Ehime University Institutional Repository

愛媛大学Ehime University博士(理学)thesi

中村, 千怜

NAKAMURA, Chisato

Japanese

中期更新世由布川火砕流堆積物の岩石学的研究

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)thesi

藤原, 崇志

FUJIWARA, Takashi

 （第３号様式）     
 
 
学 位 論 文 要 旨 
 
 
 
          氏   名 藤原崇志 
 
 
 
          論 文 名 単純ヘルペスウイルス 1 型による顔面神経麻痺ラットの作成と病態解明 
 
【背景・目的】顔面神経麻痺は表情筋が麻痺することにより生じるが、口角下垂にともなう摂
食時の流涎などの物理的症状に加え、顔の非対称などにより精神面への影響も生じ、生活の質
が大きく低下する。単純ヘルペスウイルス 1 型(HSV-1)は末梢性顔面神経麻痺の大半をしめる
ベル麻痺の原因であり、また脳炎にともない顔面神経を含めた神経障害を生じる。HSV-1 と顔
面神経麻痺に関して、これまでに balb/c マウスに HSV-1（KOS 株）を接種することで生じる顔
面神経麻痺マウスをもちいてその病態解明が行われてきた。HSV-1 による神経障害はウイルス
株や動物種によって異なるが、これまでに HSV-1 による顔面神経を検討した研究では balb/c
マウスに HSV-1（KOS 株）を接種した顔面神経麻痺マウスでのみ評価されてきた。今回 Wister
系ラットに単純ヘルペスウイルス（KOS 株）を接種することで生じる顔面神経麻痺の疾患モデ
ル動物を作成し、電気生理学的、組織学的検討等を行った。 
 
【方法】3 週齢Wister系ラット（SLC社）をセボフルレン吸入麻酔下にHSV-1（KOS株）の接種
を行った。右耳介後面を 27 ゲージ針で擦過したのちHSV-1（KOS株、1.0×104pfu/ml、0.1ml）
を接種した。HSV-1 の感染を確認するため、HSV-1 接種後 24 時間、48 時間、72 時間に側頭骨
内顔面神経を採取し、qRT-PCR法を用いてHSV-1 の検出を行った。耳介擦過で顔面神経麻痺が
生じていないことを確認するため、コントロール群としてリン酸緩衝生理食塩水（PBS）をHSV
-1 の変わりに右耳介後面に接種するコントロール群を作成した。顔面神経麻痺についてはHSV
-1 接種後 1 日、3 日、5 日、7 日に瞬目反射を確認した。また 7 日目に瞬目反射を確認したの
ち、吸入麻酔下に側頭骨外顔面神経本幹を露出し、眼輪筋のElectroneuronography（ENoG）va
lueを測定した。組織学的検討を加えるため、HSV-1 接種後 5 日目に 4%ホルマリン灌流固定後、
側頭骨外顔面神経を採取し、また顔面神経核評価のため全脳を採取した。 
 
【結果】顔面神経麻痺は HSV-1 接種後 2-3 日目に生じ、麻痺の程度は 3-5 日かけて徐々に増悪
した。瞬目反射での閉眼動作は HSV-1 接種 3 日では閉眼は不全麻痺程度であったが、HSV-1 接
種 5 日になると完全麻痺を生じた。これらの顔面神経麻痺は PBS 接種したコントロール群では
生じず、HSV-1 接種群の HSV-1 接種側のみで生じた。ENoG による顔面神経麻痺の程度評価では、
PBS 接種群では ENoG 値は 110.0±18.0 と正常値であったが、HSV-1 接種群では 33.0±15.3%と有 
氏名 藤原崇志    
 
意に低値をしめした。HSV-1 の感染を確認するため qRT-PCR を行ったが、HSV-1 接種 24 時間後よ
り徐々に HSV-1 を認め、72 時間後には HSV-1 の DNA 量は顕著に増大を認め、HSV-1 の感染が確認
された。組織学的検討では側頭骨外顔面神経において脱ミエリン化が認められた。顔面神経が損
傷した場合に顔面神経核でマイクログリアの活性化が認められることが多いが、今回の HSV-1 接
種による顔面神経麻痺モデルでは、マイクログリアの活性化は認められなかった。 
 
【考察】今回の研究では HSV-1（KOS 株）により Wister 系ラット 3 週令に顔面神経麻痺を生じた。
従来の balb/c マウスを用いた顔面神経麻痺モデル動物と比べると ENoG 値は低く、より重症の顔
面神経麻痺が生じたと考えられた。側頭骨外顔面神経の組織像は従来の balb/c マウスと類似し
た所見であったが、顔面神経核では balb/c マウスと比べて神経変性が強く生じていた。 
側頭骨外顔面神経は脱ミエリン化を生じ、従来の balb/c マウスを用いた HSV-1（KOS 株）による
顔面神経麻痺マウスと類似した所見を認めた。一方で顔面神経核では従来の balb/c マウスでは
HSV-1 ウイルスは確認されるが神経変性が目立たないのに対して、今回の Wister ラットでは神
経障害を認めた。顔面神経の末梢神経切断モデルとした顔面神経損傷では顔面神経核においてマ
イクログリアの活性化が認められるが、今回の Wister ラットに HSV-1（KOS 株）を接種した顔面
神経麻痺では活性化したマイクログリアは認められなかった。マイクログリアの活性・不活性を
変化させることで、今後 HSV-1 接種による顔面神経麻痺の機序解明が期待されるものと考えられ
た。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
キーワード（３～５） 
 
 
 
単純ヘルペスウイルス 
顔面神経麻痺 
Bell麻痺 
ヘルペスウイルス脳炎 
 
 
 


English

Facial paralysis induced by ear inoculation of herpes simplex virus in rat

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)doctoral thesi

安岡, 稔晃

YASUOKA, Toshiaki

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名   安岡 稔晃 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
 
論  文  名  転写抑制因子 Gfi1 は NKT1 および NKT2 タイプの         
         インバリアント NKT 細胞の分化や機能に必要である 
 
      審査結果の要旨 
 
        感染免疫や腫瘍免疫だけでなく、自己免疫疾患やアレルギーなどの多様な疾患や流産
に関与することが報告されているナチュラルキラーT 細胞（NKT 細胞）は、免疫応答を理解す
る上で、重要なリンパ球であるにも関わらずその分化機構は未だ不明な点が多く残されている。
Gfi1(growth factor independent 1) は多くの造血細胞にとって重要な役割を SNAG ファミリ
ーに属する zinc-finger 型の転写抑制因子であるが、NKT 細胞分化における機能は明らかでな
いため、申請者は Gfi1 の iNKT 細胞の分化についてその機構を解析した。 
 胸腺内の CD4+CD8+ダブルポジティブの段階で Gfi1 をノックアウトした、T 細胞特異
的 Gfi1 欠損（Gfi1flox/flox × CD4-Cre Tg）マウス（Gfi1KO）を作出、解析したところ NKT1 お
よび 2 細胞への分化が抑制された一方で、NKT17 への分化に変化は認めなかった。α-GalCer 投
与によって誘導される iNKT 細胞依存的な抗腫瘍活性について B16 メラノーマ細胞株の肺転移
マウスモデルを用いて解析したところ、Gfi1KO マウスでは野生型と比べ腫瘍転移が有意に増
加し (p<0.01)、生存期間が優位に低下していた。 
 これらのことから、Gfi1 が NKT1 および 2 細胞への分化を制御していることが明らか
となり、Gfi1 の機能を制御することで NKT 細胞分化をコントロールし、その結果、悪性腫瘍
や流産など、NKT 細胞が関与する疾患の治療法開発の可能性について期待される研究内容であ
った。 
  本研究の公開審査会は平成２８年１月２６日に開催され、研究背景、明確な研究手法
とその結果、考察および今後の展望について、英語での研究発表を行い、各審査員からの以下
のような質問に対し、真摯に受け答えし、的確に応答しました。 
１）固形癌に対する NKT 細胞治療の期待される効果、２）末梢から投与された場合の NKT 細胞
の目的組織への到達率、３）婦人科領域癌についての臨床応用の可能性、４）流産に関与する
子宮（胎盤）での NKT 細胞の活性化機構を子宮がんに対する治療法へ応用できる可能性、５）
全身的 Gfi1 遺伝子欠損マウスおよびヘテロ欠損マウスの表現型、６）過剰発現した場合（Gfi
1 Tg マウス）の表現型、７）ヒト Gfi1 遺伝子変異と疾患、特に悪性腫瘍との関連、８）Gfi1
活性調節薬（阻害剤など）の応用、９）悪性腫瘍の発病と NKT 細胞における Gfi1 遺伝子変異
やエピゲノムなどの転写調節機構との関連、１０）Gfi1 分子機能と転写調節機構、など。 
 
  審査委員は，申請者が本論文関連領域に対して学位授与に値する十分な見識と能力を
有することを全員一致で確認し，本論文が学位授与に値すると判定した。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


The Transcriptional Repressor Gfi1 Plays a Critical Role in the Development of NKT1- and NKT2-Type iNKT Cells

尾原, 麻耶

OHARA, Maya

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名 尾原 麻耶 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
 
      論  文  名 サルコペニアの簡便な指標は血圧反射波、中心血圧と関連する 
      審査結果の要旨（2,000 字以内） 
 サルコペニアとは、加齢による筋肉量や筋力の低下のことであり、身体機能低下、自立性消
失、施設入所へと導く病態として、注目されている。サルコペニアと動脈スティフネスとの関
連が報告されており、サルコペニアが心血管死のリスク要因であるとの指摘がある。加齢によ
る内臓肥満とサルコペニアが合併するサルコペニア肥満の群では、それぞれ単独の群に比較し、
動脈スティフネスが亢進していた。動脈スティフネスは中心血行動態に影響するが、サルコペ
ニア肥満の中心血圧に対する影響は明らかでない。末梢血圧に比較し、中心血圧は今後の心血
管イベントのよりよい指標である。ヨーロッパではＣＴで計測した大腿筋断面積がサルコペニ
ア検出のゴールドスタンダードとして提唱されている。簡便な握力測定やバイオインピーダン
ス法による骨格筋量測定によりサルコペニアを検出できるかどうかは不明である。 
 本研究では、2006 年から 2013 年に愛媛大学医学部附属病院抗加齢ドッグを受診した中高年
1593 名を対象とした。ＣＴによる大腿筋断面積、握力、バイオインピーダンス法による骨格
筋量を計測し、50 歳未満平均値の－1SD 未満或いは全集団の下位 20％をサルコペニアと定義
した。 
 大腿筋断面積は握力及びバイオインピーダンス法による骨格筋量と強い相関を認めた。握力
及び骨格筋量を三分位し、各分位における baPWV、橈骨 AI、上腕 PP、橈骨 PP2 の補正平均値
を計算したところ、いずれも有意な負の関連を認めた。 
 握力と骨格筋量のそれぞれについて－1SD 未満或いは下位 20％を活用したサルコペニアの
４通りの定義において、サルコペニア、内臓肥満とも認めない群、サルコペニアのみ群、内臓
肥満のみ群、サルコペニアと内臓肥満の両方を認める群の４群に分けたところ、全ての定義に
おいて、両方無し群に比較し、サルコペニアのみ群では上腕 PP、橈骨 PP2 の補正平均値が有
意に上昇していた。内臓肥満のみ群では baPWV が有意に高かった。サルコペニアと内臓肥満
の両方を認める群では baPWV、橈骨 AI、橈骨 PP2 が有意に上昇していた。 
 握力及びバイオインピーダンス法による骨格筋量はサルコペニアの評価法として有用である
のかもしれない。 
本研究の方法論的欠点として、本研究は横断研究であり、因果関係は論じられない。ドッグ
受診者のみであり、選択バイアスの影響が大きいと考えられる。 
 
本研究の発表において以下の質問が出された。 
1. Ever smoking ではなく、current smoking を補正した理由。 
2. トレンド P 値を計算しなかったのか。 
3. 中心血圧と動脈スティフネスを取り上げた理由。 
4. 血管の固さに影響している要因について。 
5. インシュリンに関連する要因の影響について。 
6. バイオインピーダンス法の限界点について。 
7. 極度の肥満者の解析に与える影響は。 
8. 内臓脂肪と BMI のそれぞれの影響について。 
9. インシュリン抵抗性の影響について。 
10. 腸腰筋ではなく大腿筋を採用した理由。 
11. 身長との相関について。 
12. 対象集団の内臓肥満者の割合について。 
13. 対象集団は一般集団より健康指向が高い可能性について。 
14. 慢性炎症がサルコペニアの原因ではないか。 
15. 従来筋量の少ない人は少なくても問題ないのではないか。 
16. 筋量の少ない人は動脈硬化になりやすいのか。 
17. baPWV と脈圧の結果が乖離していることについて。 
18. 筋肉から液性因子が放出され、痴呆に予防的であるという説について。 
19. 血糖値或いは糖尿病と筋肉量との関連について。 
20. 選択バイアスの記述を丁寧にすべき。 
 
以上、各審査委員は論文内容のみならず、その関連領域を含めた幅広い質問を行い、申請者は
各質問に対して明確に応答した。 
審査委員は、申請者が本論文関連領域に対して学位授与に値する十分な見識と能力を有する
ことを全員一致で確認し、本論文が学位授与に値すると判定した。 
 
 
 
 
 


Portable indices for sarcopenia are associated with pressure wave reflection and central pulse pressure: the J-SHIPP study

岡, 奈央子

OKA, Naoko

（第７号様式） 
 
学位論文審査結果の要旨 
 
   氏     名  岡 奈央子 
 
 
 
 
 
   審 査 委 員 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
                                      
 
 
 
  論  文  名  緑膿菌角膜炎における緑膿菌病原因子と臨床像の関係について 
       
  審査結果の要旨 
 緑膿菌は重症角膜感染症の主要な原因菌の１つであり、発症の契機としてコンタクトレンズ
の不適切な装用が挙げられている。本研究はコンタクトレンズ装用および非装用の角膜炎患者
から分離された緑膿菌株を用いて、緑膿菌角膜炎の臨床所見と菌の病原因子との関連性を解明
することを目的として実施された。 
 本研究は、コンタクトレンズ装用の 18 症例および非装用の 7 症例の合計 25 症例を対象とし
て実施した。各症例の臨床所見（病巣の大きさ、形、角膜浸潤の位置、前房蓄膿の有無、棘状
病変の有無、輪状膿瘍の有無）と各患者から分離培養した緑膿菌の病原因子（プロテアーゼ活
性、エラスターゼ活性、バイオフィルム、運動能（Swarming motility、Swimming motility）、
細胞表面疎水性、type Ⅲ secretion system（TTSS）関連 effector タンパク質遺伝子の exoS
と exoU）との関連性について検討を行い、以下の結果を得た。 
 はじめに臨床像の検討を行なって以下の点を明らかにした。コンタクトレンズ装用群は輪状
膿瘍の有無で 2 分され、輪状膿瘍（+）では病巣が角膜の 1/4 以上であるのに対し、輪状膿瘍
（-）では病巣が角膜の 1/4 以下であった。他方、非装用群では輪状膿瘍（-）であるが、病巣
は角膜の 1/4 以上であった。そこで、コンタクトレンズ装用群を輪状膿瘍の有無により 2 群に
分け、コンタクトレンズ非装用群（輪状膿瘍は-）を加えた 3 群を対象に、各群間における緑
膿菌病原因子の比較検討を行なった。その結果、コンタクトレンズ装用群では輪状膿瘍（+）
が輪状膿瘍（-）に比較して、運動能を示す Swimming motility と Swarming motility、およ
び exoS 遺伝子保有率が有意に高いことを明らかにした。次に、病巣の大きさの指標として病
巣占有率（focus occupied ratio: FOR）を定め、この値と緑膿菌の各病原因子との関連性を
検定したところ、FOR がプロテアーゼ活性および Swarming motility と有意の相関を示すこと
が明らかになった、また、exoS 遺伝子保有群が exoU 遺伝子保有群よりも有意に高い FOR を示
すことが判明した。さらに臨床所見と病因因子の多変量解析を行った結果、FOR は年齢、輪状
膿瘍、前房蓄膿、エラスターゼ活性、Swarming motility と、輪状膿瘍は Swarming motility、
exoS 遺伝子保有と有意に関連し、Swarming motility は FOR、輪状膿瘍、前房蓄膿の臨床所見
と有意な関連性を有することが認められた。また、病原因子間では、Swarming motility がプ
ロテアーゼ活性、細胞表面疎水性、Swimming motility と有意の関連性を有していた。 
 以上の結果から申請者は、緑膿菌の病原因子とされる Swimming motility 、Swarming moti
lity、exoS 遺伝子保有が、緑膿菌角膜炎の病態に関与することを明らかにした。 
 
 本論文に対する公開審査会は平成28年1月15日に開催された。申請者から申請論文および関
連する研究内容について英語による口頭発表がなされた後に、審査委員から本研究に関連する
以下の質問がなされた。 
1）緑膿菌は一般的には日和見感染の原因であるため、一般感染症の起炎菌としては少ないが、
角膜炎の起炎菌として緑膿菌が非常に多い理由は何か。2）コンタクトレンズの装用が緑膿菌角
膜炎に関わるとすると、どのような機序が考えられるのか。3）コンタクトレンズ非装用者の角
膜炎の背景因子として、糖尿病、悪性腫瘍、免疫抑制状態などの関与があるのではないか。4）
輪状膿瘍の有無によって症例を２群に分けた理由は何か。5）輪状病変の有無によって生ずる病
態の差異について簡潔に説明して欲しい。6）FORを菌の浸潤範囲を表す指標として使っているが、
膿瘍形成などの宿主側の炎症反応を含んでいるとすれば、FORは炎症反応の広がりによっても影
響を受けるのではないか。7）コンタクトレンズ非装用者では輪状膿瘍の形成が全くないにも拘
らず全例でFORが大きい。このような特徴にはどのような背景が関与していると考えられるのか。
8）コンタクトレンズ装用による角膜炎では、病原因子としてSwarming よりSwimming の方が重
要ではないのか。9）TTSSとFORの関連について、用いた解析法によって異なる結果がでているが、
どう解釈するのか。10）ExoS, ExoU を数値化しているが、その方法と意味を説明して欲しい。
11）緑膿菌のSwarming motilityやTTSSが重篤な感染となる要因とすると、その制御が新規治療
ターゲットになりうると考えられるが、Swarming motilityやTTSSを抑制する物質があるのか。
また、それを応用した治療の展望はどうなのか。12）感染を予防できるコンタクトレンズ開発の
可能性はどうなのか。 
 これらに対して申請者は、質問の意図を十分に理解した上で、的確に応答した。本論文は、緑
膿菌角膜炎の病態に関する知見が限られていることに着目して実施したもので、緑膿菌角膜炎
の病態解明の基礎研究として重要な結果を含んでおり、治療薬剤の開発など今後の研究の展開が
期待される。審査委員は一致して本論文を高く評価し、博士（医学）の学位論文に値するものと
結論した。 
 


Relationship of Virulence Factors and Clinical Features in Keratitis Caused by Pseudomonas aeruginosa

石崎, 淳

ISHIZAKI, Jyun

（第 12 号様式） 
 
 
学 位 論 文 の 要 約 
（ 研 究 成 果 の ま と め ） 
 
 
 
            氏   名  石 﨑  淳 
 
 
            学位論文名  
   尿異常を伴わない SLE 患者における Silent lupus nephritis の存在予測因子の解析 
 
    学位論文の要約 
【目的】全身性エリテマトーデス(SLE)は腎、中枢神経、造血器、皮膚をはじめとする多くの
臓器障害を呈する全身性の自己免疫疾患である。なかでもループス腎炎は予後に関わる重要な
臓器障害の１つである。SLE 患者の 30-60%が経過中にループス腎炎を発症する。さらに、尿異
常や腎機能低下を伴わない患者で腎生検によりループス腎炎と診断される Silent lupus neph
ritis(SLN)の存在が報告されており、実際には、より高率なループス腎炎の存在が推測される。
ループス腎炎の診断確定には腎生検が必要であるが、現在までに SLE 患者に対する腎生検の明
確な適応基準は定められていない。また、手技に関連した合併症や中枢神経病変や出血傾向を
呈する症例があるため全例に腎生検を施行することは困難である。よって、尿異常や腎機能低
下がない SLE 患者におけるループス腎炎の存在予測因子があれば、腎生検の適応症例を選択す
ることが可能となり、腎症の早期発見につながることが期待される。また、腎生検を施行でき
ない症例でも SLN の存在を推測することが可能であれば治療方針を決定する際の一助になる。
今回、我々は腎生検時に尿異常や腎機能低下を伴わない SLE 患者の中で、ループス腎炎の有無
の 2 群間における臨床的特徴を比較検討し、SLN の存在予測因子を解析した。また、腎生検後
の 5 年間の追跡調査を行い、SLN の腎予後を評価した。 
【材料と方法】2002 年 11 月から 2012 年 12 月までに産業医科大学病院に入院し、American C
ollege of Rheumatology(ACR)の SLE 分類基準(1997 年改訂)に基づいて SLE と診断された SLE
患者 449 名のうち、腎生検を施行された 182 名を解析対象とした。182 名のうち、腎生検前に
(1)一日蛋白尿量 300mg/日未満、(2)活動性の尿沈渣所見なし、(3)GFR 60mL/min/1.73m2 以上、
の 3 項目すべてを満たす場合を「尿異常なし、腎機能障害なし」と定義し、この基準に合致し
た 48 名に関して、ループス腎炎を証明された群(SLN 群)と証明されなかった群(non-LN 群)の
2 群間で、臨床所見、自己抗体や補体等の検査所見などを比較検討した。解析は単変量解析に
は Fisher の正確検定、Mann-Whitney の検定を用い、多変量解析には 2 項ロジスティッ 
ク回帰分析を用いた。 
【結果】48 名のうち 36 名(75%)がループス腎炎と診断された。ISN/RPS 分類による病型分類で
は、 classⅠ 12 名(33%)、classⅡ 14 名(39%)、classⅢ 5 名(14%)、classⅣ 1 名(3%)、clas
sⅤ 4 名(11%)であった。背景因子の比較では、単変量解析において両群間で血小板数、血清
アルブミン値、C3、C4、CH50、抗 Sm 抗体の陽性率と抗体価、抗 RNP 抗体価で有意差を認め、
これを基に多変量解析を行ったところ、SLN 群で有意な CH50 低値(p<0.001)、C3 低値(p<0.00
1)と抗 Sm 抗体価上昇(P=0.02)が抽出された。ROC 曲線により推算された CH50、C3 のカットオ
フ値は 33U/mL(正常値 31.6-57.6U/mL)、65mg/dL(正常値 65-135mg/dL)で、それぞれの感度は
89%、78%、特異度は 83%、92%であった。抗 Sm 抗体のカットオフ値は 9U/mL(正常値 7U/mL 未
満、判定保留 7 以上 30U/mL 未満)で、感度は 74%、特異度は 83%であった。CH50 <33U/mL と抗
Sm 抗体 >9U/mL の両方のカットオフ値を満たす場合、感度は 66%、特異度は 100%であり、陽性
的中率と陰性的中率はそれぞれ 100%、50%であった。腎生検から 5 年以内に、2 群すべての患
者で血清クレアチニン値の上昇は認めなかったが、1 年以上経過を追うことができた SLN 群の
32 名のうち 6 名で尿異常が出現した[蛋白尿 5 名(16%)、顕微鏡的血尿 2 名(6%)]。6 名におけ
る SLN と診断時の病理組織型は、ISN/RPS 分類 classⅠ 1 名、classⅢ 1 名、classⅣ 1 名、 
classⅤ 3 名であり、主に病理組織学的に重症度の高い腎炎患者で腎生検後に尿異常の出現を
認めた。 
【結論】尿異常や腎機能低下のない SLE 患者において、CH50・C3 低下、抗 Sm 抗体価上昇が SL
N の存在予測因子であった。補体価に関しては、それぞれのカットオフ値が正常下限に近似し
ていた。ループス腎炎の主病態は免疫複合体性腎炎であり、活動性腎炎の存在下では低補体血
症を呈することが一般的であるが、本研究結果は尿異常がなくても補体価低下を認める早期に
すでにループス腎炎が高確率に存在していることを証明した。抗 Sm 抗体は SLE 患者の 5-30%
に認められ、高い特異性から分類基準の免疫血清学的項目に含まれている。これまでに SLN と
抗 Sm 抗体の関連性に関する報告はないが、抗 Sm 抗体は遅発性腎症に関連するという報告があ
る。これは抗 Sm 抗体陽性患者において尿異常のない SLN が潜在的に増悪したのちに、遅発性
腎症と診断されている可能性が示唆される。本研究における SLN の存在予測因子はループス腎
炎の早期発見を目的とした腎生検の適応基準の一助となり、腎生検が施行困難な SLE 患者にお
いてもループス腎炎の存在予測が可能となる。以上より補体価低下と抗 Sm 抗体陽性を指標にす
ることでループス腎炎の早期発見、早期治療が可能となり、SLE 患者の腎予後や生命予後の更な
る改善につながることが期待される。 
 なお、この学位論文の内容は、以下の原著論文に既に公表済である。 
 
主論文：Ishizaki J, Saito K, Nawata M et al: Low complements and high titre of anti-
Sm antibody as predictors of histopathologically proven silent lupus nephritis with
out abnormal urinalysis in patients with systemic lupus erythematosus. Rheumatology
 54(3):405-412, 2015. DOI: 10.1093/rheumatology/keu343. 


Low complements and high titre of anti-Sm antibody as predictors of histopathologically proven silent lupus nephritis without abnormal urinalysis in patients with systemic lupus erythematosus

Ehime University (愛媛大学)博士(農学)thesi

山内, 高尚

YAMAUCHI, Kosyo

（様式５）(Style5) 
学位論文全文に代わる要約 
Extended Summary in Lieu of Dissertation 
 
 
氏名： 
Name 
 
山内 高尚 
学位論文題目： 
Title of Dissertation 
Studies on the improvement of poultry breeding  
environment due to wood charcoal including vinegar 
(木酢酸炭化粉末による家禽の飼育環境改善に関する研究) 
 
 
学位論文要約： 
Dissertation Summary 
日本の養鶏業は高い自給率で国産の蛋白質を供給できているが、飼料自給率は低く、近年は飼料価格の
上昇により養鶏農家の経営が圧迫されている。このような経営圧迫は飼育環境の悪化を招き供給農産物の
生産性や品質を低下させるだけでなく、衛生面に掛かる費用を削減せざるをえないため公害の発生増加や
家畜伝染病の発生増加につながる。このような背景において木酢液の持つ有害な細菌に対する増殖抑制効
果を利用した木酢酸炭化粉末(WCV)は飼育環境の改善・生産物の高付加価値化を目的として一部農家で使わ
れているが、その効果や要因に対する科学的な検証は乏しい。一方、採卵用鶏において生産性を下げる要
因の一つに吸血ダニ被害がある。主に被害をもたらす吸血ダニの種名はワクモといい、鶏ケージの隙間や
餌箱の間などで繁殖するため鶏体や生産物への影響が懸念され、飼育中の駆除剤散布ができない。こうし
たことから、一度発生したワクモの増殖を止めるすべがなく、死亡・貧血・大腸菌症の発生・産卵率の低
下などの被害をもたらす。そこで本研究では、第 1章で、WCVの製造工程について概略を述べた後、第2
章では、木酢液の殺菌効果がワクモに効果的かどうか、その殺虫効果が産卵鶏の飼育現場に応用できるか
どうか、ならびに木酢液のワクモ殺虫効果のメカニズムが調べられた。 
インビトロ実験による木酢液中の揮発性成分のワクモの半数致死濃度は 648.634ppmであり(下図)、弱
いものであるが一定の効果が認められた。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
鶏舎内でのケージのつなぎ目におけるワクモへの木酢液噴霧実験では、木酢液散布によってワクモの数
が優位に減少 (P<0.01)し、卵の崩壊も観察され、また、鶏の総排泄腔周辺の羽に付着したワクモ塊への
500倍希釈木酢液の散布においてもワクモ塊は消失した(下図)。 
木酢液中揮発性成分に対するワクモLC50の算出 
LC50=648.634ppm 
（様式５）(Style5) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
8日齢の雛を用いた木酢液の安全性テストでは、原液の木酢液区では２羽が死亡し、 増体率も有意に減
少した(P< 0.05)が、500 ならびに 1,000に希釈区では対照区と差異は認められなかった。この結果は500
倍希釈の木酢液は鶏に対して有害ではないことを示唆する。さらに、産卵鶏を用いた産卵成績では、木酢
液区の産卵成績は対照区と差異はなく、噴霧前の卵重(P < 0.05)と卵殻率(P < 0.01)は改善された。この
結果は、木酢液は産卵成績を低下させないことを示唆するものである。 
第3章では、WCV添加飼料を給与した採卵鶏における卵殻膜中のコラーゲン量に注目して調べた。卵殻
膜中の総コラーゲンは添加依存量的に増加し、1％添加区において有意に増加した(P< 0.05)。走査型電子
顕微鏡ならびに光学顕微鏡による観察では、1％添加区の卵殻膜は対照区よりも厚く、微細で密に分布する 
線維で構成された微細な網目構造を呈していた(下図)。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
WCV区の卵は、卵保存中(12℃で3週間)におけるハウユニットの減少程度が遅く、卵殻膜中の総コラー
ゲンと関連していた(下図)。 
 
 
 
 
 
鶏体上のワクモコロニーに対する希釈した木酢液の吹付 
走査型電子顕微鏡を用いた卵殻 
の断面観察 
Scale bars: A and B, 100 μm 
; C and D, 20μm 
A B 
C D 
M 
図中 A,C:対照区B,D:WCV1%添加区 
M=卵殻膜 矢印＝卵殻膜繊維 
（様式５）(Style5) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
第4章では、WCVを添加した飼料を給与した鶏の肉質が食品科学的および組織学的手法を用いて総合的
に評価された。WCV区の廃鶏雌では、脂質や脂肪酸の増加、クッキングロスの減少、高評価の官能テスト
および柔らかい胸肉が得られた。ブロイラーにおいては、筋の横断面積の増加、総コラーゲンの増加およ
びコラーゲンIIIの染色性に違いがみられた(下図)。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
凍結肉では、半膜様筋の筋膜の崩壊が見られず(下図)、大腿筋膜張筋、屈筋群および浅胸筋でのコラー
ゲンIIIの反応が増加した。 
 
 
 
 
y = 0.0099x + 76.292
R² = 0.3586
60
65
70
75
80
85
90
95
100
300 500 700
(ng/mm2)
(HU)
□：基礎飼料区 
◆：基礎飼料＋WCV 
卵殻膜中コラーゲン量と保管後のハウユニットとの相関 
 
a,b
同グラフ内異符号間に有意差あり(p < 0.05) 
半膜様筋中のコラーゲンの増加 
a 
ab 
ab 
b 
WCV添加区 
半膜様筋におけるコラーゲンⅢ染色 
（様式５）(Style5) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
第5章では、コラーゲンの存在が知られている既知の鶏筋肉部位を用いて、筋中のコラーゲンを直接フ
ーリエ変換赤外分光光度計(FT-IR)で同定し、近赤外分光光度計(FT-NIR)で定量した。いずれもポジティブ
な結果が得られ、FT-NIRによる筋中コラーゲンの精度の高い測定方法が確立できた。 
第6章では、鶏肉を用いて確立した FT-IRによるコラーゲンの同定法を用いて、卵黄中のコラーゲンを
同定した(下図)。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
対照区 0.8% WCV 
通常 
冷凍 
Scale=400μm 
図中矢印は筋膜 
凍結解凍後の半膜様筋における筋膜の変化比較 
AmidI AmidII AmidIII 
FT-IRを用いた卵の各部位におけるコラーゲンの検出 
（様式５）(Style5) 
さらに、MALDI-TOF MSを用いた解析により、コラーゲン固有のアミノ酸であるヒドロキシプロリンが検
出された。そして、鶏肉を用いて確立した FT-NIRによるコラーゲンの定量では、WCVの添加飼料の給与で
卵黄中のコラーゲンが増えており、鶏舎内のワクモ駆除で卵黄中のコラーゲンが増加した(下図)。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
本研究により、木酢液は、採卵鶏の産卵率を下げることなくワクモを駆除でき、WCV添加飼料は鶏の卵
殻膜および筋肉中コラーゲンを増大させることで卵や肉の鮮度が保たれることを証明した。また、本研究
で確立したFT-NIRを用いた測定で、卵黄中のコラーゲン量が WCVの給与で増加し、鶏舎内のワクモを駆除
することで増加したことから、鶏舎内の飼育環境をとらえる指標となることが分かった。 
以上のことから、WCVの給餌による家禽生産物の品質向上効果は生体内でのコラーゲン増大効果で
あり、FT-NIRによる測定で簡便にとらえることが可能であるとともに、飼育環境が品質に与える影
響をとらえる有効な手段を確立した。 
 
 
駆除前   駆除後   
n=12 
0.8
1.0
1.2
n=4
対照区 WCV1% 
WCV 給餌による卵黄中コラーゲン量の
変化(相対値) 
1 万 8 千羽の飼養鶏舎におけるワクモ
駆除前後の卵黄中コラーゲン量の変化 


Studies on the improvement of poultry breeding environment due to wood charcoal including vinegar

橋田, 祐二

HASHIDA, Yuji

（様式５）(Style5) 
学位論文全文に代わる要約 
Extended Summary in Lieu of Dissertation 
 
 
氏名： 
Name 
橋田 祐二 
 
学位論文題目： 
Title of Dissertation 
高軒高温室でのパプリカ栽培における環境制御による高収量生産技術の
開発 
 
 
学位論文要約： 
Dissertation Summary 
 
高知県内をはじめ全国的に太陽光植物工場の導入が進んでいる。高軒高温室は、換気能力に優れ、
栽培室内への環境制御関連機器の設置が容易であることから太陽光植物工場で利用されることが多
い。植物にとっての好適な生育環境は、天候の変化や栽培履歴によっても大きく変動するため、植物
の生体情報を計測して生育状態を診断し、その結果に基づいて栽培環境を制御するSpeaking Plant 
Approach （SPA） 技術が重要となる。これまでに環境要因が植物に及ぼす影響についての多くの知
見が得られているものの、その多くは短期的な植物環境応答に関するものである。一方、高軒高温室
でのハイワイヤー誘引法による長期栽培では、植物の長期的な環境応答についても把握する必要があ
る。そこで本研究では、高軒高温室において制御対象となる３つの基本的環境要因である気温・湿度・
養液濃度に注目し、これら環境要因に対するパプリカの長期的環境応答を解析するとともに、パプリ
カの安定生産を達成するため環境制御技術について検討した。 
 
１．気温と養液濃度の影響 
低日射・低温期（10月下旬～2月下旬）において、日没直後の低夜温時間帯の延長による低夜温処
理と高濃度養液の給液処理がパプリカの生育と収量に及ぼす影響を解析した。その結果、冬至を境に
低夜温処理と高濃度処理の影響の程度が変化することを確認した。冬至以前は、茎伸長速度と節形成
速度が低夜温処理によって低下するが、冬至以後は、茎伸長速度が高濃度処理によって低下し、節形
成速度は低夜温処理および高濃度処理の影響を受けないことが示された。また、冬至の前後にかかわ
らず低夜温処理と高濃度処理が葉の光合成機能、着果数および果実乾物重に及ぼす影響が小さいこと
が分かった。また、高濃度処理は、吸水を阻害することで葉面積を減少させ、同時に果実肥大も抑制
するため、収量を減少させる可能性が示唆された。このとき、夜間気温は収量に影響を及ぼさないこ
とも分かった。パプリカのハイワイヤー誘引栽培では、茎長が温室軒高に達した時点で栽培を打ち切
る必要があるため、茎伸長速度を抑制する技術が求められている。本研究では茎伸長の抑制に効果的
な環境設定について、冬至以前は低夜温かつ高養液濃度とし、冬至以降は低夜温かつ高養液濃度とす
ることが望ましいと考えられた。 
 
２．湿度の影響 
昼間の加湿処理がパプリカの葉の形態と光合成機能に及ぼす影響を調査した。相対湿度70％以上と
なるように細霧発生装置を用いて加湿した区（Fog区）では、加湿しない区（Control区）に比べて、
実験期間の相対湿度が約10 ％高く、昼間の飽差（以降、VPD）は0.7 kPa程度で維持された。Fog区で
は、吸水量が18 ％減少し、葉面積が上位葉で6 ％、下位葉で20 ％増大した。さらに、下位葉の最大
光合成速度の低下、総クロロフィル含有量の減少、およびクロロフィルa/b比の低下が確認された。
これらの結果は、低いVPD環境による吸水量の減少が無機養分吸収量の減少につながり、このことが
（様式５）(Style5) 
下位葉におけるクロロフィル含有量を減少させたと解釈できた。さらに、低VPD環境は、葉面積の増
大に伴うLAIの増加によって下位葉の弱光順化を助長することを示唆していた。なお、本研究では
VPD環境の違いによる収量への影響は確認されなかった。 
 
３．パプリカ個体群を対象とした気孔コンダクタンスの計測 
これまでの結果から、気温・湿度・養液濃度の制御により光合成量が直接的に増大することはない
が、蒸散に大きな影響を及ぼすことが確認された。蒸散量は気孔の開閉によって増減するが、気孔の
閉鎖は光合成の基質であるCO2の葉内への取り込みを制限し、光合成量の低下を招き、最終的に収量
を低下させる。つまり、収量を高く維持するためには、気温・湿度・養液濃度の不適切な制御によっ
て生じた気孔閉鎖を即座に検知し、気孔閉鎖の原因を排除する必要がある。これを実現するためには、
気孔コンダクタンスのモニタリングが最優先で導入すべきSPA技術となる。土耕栽培への適用を念頭
に置き、温室全体をチャンバとして用いた開放型チャンバ法による蒸散量計測と赤外線放射温度セン
サでの葉温計測を組み合わせた気孔コンダクタンスのリアルタイムモニタリングを試みた。その結果、
従来の秤量法に比べて計測精度は劣るものの、気孔コンダクタンスの日変化をモニタリングできるこ
とを確認した。 
 
まとめ 
 本研究では基本的環境要因（気温・湿度・養液濃度）がパプリカの生育や形態に及ぼす長期的な影
響を明らかにした。これらの知見は、高軒高温室を用いたパプリカ栽培の生産性向上に寄与する。ま
た、本研究で開発した気孔コンダクタンス計測法は小規模温室への適用が期待できる。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
(注) 要約の文量は，学位論文の文量の約１０分の１として下さい。図表や写真を含めても構いません。
(Note)  The Summary should be about 10％ of the entire dissertation and may include illustrations 


高軒高温室でのパプリカ栽培における環境制御による高収量生産技術の開発

辻????田, 泉

TSUJITA, Izumi

(Form No. 3) 
Dissertation Abstract 
Name 
Title of Dissertation 
9
1)
3  ( )
10 12
1
2)
10
3
(Form No. 3) 
3
3)
12
1
2 45 14 gm-2
77
5gm-2
9g
m-2 2gm-2 3gm-2


Not a member yet

中期更新世由布川火砕流堆積物の岩石学的研究

Facial paralysis induced by ear inoculation of herpes simplex virus in rat

The Transcriptional Repressor Gfi1 Plays a Critical Role in the Development of NKT1- and NKT2-Type iNKT Cells

Portable indices for sarcopenia are associated with pressure wave reflection and central pulse pressure: the J-SHIPP study

Relationship of Virulence Factors and Clinical Features in Keratitis Caused by Pseudomonas aeruginosa

Low complements and high titre of anti-Sm antibody as predictors of histopathologically proven silent lupus nephritis without abnormal urinalysis in patients with systemic lupus erythematosus

Studies on the improvement of poultry breeding environment due to wood charcoal including vinegar

高軒高温室でのパプリカ栽培における環境制御による高収量生産技術の開発

愛媛県のハダカムギ早播・晩播栽培における収量・品質低下要因とその対策技術に関する研究

Development and Role of Agricultural Cooperatives in Nepal : A Case Study of Chitwan and Makawanpur District

5,362

5,403