Ehime University Institutional Repository

森, 貴?

Japanese

アングロ・サクソン期ウスター司教区の訴訟?覧

中村, 依子

安平, 奈央

向, 平和

日詰, 雅博

カエル原腸胚切断面観察の実践的研究

露口, 健司

若年層教員のキャリア発達における信頼効果

鵜川, 是

立入, 哉

大学でのスポーツ教育を終えてもできない人が何故いるのだろう

川瀬, 久美子

地域的課題解決への意欲を喚起する高等学校地理学習の単元開発 ?水俣病問題への支援者の関わりを題材として?

秋山, 英治

仲道, 雅輝

清水, 史

山本, 與志隆

木藤, 隆雄

村尾, 恵一

初年次教育科目「日本語リテラシー入門」の取組と成果 ～ 6 年間の取組を振り返って～

休刊に当たって / 神楽岡幼子大学生のインターンシップ近くのツカエル図書館(2) 松山市立図書館図書館の世界～今すぐ行きたくなる愛媛の図書館～シリーズ学部資料室紹介(6) 教育企画室ちょっと便利な探し方(3)学生にすすめるこの1冊学部別・貸出ランキング【2020年上半期】グラフで見る愛媛大学図書館図書館日誌othe

愛媛大学図書館

愛媛大学図書館報「図書館だより」第109号

Ehime University (愛媛大学)博士(医学)thesi

末廣, 千佳

SUEHIRO, Chika

 
（第 12号様式） 
 
 
学 位 論 文 の 要 約 
（ 研 究 成 果 の ま と め ） 
 
 
 
            氏   名      末廣 千佳 
 
 
            学位論文名  
インターロイキン 18 遺伝子欠損は腹部大動脈瘤の形成を抑制する 
 
    学位論文の要約 
  腹部大動脈瘤は生涯無症候で経過することが多いが、破裂すると致死率の高い疾患である。
大動脈瘤とは、大動脈壁の拡大または突出で、直径が正常径の 1.5 倍以上と定義されている。
腹部大動脈瘤の病態には、炎症や細胞外基質の分解に伴う血管壁の脆弱化が深く関与している
ことが報告されている。しかしながら、その詳細な分子メカニズムは未だ十分に解明されてい
ない。腹部大動脈瘤の径が 5.5 cm 以上に増大した場合、外科的インターベンションの適応で
あるが、その発症や進展を予防する至適薬物治療法がないのが現状である。 
腹部大動脈瘤の病理組織学的特徴として、炎症細胞浸潤、細胞外基質の分解、血管平滑筋細
胞の減少などが挙げられる。炎症には上皮成長因子やインターロイキン(IL)-1β、IL-17 など
多くのサイトカインが関わっており、細胞外基質の分解には、細胞外基質分解酵素やカテプシ
ンが重要な役割を果たしていることが知られている。骨基質タンパクの一つとして同定された
オステオポンチン（OPN）は、炎症細胞の遊走や接着の制御に関与するのみならず、細胞外基
質分解酵素の誘導を介して大動脈瘤形成に促進的にはたらいていることが報告されている。 
IL-18 は IL-1 スーパーファミリーに属するサイトカインの一つで、免疫細胞、非免疫細胞
両者に発現していることが知られている。近年、IL-18 は動脈硬化性プラークの形成や不安定
化において重要な役割を果たしていることが報告されており、心血管死を予測するマーカーと
しても注目されつつある。また、IL-18 は腹部大動脈瘤形成の鍵分子である OPN の発現を誘導
することも知られている。しかしながら、我々が知る限りでは、これまでに腹部大動脈瘤と
IL-18 の関係に着目した報告はない。そこで今回我々は、IL-18 は腹部大動脈瘤の形成に重要
な役割を果たしているとの仮説を立て、腹部大動脈瘤マウスモデルを用いて検討を行った。こ
の動物実験は、愛媛大学医学部の動物実験の倫理委員会によって承認されている(承認番号：
第 05TA38-16)。 
8 週齢、雄性の野生型マウスおよび IL-18 遺伝子欠損マウスにアンジオテンシンⅡ（Ang
Ⅱ）（1,000 ng/kg/min）を osmotic minipump で 4 週間持続投与し、同時にβ-アミノプロピ
オニトリル（BAPN）（1 mg/mL）を 2 週間飲水投与する腹部大動脈瘤モデルを作製した。AngⅡ
 
/BAPN 投与マウスでは、生食投与マウスに比し腹部大動脈血管壁における IL-18 の発現が亢進
していた。IL-18 遺伝子欠損マウスでは、野生型マウスに比し腹部大動脈瘤の発症率が有意に
抑制されており（P＜0.01）、腹部大動脈の最大血管径も有意に小さかった（P＜0.001）。こ
のモデルにおける野生型マウス、IL-18 遺伝子欠損マウスの両群間で、AngⅡ/BAPN 投与前後の
収縮期血圧に有意差は認められなかった。また、IL-18 遺伝子欠損は AngⅡ/BAPN 投与による
腹部大動脈壁のマクロファージ浸潤、細胞外基質分解酵素活性を有意に抑制した。腹部大動脈
壁におけるマクロファージの極性をフローサイトメトリーで確認したところ、野生型マウスで
は炎症誘発性（M1）表現型への分極化が認められたのに対し、IL-18 遺伝子欠損マウスでは抗
炎症性（M2）表現型への分極化が認められた。また、腹部大動脈組織における OPN の発現を免
疫染色で評価したところ、AngⅡ/BAPN 投与後の野生型マウスでは、血管平滑筋細胞の局在と
一致して OPN の発現が亢進していたのに対し、IL-18 遺伝子欠損マウスでは OPN の発現亢進が
認められなかった。IL-18 遺伝子欠損マウスでは、野生型マウスに比し腹部大動脈組織におけ
る OPN mRNA の発現も低下していた。さらに、IL-18 はラット大動脈平滑筋細胞において、用
量依存的な OPN mRNA 発現亢進作用を示した。また、野生型マウス腹腔内マクロファージを
OPN で刺激することにより、マクロファージの遊走能は亢進するが、増殖能に変化は認められ
なかった。 
これらの結果から、IL-18 は OPN の発現亢進を介してマクロファージの遊走や細胞外基質分
解酵素の活性化を引き起こすことで、腹部大動脈瘤の発症に重要な役割を果たしていることが
示唆された。今後、本研究成果が IL-18/OPN 経路をターゲットとした腹部大動脈瘤に対する新
たな治療薬の開発に繋がることが期待される。なお、この学位論文の内容は、以下の原著論文
に既に公表済である。 
主論文：Suehiro C, Suzuki J, Hamaguchi M, Takahashi K, Nagao T, Sakaue T, Uetani T, 
Aono J, Ikeda S, Okura T, Okamura H, Yamaguchi O: Deletion of Interleukin-18 
attenuates abdominal aortic aneurysm formation. Atherosclerosis 289:14-20, 2019 
DOI:10.1016/j.atherosclerosis.2019.08.003 
 
 


インターロイキン18遺伝子欠損は腹部大動脈瘤の形成を抑制する

Ehime University (愛媛大学)博士(農学)thesi

Adhikari, Sudhashree

 
 
（第５号様式）  
                        学位論文審査の結果の要旨 
 
氏     名 Adhikari Sudhashree 
審 査 委 員 
      主  査      岸田 太郎             
 
      副  査       松尾 達博               
 
      副  査       菅原 卓也               
 
      副  査       足立 亨介               
 
      副  査       丸山 広達               
 
         論  文  名 
Effects of daidzein and its metabolite on lipid and glucose metabolism 
（ダイゼインおよびその代謝物が脂質・糖代謝に与える影響） 
 
         審査結果の要旨 
 肥満および高脂血症は、高血圧や糖尿病等との因果関係も指摘され、ともに様々な健康問題の重要な
危険因子と認識されている。重篤な場合には医療処置に頼らざるを得ないが、運動や健康的な食事によ
る予防が望まれている。食事成分によるこれらの疾病予防の研究も多数なされており、食物繊維や植物
ステロール、ポリフェノールが有効である可能性が報告されている。こうした中、大豆の摂取が肥満お
よび高脂血症の予防に有効である可能性が多くの研究により指摘されている。大豆の多くの成分の中で、
これらの疾病予防に寄与する可能性のあるものとして大豆タンパク質とともに大豆イソフラボンが挙げ
られている。大豆イソフラボンはポリフェノールの一種で、主にダイゼインおよびゲニステインからな
る。これまでに申請者の研究室においてダイゼインが抗肥満効果およびコレステロール低下効果を持つ
ことが明らかになっている。本研究ではこれらの作用機構の解明を中心として検討を行った。 
 コレステロール低下効果の検討については、飼料を血清コレステロール濃度が通常の飼料（AIN 
-93 組成）に比べ高くなる高スクロース食とし、雌の SD ラットをそのまま、または卵巣摘出術を施して
用いた。卵巣摘出はエストロゲン欠乏により肥満、高脂血症の症状を亢進させることが知られている。
このラットにダイゼイン、ゲニステイン又はこの両方を混餌投与し 4 週間飼育し血清コレステロール濃
度低下を観察した。ダイゼインはゲニステインとの併投与とも、卵巣摘出術の施術の有無とも独立して
血清コレステロール濃度を有意に低下させ、肝臓の総コレステロール含量も同様に低下させた。この際、
血清のコレステロール前駆体のプロファイルを調べたところ、ラソステロール、デスモステロール、ス
クアレン他の前駆体の濃度が、ダイゼインの摂取により有意に低下していた。また、肝臓のコレステロ
ール合成の律速酵素である HMG-CoA レダクターゼの遺伝子発現も有意に低下していたことから、コレ
ステロール低下作用は、ダイゼインがコレステロール合成を低下させることによりもたらされているこ
とが示唆された。以前申請者の研究室で報告している通常の飼料での飼育の場合と異なり、ダイゼイン
摂取による糞中胆汁酸排泄量の増加は見られず、胆汁酸合成の律速酵素である CYP7A1 の遺伝子発現は
 
 
ダイゼインの摂取によりむしろ有意に低下した。この低下は先に述べた、胆汁酸の原料であるコレステ
ロール合成の低下を反映していると推測された。 
 大豆イソフラボンの摂取が糖代謝にもたらす影響についてはまだ知見がほとんどない。そこで本研究
ではダイゼインについて、緩和な体脂肪の増加をもたらす高スクロース・高脂肪飼料摂取時において検
討した。ラットはコレステロール低下作用の検討時と同様に雌の SD ラットをそのまま、または卵巣摘
出術を施して用いた。このラットにダイゼインを 35 日間混餌投与した。ダイゼインは試料摂取量を有
意に低下させ、体重、脂肪組織重量を有意に低下させた。14 日目と 28 日目に経口耐糖性試験を行った
ところ、飼育日数によらず、ダイゼインは絶食時血糖値および曲線下面積値を有意に低下させた。最終
日の血清インスリン濃度はダイゼイン摂取により有意に低下していたが、血清グルコース濃度に有意差
は見られなかった。血清および肝臓の中性脂肪濃度はダイゼイン摂取により有意に減少していた。肝臓
の遺伝子発現の解析から、ダイゼインがエネルギー摂取の低下を介して耐糖性を改善していることが示
唆された。またこの際、消化管のプレプログルカゴンの遺伝子発現がダイゼイン摂取により有意に増加
していた。プレプログルカゴンはエネルギー摂取を負に制御するホルモンである GLP-1 の前駆体である。 
 先に述べたダイゼイン摂取によるコレステロール低下作用や、これまで報告されてきた飼料摂取量低
下作用が観察された際、血中にはダイゼイン自体はほとんど存在せず、腸内細菌代謝物であるエコール
が高濃度で存在することが明らかになっている。しかし、エコールが体内でどのように分布しているか
は不明である。作用機構を考える上で体内分布は非常に重要である。体内分布の検討についても雌の
SD ラットをそのまま、または卵巣摘出術を施して用いた。このラットにダイゼインを 7 日間混餌投与
し、血液、胆汁、尿、糞のエコール濃度を測定した。血液の 1000 倍以上の濃度のエコールが胆汁中に
存在した。血液にも胆汁にもダイゼインはほとんど存在しなかった。尿や糞にはダイゼインもエコール
の半分の濃度が検出された。以上からダイゼインは腸内細菌で代謝されエコールとなった後、その多く
が腸肝循環、すなわち吸収され肝臓に至った後胆汁成分として消化管に再び分泌されることを繰り返し、
腸肝循環から漏れ出たものが血液や尿、糞に存在していることが示唆された。 
 本研究で見出されたダイゼイン摂取による耐糖性改善も、以前から見出されている飼料摂取量低下作
用によりもたらされている可能性が高い。飼料摂取量低下作用の作用機構解明の一助として、ダイゼイ
ンが胃排泄に及ぼす影響について検討した。胃排泄が遅延し、胃内容物が残れば、次の食餌タイミング
での飼料摂取量は低下する。これについて、卵巣摘出 SD ラットを用い、一日 3〜6 時間のみに食事時間
を制限した食餌様式、あるいは 1 日 2 回食餌時間 1 時間のみに制限した食餌様式（2 食制）にラットを
馴化させ、5 日間飼育し、ダイゼインの飼料摂取量に与える影響を観察し、最終日に胃排泄を測定した。
3〜6 時間制限食餌では、4 時間の時に最もダイゼインによる飼料摂取量低下が顕著にみられた。ダイゼ
イン摂取による胃排泄の遅延はいずれの制限時間でも見られたが、3 時間が一番顕著であった。2 食制
においてはダイゼイン摂取による飼料摂取量低下が 2 回目の食餌においてのみ見られ、この時の胃内容
排泄は有意に遅延していた。この効果は部分胃切除術により胃内容物の貯留を大幅に制限したラットで
は見られなくなった。以上からダイゼイン摂取による胃排泄の遅延により飼料摂取量の低下がもたらさ
れていることが示唆された。 
 以上一連の結果から大豆イソフラボン・ダイゼインが腸内細菌によりエコールに代謝され、コレステ
ロール低下作用および耐糖性改善をもたらすことが明らかになり、両効果の作用機構の一端も明らかに
された。さらなる検討により作用機構が明示されればヒトの健康栄養への利用も期待される。 
学位論文の公開審査会は 2020 年 2 月 8 日愛媛大学農学部で実施され、口頭発表と質疑応答が行なわ
れた。続いて学位論文審査委員会を開催して本論文の内容を審査した。その結果、全員一致して本論文
が博士（農学）の学位を授与するに値するものと判定した。 


English

Effects of daidzein and its metabolite on lipid and glucose metabolism

坂根, 由梨

SAKANE, Yuri

 
（第３号様式）     
 
 
学 位 論 文 要 旨 
 
 
 
            氏   名 坂根 由梨 
 
 
 
            論 文 名 ドライアイ QOL 質問票の開発と妥当性の検討 
 
 
 
 
学位論文要旨 
ドライアイは、様々な要因により涙液層の安定性が低下する疾患であり、眼不快感や視機能
異常を生じ、眼表面の障害を伴うことがある。ドライアイによる眼不快感や視機能異常などの
自覚症状は、Quality of life（QOL）にも負の影響を及ばすことが指摘されており、ドライアイ
の確定診断基準の一つにもなっている重要な要素である。また、ドライアイの臨床所見の重症
度と自覚症状の強さには乖離がみられることが知られており、治療効果の評価には臨床所見だ
けでなく、自覚症状の評価も不可欠である。しかし、自覚症状は主観的なものであり、評価に
は精度よく測定できる専用の尺度が必要である。 
欧米では、ドライアイの症状や QOL への影響を評価する尺度として、複数のドライアイ質
問票が使用されているが、日本では言語や文化の違い、ドライアイ診断基準の違いなどから、
これらの質問票をそのまま使用することはできない。そこで、日本初となるドライアイの症状
や QOL への影響を評価するドライアイ QOL 質問票 DEQS（Dry Eye-related Quality of life 
Score）を開発し、計量心理学的に妥当性と信頼性を検証することを本研究の目的とした。 
 質問票の開発および妥当性の検証は、1）Item Generation、2）Pilot Study、3）Preliminary  
validation study、4）Validation study の 4 つのフェーズに分けて行った。2）～4）のフェーズは
それぞれ、愛媛大学医学部の臨床研究倫理審査委員会によって承認されている（愛大医病倫
1103012 号、1106008 号、1112002 号）。 
1）Item Generation 
眼表面疾患に関する質問票の文献的レビューと専門家の意見から 45 の質問項目が収集さ
れ、ドライアイを専門分野とする医師の会議により、35 項目を選択して DEQS 第 1 版を作成
した。 
2）Pilot study 
 表面的妥当性と内容的妥当性を評価するために、ドライアイ患者 20 名を対象に行った。参
加者は DEQS 第 1 版に回答後、質問票の印象、包括性、質問内容や選択肢の明確さ、不必要  
 
氏名 坂根 由梨     
な項目や追加すべき項目などについてインタビューを受けた。参加者の意見に基づき、質問項
目を整理し、24 項目から成る DEQS 第 2 版を作成した。 
3）Preliminary validation study 
 最終的な検証の前に、さらなる質問項目の絞り込みと、DEQS の因子構造を確認するため、
予備的に計量心理学的検討を行った。対象はドライアイ群 112 名と正常コントロール群 30 名
で、DEQS 第 2 版に回答してもらい、結果に対し因子分析と項目分析を行った。その結果、
60％以上が該当なしと回答した質問項目や、健常者と有意差のない質問項目を除外し、15 の
質問項目で構成された DEQS 最終版を完成させた。 
4）Validation study 
完成した DEQS 最終版を用い、ドライア群 203 名と正常コントロール群 21 名を対象とした
計量心理学的検討を行い、因子分析、内的整合性、再検査信頼性、ドライアイ群とコントロー
ル群の弁別、併存的妥当性、治療に対する反応性を検討した。因子分析では、DEQS の 15 項
目はドライアイの自覚症状に関する 6 項目と、日常生活への支障に関する 9 項目の 2 因子に分
けられ、この 2 因子を DEQS の下位尺度（因子 1：目の症状、因子 2：日常生活への支障）と
して用いることとした。内的整合性の検討では、DEQS の総合スコアと 2 つの下位尺度のスコ
アはすべて、Cronbach‘s α 係数が 0.7 以上の高値で良好であった。再検査信頼性では、初回の
回答から 2 週後に再度 DEQS に回答してもらい、その級内相関係数を検討した。総合スコ
ア、2 つの下位尺度のスコアともに級内相関係数は 0.8 以上であり、良好な再現性を示した。
ドライアイ群と正常コントロール群のスコアの比較では、総合スコアと 2 つの下位尺度のスコ
ア全てで、ドライアイ群が有意に高く、ドライア患者の弁別に有用と考えられた。併存的妥当
性では、他の確立された QOL 指標の類似項目と、DEQS の各スコアの相関を検討した。総合
スコア、下位尺度スコアともに、類似項目のスコアと有意な相関が得られ、妥当性が確認され
た。治療に対する反応性では、ドライアイ群のうち、DEQS 回答後に治療として涙点プラグ挿
入術を施行した 10 名について、治療後にもう一度 DEQS に回答してもらい、治療前後の
DEQS のスコアを比較した。結果として、総合スコアと 2 つの下位尺度のスコアの全てで有意
な改善がみられ、DEQS は治療による症状の変化を評価するのにも有用であった。 
 
以上の結果から、DEQS はドライアイの自覚症状と QOL への影響を評価する尺度として、
十分な妥当性と信頼性が検証された。DEQS は 15 項目の簡単な質問票であり、日常診療でド
ライアイの診断や治療効果の指標として有用であると考えられる。日本では DEQS のほかに
妥当性が検証されたドライアイ質問票の報告はなく、今後様々な臨床研究で活用されることが
期待される。 
 
 
キーワード（３～５） 
 
 
 
ドライアイ 
Patient Reported Outcome（PRO） 
QOL質問票 
Health-related quality of life (HRQoL) 
 


ドライアイQOL質問票の開発と妥当性の検討

Not a member yet