Jichi Medical University Institutional Repository

自治医科大学博士（医学）令和元年度doctoral thesi

増田, 麻里亜

Japanese

好酸球性中耳炎の病態解明

Thitiananpakorn, Kanate

English

MRSAにおけるダプトマイシンとバンコマイシン交差耐性メカニズムの解明

村山, 瑛

血管付きβリン酸三カルシウムの作成と応用に関する検討

自治医科大学博士（医学）令和2年度doctoral thesi

須藤, 大輔

川崎病再発患者の疫学研究（２００３～２０１２年）

田中, 克明

糖尿病網膜症モデル動物の開発とその定量評価方法検討

直井, 為任

Body lateropulsionを呈する脳梗塞症例の臨床・画像的特徴ならびに解剖学的責任経路を検証する

自治医科大学博士（医学）令和元年度thesi

渡邉, 萌理

（甲種）
論  文  要  旨 
学 位 論 文（要約） 
表 題 多発性筋炎・皮膚筋炎における新規バイオマーカーの検索 
申 請 者 氏 名 渡邉 萌理 
担当指導教員氏名 教授 小竹 茂 
所 属 自治医科大学大学院医学研究科 
地域医療学系 
総合医学 
内科系総合医学 
使用文字数 ２４８５ 字 
（甲種）
1 
論  文  要  旨 
氏名 渡邉 萌理
表題 
  多発性筋炎・皮膚筋炎における新規バイオマーカーの検索
１ 研究目的 
 多発性筋炎・皮膚筋炎 (polymyositis/dermatomyositis; PM/DM) は骨格筋の炎症と変性を主徴
とする自己免疫疾患であり、皮膚、関節、肺、心臓など複数の臓器に炎症を及ぼす。PM/DMの病因
は、遺伝性、環境因子、免疫原性など多元的な要因が関与していると考えられているが、未だ十分
な解明に至っていない。CD146は細胞接着分子の免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜貫
通型糖蛋白である。血管内皮細胞上に恒常的に発現し、vascular endothelial growth factor受
容体や CD44 分子と細胞膜上で会合し、細胞の接着、細胞単層の維持、炎症細胞遊走および血管新
生に関わっている。リンパ球 (T細胞、B細胞、NK細胞) にも発現がみられ、CD146陽性 T細胞は
炎症性サイトカインを分泌し、炎症性疾患の病態に関与していることが報告されている。また、血
管内皮細胞の細胞膜上で CD146と結合する分子にβ-galactosidase-binding lectin familyに属
する galectin-3がある。galectin-3は上皮細胞、血管内皮細胞、全ての炎症細胞 (マクロファー
ジ、単球、好中球、T細胞など)、などに発現し、細胞のアポトーシスや、細胞接着、遊走、血管新
生、炎症など様々な生物学的活性を有する。CD146、galectin-3共に一部の自己免疫疾患において
発現が報告されており、その病態に係る因子として注目されている。本研究では CD146と galectin-
3の PM/DMとの関連を調べ、血清中の soluble CD146 (sCD146）、galectin-3、並びにそれらの自己
抗体が、PM/DMの疾患活動性や臨床病態を示すバイオマーカーとなる可能性について検討を行った。 
２ 研究方法 
 患者血清と健常者 (HC) 血清を用いて、sCD146、抗 CD146抗体、galectin-3、抗 galectin-3抗
体をそれぞれ特異的な ELISAを用いて測定した。sCD146の測定は sandwich ELISA法を構築し測定
系を確立した。抗 CD146抗体は A375と human umbilical vein endothelial cell (HUVEC)を用い
たフローサイトメトリーを用いて存在を検証した後、抗 CD146 抗体の定量を目的とした direct 
ELISAを構築し測定を行った。Galectin-3の測定は ELISA kitを用いて測定し、抗 galectin-3抗
体の測定は direct ELISAを構築し測定を行った。また、それぞれの蛋白について、PM/DM患者の臨
床所見、血清学的データ、血清サイトカイン、筋炎特異抗体との関連を調べた。さらに、CD146と
galectin-3の組織中での発現部位を検討するために、患者検体を用いて免疫組織染色を行った。 
３ 研究成果 
 血清 sCD146は PM患者において DM患者や HCと比較して有意な上昇がみられたが、PM/DMの臨床
所見との関連は示さなかった。PM/DM 患者血清中の抗 CD146 抗体の存在を証明するべく、A357 と
HUVECを用いたフローサイトメトリーを行ったところ血清抗 CD146抗体を確認する事が出来た。さ
（甲種）
2 
らに、抗 CD146抗体測定を目的とした direct ELISAを構築し測定を行ったところ、抗 CD146抗体
は DM患者において PM患者や HCと比較して有意に高値で存在する事が判明した。また、抗 CD146
抗体は疾患活動性と伴に低下し、一方 sCD146 は疾患活動性と伴に上昇する傾向がみられた。また
患者組織において CD146の発現部位を検討すべく免疫染色を行ったところ、皮膚炎、ILD組織の増
生した小血管の血管内皮細胞に陽性像を認めた。 
血清 galectin-3 値については、PM/DM 患者において HC より有意な上昇を見せた。また、血清
galectin-3は炎症性サイトカインや、C-reactive proteinや赤血球沈降速度などの血清炎症マー
カーと有意な相関をみせた。臨床所見との関連においては、間質性肺炎 (ILD) を有する群で血清
galectin-3値は有意に高値となり、中でも acute/subacute interstitial pneumonia (A/SIP) は
chronic interstitial pneumoniaより有意な高値を示した。さらに、血清 galectin-3値は ILDの
画像的評価とも相関がみられた。疾患活動性との変化においては、血清 galectin-3値は Myositis 
Intention to Treat Activities Indexとの有意な相関を示した他、疾患活動性と伴に有意に低下
する事が判明した。Galectin-3免疫染色では、皮膚炎、筋炎組織の炎症細胞に、ILD組織の炎症細
胞と線維化部位に陽性像が認められ、それぞれに galectin-3の発現が示唆された。 
抗 galectin-3抗体においては DM患者において PM患者や HCより有意な上昇が認められ、疾患活
動性と伴に低下する事が判明した。 
４ 考察 
sCD146 の測定においては過去の報告と同様に PM 患者において有意な上昇をみとめた。しかし
sCD146が DM患者で有意な上昇が認められないという結果は、DMの炎症の首座が筋線維束周囲の小
血管にあり PM より血管障害性が強い疾患であることから理論的には説明が困難な結果であった。
そこで、DM患者血清中に抗 CD146抗体が存在し sCD146の測定系に影響している、と仮説を立て、
A375と HUVECへの反応性の結果を経て、抗 CD146抗体測定のための ELISAを構築し定量を行った。
抗 CD146 抗体は本研究において初めて存在を証明し、DM 患者において有意な高値を示すことが判
明した。また、疾患活動性に伴い抗 CD146抗体が低下し、反対に sCD146が上昇する傾向がみられ、
抗 CD146抗体と sCD146の動態が疾患活動性を反映する指標になり得る可能性が考えられた。 
Galectin-3 は炎症性サイトカインを介した炎症性病態に関与する他、transforming growth 
factor-β を介して線維化に係り、ILD の病因に関与する事が報告されている。PM/DM 患者におい
ても、血清 galectin-3値は PM/DMの病因に関与する炎症性サイトカインとの有意な関連を示し、
線維化病態として PM/DM-ILD との関連を示した。さらに、galectin-3 は PM/DM-ILD 患者における
A/SIPの判別に有用であり、且つ ILDの重症度とも相関する有意義なバイオマーカーとなる可能性
が示唆された。疾患活動性との変化においてもベースラインの疾患活動性を反映し、活動性と伴に
有意に変化するため、PM/DMの疾患活動性の指標にもなり得ると考えられる。 
抗 galectin-3抗体においては、本研究において新規にリコンビナント蛋白を用いた ELISAで測
定を可能とした。抗 galectin-3抗体は既報において SLE患者の皮膚血管炎との関連が示唆されて
いる。本研究において抗 galectin-3抗体は DM患者において PM患者より有意に高値を示しており、
PM/DMにおいても抗 galectin-3抗体が皮膚血管炎と関連がある可能性が考えられる。 
５ 結論 
血清 sCD146、抗 CD146 抗体、galectin-3、抗 galectin-3 抗体についてそれぞれ PM/DM における
臨床病態との関連とバイオマーカーとしての可能性を検討した。それぞれ PM/DMの機序に関連があ
（甲種） 
3 
 
る可能性を示唆し、PM/DM患者の疾患活動性に応じて変化した。その中でも血清バイオマーカーと
して臨床的に最も有意義な結果が認められたのは galectin-3であった。Galectin-3は PM/DMにお
いて炎症と線維化を反映し、中でも PM/DM-ILD患者において有用なバイオマーカーになると考えら
れる。本研究の結果について将来的にはより大きな母集団での再検証を必要とする他、今回新規に
判明した抗 CD146抗体や、抗 galectin-3抗体に関してはより詳細なメカニズムを明らかにする必
要がある。 
 


多発性筋炎・皮膚筋炎における新規バイオマーカーの検索

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