hialina y la preservación del fenotipo condrocítico. Este sistema de andamio funcional representa una estrategia prometedora para la reparación de defectos focales del cartílago articular

    Evaluación de la expresión de miRNAs en macrófagos infectados in vitro por Nocardia brasiliensis

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    El actinomicetoma es una enfermedad infecciosa crónica causada por N. brasiliensis, un patógeno intracelular que pertenece al orden de los Mycobacteriales. Bacterias como M. tuberculosis pueden modular y evadir la respuesta inmune del huésped. Uno de los mecanismos de regulación es la alteración de la expresión de los microRNAs (miRNAs), lo que modifica la expresión de genes involucrados con la respuesta inmune. Los miRNAs son RNA no codificantes pequeños que participan en la regulación postranscripcional de diversos procesos biológicos del huésped; como la respuesta inmune frente a patógenos intracelulares. Existen estudios sobre la relevancia de la expresión de miR-21, miR-26b y miR-29c en infecciones con micobacterias; sin embargo, en infecciones intracelulares con N. brasiliensis la información es nula. En este trabajo se realizaron infecciones con N. brasiliensis en macrófagos derivados de monocitos humanos, donde se analizó la expresión de miR-21, miR-26b y miR-29c, además de un análisis in silico de bases de datos de genes diana regulados por estos miRNAs y su posible efecto en la regulación de la respuesta inmune. Los macrófagos infectados con N. brasiliensis mostraron un aumento de la expresión de miR-21, miR-26b y miR-29c en comparación con los no infectados (p=0.0164, 0.0325, 0.0279 respectivamente). Este incremento sugiere la participación de estos miRNAs en la regulación de vías de señalización como de PI3K/Akt, MAPK, p53, y en procesos como el metabolismo de ácidos grasos y la reorganización de la matriz extracelular asociado con la formación del micetoma. La alteración de estas vías puede contribuir a una disminución en la actividad microbicida y la polarización de los macrófagos durante un proceso de infección intracelular. Entre los genes de relevancia regulados por cada miRNA se identificaron: CCL20, CCL1, FASLG y STAT3 para miR-21, relacionados con múltiples procesos inflamatorios; PRKCD y PTEN para miR-26b, asociados a la regulación de la apoptosis; y TNFRSF1A y TRAF4 para miR-29c los cuales están vinculados con TNF, que participa en los procesos de respuesta inflamatoria en infección con M. tuberculosis

    Análisis biomecánico en practicantes de cinta negra de Kung Fu y Jeet Kune Do

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    En la presente investigación se realizó un análisis biomecánico a practicantes de Kung Fu y Jeet Kune Do mexicanos, esto con el fin de obtener los primeros valores de la población en ambas disciplinas. El objetivo del estudio fue el analizar variables cinemáticas en practicantes de cinta negra en las disciplinas de Kung Fu y Jeet Kune Do y comparar las variables entre ambos deportes. En el estudio participaron cuatro practicantes de Kung Fu y cuatro practicantes de Jeet Kune Do. La evaluación se llevó a cabo dentro de las instalaciones de la academia Bull Zhan Martial Arts, a los atletas se les fueron colocadas cintas de colores contrastantes a la ropa utilizada, se colocaron en el centro del área designada para la prueba y realizaron tres intentos de cada una de las técnicas seleccionando el mejor para el análisis de las variables. Los resultados obtenidos muestran diferencias significativas en las variables de velocidad, aceleración, distancia y ángulos de flexión y extensión. Nuestros datos muestran la diferencia entre ambos deportes teniendo mejores valores el Jeet Kune Do, pero esto también podría deberse a las posturas desde donde es que cada una de estas técnicas es que se realiza

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