Yamagata University Academic Repository

山形大学博士（医学）学位論文(Thesis)学位論文要

角田, 道彦

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
 
膵癌 EUS-FNA サンプルより樹立した Organoid の臨床応用に向けた検討 
 
責任講座：内科学第二講座 
氏  名：角田 道彦  
【要約】 
【背景】膵癌は予後不良な癌とされ、特に切除不能な進行癌につい
ては現時点で有効な治療薬の開発に至っていない。癌患者の遺伝子
解析を行い最適な治療方法を選択する Precision Medicine の取り組
みも進められているが、膵癌においては安定した腫瘍組織検体の確
保が困難な実情がある。採取した癌細胞を三次元条件下で培養する
organoid 培養技術は、臨床検体を元として生体に近い環境で安定的
に細胞を維持培養する技術であり、癌遺伝子研究に有用となり得る。
しかし、長期培養や継代が膵癌 organoid に与える影響について詳細
な検討はなされていない。 
【目的】本研究では膵癌組織や膵癌 organoid 由来の DNA、並びに
organoid 培地や血液検体中の cell-free DNA の遺伝子変異に関して
解析を行い、organoid により得られる癌遺伝子情報の安定性や研究
利用における有用性について検討を行った。 
【方法】当院で膵癌に対し超音波内視鏡下吸引生検(EUS-FNA)を行
った症例の生検検体、並びに膵切除症例の正常膵組織を用いて
organoid 培養を行った。継代早期および後期の organoid と、由来組
織のホルマリン固定標本から DNA を抽出し、Comprehensive 
cancer gene panel で評価可能な 400 遺伝子について次世代シーケ
ンサーにより変異解析を行った。 
【結果】organoid より抽出した DNA は、組織標本由来の DNA と
比べ DNA の分解が少なく、解析検体としての質が良好であった。膵
癌 organoid は FFPE 検体と高い variant の一致率を示し（Simpson 
score 0.73～0.90）、同様に継代早期・後期の膵癌organoidのvariant
は維持された（Simpson score 0.86～0.92）。一方、血清中の
cell-freeDNA については膵癌 organoid3 検体ともに確認された
KRAS 変異は認められなかった。organoid 培地中の cell-freeDNA
は organoid と一致した variant を有するものの、培地中 cell-free 
DNA にのみに発現する variant を認めた。 
【結論】 EUS-FNA 検体から樹立した organoid は、膵癌の遺伝子
解析における質的・量的な問題点を解消し、臨床応用における有用
な検体になり得る。 
 


膵癌ＥＵＳ－ＦＮＡサンプルより樹立したＯｒｇａｎｏｉｄの臨床応用に向けた検討

菅原, 心平

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
ラット肝部分切除後の肝再生時における胆汁由来細胞外小胞の肝細胞に与える影響に
ついて 
 
責任講座：   内科学第二講座 
氏  名：   菅 原  心 平    
【要約】 
【背景】肝臓の高い再生能力のメカニズムを明らかにするために、これまで研
究が盛んに行われてきたが未だに全容は不明である。肝内には血管と同様に胆
管も張り巡らされているが、胆管内を流れる胆汁と肝再生の関連についてはほ
とんど検討されていない。また、細胞外小胞(Extracellular vesicle：EV)はあら
ゆる細胞から放出されており、内部には細胞由来の蛋白質や核酸が含まれ様々
な生命活動に関与している。胆汁中にも EV が存在することも示されており、
本研究では肝再生と胆汁 EV の関係を明らかにするため、ラット肝部分切除モ
デルの胆汁 EVが肝細胞に与える影響について検討した。 
【方法】SDラット（８週齢、オス）を用い、胆管カニュレーションラットを作
成した。このラットに 70％肝部分切除術（Partial hepatectomy：PH）／sham
手術を施行し、経時的に胆汁を採取した。サイズ排除クロマトグラフィー法を
用いて採取した胆汁から EV を抽出し、透過型電子顕微鏡検査（Transmission 
Electron Microscope：TEM）、ナノ粒子トラッキング解析（Nano tracking 
analysis：NTA）で解析した。次に蛍光標識した胆汁 EV をラット肝細胞株
（BRL-3A）に添加し 24 時間培養後に蛍光顕微鏡で観察した。次いで、PH12
時間後／PH24時間後／sham手術後の胆汁EV（それぞれPH12-EV／PH24-EV
／sham-EV）をラット肝細胞株に添加し、24 時間後に回収した細胞から RNA
を抽出しトランスクリプトーム解析を行った。さらに、ラット肝細胞株に
PH24-EV、sham-EVを添加し培養、MTSアッセイにて増殖能を検討した。 
【結果】ラット胆汁より抽出した EV 抽出液中には、TEM および NTA で EV
の存在が確認できた。また、NTAでは PH12時間後に肝重量あたりの胆汁中へ
放出される EV数が有意に増加していた。さらに、in vitroでは肝細胞株に胆汁
EVが取り込まれることが確認された。トランスクリプトーム解析では、肝細胞
株に PH24-EV を添加した群（PH-24 群）は、sham-EV を添加した群（sham
群）に比べ、発現が増加・減少する遺伝子を多数認めた。さらに細胞周期に着
目し GO解析を行うと、sham群に比べ PH-24群では 28種類の遺伝子で発現増
加が見られ、その中には細胞周期を促進させる遺伝子や肝再生を促すとされる
遺伝子も見られた。そこで、胆汁 EV が肝細胞の増殖に及ぼす影響を検証した
ところ、PH24-EVは濃度依存的に肝細胞の増殖させることが明らかとなった。 
【結論】本研究では PH後に胆汁 EVが増加すること、また、PH後の胆汁 EV
は肝細胞株の増殖を促進させること、さらに、肝細胞内では細胞周期を促す遺
伝子の発現が増加することが明らかとなった。 
 


ラット肝部分切除後の肝再生時における胆汁由来細胞外小胞の肝細胞に与える影響について

山形大学博士（看護学）学位論文(Thesis)学位論文要

遠藤, 美穂子

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
高校生を対象としたセクシュアルヘルスリテラシー育成プログラムの開発 
 
 
教育・研究領域：生涯生活支援看護学  
氏  名：  遠藤 美穂子      
【要約】 
 本研究は高校生を対象としたセクシュアルヘルスリテラシー（以下、SHL
とする）育成プログラムの開発を目的とした。 
ヘルスリテラシーをもとに作成した SHL 育成プログラムにて、X 県 Y 地区
の高校 3 校に在籍する高校 2 年生 66 名を対象に介入を行った。高校生向け
SHL 尺度得点、eHEALS 日本語版得点、性知識得点をアウトカムとし、事前、
介入直後、介入 1 ヶ月後に自記式質問紙を用いて調査を行った。 
結果、高校生向け SHL 尺度得点、eHEALS 日本語版得点、性知識得点は介
入直後に上昇し、1 ヶ月後も持続していた。SHL 育成プログラムは高校生の
SHL の向上、e ヘルスリテラシーの向上、性知識の向上に有用性がある可能
性が示唆された。 
 


高校生を対象としたセクシュアルヘルスリテラシー育成プログラムの開発

山形大学博士(理学)学位論文(Thesis

川口, 正記

一般次元におけるドメインウォールネットワーク厳密解の構成及びトポロジカルソリトン上へのゲージ場の局在機構の解明

武田,洋子

論 文 内 容 要　約
論文題目
化学療法を受けている膵臓がん患者の健康関連 Quality of lifeの
特徴と栄養に関連する指標・食の苦悩の実態との関連
教育・研究領域：生涯生活支援看護学
氏  名： 武 田 洋 子  
【要約】
本研究は，化学療法を受けている膵臓がん患者の健康関連 QOL の特徴を明らか 
し，栄養に関連する指標および食の苦悩の実態との関連を検討することを目的
とした．同意の得られた 33 名に自記式質問紙調査，診療録調査を行い，基本属
性，診療関連情報，栄養に関連する指標（血清アルブミン値，CONUT 変法等），
食の苦悩，Functional Assessment of Cancer Therapy-Hepatobiliary（以下
FACT-Hep）を用いて QOL を評価した．分析は FACT-Hep の平均値で高低 2 群に分
類し，他の変数との関連について統計的に検討した．その結果，FACT-Hep を構
成する HCS が高い患者は血清アルブミン値も有意に高く，FACT-Hep の低い患者
は食の苦悩が有意に高いことが示された．以上から，化学療法中の膵臓がん患
者の QOL の向上には，食の苦悩に対する取り組みが必要とされることが示唆さ
れた． 
（400 字） 


Japanese

化学療法を受けている膵臓がん患者の健康関連 Quality of life の特徴と栄養に関連する指標・食の苦悩の実態との関連

山形大学博士(工学)学位論文(Thesis)要約の

鮏川, 慶仁

非晶質有機半導体蒸着膜の高次構造形成機構とその制御因子

遊田,由希子

 
 
論 文 内 容 要 約 
論文題目 
 産婦人科外来看護職を対象とした禁煙支援促進教育プログラムの
作成と評価 
 
教育・研究領域：生涯生活支援看護学              
氏  名： 遊田 由希子  
【要約】 
本研究の目的は，産婦人科外来看護職の禁煙支援を促進する教育プログラムを作成し，評
価することである。 
  プログラムは，学習者のモチベーションの向上に役立つ ARCS（Attention Relevance Confide 
nce Satisfaction）モデルに基づき構成し，自己効力感を高める内容を取り入れて作成した。東 
北 6県の産婦人科外来に勤務する看護職 16名を対象にプログラムを実施し，途中脱落の 2名 
を除いた14名を分析対象とした。プログラム評価の得点は高く，禁煙支援に対するモチベーショ 
ンの向上に貢献できた内容であった。プログラムの受講により，看護職の「禁煙支援に対する知 
識」，「禁煙支援に対する信念と態度」，「禁煙支援の自己効力感」，「禁煙支援の実践」は，実施 
直後，１か月後に得点が有意に上昇したことから，産婦人科外来看護職の禁煙支援の促進に有 
効であった。同様の教育プログラムはこれまでに存在しなかったことから，本研究により初めて産 
婦人科外来看護職の禁煙支援を促進する教育プログラムを提示した。 
 
  


産婦人科外来看護職を対象とした禁煙支援促進教育プログラムの作成と評価

志賀, 翔多

β-Meander構造を起点としたβシートモデル蛋白質の再設計

大石, 絵理

主鎖および側鎖末端が高分子の電子デバイス特性に与える影響

宇野, 智洋

論 文 内 容 要 約 
論文題目 
 
骨髄由来多血小板フィブリンの腱板修復促進効果 
― 家兎肩腱板変性断裂モデルを用いた基礎研究 ― 
 
 
責任講座：    整形外科学 講座 
氏  名：    宇野 智洋    
【要約】 
 
【目的】多血小板フィブリン（PRF）は多血小板血漿（PRP）と比較して成長
因子を緩徐に放出する．肩腱板断裂の修復時に併用し，組織学的に検討した研
究はない．また，PRF は末梢血（P-PRF）から作製するのが一般的で, 骨髄由来
の PRF（BM-PRF）の報告はない. 本研究の目的は，家兎肩腱板変性断裂モデル
での PRP，P-PRF，BM-PRF を併用した肩腱板修復を検証することである． 
【対象と方法】白色家兎 62 羽（平均 13.9 週齢）の肩腱板変性断裂モデルに
対し，骨孔法で腱板修復を行った．修復のみを行う対照群，修復時に耳動脈の
末梢血由来の PRP を併用した PRP 群，末梢血由来の PRF を併用した P-PRF 群，
腸骨の骨髄由来の PRF を併用した BM-PRF 群の 4群に分けた．4週，8週，12 週
の組織のヘマトキシリン・エオジン（H.E.）染色を行った．腱骨接合部の細胞
数は BZ-X 710 digital microscope（KEYENCE JAPAN）で評価した．修復した腱
骨接合部の連続性は Continuity スコアで, 12 週での腱骨の成熟については
Modified tendon to bone maturing スコアで半定量的に評価した．28 週齢の
家兎由来の P-PRF と BM-PRF について H.E.染色，CD11b の免疫組織化学染色に
て評価し，さらに成長因子の徐放濃度を ELISA 法で評価した．統計学的評価に
は，Mann-Whitney U 検定，Kruskal-Wallis 検定（Dunn 法）を用いた． 
【結果】4週の Continuity スコアは，対照群で 2.4 ± 0.6 点，PRP 群で
2.5 ± 0.4 点，P-PRF 群で 2.7 ± 1.0 点，および BM-PRF 群で 3.8 ± 0.4 点
であり，BM-PRF 群で対照群と比較して有意に高かった（p＜.05）．Modified 
tendon to bone maturing スコアは，対照群で 21.5 ± 6.4 点，PRP 群で 18.8 
± 6.9 点，P-PRF 群で 27.6 ± 9.8 点，および BM-PRF 群で 41.5 ± 1.3 点で
あり，BM-PRF 群は対照群，PRP 群と比較して有意に高かった（それぞれ，p
＜.05）． 
P-PRF には細胞が認められず，BM-PRF には 68 ± 52 cells/強拡大視野が認
められた．BM-PRF の細胞の 66 ± 14%が CD11b陽性細胞であった．徐放 3日の
血管内皮細胞増殖因子 A（VEGFA）の濃度は BM-PRF（43.8 ± 28.9 pg/mL）に
おいて，P-PRF（6.4 ± 5.2 pg/mL）と比較して有意に高かった（p＜.05）． 
【結論】BM-PRF を併用した腱板修復では，4週での腱骨の連続性を高め，12 週
において良好な腱骨の成熟が得られた．BM-PRF には骨髄細胞や単球などの
CD11b陽性細胞が含まれ, フィブリン塊を足場として早期に細胞が集積し，緩
徐に成長因子を放出することで腱骨接合部の修復を促進した． 
 


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