9005 research outputs found

    Enriquecimiento del conocimiento previo en ILP

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    Inductive Logic Programming (ILP) induces concepts from a set of negative examples, a set of positive examples, and background knowledge. ILP has been applied on tasks in areas such as natural language processing, finite element mesh design, network mining, robotics, drug discovery, and more. These datasets typically contain both numerical and categorical attributes; however, few relational learning systems efficiently handle such data. This thesis introduces an evolutionary method called ”Grouping and Discretization for Enriching the Background Knowledge (GDEBaK),”which enables the handling of numerical and categorical attributes. This method employs evolutionary operators to create and test different split points (for numerical attributes) and subsets of values (for categorical attributes) based on a fitness function. Subsequently, the best split points and category subsets are added to the background knowledge before the learning process, to be used during the induction of the final theory. We implemented GDEBaK embedded in the Aleph system and compared it with Aleph’s lazy discretization and the discretization performed by the Top-down Induction of Logical Decision Trees (TILDE) system [6]. Aleph is one of the most widely used ILP systems for learning concepts that require high representational power [55]. It is crucial in ILP, incorporating functionalities from other systems such as Progol, FOIL, FORS, or TILDE. The obtained results indicate that the presented method improves the accuracy of final theories and reduces the number of rules in the majority of cases.La Programación Lógica Inductiva (ILP) induce conceptos a partir de un conjunto de ejemplos negativos, un conjunto de ejemplos positivos, y un conocimiento previo. La ILP ha sido utilizada en tareas dentro de diversas áreas como procesamiento de lenguaje natural, diseño de malla para elementos finitos, minería de redes, robótica, descubrimiento de nuevas drogas en farmacéutica, etc. Los conjuntos de datos utilizados, usualmente, contienen atributos numéricos y categóricos, sin embargo, son pocos los sistemas de aprendizaje relacional que son capaces de manejar ese tipo de datos de manera eficiente. Esta tesis presenta un método evolutivo, llamado “Agrupamiento y discretización para el enriquecimiento del conocimiento previo” (en inglés Grouping and Discretización for Enriching the Background Knowledge - GDEBaK), el cual, permite manejar atributos numéricos y categóricos. Este método utiliza operadores evolutivos para crear y probar diferentes puntos de división (en el caso de los atributos numéricos) y subconjuntos de valores (en el caso de ´ los atributos categóricos) de acuerdo a una función de aptitud. Después, los mejores puntos de división y subconjuntos de categorías son agregados al conocimiento previo, antes de realizar el proceso de aprendizaje, para que sean utilizados durante la construcción de la teoría final. Implementamos GDEBaK embebido en el sistema Aleph y lo comparamos con la discretización perezosa del sistema Aleph y con la discretización llevada a cabo por el sistema Top-down Induction of Logical Decision Trees (TILDE) [6]. Aleph es uno de los sistemas de ILP más usados para aprender conceptos que necesitan gran poder de representación [ ´ 55], y es uno de los más importantes en ILP ya que posee funcionalidades de otros sistemas como Progol, FOIL, FORS o TILDE. Los resultados obtenidos muestran que el método presentado mejora la precisión de las teorías finales y reduce el número de reglas en la mayoría de los casos

    Afecto-narrativas de la resistencia y la ocupación del espacio ante las violencias hacia las mujeres

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    La siguiente investigación es un esfuerzo por reconocer las voces y vivencias de las mujeres activistas, además de fungir como una interpretación acerca de las formas afectivas presentes en este contexto de violencias hacia las mujeres. Se sitúa bajo las premisas de la psicología colectiva y del construccionismo social, cuestionando las conceptualizaciones hegemónicas acerca de lo afectivo. El objetivo fue comprender las formas afectivas de la resistencia y la ocupación del espacio ante las violencias que viven las mujeres en la Ciudad de México. Para ello, se realizaron entrevistas a profundidad, distribuidas en tres sesiones, a 3 mujeres en la Ciudad de México. En cada sesión se abordó un tema en específico. En la primera sesión se habló de las acciones colectivas. En la segunda sesión se abordó el tema del espacio. Por último, en la tercera sesión se conversó sobre el contexto de violencia. Además, se realizó un grupo focal con 5 adolescentes en donde el tema a tratar fue la criminalización de sus acciones como colectivas y las contranarrativas de sus acciones performativas. Para el análisis se propuso uno de corte narrativo, debido al interés de crear conocimiento desde las características específicas del contexto en el que viven las mujeres. Finalmente, se habla de afectos en camino a lo emergente haciendo referencia a la posibilidad de transformación de la forma actual que tiene la sociedad a una en donde la vida de las mujeres sea más digna de vivir. Palabras clave: Acción performativa, Afectividad colectiva, Espacio, Metáforas, Narrativa, Resistencia y Violencia hacia las mujeres

    Identificación de CRISP1, ADAM7 y PMCA4 en epididimo del murciélago Corynorhinus mexicanus, así como su posible participación en la maduración espermática epididimaria

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    Los espermatozoides producidos en los testículos carecen de toda capacidad de fecundar al ovocito, para ello deben experimentar una serie de cambios morfológicos, fisiológicos y bioquímicos que le van a permitir adquirir dicha capacidad. Durante la maduración espermática epididimaria el espermatozoide va adquiriendo proteínas durante su viaje por el epidídimo, algunas de estas se asocian a su membrana de manera temporal y algunas otras permanecen aún después de ser eyaculados. Algunas de estas proteínas son exclusivas del epidídimo y participan activamente en la maduración epididimaria principalmente en especies, cuya maduración en general finaliza en la región distal del cuerpo del epidídimo, esta última característica general en mamíferos es distinta en Corynorhinus mexicanus, cuya maduración finaliza en la región caudal del epidídimo y se ha asociado a un almacenamiento prolongado de hasta 5 meses. Por lo que el objetivo del presente trabajo fue, identificar la presencia de CRISP1, PMCA4 y ADAM7 en epididimo de C. mexicanus e inferir su posible participación en la maduración. El análisis filogenético identifico la presencia de las proteínas de interés CRISP1, PMCA4 y ADAM7 dentro del grupo quiróptera dando evidencia indirecta de la presencia de dichas proteínas en C. mexicanus. La inmunofluorescencia realizada para las fechas de Octubre (maduración) y febrero (final del almacenamiento) mostraron la presencia de CRISP1, PMCA4 y ADAM7 en todo el tejido epididimario. En octubre CRISP1 no mostró diferencia de expresión entre las regiones del epidídimo, PMCA4 tuvo mayor expresión en la cauda al igual que ADAM7. Posiblemente las tres proteínas estén participando activamente en la maduración a través del mantenimiento del tejido epididimario para brindar un ambiente luminal adecuado, mientras que en el espermatozoide estén regulando la entrada de calcio, evitando su acumulación y en la correcta osmolaridad por parte de los espermatozoides. Inclusive parece ser que al menos la expresión de PMCA4 es de importancia para la regresión del tejido epididimario y eliminación de espermatozoides por apoptosis, que marcara el inicio del periodo de inactividad reproductiva.The sperm produced in the testicles lack any capacity to fertilize the oocyte, for this they must undergo a series of morphological, physiological and biochemical changes that will allow them to acquire this capacity. During epididymal sperm maturation, the spermatozoon acquires proteins during its journey through the epididymis, some of these are temporarily associated with its membrane and some others remain even after being ejaculated. Some of these proteins are exclusive to the epididymis and actively participate in epididymal maturation, mainly in species, whose maturation generally ends in the distal region of the body of the epididymis. This last general characteristic in mammals is different in Corynorhinus mexicanus, whose maturation ends in the epididymis. caudal region of the epididymis and has been associated with prolonged storage of up to 5 months. Therefore, the objective of this work was to identify the presence of CRISP1, PMCA4 and ADAM7 in the epididymis of C. mexicanus and infer their possible participation in maturation. The phylogenetic analysis identified the presence of the proteins of interest CRISP1, PMCA4 and ADAM7 within the bat group, giving indirect evidence of the presence of these proteins in C. mexicanus. Immunofluorescence performed for the dates of October (maturation) and February (final storage) showed the presence of CRISP1, PMCA4 and ADAM7 in all epididymal tissue. In October CRISP1 did not show a difference in expression between the regions of the epididymis, PMCA4 had higher expression in the cauda, as did ADAM7. Possibly the three proteins are actively participating in maturation by maintaining the epididymal tissue to provide an adequate luminal environment, while calcium entry is being regulated in the spermatozoon, preventing its accumulation and correct osmolarity by the spermatozoa. . It even seems that at least the expression of PMCA4 is of importance for the regression of the epididymal tissue and elimination of spermatozoa by apoptosis, which will mark the beginning of the period of reproductive inactivity

    CTCF como regulador de múltiples mecanismos estructurales y moleculares durante la espermatogénesis

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    CTCF es una proteína arquitectónica que organiza el genoma dentro del núcleo en casi todas las células eucariotas. Hay evidencias que sugieren el papel clave que CTCF tiene durante la espermatogénesis donde su eliminación da como resultado la producción anormal de espermatozoides e infertilidad en un modelo murino. Sin embargo, los defectos producidos por la eliminación de CTCF en la espermatogénesis no han sido del todo caracterizados. En este trabajo se realizó secuenciación de células individuales como herramienta para evaluar las alteraciones transcripcionales en células espermatogénicas con y sin la presencia de CTCF. Los análisis bioinformáticos, estructurales y bioquímicos, revelan los defectos en los procesos biológicos que explican el daño producido en los espermatozoides maduros. De esta manera, en la etapa temprana de la espermatogénesis las alteraciones no son tan evidentes; sin embargo, conforme las células germinales avanzan en la especialización o espermatogénesis los programas transcripcionales, morfológicos y bioquímicos se van alterando. En conclusión, este estudio resalta la contribución de CTCF en la especialización de los gametos masculinos y provee una descripción fundamental de su función en las etapas de la espermatogénesis.CTCF is an architectonic protein that organizes the genome inside the nucleus in almost all eukaryotic cells. There is evidence that CTCF plays a critical role during spermatogenesis as its depletion produces abnormal sperm and infertility in mice model. However, the defects produced by its depletion throughout spermatogenesis have not been fully characterized. In this work, we performed single cell RNA sequencing in spermatogenic cells with and without CTCF. Bioinformatic, structural and biochemical analysis uncovered altered biological process that are involved in mature sperm damage. At early stages of spermatogenesis, transcriptional alterations are mild. As germ cells go through the specialization stage or spermiogenesis, transcriptional, morphology and biochemical profiles become more altered. In conclusion, our study sheds light on the contribution of CTCF to the phenotype of male gametes and provides a fundamental description of its role at different stages of spermiogenesis

    Efecto de la sobrecarga de colesterol en la pancreatitis aguda

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    El páncreas es un órgano que presenta una función mixta; una exocrina y una endocrina. Se denomina pancreatitis aguda a la inflamación del páncreas, en la cual, las enzimas producidas por dicho órgano se activan intracelularmente, provocando la digestión del propio tejido. El colesterol es un compuesto vital, esencial en la formación de la membrana celular, la producción de hormonas sexuales y la formación de sales biliares, entre otras funciones. Aunque cada lípido posee efectos específicos en células y tejidos, la acumulación de colesterol se considera dañino para el funcionamiento adecuado del organismo. A pesar de su relevancia, no existen estudios sobre el efecto que puede tener una dieta alta en colesterol en el inicio y progresión de la pancreatitis aguda. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar la contribución del colesterol durante el desarrollo de la pancreatitis aguda en un modelo preclínico de pancreatitis inducida por ceruleína (Cn). Nuestros datos muestran que el tratamiento con una dieta alta en colesterol (HC) aumenta el contenido de grasa visceral en los animales, mientras que el tratamiento con ceruleína (Cn) y el cotratameinto (HC+Cn), incrementan el peso del páncreas. El análisis histológico realizado con tinción de H&E, muestra que la dieta HC y los tratamientos con Cn promueven la presencia de edema, daño celular y presencia de infiltrado inflamatorio, parámetros que se incrementan significativamente, sin embargo, solo la dieta HC causa el depósito de grasa en el parénquima. Por otro lado, nosotros encontramos por medio de análisis de IHC e IF, la presencia de células del infiltrado inflamatorio y una alteración en la distribución de la amilasa dentro del parénquima pancreático tanto en los grupos tratados con la dieta HC como en los tratados con Cn. El perfil bioquímico muestra sorpresivamente un incremento estadísticamente significativo en la actividad de la amilasa y la lipasa séricas en el grupo de dieta HC asi como en todos los otros grupos de daño ( Cn, HC+Cn), respecto al control. El incremento en las enzimas pancreáticas en los animales HC, indica que el HC, sin necesidad de otra agresión está provocando pancreatitis aguda. En conclusión, este trabajo provee evidencia que indica que la dieta HC provoca un daño generalizado al páncreas en diferentes parámetros asociados con la pancreatitis aguda y que no es necesaria la inducción de la pancreatitis con Cn ya que solo la ingesta de la dieta HC es suficiente para provocarla. Estos datos resultan de gran interés, debido a que una dieta alta en colesterol puede ser el agente inductor en el desarrollo de la pancreatitis aguda. Los datos obtenidos en el presente trabajo abren una nueva perspectiva a futuro, que sería la de evaluar el mecanismo molecular por el cual el colesterol induce la pancreatitis en el modelo murino utilizado.The pancreas is an organ that has a mixed function an exocrine and an endocrine one. Acute pancreatitis is the inflammation of the pancreas, in which the enzymes produced by the pancreas are activated intracellularly, causing the digestion of the tissue itself. Cholesterol is a vital compound, essential in the formation of the cell membrane, the production of sexual hormones, and the bile salts synthesis, among other functions. Although each lipid has physiological specific effects on cells and tissues, the accumulation of cholesterol has been considered harmful. Despite its relevance, there are no studies on the effect that a high-cholesterol diet could have on the onset and progression of acute pancreatitis. The present work aimed to determine the contribution of cholesterol during the development of acute pancreatitis in a preclinical model induced by cerulein (Cn). Our data show that high cholesterol (HC) diet increases visceral fat content in animals, while treatment with Cn and co-treatment (HC+Cn) increases pancreas weight. The histological analysis performed with H&E staining shows that HC diet and Cn treatments significantly increased the presence of edema, cell damage, and presence of inflammatory infiltrate. However, only HC diet group presents fat deposition in the pancreas parenchyma. On the other hand, we found through analysis of IHC and IF, an inflammatory infiltrate and an alteration in the distribution of amylase within the pancreatic parenchyma in all experimental groups. The biochemical profile surprisingly shows a statistically significant increase in serum amylase and lipase activity in all groups (HC, Cn, HC + Cn), compared to the control. The increase in pancreatic enzymes in HC animals indicates that HC, without the need for other aggression, is able to induce pancreatitis. In conclusion, this work provides evidence indicating that the HC diet causes widespread damage to the pancreas in different parameters associated with acute The biochemical profile surprisingly shows a statistically significant increase in serum amylase and lipase activity in all groups (HC, Cn, HC + Cn), compared to the control. The increase in pancreatic enzymes in HC animals indicates that HC, without the need for other aggression, is able to induce pancreatitis. In conclusion, this work provides evidence indicating that the HC diet causes widespread damage to the pancreas in different parameters associated with acute pancreatitis. determine the molecular mechanism by which cholesterol induces pancreatitis in the murine model used

    Potenciación de sensaciones gustativas inducidas por el olor en alimentos para adultos mexicanos con peso normal y obesos

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    Odor-induced taste enhancement in Mexican adults with obesity and normalweight Odor and taste play an important role in flavour perception and it is well known that the chemical composition of the matrix and consequently its structure influences release and perception of flavour. OITE (Odor-induced taste enhancement), is a phenomenon that derives from the integration of taste and odor into flavor perception in order to enhance the taste perception. In this work, the OITE phenomenon was used to enhance the sweet and salty taste in people of normal weight (PN) and with obesity (OB) using ranking tests. In addition, pleasantness, familiarity and JAR scale was applied with solutions with odorant. Moreover, participants filled out two questionnaires on eating behaviour (DEBQ & DFS). Thirty-nine people of normal weight (PN: 25 kg/m2 < BMI) and thirty-five obese people (OB: BMI ≥ 30 kg/m2 ) participated in sensory evaluations which were divided into two sessions; sweet session and salty session. For the sweet part, the participants evaluated two bases; Jamaicas water and apple juice. The “vanilla mx”, “golden syrup” and “sugar type” odorants were added to the Jamaica water base and the “vanillin fr” odorant were added to the apple juice base. In the case of the salty part, the participants evaluated three bases; the chayote, corn and green peas with the odorants "mx bacon" and "Beff" to the chayote base, odorant " onion fried" and "coriander" to the white corn base and odorant "bacon fr” for the green pea base. Each ranking was performed with 4 solutions, 3 with increasing salt/sugar concentration (S1 to S3), and the fourth contained the lowest sugar/salt concentration with an odorant added. The participants had to classify the 4 bottles according to the intensity of sweetness or saltiness. The results showed that people with obesity (OB) experienced a slight tendency to perceive a higher odor induced sweetness enhancement than normal weight people (NW). In contrast, people with normal weight showed a slightly higher trend to perceive odor induced saltiness enhancement than obese people.Potenciación de sensaciones gustativas inducidas por el olor en alimentos para adultos mexicanos con peso normal y obesos El aroma y el gusto juegan un papel importante en la percepción del sabor, por lo tanto, la percepción de la sal y el azúcar pueden ser potenciadas a través de aromas congruentes al gusto percibido. OITE (Odor-induced taste enhancement), por sus siglas en inglés, es un fenómeno que se deriva de la integración del gusto y del olor tendiendo como resultado la percepción del sabor. En este trabajo se utilizó el fenómeno OITE para potenciar el sabor dulce y salado en personas de peso normal (PN) y con obesidad (OB) usando pruebas de ordenamiento (Ranking test), además se evaluó el agredo, familiaridad y se aplicó escala justo como lo esperaba (JAR) a las soluciones con odorante. Asimismo, los participantes llenaron dos cuestionarios sobre comportamiento alimentario (DEBQ & DFS). Treinta y nueve personas de peso normal (PN: 25 kg/m2< IMC) y treinta y cinco personas con obesidad (OB: IMC ≥ 30 kg/ m2 ) participaron en evaluaciones sensoriales las cuales se dividieron en dos sesiones; sesión dulce y sesión salada. Para la parte dulce, los participantes evaluaron dos bases; el agua de Jamaica y el jugo de manzana, agregando los odorantes “vainilla mx”, “golden syrup” y “sugar type” para la base agua de Jamaica y el odorante “vainillina fr” para la base jugo de manzana. En el caso de la parte salada, los participantes evaluaron tres bases; el chayote, el maíz y chicharos con los odorantes “tocino mx” y “res” para la base chayote, odorante “cebolla frita” y “cilantro” para la base maíz y odorante “tocino fr” para la base de chicharos. Cada clasificación se realizó con 4 soluciones, 3 con una concentración creciente de sal/azúcar (S1 a S3), y la cuarta contenía la menor concentración de azúcar/sal con un odorante añadido. Los participantes tenían que clasificar las 4 botellitas según la intensidad de la dulzura o la salinidad. Los resultados mostraron que las personas con obesidad experimentaron una ligera mayor tendencia a percibir una mejora de la dulzura inducida por el olor que las personas de peso normal. En contraste, las personas con peso normal mostraron una tendencia ligeramente mayor a percibir una mejora en la salinidad inducida por el olor que las personas obesas

    Generación de embriones interespecie clonados a partir de fibroblastos de piel de bovino

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    El uso de células somáticas (fibroblastos) provenientes de piel, constituye un precedente sumamente importante para la obtención de cultivos celulares con fines reproductivos, de conservación y preservación de material genético proveniente de especies amenazadas, extintas o en peligro de extinción, especímenes cuyo potencial genético es superior al resto de la población promedio a la que pertenecen, apoyados de tecnologías de reproducción animal asistida como el la transferencia nuclear de células somáticas (TNCS). En el presente trabajo se utilizaron tres métodos de deriva celular (enzimático (E), mecánico (M) y mecánico-enzimático o mixto (M-E) para obtener fibroblastos de piel de bovinos adultos post mortem (tipo criollo) y vivos para producción de carne hembras y machos (razas Angus, Simbrah, Simmental y Tuli), y de bovino joven para producción de leche (Holstein). Como variables medibles se consideró el crecimiento y número de células obtenidas en cada uno de los pasajes celulares, siendo el método E superior (p≥0.05) para los cultivos primarios de deriva celular. Este método mostró un número de células en crecimiento (± 50%) para el primer pasaje, reduciéndose hacia el segundo pasaje (± 15%) y siendo aún menor en el último pasaje celular. El tiempo estimado de crecimiento en días de las colonias celulares fue en promedio de 10±3.1 (M-E), 11±3.5 (E), 12±3.7 (M). Se demostró la eficiencia de los métodos empleados para obtener células de piel de oreja de bovinos productivos y llevarlas a los pasajes celulares necesarios para su uso como carioplastos en la transferencia nuclear de células somáticas interespecie (TNCSI). También se demostró la capacidad de crecimiento postcongelación de estas células, lo cual garantiza su almacenamiento en bancos de germoplasma. Respecto a la TNCSI, se utilizaron ovocitos de ovino doméstico como citoplastos receptores de los carioplastos de bovino hembra adulta raza Simbrah de la UANL. El máximo desarrollo alcanzado por los embriones clones de bovino Simbrah así reconstruidos, fue la etapa de mórula (16 células) con una tasa de eficiencia del 46%. Se seleccionó la hembra raza Simbrah porque fue el ejemplar de la que se obtuvieron las cuentas celulares más altas (±10%), en comparación con las razas Tuli, Simmental, Angus y Holstein, respectivamente, y porque fue campeona mundial en el 2020. Con lo cual se demostró la utilidad de esas células para la TNCSI. Estos resultados dan un importante precedente para llevar a cabo la TNCS utilizando el método manual (Handmade cloning o HMC), resta continuar evaluando otras fuentes de ovocitos como receptores de núcleoThe use of somatic cells (fibroblasts) from the skin constitutes an extremely important precedent for obtaining cell cultures for the purposes of reproduction, conservation and demonstrated genetic material of threatened, extinct or endangered species, specimens whose genetic potential is superior. To the rest of the average population. To which they belong, supported by assisted animal reproduction technologies such as somatic cell nuclear transfer (SCNT). In the present work, three methods of cell drift (enzymatic (E), mechanical (M) and mechanical-enzymatic or mixed (ME)) were used to obtain live postmortem adult bovine skin fibroblasts (Creole type) for production. Of meat Females and males (Angus, Simbrah, Simmental and Tuli breeds), and young cattle for milk production (Holstein). As measurable variables, the growth and number of cells obtained in each of the cell passages were observed, the E method being higher (p≥0.05) for the primary cultures of cell drift. This method shows a growing number of cells (±50%) for the first passage, decreasing towards the second passage (±15%) and being even lower in the last passage. cell passage. The estimated growth time in days of the cell colonies was on average 10±3.1 (ME), 11±3.5 (E), 12±3.7 (M). The efficiency of the methods used to obtain cells was demonstrated, of ear skin from productive bovines and extract the p-cell handles required for use as caryoplasts in interspecies somatic cell nuclear transfer (ISCNT). The post-freezing growth capacity of these cells was also increased, which guarantees their storage in germplasm banks. Regarding the ISCNT, oocytes from domestic sheep were used as receptor cytoplasts for the caryoplasts of adult female Simbrah bovines from the UANL. The maximum development reached by the cloned Simbrah bovine embryos thus reconstructed was the morula stage (16 cells) with an efficiency of 46%. The female Simbrah breed was selected for being the specimen from which the highest cell counts (±10%) will be acquired, compared to the Tuli, Simmental, Angus and Holstein breeds, respectively, and for being world champion in 2020. With which the utility of these cells will be exploited for ISCNT. These results set an important precedent for performing the SCNT by the manual method (Handmade cloning or HMC), it remains to continue evaluating other sources of oocytes such as nucleus recipients

    Identificación de una proteína ribosomal con actividad antimicrobiana, producida por Streptomyces lividans TK24

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    The use of antimicrobial proteins and peptides is considered an alternative to replace traditional antibiotics that are currently ceasing to be effective in the presence of resistant pathogenic microorganisms. These molecules are effective against a broad spectrum of infectious bacterial, viral, fungal, and parasitic pathogens. The development of this project originated from the discovery of an antimicrobial compound around 10 kDa, this molecule was found in the biomass-free extract of a Streptomyces lividans TK24 culture. In the first stage we showed that this molecule contained in ELB acts against Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Kokuria rhizophila, Clostridium sporogenes and Clavibacter michiganensis (phytopathogenic bacteria responsible for bacterial canker), all these bacteria are Grampositive. Antimicrobial activity was observed only when glycerol and glucose were used as carbon source. As a second stage a partial protein purification was performed, starting with ammonium sulfate precipitation followed by ion exchange chromatography, then hydroxyapatite chromatography. By SDS-PAGE gel (under non-denaturing conditions) coupled to an antimicrobial activity assay, it was determined that the band with antimicrobial activity corresponds to a size of 12.6±1.26 kDa. On the other hand, by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry, we identified that 11 proteins were within the interval of 11.3-13.9 kDa. Through a functional analysis we selected 4 proteins as those possibly responsible for the antimicrobial activity. In stage three, a gene expression analysis was made to determine the expression levels of the genes that code for the selected proteins and see the relationship with the antimicrobial activity, using culture conditions that showed antimicrobial activity and culture conditions that did not show antimicrobial activity. Altogether, protein fractionation, correlation analysis between antimicrobial activity and abundance of selected proteins, as well as gene expression (semi-quantitative and quantitative analyses) and a prediction of the antimicrobial potential of peptides, indicate that the 50S ribosomal protein L19 is the main candidate responsible for the antimicrobial activity. Keywords: Antimicrobial protein; moonlighting protein; Streptomyces lividans; Clavibacter michiganensis.El uso de proteínas y péptidos antimicrobianos se considera una alternativa para sustituir a los antibióticos tradicionales que actualmente están dejando de ser efectivos ante la presencia de microorganismos patógenos resistentes. Estas moléculas son efectivas hacia un amplio espectro de patógenos bacterianos, virales, fúngicos y parasitarios. El desarrollo de este proyecto surgió por el descubrimiento de un compuesto con actividad antimicrobiana mayor a 10 kDa, dicha molécula se encontró en el extracto libre de biomasa (ELB) de un cultivo de Streptomyces lividans TK24. En la primera etapa demostramos que esta molécula contenida en el ELB actúa contra Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Kokuria rhizophila, Clostridium sporogenes y Clavibacter michiganensis (bacteria fitopatógena responsable del cancro bacteriano), todas son bacterias Gram-positivas, y que la actividad antimicrobiana se presentaba solo cuando se utilizaba glicerol y glucosa como fuente de carbono. En la segunda etapa se realizó una purificación parcial de proteínas, iniciando con una precipitación con sulfato de amonio seguida de cromatografía de intercambio iónico y una cromatografía con hidroxiapatita. Mediante gel SDS-PAGE (en condiciones no desnaturalizantes) acoplado a una prueba de actividad antimicrobiana se determinó que la banda con actividad antimicrobiana corresponde a un tamaño de 12.6±1.26 kDa. Por otro lado, mediante cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem identificamos que 11 proteínas se encontraban dentro del intervalo de 11.3-13.9 kDa. A través de un análisis funcional seleccionamos 4 proteínas como las posibles responsables de la actividad antimicrobiana. En la etapa 3 se hizo un análisis de expresión génica para determinar los niveles de expresión de los genes que codifican a las proteínas seleccionadas y ver la relación con la actividad antimicrobiana, empleando condiciones de cultivo que mostraron actividad antimicrobiana y condiciones de cultivo que no mostraron actividad antimicrobiana. En conjunto, el fraccionamiento de proteínas, el análisis de correlación entre la actividad antimicrobiana y la abundancia de las proteínas seleccionadas, el análisis de expresión génica (análisis semicuantitativo y cuantitativo) y una predicción del potencial antimicrobiano de péptidos, indican que la proteína 50S ribosomal L19 es la principal candidata responsable de la actividad antimicrobiana. Palabras clave: Proteína antimicrobiana; proteínas moonlighting; Streptomyces lividans; Clavibacter michiganensis

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