Ehime University Institutional Repository

藤田, 勝久

Japanese

里耶秦簡の交通資料と県社会

高田, 律美

川出, 富貴子

川崎, 幹子

矢野, 奈美

田村, 優佳

加藤, 匡宏

大学生の母乳育児に関する親準備性の意識調査

梶原, 郁郎

J.デューイの熟慮 reflection の道徳教育における役割 : 行為に連動可能な社会認識形成

森, 貴子

中世初期イングランドにおける集会をめぐって

川岡, 勉

戦国期但馬の守護と領主

樫木, 暢子

山下, 祥代

病気療養児に対する学生ボランティアによる学習支援の可能性

山口, 由等

地方実業家の不動産所有と経営 : 愛知県半田地方・小栗三郎家の事例

Ehime University (愛媛大学)博士(理学)thesi

落合, 真理

OCHIAI, Mari

English

Accumulation Features and Blood-Brain Transfer of Halogenated Phenolic Metabolites in Cetaceans

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)doctoral thesi

西山, 香子

NISHIYAMA, Yoshiko

Combined Supine and Prone Myocardial Perfusion Single-Photon Emission Computed Tomography With a Cadmium Zinc Telluride Camera for Detection of Coronary Artery Disease

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)thesi

徳田, 桐子

TOKUDA, Kiriko

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名 徳田 桐子 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
論文名：CLTC-ALK 陽性先天性芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍の発症機序についての検討 
    
学位論文要旨 
【背景】樹状細胞（DC）には conventional DC と形質細胞様樹状細胞（plasmacytoid DC: pDC）
があるが、いずれも腫瘍化しうる。芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍(blastic plasmacytoid 
dendritic cell neoplasm: BPDCN)は pDC 前駆細胞由来の腫瘍で、60 歳以上の男性で発生しやす
く、大多数の症例に皮膚病変が見られる。骨髄、末梢血浸潤、リンパ節浸潤も伴い、化学療法に
抵抗性を有し、予後不良な疾患である。全体の約 2/3 の症例で染色体異常が認められるが、疾患
に特異的な遺伝子異常は報告されていない。 
Clathrin heavy chain (CLTC)-Anaplastic lymphoma kinase(ALK) 融合遺伝子は、これまで血液
腫瘍としては anaplastic large cell lymphoma（ALCL）や diffuse large B-cell lymphoma と
いったリンパ系腫瘍でのみ認められている。本論文は血球貪食性リンパ組織球症（HLH）で 発症
し CLTC-ALK 融合遺伝子による BPDCN に進展した症例について腫瘍細胞の起源と白血病化過程を
研究したものである。 
【方法と結果】申請者は患児の末梢血と骨髄細胞を用いて解析を行った。HLH 診断時の染色体検
査は正常女性核型だったが、病勢の進行とともに 46,XX,t(2;17;8)(p23;q23;p23)の異常が出現
した。白血病化した際には 45,XX, t(2;17;8)(p23;q23;p23),-7 といった clonal evolution が認
められた。この時点で白血病細胞の表面マーカーの特徴から BPDCN と確定診断した。染色体検査
結果から CLTC (17q23)と ALK (2p23)の関与が疑われたため、ALK break apart probe を用いて
FISH を実施した。その結果 17 番染色体上に 3’ALK  signal を認め、ALK 遺伝子の切断と転座を
確認した。その後 RT-PCR とシークエンスにて CLTC exon31 と ALK exon19 の in frame 融合を確
認し、CLTC-ALK 融合遺伝子の形成を証明した。さらに、発症が新生児期であったため、胎生期
での腫瘍細胞形成を疑いガスリーカードでの解析を行った。まず inverse PCR 法にて、CLTC 
intron 31 と ALK intron 18 に位置する腫瘍細胞の genomic breakpoint を同定した。次に CLTC-
ALK fusion point を検出するプライマーを設定して semi-nested PCR を行ったところ、ガスリ
ーカード 24 切片中 17 切片に CLTC-ALK 融合遺伝子を認めた。これにより CLTC-ALK は胎生期に形
成されていたことが判明した。さらに FACS にて白血病細胞の解析をすすめたところ、白血病細
胞分画中には ALCL で認められる CD30 陽性細胞、造血前駆細胞である CD34 陽性細胞、CD14 陽性
単球までも含まれることが判明した。そこで末梢血から各細胞分画を sort した後に DNA を抽出
し CLTC-ALK 融合遺伝子の存在を検討したところ、上述した白血病細胞分画のみならず造血幹細
胞、単球、好中球、T,B リンパ球にも融合遺伝子の存在を認めた。ただし RNA を用いた検討では、
白血病細胞と単球にしか CLTC-ALK の発現は認められなかった。 
【考察】 
以上の結果から申請者は本症例における BPDCN の発症機序を検討した。急性白血病では少なくと
も 2 つのタイプの遺伝子変異の機序が白血病化には必要と考えられている。ひとつはチロシンキ
ナーゼ活性のような増殖や生存シグナル（クラス I 変異）で、もうひとつは転写因子の変異のよ
うな分化障害である（クラス II 変異）。CLTC-ALK は活性化チロシンキナーゼであるため、これ
が造血前駆細胞に発生すると、分化抑制を受けることなく融合遺伝子を維持したまま下流域の各
種血液細胞へ分化する。そこに monosomy7 がセカンドヒットとして加わることで白血病化したと
思われた。CLTC-ALK は CD30 陽性細胞にも存在したため、ALCL に進展する可能性もあったと思わ
れるが、申請者は本症例では骨髄性腫瘍を惹起する monosomy7 の関与により、リンパ球系でなく
骨髄系の腫瘍に進展したと考えた。さらに初発症状としての HLH は CLTC-ALK を有する単球によ
り引き起こされたと考えた。 
【結論】 
小児での BPDCN 報告例は少なく、本例が 36 例目である。また、BPDCN で初めて CLTC-ALK 融合遺
伝子を検出した。さらに、この遺伝子異常が胎生期に形成され、T 細胞、単球にも発現している
ことから、造血前駆細胞の段階で異常が生じたことを解明した。本研究は CLTC-ALK 変異の存在
が稀な腫瘍である BPDCN の起源を知る上で、重要である。 
 
本論文の公開審査会は 2013 年 12 月 27 日に開催された。申請者は研究内容を明確に発表し、以
下の内容を含む多くの質疑に対し的確に応答した。 
１）実験系での細胞分離の精度について、２）NOG マウスでの移植腫瘍の形質について、３）小
児 BPDCN での CR 率は高いが、治癒率はどの程度か、４）皮膚症状を伴わない BPDCN 症例である
が、他臓器での腫瘍形成部位はどうか、５）Monosomy 7 がどのように腫瘍化に関与したのか、
６）本腫瘍に対する化学療法奏効率は成人、小児で大きな差があるが、薬剤耐性に違いがあるの
か。 
本研究は小児 HLH 患者に続発した BPDCN の発症機序を詳細に遺伝子解析したものであり、今後の
治療成績向上に役立つ臨床研究として高く評価される。審査会は全員一致して本論文が学位論文
に値すると判定した。 


CLTC-ALK Fusion as a Primary Event in Congenital Blastic Plasmacytoid Dendritic Cell Neoplasm

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