Yamagata University Academic Repository

山形大学博士(工学)学位論文(Thesis

池嶋, 正宣

電子供与性芳香族置換基が主鎖に直結したポリジアセチレンの合成と物性

山形大学博士(工学)学位論文(Thesis)要約の

南木, 創

Fundamental research of biosensors based on organic transistors with self-assembled monolayer-functionalized electrodes

山形大学博士(理学)学位論文(Thesis

Matsuda, Hiroki

Measurement of longitudinal double spin asymmetries in the single-inclusive  hadron quasi-real photoproduction at high-pт by a muon beam for the study of gluon polarisation in nucleon

山形大学博士(医学)学位論文（Thesis)学位論文要

岡村, 賢

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
 
ヒトメラノサイトにおいてホスファチジルイノシトールグリカン, クラス K 遺
伝子 (PIGK)の発現はチロシナーゼ活性と相関し、PIGK の発現はその直上にあ
る短反復配列多型に影響される：ロドデノール誘発性脱色素斑との関連 
責任講座：   皮膚科学講座 
氏  名：   岡 村  賢    
 
【要約】 
 
【背景】 
  チロシナーゼ阻害薬として美白化粧品に含有されていたロドデノールにより皮膚の脱
色素斑が誘発されることが明らかとなり、近年社会問題となった。ロドデノール誘発性脱
色素斑は、ロドデノール含有化粧品使用者のうち約 2%に発症し、これは他の化学白斑の発
生頻度とほぼ同等である。このことは、ロドデノール誘発性脱色素斑を含めた化学白斑の
疾患感受性遺伝子の存在を示唆する。一方で、グリコシルホスファチジルイノシトール(GPI)
は 150 以上もの蛋白を錨（アンカー）として生体膜と結合させ、翻訳語修飾に関わってい
る。これらの GPI アンカー型蛋白はユビキタスに発現しているが、メラノサイトにおける
役割は全くもって調べられていない。 
 
【目的】 
  ロドデノール誘発性脱色素斑の感受性遺伝子を探るにあたり、今回我々は、GPI アンカ
ー型蛋白の関与に着目した。 
 
【方法】 
  蛋白と GPI のアンカリングに必須の役割を果たすホスファチジルイノシトールグリカ
ン, クラス K 遺伝子 (PIGK)の発現を、既にロドデノールに対する感受性が報告されている
13 種の正常ヒト培養メラノサイト（NHEM）を用いて調べた。さらに、PIGK 直上のプロモ
ーター活性領域と予測される場所に位置する唯一の短反復配列多型をジェノタイピングし
た。PIGK の RNA 干渉実験および、ロドデノール暴露下におけるアラマーブルーを用いた
細胞増殖活性アッセイも施行した。 
 
【結果】 
  PIGK の mRNA の発現はロドデノール感受性の高い細胞群において有意に低かった。さ
らに PIGK と TYR の mRNA の発現は強い逆相関の関係にあった。PIGK 直上の短反復配列
のリピート数が多い細胞群ではそうでない群に比べ、有意に PIGK の発現が低下していた。
NHEM において、PIGK のノックダウンによりチロシナーゼの発現が mRNA レベルで有意
な上昇を認め、ロドデノールへの感受性は上昇する傾向にあった。 
 
 
【結論】 
  ヒトメラノサイトにおいて、PIGK の発現とチロシナーゼ活性は強い相関関係にある。
PIGK 直上の短反復配列多型は、その発現を制御している可能性が強く示唆された。 


Microsatellite polymorphism located immediately upstream of the phosphatidylinositol glycan, class K gene (PIGK) affects its expression, which correlates with tyrosinase activity in human melanocytes: Association with rhododenol- induced leukoderma

根本, 貴子

論 文 内 容 要 約 
 
論文題目 
 
Role of transcription factor MafB for macrophage 
phagocytosis 
（マクロファージの貪食能における転写因子MafBの役割） 
 
 
責任講座：   内科学第一   講座 
氏  名：    根本 貴子      
 
【要約】 
 
＜背景＞MafB はマクロファージの分化にも関与する転写因子とし
て知られる。我々は、マクロファージ特異的に MafB の機能を抑制
した優性阻害 MafB 遺伝子改変 (DN-MafB) マウスを作製し、肺胞
マクロファージの貪食能が低下していることを報告した。マクロフ
ァージ細胞表面に発現する Fcγ 受容体はオプソニン化された物質の
貪食に深く関与する。中でも Fcgr3 (CD16) はマクロファージの分
化に伴い細胞表面に発現する受容体の一つとして知られ、宿主防御
において重要な役割を果たす。今回、マクロファージの異物貪食過
程における MafB の役割を明らかにするため、MafB 機能を抑制した
RAW 264.7- MafB- shRNA 細胞を用い、オプソニン化された異物の
認識、貪食に関与する Fcγ 受容体の中で、貪食抑制的に作用する
Fcgr2b (CD32b) と、貪食を促進する Fcgr3 (CD16) の発現に着目し、
これら２つの受容体発現における MafB の役割を検討した。 
＜方法＞貪食能を有するマクロファージ細胞株 RAW 264.7（対照細
胞）と、以前当講座で樹立し MafB 機能が抑制状態にある
MafB-shRNA恒常発現細胞株RAW 264.7-MafB-shRNA細胞を用い、
オプソニン化ポリスチレンビーズ貪食能をフローサイトメトリー法
で検討した。Fcgr2b と Fcgr3 の mRNA と細胞表面マーカーの発現
は、リアルタイム PCR 法とフローサイトメトリー法で、それぞれ評
価した。さらに RAW 264.7-MafB-shRNA 細胞に Fcgr3 を強制発現
させ、その貪食能も評価した。 
＜結果＞RAW 264.7- MafB- shRNA 細胞ではオプソニン化ポリスチ
レンビーズ貪食能が低下していた。また Fcgr3 の mRNA と表面マー
カーの発現も低下していた。一方、Fcgr2bの発現は変わらなかった。
さらに Fcgr3 の強制発現により、低下していた貪食能が改善した。 
＜結論＞MafB は、マクロファージの貪食機構において、Fcgr3 の発
現に関与し、異物貪食を調節する。 


Role of transcription factor MafB for macrophage phagocytosis

梁  , 秀蘭

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
 
関節リウマチ滑膜における HO-1発現細胞の検討 
 
 
責任講座：     病理診断学講座 
氏  名：     梁 秀蘭         
【要約】 
【背景と目的】Heme oxygenase-1 (HO-1) は遊離ヘムに対する蛋白分解酵素
で、種々のストレス下で発現が誘導される。HO-1分解産物が TNFなどの前炎
症性サイトカイン産生を減少させ、IL-10などの抗炎症性サイトカインの産生を
亢進させるなどの機序で、抗炎症作用に働く。関節リウマチ（RA）の滑膜では
HO-1の発現が増加するが、HO-1発現細胞の詳細についてはまだ不明である。
本研究の目的は、HO-1発現細胞が RAの病態形成において果たす役割を明らか
にすることである。 
 
【材料および方法】RA 50例、対照として変形性関節症（OA）の膝関節の滑膜
組織 13例を用いた。免疫組織学的に、滑膜表層における HO-1陽性細胞出現率
や形態学的特徴を検討した。また、蛍光二重染色で、HO-1陽性細胞におけるマ
クロファージマーカーなどの共発現について検討した。In situ PLA法を用いて
抗原提示能を検討した。さらに、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）で、
HO-1 mRNAの発現を検討した。 
 
【結果】滑膜表層における HO-1陽性細胞の出現率は、OAに比べ RAで有意に
多かった。その出現率は滑膜炎の程度が高いほど有意に高く、表層多層化の程
度とも相関していた。蛍光二重染色では、HO-1とマクロファージマーカーであ
る CD68、iNOS、CD163、CD206のそれぞれを共発現する細胞が確認できた。
In situ PLA法では、RA滑膜表層で HO-1陽性細胞のうち約半数で
IgG-Fc/HLA-DRα複合体を共発現していた。また、RAでは滑膜表層に対して
垂直に配列する HO-1陽性細胞（Perpendiculocyte）の数は、滑膜多層化と相
関していた。RT-PCR法では、RAおよび OA共に HO-1の mRNAが確認でき
た。 
 
【結論】RA滑膜表層における HO-1陽性細胞の出現率は、滑膜の炎症程度およ
び滑膜表層多層化の程度と正の相関を認めた。HO-1陽性細胞の中には、抗原提
示し得る細胞が存在していた。Perpendiculocyteの出現率も、滑膜表層多層化
の程度と正の相関を認めた。これらのことは、滑膜表層における HO-1陽性細
胞の出現率が局所の炎症程度を推測するマーカーとなり得る可能性を示唆して
いる。また、RAと炎症反応が目立つ OAの鑑別診断に難渋する場合、
Perpendiculocyteの存在が RAの診断を支持する一つの材料になり得る。また、
HO-1陽性細胞の中には自己抗体産生に関わると考えられる抗原を提示してい
る細胞が存在していることから、この抗原提示に関わる因子を検討することに
より、抗体産生を抑制するなどの新たな治療につながる可能性がある。 
 


関節リウマチ滑膜におけるHO-1 発現細胞の検討

Mir, Sajjad Husain

Development of organic-inorganic hybrid functional nanomaterials by metal-complexation induced self-assembly processes

山形大学博士（医学）学位論文(Thesis)学位論文要

清野, 学

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
JNKシグナルに着目した卵巣がん治療抵抗性に関する研究 
 
責任講座： 産科婦人科学 講座 
氏  名： 清野 学    
【要約】 
【背景】卵巣がんは婦人科がんの中でも最も予後の悪い疾患である。
初期の治療が奏功し一見寛解に至った後でも多くが再発し、化学療
法抵抗性を獲得する場合が多い。卵巣がんの治療抵抗性の原因とし
て卵巣がん幹細胞および非幹細胞の薬剤耐性が挙げられる。我々は
これまでにグリオーマ幹細胞、膵がん幹細胞においてがん幹細胞性
の維持に c-Jun NH2-terminal kinase（JNK）が重要であることな
どを明らかにしてきたが、これらのがんと同様に進行卵巣がんの多
くの症例で JNK経路が活性化していることから卵巣がん幹細胞に
おいても JNK経路が重要な役割を担っているのではないかと考え
た。また卵巣がん細胞 (非幹細胞) において JNK活性がシスプラチ
ン耐性に関わるという報告はあるがパクリタキセル耐性に関わると
いう報告はない。私は卵巣がん治療抵抗性の克服をめざし、卵巣が
ん幹細胞および非幹細胞における JNK経路の役割を検討した。 
【方法】ヒト卵巣がん細胞株 A2780を用いて卵巣がん幹細胞株
A2780CSCを樹立した。JNK阻害薬 SP600125および JNKに対す
る siRNAを用いて A2780CSCの JNK活性を抑制した際の
A2780CSCのがん幹細胞性について検討した。さらに卵巣がん非幹
細胞の薬剤耐性に関する検討について、ヒト卵巣がん細胞株を用い
てSP600125で卵巣がん細胞のJNK活性を抑制した際のシスプラチ
ンおよびパクリタキセルに対する薬剤感受性を検討した。 
【結果】SP600125を用いて A2780CSCの JNK活性を抑制した場
合、がん幹細胞マーカーの発現抑制、がん幹細胞性を示す sphere形
成能抑制が認められた。siRNAを用いて A2780CSCの JNK発現を
抑制した際にも同様の事象が認められた。さらに SP600125で
A2780CSCの JNK活性を抑制した場合、その腫瘍形成能の抑制が
みられた。続いて卵巣がん細胞において薬剤抵抗性と JNK活性の関
係を調べた所、JNK 活性が高いほど薬剤耐性が高い傾向にあった。
SP600125存在下 (同時処理) ではシスプラチンは抗腫瘍効果を増
強させる一方、パクリタキセルでは逆に抗腫瘍効果を減弱させた。
これに対して SP600125を前処理した後にシスプラチンないしパク
リタキセル処理 (逐次処理) を行うと両者とも殺細胞効果を増強し
た。また、SP600125とシスプラチンないしパクリタキセルの逐次
処理は正常繊維芽細胞の細胞生存率を低下させなかった。 
【結論】卵巣がん幹細胞の幹細胞性維持に JNK活性が必要であるこ
と並びに JNKを抑制することで卵巣がん幹細胞の幹細胞性および
腫瘍創始能の喪失を誘導できることを明らかにした。また、前もっ
て JNK活性を抑制することで卵巣がん細胞のシスプラチンおよび
パクリタキセル抵抗性を減弱し化学療法の有効性を高めることがで
きることを明らかにした。また、パクリタキセルの場合、同時処理
と逐次処理で JNK阻害薬の効果が全く逆になることから、卵巣がん
細胞において定常状態の JNK活性とストレス応答性 JNK活性が卵
巣がんの薬剤抵抗性において異なった役割を担うこと、JNK阻害の
時機を工夫することがシスプラチンおよびパクリタキセル耐性卵巣
がんに対する有効な治療戦略となりうる可能性を示唆した。 
 
 


JNKシグナルに着目した卵巣がん治療抵抗性に関する研究

山形大学博士（医学）学位論文(Thesis

田邉, さおり

Upshaw-Schulman症候群の病因・病態解析　 -臨床経過の異なる２例の解析を通じて-

中村, 和幸

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
  早期発症てんかん性脳症における遺伝学的背景の解明 
 
指導（紹介）教授：	 三井	 哲夫 
	 	 	 	 	 	 	 	 	 	 	 	 	  氏 名 ：	 中村	 和幸 
【要	 約】 
 
 早期発症てんかん性脳症 (Early-onset epileptic encephalopathy: EOEE)とは、けいれん
発作を反復し、発作間欠時脳波でてんかん性異常波を認め、知的や感覚、運動発達の遅滞
を伴う疾患群である。EOEEに含まれる疾患として大田原症候群、West症候群、早期ミオ
クロニー脳症、Dravet 症候群などが挙げられ、これまでに 30 以上の原因遺伝子が同定さ
れている。大田原症候群の一部はWest症候群へ変容していくことが知られており、年齢依
存性てんかんと呼称される。これらには共通した原因背景が存在すると推測されており、
その遺伝学的基盤を明らかにするため解析を行った。 
	 328例のEOEEを対象とし、Whole exome sequencing (WES)とHigh resolution melting 
(HRM) 法を用いて SCN2A遺伝子の変異スクリーニングを行った。 
	 新規の SCN2A変異を 15症例（大田原症候群が 9例、West症候群１例、分類不能 EOEE 
5例）に 14変異同定した。全てミスセンス変異であり、12例で新生突然変異と確認された。
c.3976G>C（大田原症候群）は新生モザイク変異(変異率 18%)であり、c.634A>G（分類不
能 EOEE）は transcript variant 3に存在していた。大田原症候群の 78% (7/9)がWest症
候群へ移行した。全例重度の精神運動発達遅滞を認め、15例中 12例は難治性てんかんを示
した。 
	 次に 12例の EOEEに対してWESを行い、続いて 367例の EOEEに対して HRM法も
しくはWESを用いて GNAO1変異スクリーニングを行った。また、同定された変異体に対
する発現解析、構造解析、電気生理学的解析を行った。 
	 大田原症候群 3例 、分類不能 EOEE1例に GNAO1変異を同定し、3例はミスセンス変
異(p.Asp174Gly, p.Gly203Arg, p.Ile279Asn)、1例は欠失変異(p.Thr191_Phe197del)であ
り、全て新生突然変異であった。p.Asp174Glyは体細胞モザイク変異（変異率は 35〜50%）
であった。全例重度の精神運動発達遅滞と難治性てんかんを認め、4例中 2例に不随意運動
がみられた。Gαo変異体 (p.Asp174Gly, p.Ile279Asn, p.Thr191_Phe197del)では、細胞膜
だけではなく細胞質への異常局在を認めた。p.Gly203Thrは、立体構造解析により GTPと
の結合異常をきたすことが示唆された。ノルエピネフリン投与による Ca電流の抑制を測定
した結果、3変異（p.Gly203Thr, p.Asp174Gly, p.Thr191_Phe197del）において、カルシ
ウム電流の抑制は減弱する傾向があった。 
	 また、分類不能 EOEEの 1家系(罹患者 2名と両親)を対象としてWESを行い、PIGO 複
合へテロ変異 (c.389C>A [p.Thr130Asn], c.1288C>T [p.Gln430*])を同胞 2例に認めた。1
例は顔貌異常と重度精神運動発達遅滞を認め、もう 1例は生後 7か月時に死亡した。 
	 EOEE、特に大田原症候群で SCN2A変異を発見したことにより、SCN2A変異関連疾患
スペクトラムがより重度なてんかん症候群に広がっていることを示した。今後、EOEE の
原因解析において SCN2Aは重要な遺伝子の１つになると考えられた。また、大脳に強く発
現している 3量体 G蛋白質の αサブユニット（Gαo）をコードしている GNAO1遺伝子変
異を同定したことで、細胞内シグナル伝達異常が EOEEの原因となることを示した。また、
GPI アンカー異常症の病態も明らかになるにつれ、EOEE の遺伝学的背景がより多岐に渡
っていることが示唆された。同一の遺伝子における変異により、大田原症候群やWest症候
群など異なるてんかん症候群を発症することが明らかとなり、今後は遺伝子型と表現型の
関連性を解析していくことが課題である。 


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電子供与性芳香族置換基が主鎖に直結したポリジアセチレンの合成と物性

Fundamental research of biosensors based on organic transistors with self-assembled monolayer-functionalized electrodes

Measurement of longitudinal double spin asymmetries in the single-inclusive hadron quasi-real photoproduction at high-pт by a muon beam for the study of gluon polarisation in nucleon

Microsatellite polymorphism located immediately upstream of the phosphatidylinositol glycan, class K gene (PIGK) affects its expression, which correlates with tyrosinase activity in human melanocytes: Association with rhododenol- induced leukoderma

Role of transcription factor MafB for macrophage phagocytosis

関節リウマチ滑膜におけるHO-1 発現細胞の検討

Development of organic-inorganic hybrid functional nanomaterials by metal-complexation induced self-assembly processes

JNKシグナルに着目した卵巣がん治療抵抗性に関する研究

Upshaw-Schulman症候群の病因・病態解析　 -臨床経過の異なる２例の解析を通じて-

早期発症てんかん性脳症における遺伝学的背景の解明

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