Ehime University Institutional Repository

立川, 信子

Japanese

反モダンについての考察 : アントワーヌ・コンパニョンのアンチモダンの概念をめぐって

高橋, 弘臣

南宋臨安の倉庫

愛媛大学Ehime University博士(工学)doctoral thesi

Ram, Chandra Tiwari

English

Elasto-Plastic Continuum Modeling for Slope Stability Evaluation: Numerical Methods and Applications

Ehime University (愛媛大学)博士(理学)doctoral thesi

金, 受診

KIM, Soojin

(第 6号様式)
学位論文審査の結果の要旨
氏 名 1 金受珍
審査委員
聡
論文名
Occurrence and diversity of tetracycline resistance gene， tet(M) ， in Korean coastal 
seawater 
審査結果の要旨 (2，000字以内)
近年，抗生物質耐性菌 (antibioticresistant bacteria， ARB) および耐性遺伝子
(antibiotic resistance genes， ARGs)の分布拡大と死亡者数増加が国際的にも問題になっ
ており，本年6月の G8会議の科学大臣提言でもトッププライオリティに挙げられ，国際共
同研究の必要性がアピールされた欧米では加速的に研究が進められているが，日本を含む
アジア諸国での研究はまだ院内感染のみに焦点が当てられ，環境汚染物質としての認識は低
く，研究者人口も少ない 自然環境と人間環境問のほGs移動は新しい環境問題である。
これまで， ARGsは高濃度の抗生物質使用によって選択的に形成されることは知られてきた
が，最近になって，極低濃度の抗生物質が遺伝子変異の固定化と遺伝子の水平伝播を促進し，
ARGsの環境への残存性が高まる事が明らかになってきた 環境での ARBとARGsの分布を知
る事は環境からの ARGsリスクを評価する上で重要であると考えられている
本研究は，韓国南岸の， Yeosu (KYS) ， Geoje (KGJ)および Wando(KWD)の3地点の沿岸海水中
における ARBとARGsの分布と遺伝的多様性を調べたものである 抗生物質のうち，世界的
にも畜産・水産での使用量の多いオキシテトラサイクリン (OTC) の現場海水中の濃度を測
定したところ，ほとんどの調査地点で 2010年， 2011年ともに検出限界以下 (0.1μg/L)で
あった海水中での濃度はリアルタイムでの汚染を示すことから，韓国南岸では OTC汚染は
低いと考えられた OTC耐性菌率は 2010年で 0-0.35弘 2011年でか10.6唱であり，年による
有為差はなかった.地点、別では KWDで高い傾向があり， ARBの由来が陸地からの流入も含め，
多様である可能性が示唆された. 3地点では KWDで耐性率が高い傾向がみられた
OTC耐性遺伝子は現在まで 40種以上が知られている本研究では，その中で遺伝子の進化，
分布，多様性の情報の多い tet(M)に焦点をあて，海水中の細菌が保有する tetCM)の量と遺
伝的多様性を，非培養法および培養法で調べた.まず，現場海水中から直接抽出した DNAか
ら tet(M)を PCRで検出，定量した 3地点いずれからも tet(M)は検出され，海水細菌群集
中には.tet{M)は量的変化するもののいずれの地点でも存在することが分かつた.培養法で
OTC耐性菌を分離したところ.70株の tet(M)保有株が得られ，すべて由来は KWD地点であっ
た.培養可能な菌では tet{M)は偏在することが示唆された.
tet (M)の遺伝的多様性を塩基配列で調べたところ.KWDの tet{M)はすべての群集および分
離株間で 99%以上の相向性を示し，日本の養殖場由来 tet(M)と同じ遺伝子であった. KWDの
tet(M)は養殖環境由来であることが示唆された 一方. KGJの群集 tet(M)聞の相同性では
91. 7覧と低いものがあった また，ヒトの腸球菌由来の伝達性因子に由来する tet (M)と相向
性の高いものが含まれていたことから.tet{M)のヒト環境からの流入が疑われた.地域によ
って存在する遺伝子ゲノタイプが異なる事が明らかになり .KWDとKG]では tet (M)の由来が
ことなるために多様度に差異があることが考えられた
分離培養された tetCM)保有菌の分類群を 16SrRNA遺伝子で調べたところ，すべて Vibrio
または Photobacterium属であり，類縁のガンマプロテオバクテリアに限られていることが
分かった.これらの結果から，海水中の細菌群集では tet(M)は普遍的に存在するものの，培
養可能菌ではガンマプロテオバクテリアが培養法によって選択されていることが明らかに
なった
本研究を通して得られた知見から，これまで明らかにされていなかった韓国沿岸海水中で
の OTC濃度，耐性菌率，耐性遺伝子の多様性および耐性遺伝子保有菌の特徴が明らかにされ
た これらはすべて初めて得られた知見であり，本研究は微生物生態学，公衆衛生学の分野
における国際的情報を拡大した.薬剤耐性菌と耐性遺伝子の環境実態と遺伝的特徴の解明
は，微生物生態学的に評価されるだけでなく，環境科学的にも評価できるものである
以上のような研究内容の評価により，審査委員会員一致して本学位論文が，博士(理学)
を授与するに値する論文であると判定した.


Occurrence and diversity of tetracycline resistance gene,tet(M),in Korean coastal seawater

寺内, 浩

The Tengyo Disturbance and the Johei-Tengyo Disturbance (1)

高安, 啓介

Adorno's Concept of Aesthetic Theory

向井, 留実子

高橋, 志野

What Japanese language supporters learn when helping to teach kanji to Japanese language students : A case study

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)doctoral thesi

渡辺, 崇夫

WATANABE, Takao

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名 渡辺 崇夫 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  主 査                             印 
 
  副 査                             印 
 
  副 査                            印 
 
  副 査                             印 
 
  副 査                             印 
 
 
      論  文  名 
C 型肝炎ウイルス関連肝細胞癌においてみられた、Protein kinase R による c-Fos と 
c-Jun 活性化を介した細胞増殖促進作用 
 
   審査結果の要旨 
 
Protein kinase R (PKR)は C 型肝炎ウイルス (HCV)を含む RNA ウイルスが複製する際
に生じる二本鎖 RNA によって活性化され、ウイルスの増殖を抑制する細胞内タンパク質
である。申請者らはこれまでの検討で、PKR が、HCV 関連の肝細胞癌において非癌部の
肝組織に比べて高発現することを報告してきた。しかし、HCV 関連肝細胞癌で高発現す
る PKR の肝細胞癌の発癌と進展における役割については不明である。 
そこで申請者は、HCV 発現肝癌細胞株を用いて PKR の発現を増減させ、発現量に変化
のみられる遺伝子を同定し、その機能を検討した。まず、肝癌細胞株 Huh7.5.1 を用い
て、HCV2 型の全遺伝子を複製する JFH1 株と、HCV1 型の全遺伝子を複製する H77s 株を
作製した。それらの細胞株を用いて in vitro で PKR siRNA による PKR のノックダウン
と PKR 発現プラスミドによる過剰発現をおこない、PCR アレイの結果、PKR を過剰発現
すると MAP kinase 関連遺伝子である c-Fos と c-Jun の発現が増加してノックダウンす
ると低下した。PKR の増減による c-Fos と c-Jun 遺伝子の増減は、HCV を複製していな
い Huh7.5.1 より、HCV を複製している JFH1 株で大きかった。以上の結果を、リアルタ
イム PCR により確認し、また、リン酸化 c-Fos とリン酸化 c-Jun も PKR ノックダウンで
低下し、PKR 過剰発現で増加することをウエスタンブロット法で確認した。さらに各々
の上流にある Erk1/2 と JNK1 のリン酸化蛋白も同様に PKR の増減に伴って増減すること
を示した。 
  次に、細胞増殖アッセイ (MTS アッセイ)と wound-healing アッセイをおこない、PKR
ノックダウンにより細胞増殖能が低下し、また過剰発現すると細胞増殖能が増加し、PK
R ノックダウンにより傷の修復が遅延することを示した。さらに、c-Fos を阻害する U01
26 と c-Jun を阻害する SP600125 を添加すると、PKR の過剰発現による細胞増殖増加は、
各々の阻害により低下し、両者を阻害することでさらに低下した。PKR による肝細胞癌
増殖作用は c-Fos と c-Jun の両者に依存していた。 
      最後に、ヒト肝細胞癌組織を用いた実験で、特に HCV 陽性の肝細胞癌で PKR 高発現群
において PKR 低発現群より c-Jun mRNA が増加していることを明らかにした。また、ウ
エスタンブロットにて、PKR 高発現群では PKR 低発現群よりリン酸化 c-Fos とリン酸化
c-Jun の発現増加がみられた。これらの結果は細胞株の実験でみられた PKR が c-Fos と
c-Jun を活性化する結果と一致していた。 
      本学位審査は平成 24 年 11 月 15 日に開催され、申請者は、in vitro で gain-of-func
tion 実験と loss-of-function 実験をおこない、PKR の役割とその機序を解析し、さら
に、ヒト肝細胞癌組織を用いた実験をおこない、HCV 感染関連肝細胞癌で強発現してい
る PKR は c-Fos と c-Jun の活性化による細胞増殖能亢進能を有し、この作用が PKR の腫
瘍増殖作用と発癌作用に寄与していることを明解に発表し、HCV 感染関連肝細胞癌で過
剰に発現する PKR がその治療標的となり得る可能性を示した。①PKR による c-Fos と c-
Jun の活性化におけるタンパク量とリン酸化の関係、②PKR と IL-8、NFkB の関係、③正
常肝細胞における PKR の発現とその作用、④肝炎と肝癌における PKR の作用と AP-1 活
性の違い、⑤PKR の機能解析における wound-healing アッセイの意義、⑥肝癌以外の癌
における PKR の発現とその作用、等について質疑応答があり、申請者は的確に答えた。
本来、HCV に対して抑制的に作用する PKR が、HCV 関連の肝細胞癌において非癌部の肝
組織に比べて高発現することことに着目し、PKR が肝細胞癌において c-Fos と c-Jun の
活性化による細胞増殖能亢進能を有し、この作用が PKR の腫瘍増殖作用と発癌作用に寄
与していることを明らかにした点は特記でき、肝細胞癌治療の面で大いなる寄与をもた
らす点を評価し、審査員は全員一致で本研究が学位(医学)に値すると判定した。 
 
 
 
 


Protein kinase R modulates c-Fos and c-Jun signaling to promote proliferation of hepatocellular carcinoma with hepatitis C virus infection

佃, 架奈

TSUKUDA, Kana

 
 
（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
氏     名 佃 架奈 
審 査 委 員 
 
 
  
 
 
 
 
 
 
   
    論  文  名 認知機能障害に対するレニン・アンジオテンシン系よりのアプローチ 
      審査結果の要旨 
【目的】わが国では急速な高齢社会の進行とともに認知症患者が増加しており、その予防対策
や治療法の確立が急務となっている。高血圧や糖尿病が認知機能を低下させることが多数報告
されており、生活習慣病が認知機能障害発症の危険因子であることが明らかとなりつつある。
最近の研究からレニン・アンジオテンシン(RA)系は血圧の調節だけではなく、インスリン抵抗
性発症にも関与していることが知られており、アンジオテンシンⅡ1型受容体拮抗薬(ARB)が
認知症の発症、進展を抑制することが報告されているが ARB投与による認知機能障害改善の機
構に関しては不明な点が多い。申請者は ARBによる認知機能低下改善機構を 2型糖尿病マウス
モデル、アルツハイマー病マウスモデルを用いて検討した。 
【方法】実験（１）2型糖尿病マウスモデルとして KK-Ay 系マウスを用い、対照野生型マウス
(C57BL/6j)と比較した。ARB(カンデサルタン)を混餌にて投与し、認知機能は毎週 1 回、電撃
回避試験により評価した。 
実験（２）アルツハイマー病モデルの作製にはアミロイドベータ(A)200 pmolを ddY系マウ
スの脳室内に投与した。A 投与の 2週間前から peroxisome proliferator-activated 
receptor(PPAR)-の活性化作用を有する ARB（テルミサルタン）を飲水にて投与し、A 投与 4
週間後に Morris水迷路による空間認知機能の試験を行った。脳血流は 2Dレーザー血流計で測
定した。脳内の A 沈着ならびに脳内の mRNAの発現はそれぞれ ELISA法、リアルタイム PCR
法で検討した。いずれの ARBも血圧に影響を与えない用量を用いた。 
【結果】実験（１）野生型マウスでは電撃回避試験の回数を増すごとに認知機能の上昇が認
められたが、KK-Ay 系マウスでは上昇は認められず、14週齢から認知機能の低下を認めた。8
 
 
週齢からカンデサルタンを投与すると、低用量（0.001％）では 15週齢から、高用量（0.005
％）では 9週齢から認知機能の上昇が認められ、高用量群では野生型マウスと同程度の認知機
能を示した。すでに認知機能の低下が認められた KK-Ay 系マウスに対し、カルデサルタンを
15週齢から投与した群では認知機能の低下が有意に抑制された。カルデサルタンは KK-Ay 系
マウスに認められる高血糖・高インスリン状態を改善した。KK-Ay 系マウスにおいて脳内のア
ンジオテンシンⅡ2型受容体受容体と神経分化誘導因子である methyl methanesulfonate 
sensitive 2の発現が減少するが、カンデサルタン投与により発現は有意に増加した。 
実験（２）ARBとして PPAR-刺激作用を有するテルミサルタンを用い、RA系と PPAR-のクロ
ストークを検討した。Aの脳 室内投与により空間認知機能の顕著な低下が認められたがテル
ミサルタン投与によりその低下は有意に抑制された。一方、PPAR-のアンタゴニストである
GW9662投与によりテルミサルタンの認知機能改善作用は減弱した。テルミサルタン投与群で
は脳血流の有意な増加と TNF-の減少が認められたが、GW9662同時投与によりその効果は減
弱した。テルミサルタン投与群では脳内 Aの沈着が減少した。 
 
【考察】実験（１）よりカンデサルタンは高血糖やインスリン抵抗性の是正に加え、直接神
経保護作用により糖尿病に起因する認知機能の低下を予防する可能性が示唆された。実験
（２）からテルミサルタンは脳血流の増加により Aのクリアランスを増すことで脳内の A沈
着を抑制していると考えられる。さらに認知機能障害の抑制には抗炎症作用が関わっており、
これらの作用には PPAR-の活性化が関与することが示唆された。RA系は糖尿病やアルツハイ
マー病に伴う認知機能の低下に関与しており ARB投与が認知機能障害の改善につながると考え
られる。 
 
本学位審査は平成 25 年 9 月 27 日に開催され、申請者は、糖尿病によって誘発される認知
機能障害ならびにアルツハイマー病による認知機能障害に対する ARBの改善作用についてそれ
ぞれの疾患モデルマウスを用いて検討し、その成果を発表した。 
（１） 認知機能障害改善における ARB の血圧低下による影響、（２）血糖をコントロールす
ることにより認知障害が改善するか、（３）ヒトと実験モデルマウスの違いと使用したモデル
マウスの選択、（４）それぞれの認知障害実験モデルの解析手法の違い、（５）A脳室内投
与後の沈着部位、（６）他の ARB製剤との比較、等について質疑応答があり、申請者は的確に
答えた。 
申請者が糖尿病やアルツハイマー病の疾患モデルマウスを用いて ARBの認知機能障害を抑制
する機序を分子生化学ならびに薬理学的手法から明らかにした点は特記でき、急速な高齢化社
会の進行に伴う認知症患者の増加に対し、認知機能障害の予防・治療の面で大いなる寄与をも
たらす点を評価し、審査員は全員一致で本研究が学位(医学)に値すると判定した。 
 
 
 
 


Amelioration of Cognitive Impairment in the Type-2 Diabetic Mouse by the Angiotensin II Type-1 Receptor Blocker Candesartan|Cognitive Deficit in Amyloid- -β Injected Mice Was Improved by Pretreatment With a Low Dose of Telmisartan Partly Because of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor- γ Activation

Ehime University (愛媛大学)博士(農学)thesi

Meenu, Gupta

（様式５）(Style5) 
学位論文全文に代わる要約  
Extended Summary in Lieu of Dissertation 
 
 
氏名：  
Name 
 
Meenu Gupta 
学位論文題目：  
Title of Dissertation 
 
Studies on regulatory mechanisms of hypersensitive responses in 
Nicotiana benthamiana . 
（Nicotiana benthamiana における過敏感反応の制御機構に関
する研究）  
 
学位論文要旨：  
Dissertation Summary 
 
Plants have a variety of active defense mechanisms to protect themselves from 
microbial pathogen infection. One of the best characterized defense responses is the 
hypersensitive response (HR), which is a defense response accompanied by programmed 
cell death. Previously, more than 50 gene fragments, which were regulated in tobacco 
plants after inoculation with R. solanacearum (R. solanacearum-responsive genes, 
RsRGs; Kiba et al. 2007) have been isolated. Many RsRGs showed no similarity to any 
known genes and thus might represent novel genes related to plant defense responses. 
The objective of this study is isolation and characterization of RsRGs related to 
HR. I focused on RsRG308 and RsRGM10, which encodes a putative 
translationally controlled tumor protein (NbTCTP) and asparagine-rich protein 
(NbARP), respectively.  
RsRG308 showed homology with N. benthamiana translationally controlled tumor 
protein (NbTCTP). An HR induction was accelerated in NbTCTP-silenced N. 
benthamiana plants challenged with incompatible bacteria and Agrobacterium-mediated 
transient expression of HR inducers, such as AvrA, BAX, INF1 and NbMEK2 DD . NbTCTP 
silencing enhanced NbrbohB and NbMEK2-mediated ROS production leading to HR-cell 
death. Transient expression of both the full-length sequence of NbTCTP and the Bcl-xL 
domain of NbTCTP reduces the HR cell death induced by INF1 treatment. Therefore, 
NbTCTP might act as negative regulator of HR. 
RsRGM10 showed homology with N. benthamiana asparagine-rich protein (NbARP). 
Induction of the HR by incompatible bacteria Rs8107, Pseudomonas cichorii and 
Pseudomonas syringae pv. syringae was delayed in NbARP-silenced plants. Silencing of 
NbARP reduced induction of HR-cell death by Agrobacterium tumefaciens-mediated 
transient expression of HR inducers. These results suggest that NbARP is closely related to 
the HR.  
Taken together, plant cell death regulators, including NbTCTP and NbARP might have 
a role to fine tune HR during plant defense responses. 


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