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The influence of the storage period on the suppressive capacity of composts enriched with trichoderma atroviride
No full textComposts can be used to improve soil fertility while controlling soil diseases, contributing to the circular economy in agriculture. Biological control of soil diseases may be achieved by the activity of antagonistic microorganisms, that, by different ways, prevent the development of phytopathogenic microorganisms, being Trichoderma spp. one of the best-known antagonistic fungi. In this work, the evolution of the suppressive capacity during a storage period of one year, was evaluated on two composts enriched with Trichoderma atroviride, against Rhizoctonia solani, Clarireedia spp. and Sclerotium rolfsii in turfgrass (Agrostis stolonifera). Both composts, obtained from agro-industrial residues, were enriched with T. atroviride, and stored at room temperature, in the dark. The composts were tested in vivo, at 0, 6 and 12 months of storage, as substrates for turfgrass (Agrostis stolonifera L. cv. T1) grown in pots. Plants were inoculated with the above-mentioned pathogenic fungi and the incidence and the severity of the diseases, AUDPC and BCI, were determined during the storage period. The highest biological control performance was achieved after 6 months of storage, especially on the composts enriched with Trichoderma atroviride
Texting: A way to learn maternal languages. A Portuguese case study
No full textA case study carried out in Portugal, at a Secondary School in Silves (a small city in the southern Algarve region), with the collaboration of Portuguese language teachers and students, and which is currently being extended to the St. Tiernan‘s Community School in Dublin, Ireland, enabled the development of a programme that uses txting (the abbreviated writing form used mainly by young people to communicate through mobile phones and IM – Instant Messaging services, such as the MSN), which is still being tested and improved, with the aim of teaching some basic maternal language grammar rules.N/
Benchmarking tourism destinations - a contribution to performance measurement and management of tourism organisations in Portugal
No full textTourism has become a major component of the global economy, contributing significantly to employment, GDP growth, and foreign exchange earnings (UNWTO, 2019). Tourism organisations must prioritise effective and efficient performance measures and management strategies to maintain competitiveness and sustainability. This study focuses on benchmarking as a strategic tool for improving the performance of tourism destinations in Portugal by employing a systematic research approach to analyze the methodologies, challenges, and outcomes in this area, specifically in tourism destination image. This study presents a comprehensive literature review on benchmarking, with a particular focus on its application in tourism destinations. It then conducts a systematic literature review of benchmarking research published between 2015 and 2023, with special emphasis on the role of destination image. The research further analyses the impact of benchmarking on performance improvement, identifying the key barriers to its implementation and proposing effective strategies to overcome these challenges. In conclusion, this thesis firmly establishes that benchmarking is an indispensable strategic tool for destinations and tourism organizations in Portugal. Although challenges to its implementation exist, they are not insurmountable. Furthermore, this research addresses the need for a more structured and empirical approach to benchmarking within Portuguese tourism, providing a clearer understanding of how benchmarking practices influence long-term sustainability and performance enhancement. The study also examines the effectiveness of existing benchmarking models and proposes refinements suitable for the Portuguese tourism industry. This research provides evidence-based insights for policymakers, destination managers, and stakeholders in the tourism industry. It is intended to promote sustainable tourism development, improve benchmarking practices, and enhance Portugal's global reputation as a competitive tourism destination.O turismo tornou-se um componente importante da economia global, contribuindo significativamente para o emprego, o crescimento do PIB e os ganhos com divisas (UNWTO, 2019). As organizações de turismo devem priorizar medições de desempenho e estratégias de gestão eficazes e eficientes para manter sua competitividade e sustentabilidade. Este estudo foca no benchmarking como uma ferramenta estratégica para melhorar o desempenho dos destinos turísticos em Portugal, empregando uma abordagem de investigação sistemática para analisar as metodologias, desafios e resultados nesta área, com especial foco na imagem dos destinos. Este estudo apresenta uma revisão abrangente da literatura sobre benchmarking, com especial atenção à sua aplicação em destinos turísticos, com revisão sistemática da literatura sobre benchmarking publicada entre 2015 e 2023, com ênfase especial no papel da imagem do destino. É também analisado o impacto do benchmarking na melhoria do desempenho, identificando as principais barreiras à sua implementação e propondo estratégias eficazes para superar esses desafios. Em conclusão, esta tese conclui que benchmarking é uma ferramenta estratégica indispensável para os destinos e organizações de turismo em Portugal e que embora existam desafios na sua implementação, estes não são intransponíveis. Além disso, evidencia a necessidade de uma abordagem mais estruturada e empírica para o benchmarking no turismo português, proporcionando uma compreensão mais evidente de como as práticas de benchmarking influenciam a sustentabilidade a longo prazo e a melhoria do desempenho. O estudo também examina a eficácia dos modelos de benchmarking existentes e propõe refinamentos adequados para a indústria do turismo em Portugal. Esta investigação fornece inputs baseados em evidências para os stakeholders de políticas, gestores de destinos e partes interessadas na indústria do turismo. Tem como objetivo promover o desenvolvimento sustentável do turismo, melhorar as práticas de benchmarking e aumentar a reputação global de Portugal como um destino turístico competitivo
Medication adherence and glycemic control in older adults with type 2 diabetes: a cross-sectional study in a community setting
No full textBackground/Objectives: Glycemic control is essential for preventing both short- and long-term complications of type 2 diabetes (T2D), requiring strict adherence to pharmacological therapy. Medication adherence directly influences therapeutic effectiveness, making its assessment in clinical practice crucial. This study aimed to evaluate medication adherence in elderly patients with T2D and its association with glycemic control. Methods: A descriptive cross-sectional study was conducted in the Algarve, Portugal, involving 133 elderly patients (≥60 years) with T2D. Cardiometabolic parameters and medication adherence (global, intentional, and unintentional) were assessed. Statistical analyses were performed using IBM SPSS Statistics 28.0. Results: The study population had a mean age of 71.7 ± 5.7 years, with a predominance of male participants (57.9%) and a high prevalence of dyslipidemia and/or hypertension. Cardiometabolic control was generally poor, with only 26.3% achieving blood pressure targets (≤140/90 mmHg), 8.5% maintaining fasting glycemia within the recommended range (70–110 mg/dL), and 13.6% attaining glycated hemoglobin (HbA1c) values ≤ 7%. Despite this, medication adherence was notably high (97.7%), with no significant association with cardiometabolic control (p > 0.05). Unintentional non-adherence behaviors, such as forgetfulness and inconsistent medication schedules, were the most frequently reported. Conclusions: Although elderly patients with T2D demonstrated high medication adherence rates, their cardiometabolic control remained suboptimal. Unintentional non-adherence behaviors may contribute to poor glycemic control. However, medication adherence alone does not fully explain these outcomes, highlighting the need to assess adherence to other self-care behaviors, particularly dietary and physical activity patterns. Future interventions should integrate comprehensive lifestyle modifications alongside pharmacological management to enhance overall disease control
A relação entre a meta-desumanização e a saúde mental geral: os papéis mediadores da auto-desumanização e da fusão cognitiva numa amostra da população LGB
No full textMembros da comunidade Lésbica, Gay e Bissexual (LGB) têm uma maior probabilidade de desenvolver problemas ao nível de saúde mental e uma pior qualidade de vida em comparação com a população heterossexual. A investigação sugere que o facto de pertencerem a uma minoria sexual representa per se um fator de risco para desenvolver patologias a nível da saúde. Este estudo pretender investigar se existe uma relação entre a meta-desumanização e a saúde mental geral, como também, analisar se a auto-desumanização e a fusão cognitiva podem ser mediadoras nesta relação. 162 participantes responderam a medidas de autorrelato dos construtos em estudo; 62 participantes identificados com o género feminino (42%), 81 participantes com o género masculino (50%) e 13 participantes como não binários (8%), com idades compreendidas entre os 19 e 54 anos de idade. As correlações de Pearson refletem correlações estatisticamente significantes e positivas entre as variáveis, como também, as análises de mediação sugerem que meta-desumanização é um preditor significativo da auto-desumanização, da fusão cognitiva e da saúde mental geral. Os resultados também sugerem que a auto-desumanização é um preditor da fusão cognitiva e esta, por sua vez, é um preditor da ansiedade e insónia, dos sintomas somáticos, da depressão grave, mas não do disfuncionamento social. Estes resultados sugerem que níveis elevados de meta-desumanização podem contribuir para uma pior saúde mental geral porque aumenta a vulnerabilidade dos membros desta comunidade à auto-desumanização e fusão cognitiva.Members of the Lesbian, Gay and Bisexual (LGB) community are more likely to develop mental health problems and have a worse quality of life when compared to the heterosexual population. Research suggests that belonging to a sexual minority represents per se a risk factor for developing health pathologies. This study aims to investigate whether there is a relationship between meta-dehumanization and general mental health, as well as to analyze whether self-dehumanization and cognitive fusion can be mediators in this relationship. 162 participants responded to self-report measures of the constructs under study; 62 participants identified as female (42%), 81 participants as male (50%) and 13 participants as non-binary (8%), aged between 19 and 54 years old. Pearson correlations reflect statistically significant and positive correlations between variables, and mediation analyses suggest that meta-dehumanization is a significant predictor of self dehumanization, cognitive fusion and general mental health. The results also suggest that self dehumanization is a predictor of cognitive fusion and this, in turn, is a predictor of anxiety and insomnia, somatic symptoms, severe depression, but not social dysfunction. These results suggest that high levels of meta-dehumanization may contribute to poorer overall mental health because it increases the vulnerability of members of this community to self dehumanization and cognitive fusion
Modelling aging in vitro using stem cells-derived cells
No full textO progresso científico e médico tem vindo a permitir ao ser humano viver para além da esperança média de vida. Com os novos conhecimentos, vão sendo desenvolvidos novos tratamentos e medicamentos que permitem à humanidade viver por mais anos – o aumento de estudos de doenças permitem curar ou retardar os efeitos destas mesmas doenças.
No entanto, daí advêm consequências, mais precisamente doenças relacionadas com a idade. Ainda que os seres humanos vivam mais anos, esta longevidade está associada, na maior parte dos casos, a uma má qualidade de vida e de saúde. As diferenças no processo do envelhecimento e as suas implicações no corpo humano podem ser o resultado de fatores genéticos, epigenéticos e ambientais, que terão impacto a nível celular, tais como senescência celular, alterações epigenéticas, perda da proteostase, desregulamentação na deteção de nutrientes, disfunção mitocondrial, instabilidade genómica, instabilidade nos telómeros, exaustão das células estaminais e alteração na comunicação intercelular.
Para futuramente estudar os mecanismos relacionados com a idade e para entender melhor os benefícios dos fatores anti-envelhecimento, foram estabelecidas, no ambiente do trabalho de Mestrado, Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells, que são células com propriedades de células estaminais embrionárias. Assim as células iPS têm a capacidade de diferenciação em qualquer tecido/célula adulta e servir como modelo celular in vitro para estudar o envelhecimento celular.
Neste projeto, propôs-se a reprogramação de células somáticas recolhidas de dadores com a Síndrome da Progeria Hutchison-Gilford (HGPS) para obter células iPS. O processo de reprogramação conduz as células somáticas a desdiferenciar até um estado de pluripotência, tal como as Células Estaminais Embrionárias humanas.
Assim, podemos ter um modelo de Células iPS que tiveram origem em células de doentes com Progeria, para serem depois utilizadas para outras experiências, tal como a diferenciação em cardiomiócitos ou neurónios, por exemplo. Nesse processo poderá ser visível como esta patologia afeta estas células específicas com o tempo, podendo também ser uma forma de observar como um tratamento poderia atrasar o processo de senescência, característico desta patologia.Scientific and medical progress has allowed human beings to live beyond average life expectancy. With new knowledge, new treatments and medicine are being developed that allow mankind to live for more years – the increase in illnesses related studies allow to heal or delay the effects of those same illnesses.
However, that causes consequences, in particular diseases related to aging. Despite human beings living longer, this longevity is, in most cases, associated with a bad quality of life and health. Differences in the process of aging and its implications in the human body can be the result of genetic, epigenetic and environmental factors, that will have an impact at the cellular level, such as cellular senescence, epigenetic changes, loss of proteostasis, deregulation of nutrient sensing, mitochondrial dysfunction, genomic instability, telomere attrition, stem cell exhaustion and altered intercellular communication.
To further study age-related mechanisms and to better understand the benefits of anti-aging factors, Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells were established, in the context of the Master degree work, which are cells with embryonic stem properties. Thus, the iPS cells have the capacity for differentiation in any tissue/adult cell and serve as in vitro cellular model to study aging.
In this project, it was proposed the reprogramming of somatic cells collected from donors with The Hutchison-Gilford Progeria Syndrome (HGPS) to obtain iPS cells. The reprogramming process takes somatic cells to dedifferentiate until a state of pluripotency, such as human Embryonic Stem (ES) Cells.
Thus, we can have a model of iPS cells that was originated in cells from patients with Progeria, to be used for other experiments, such as differentiation in cardiomyocytes or neurons, for example. In this process it can be visible how this pathology affects these specific cells over time and may also be a way of observing how a treatment could delay the senescence process, characteristic of this pathology
Company resilience in the european tourism industry: Evidence from the covid-19 pandemic
No full textWhat influences the ability of tourism companies to withstand and recover from disruptive events like pandemics or wars? How can these businesses strengthen their resilience? Why do some profitable companies collapse while others thrive in the face of adversity? The resilience of tourism firms to disruptive events is a critical but underexplored topic. This thesis addresses these critical questions by examining the determinants of company resilience, its dynamic mechanisms across resistance and recovery phases, and the distinct resilience drivers of profit-making and loss-making firms. Through a systematic literature review and the application of a proposed resilience index, our research provides a unified framework for future research, advancing theoretical understanding of company resilience in the tourism industry and providing insights for managers and policymakers in this sector. Findings from our review highlight the dynamic, idiosyncratic, interdisciplinary and context-dependent nature of resilience, with clear evidence that human capital plays a pivotal role in the tourism industry’s ability to remain resilient. Furthermore, the empirical studies identify the factors driving the resilience of these firms to COVID-19, suggesting that their effects differ across countries, resilience stages, and types of firms. The results further underscore the potential consequences of Eurozone membership in the resilience of tourism firms, providing valuable insights into future preparedness strategies and policies. Moreover, the results contribute to the resource-based view and dynamic capabilities perspective by demonstrating the impact of firm-level resources across crisis phases. Together, these studies provide a comprehensive understanding of the resilience mechanisms of tourism firms, expanding the current understanding of how these firms can enhance their resilience, bridging theory and practice. Finally, this thesis provides actionable insights for academics, policymakers, and managers, discussing theoretical and practical implications, as well as future research directions, ultimately contributing to build a more sustainable and enduring tourism industry.O conceito de resiliência empresarial é de crucial importância para compreender como as empresas reagem e resistem a eventos disruptivos, particularmente numa era de crescente incerteza global, marcada por tensões geopolíticas, inflação e instabilidade financeira (International Monetary Fund, 2023). Tais crises dão origem a custos económicos e sociais significativos, o que insta a que compreendamos como melhorar a resiliência destas empresas, de modo a reduzir esses custos e prepará-las para futuras disrupções (Bertschek et al., 2019). Este tema assume particular interesse na sequência de eventos altamente disruptivos para a economia mundial, como foi o caso da pandemia de COVID-19. Investigar este tópico no setor do turismo revela-se crucial por vários motivos. Em primeiro lugar, esta indústria é responsável por uma percentagem considerável do PIB e nível de emprego mundial (World Travel & Tourism Council, 2024). Em segundo lugar, o turismo é uma indústria particularmente vulnerável a eventos disruptivos (Chowdhury et al., 2019; Espiner & Becken, 2014; Prayag et al., 2020), o que reforça a necessidade de aumentar a resiliência das empresas deste setor. A recente pandemia ilustrou vividamente essa vulnerabilidade, causando reduções severas nos fluxos internacionais e no PIB do setor (World Tourism Organization, 2021). A recuperação tem sido mais lenta do que seria expectável. De facto, apenas quatro anos após o início da pandemia é que os níveis de turismo foram totalmente recuperados (UNWTO, 2024b, 2025). Estes desafios reafirmam a importância de identificar e compreender os processos e fatores que contribuem para a resiliência neste setor. A estes desafios, acresce que o setor do turismo foi gravemente afetado em surtos anteriores de síndrome respiratória aguda grave (SARS), enquanto outros setores foram significativamente menos afetados (M.-H. Chen et al., 2007; Zeng et al., 2005). Alguns estudos demonstram que várias empresas do setor do turismo possuem níveis de resiliência insuficientes (Wieczorek-Kosmala, 2022), e que se consideram menos resilientes do que empresas de outros setores (Ntounis et al., 2022). Por fim, alguns estudos revelam também que as empresas de turismo reagem de forma diferente aos mesmos eventos disruptivos. Isto é evidenciado, por exemplo, no estudo do setor de alojamento de Pongtanalert e Assarut (2022), que detalha os diferentes mecanismos
usados por pequenas empresas para sobreviver ao impacto da pandemia. Estando particularmente dependente da mobilidade (Archanskaia et al., 2023), este setor é bastante suscetível a choques externos que afetem severamente a continuidade das suas operações (Bharwani & Mathews, 2012; Dimitrić et al., 2019; Dogru et al., 2023; Vivel-Búa et al.,
2019). Além disso, as medidas de resposta à pandemia, como as medidas de confinamento, distanciamento social e restrições de mobilidade, impactaram significativamente o desempenho das empresas deste setor (S. Lee et al., 2024), motivo pelo qual este trabalho de investigação se debruça especificamente sobre este subsetor. Contudo, importa frisar que a resiliência empresarial está muito para além de uma tendência recente: trata-se de um tópico de investigação intemporal e indispensável. A teoria demonstra que desenvolver resiliência é vital não apenas para a sobrevivência das empresas, mas também para a criação e manutenção de vantagens competitivas (Vogus & Sutcliffe, 2007). Esta conclusão reforça a necessidade de implementar estratégias de desenvolvimento da resiliência empresarial mesmo em períodos de aparente estabilidade. Embora a resiliência no turismo continue pouco explorada, é cada vez mais reconhecida como um processo multidisciplinar e dinâmico (Amaral & Da Rocha, 2023; Brown et al., 2017; Hall et al., 2023; W. Liu et al., 2024; Wided, 2022). Os seus determinantes variam consoante o contexto, o tipo de disrupção e as características das empresas (Amaral & Da
Rocha, 2023; Orchiston et al., 2016; Sobaih et al., 2021). Assim, as organizações adotam diferentes estratégias de resiliência ao longo de uma crise (A. V. Lee et al., 2013), consoante a sua capacidade de recolha de informação e adaptação vai evoluindo (S. X. Chen et al., 2022). Um estudo posterior conduzido por Amaral e Da Rocha (2023) ilustra bem o modo como as pequenas empresas familiares no setor do turismo recorrem a diversas estratégias, emoções e capacidades ao longo da progressão da pandemia. Coletivamente, estes estudos descrevem a resiliência como um processo dinâmico e idiossincrático, caracterizado por uma interação complexa de recursos, competências e estratégias que evoluem ao longo das diferentes fases da disrupção (Amaral & Da Rocha, 2023; Biggs et al., 2012, 2015; S. X. Chen et al., 2022; Hoang et al., 2021; Jawed et al., 2021; S. Lee et al., 2024; Usher et al., 2019). No entanto, apesar do crescente interesse no tema da resiliência empresarial, a literatura
existente tende a privilegiar o estudo da resiliência regional em detrimento das dinâmicas empresariais, tratando frequentemente a resiliência como um atributo estático, em vez de um processo dinâmico e idiossincrático. Deste modo, esta tese procura colmatar estas lacunas, explorando os determinantes, os mecanismos e as implicações da resiliência
empresarial em empresas do setor do turismo. Assim, os principais objetivos desta investigação são três. Primeiro, a atenção é
direcionada para os determinantes da resiliência empresarial nas empresas do setor do turismo, com particular enfoque no papel crítico dos fatores ao nível da empresa. Segundo, é abordada a natureza dinâmica da resiliência, com modelos direcionados às suas fases principais: resistência e recuperação. Destaca-se particularmente a forma como as características de cada empresa influenciam a sua resiliência de forma distinta em cada uma destas fases. Por fim, esta tese explora em detalhe os fatores que influenciam a resiliência de empresas rentáveis e não rentáveis, identificando os mecanismos
específicos que cada tipo de empresa pode utilizar a seu favor. Estes objetivos são repartidos por três artigos científicos distintos, mas interrelacionados, cada um contribuindo com perspetivas teóricas e práticas sobre a resiliência destas empresas. O primeiro artigo visa desenvolver um referencial teórico unificado para estudar a resiliência empresarial. Aplicando este quadro ao setor do turismo, o estudo procura identificar os determinantes da resiliência empresarial evidenciados na literatura, por forma a identificar que características influenciam a resiliência das empresas que operam
neste setor. O segundo artigo explora a necessidade de métricas que possam ser utilizadas para medir a resiliência no setor do turismo, propondo uma adaptação de um índice de resiliência regional ao contexto empresarial. A aplicação desta métrica permite identificar, de modo empírico, os fatores que influenciaram a resiliência de empresas de alojamento à
pandemia de COVID-19. Dada a perspetiva estática da maioria dos estudos existentes, o terceiro artigo desta tese
explora a natureza dinâmica da resiliência e as idiossincrasias entre empresas rentáveis e não rentáveis. Para tal, índice de resiliência proposto no segundo artigo é decomposto em índices de resistência e recuperação. Através da aplicação destes índices, o artigo procura identificar os papéis distintos das características empresariais ao longo das duas fases da
resiliência, com o objetivo de identificar se a rentabilidade impacta a resiliência das empresas no setor do turismo e se o seu papel é distinto nas duas fases da resiliência. Em conjunto, estes artigos oferecem uma perspetiva holística da resiliência no setor do turismo, colmatando importantes lacunas teóricas e práticas, com contribuições teóricas e práticas significativas. Ao identificar os fatores que impulsionam a resiliência, propor uma métrica de resiliência empresarial e explorar os mecanismos dinâmicos da resiliência, esta investigação abre caminho para um setor do turismo mais resiliente, capaz de enfrentar futuras disrupções e promover a sustentabilidade a longo prazo.This work was financed by National Funds provided by the FCT - Foundation for Science and Technology, within the Ministry of Education, Science and Innovation, via the State Budget, through the Studentship for Doctoral Research with the reference UIBD/152309/2021 (DOI:https://doi.org/10.54499/UI/BD/152309/2021) and under the project UIDB/04020/2020 (DOI: https://doi.org/10.54499/UIDB/04020/2020)
Desenvolvimento e otimização de bombons de alfarroba
No full textA indústria alimentar é um setor de extrema importância por todo o mundo, pelo que se destaca a necessidade de inovação com novos produtos e reinvenção dos já existentes. A alfarroba, fruto colhido da espécie Ceratonia siliqua L., tem vindo a destacar-se em várias indústrias, incluindo a alimentar, como potencial substituto ao cacau. A presente dissertação, foi desenvolvida no âmbito de um estágio e teve como objetivo desenvolver e caracterizar bombons de alfarroba com recheio semilíquido. Os bombons foram desenvolvidos com a mesma formulação de cobertura e recheio, variando as condições de produção. Os bombons foram avaliados em termos de dimensões, cor, textura, atividade da água, presença de fat bloom e características sensoriais. Com base nos resultados obtidos, verificou-se que os bombons desenvolvidos apresentaram um diâmetro de cerca de 31 mm e uma altura entre 11 e 12 mm. Em relação à cor, os bombons apresentaram valores de luminosidade (L*) inferiores a 50, com os parâmetros a* e b* a variarem entre 1,5 e 3. Quanto à textura todos os bombons demonstraram uma dureza entre 1400 e 1500 g.f. A atividade da água do recheio e da cobertura foi bastante baixa com valores de 0,300 e 0,360, respetivamente. Verificou-se o aparecimento de fat bloom em algumas amostras, nomeadamente na amostra T2. Relativamente à análise sensorial, o painel de provadores demonstrou uma ligeira preferência pelo bombom com recheio (amostra 2), particularmente no sabor, no sabor a amêndoa e na apreciação global. Em síntese, foram recolhidos todos os dados necessários para, doravante, otimizar o protocolo e adaptar a produção à escala industrial.The food industry is an extremely important sector all over the world, so there is a need to innovate with new products and reinvent existing ones. Carob, the fruit harvested from the Ceratonia siliqua L. species, has been gaining prominence in various industries, including the food industry, as a potential substitute for cocoa. The aim of this internship project was to develop and characterize carob bonbons with a semi-liquid filling. The bonbons were developed with the same coating and filling
formulation, varying the production conditions. The bonbons were evaluated in terms of their dimensions, color, texture, water activity, fat bloom and sensory analysis.
The results showed that the bonbons developed had a diameter of around 31 mm and a height of between 11-12 mm. The bonbons had a luminosity (L*) of less than 50 and the a* and b* parameters varied between 1.5 and 3. In terms of texture, all the bonbons had a hardness of between 1400 and 1500 g.f. The water activity of the filling and topping used for the developed bonbons was quite low with values of 0.300 and 0.360 respectively. Fat bloom appeared in some samples, particularly in sample T2. The panel of tasters slightly preferred the filled bonbon (sample 2) in terms of taste, almond flavor and overall appreciation. In short, all the data needed to optimize the protocol and adapt production to an industrial scale has been collected
Study of BUB1 functions in the neurodevelopment
No full textBudding uninhibited by benzimidazole 1 (BUB1) is a kinase protein essential for proper chromosome segregation. Recently, we identified two biallelic BUB1 mutations linked to primary microcephaly, a rare condition causing reduced head size. The transmission pattern of BUB1’s individuals was consistent with the Autosomal Recessive Primary Microcephaly 30 (MCPH30).
The present thesis aimed to understand how the BUB1 protein functions during human neurodevelopment, and how, when affected, it leads to microcephaly. We successfully generated a new induced pluripotent stem cells (iPSCs) line from patient 2’s fibroblasts. Two clones - clone 4 (C4) and clone 7 (C7) - were characterised by standard norms. Both showed pluripotency and the ability to differentiate in cells from all germ layers. However, while C4 had a diploid karyotype, C7 held trisomy on chromosome 8. To evaluate BUB1’s role in neurodevelopment, wild-type iPSCs were differentiated in neuro progenitor cells (NPCs) and then submitted to differentiation and maturation steps. Our findings reveal that when NPCs were treated with the BUB1 inhibitor drug, BAY1816032, they could not eliminate the signal for the main substrate of the BUB1 kinase, the phosphorylation on H2A-T120 (pH2A-T120), as demonstrated in somatic cells. However, pH2A-T120 levels on forebrain cells were sensible to BAY1816032. These cells hold several morphological modifications. In addition, diploid C4 iPSCs were differentiated into NPCs. However, C4-NPCs exhibited poor stability under multipotent conditions. Additionally, C4-forebrain cells also displayed morphological changes. Previous lab results showed that BAY1816032-treatment induced microcephaly in chicken embryos. However, our preliminary study revealed that microcephalic size depends on the developmental stage.
This project successfully developed a new cell line for studying BUB1, made available to the community (Ferreira et al., 2024). And, despite preliminary, our overall results support BUB1's crucial role in NPCs maintenance and proper forebrain neurodevelopment.As células passam por um processo denominado ciclo celular para se multiplicarem, isto é, para que se possam dividir em duas células semelhantes, ou para se diferenciarem, ou seja, gerarem duas células específicas para cada tecido, as quais podem ser iguais ou não. O ciclo celular é subdividido em fases, a passagem e o progresso entre estas é verificado por maquinaria molecular específica de modo a garantir a correta divisão dos cromossomas. Na presença de um incorreto alinhamento destes, é ativo o SAC, do inglês Spindle Assembly Checkpoint. A cináse Budding uninhibited by benzimidazole 1 (BUB1) foi descoberta e primeiramente associada a funções do SAC.
Mutações bi-alélicas do gene BUB1 foram identificadas em dois indivíduos com microcefalia primária, entre outras características. Microcefalia é uma condição congénita caracterizada por uma redução do tamanho da cabeça face ao controlo. Embora as funções do BUB1 durante o ciclo celular têm vindo a ser muito estudadas, não há literatura publicada sob as suas funções no contexto neuronal e qual a relação com a microcefalia. Esta tese teve como principal objetivo estudar o papel da BUB1 durante o neuro-desenvolvimento humano e como a sua disfunção está relacionada com microcefalia.
Considerando que o mesmo nunca foi analisado previamente no laboratório, o nosso primeiro passo foi gerar novos modelos de estudo. Para isso, gerámos com sucesso uma nova linha de células estaminais pluripotentes induzidas a partir de fibroblastos da pele do paciente número 2, utilizando fatores estabelecidos como essenciais para a pluripotência durante a sua reprogramação (fatores Yamanaka). Dois clones – clone 4 (C4) e clone 7 (C7) – foram caracterizados segundo as normas estabelecidas pela Sociedade Internacional para a Investigação em Células Estaminais: quanto à sua pluripotência, a sua capacidade de gerar células das três camadas germinativas e ainda o seu cariótipo de modo a verificar que a reprogramação não alterou número de cromossomas. Ambos os clones demonstraram pluripotência e capacidade de diferenciação em células da endoderme, mesoderme e ectoderme. Relativamente ao cariótipo, o C4 apresentou um cariótipo diploide, ou seja, um número normal de cromossomas, enquanto todas as células do C7 revelaram-se aneuploides, com uma cópia extra do cromossoma 8. Esta linha pode no futuro ser utilizada para estudar este tipo de trissomia, e a sua dependência no BUB1.
A segunda parte deste trabalho teve como objetivo avaliar o papel de BUB1 durante o neuro-desenvolvimento. Para isso, células estaminais pluripotentes induzidas de um indivíduo controlo foram diferenciadas em células progenitoras neuronais e submetidas a processos de diferenciação e maturação, otimizando o protocolo. Estas células foram tratadas com um composto que inibe a atividade cináse de BUB1 (BAY1816032), durante diferentes fases do processo. Sabe-se que o tratamento de células somáticas, fibroblastos, com BAY1816032 impede o processo de fosforilação na treonina 120 na histona H2A (pH2A-T120) pela proteína BUB1. Porém, em condições de multipotência, células progenitoras neuronais tratadas com BAY1816032 mantiveram alguma fosforilação, cerca de 20%. Este resultado sugere que nas células progenitoras neuronais esta fosforilação pode não ser provocada apenas pela proteína BUB1, ou que, estas células não são tão sensíveis como as células somáticas. No entanto, células do prosencéfalo (células progenitoras neuronais diferenciadas e maturadas) mostraram-se sensíveis ao tratamento com BAY1816032, não apresentando sinais de pH2A-T120 e sofrendo diversas alterações morfológicas.
Para caracterizar a população neuronal, utilizamos dois marcadores, um para neurónios (TUJ1) e outro para astrócitos (GFAP). Foi nos possível observar que em ambas as populações existiam células com diferentes níveis de pH2A-T120. Após quatro semanas de maturação, as células neuronais que apresentavam altos níveis de fosforilação, ao serem tratadas com BAY1816032, passaram a evidenciar pH2A-T120 a níveis residuais. Indicando que, consoante o estadio da diferenciação neuronal, BUB1 apresenta diferentes sensibilidades, sendo bastante mais sensível durante a fase da maturação que na fase de multipotência; este resultado sugere também que esta fosforilação é totalmente dependente de BUB1 nestas células. Quando BAY1816032 foi adicionado durante um longo período (10 dias) durante a maturação, a população neuronal apresentou mudanças evidentes tais como: uma maior quantidade de mais curtas ramificações e uma maior taxa de morte celular, que a condição controlo (em DMSO). Depois de otimizado, este protocolo foi aplicado nas células estaminais pluripotentes induzidas geradas do paciente 2 (C4), a fim de analisar como é que a anormal atividade cinase de BUB1, causada pelas mutações bialélicas, influencia o processo de diferenciação neuronal. Estas células foram igualmente induzidas a células progenitoras neuronais, que por sua vez demonstraram uma fraca estabilidade em condições de multipotência e uma diferenciação precoce comparando com as células controlo. Ao encontro do resultado anterior, células controlo tratadas com BAY1816032, as células do prosencéfalo derivadas de C4 também exibiram alterações morfológicas, apresentando mais agregados celulares e uma menor percentagem de neurónios maturos, sugerindo um aumento de células da glia, como astrócitos. Ao analisar preliminarmente os níveis de expressão de marcadores neuronais e gliais, verificou-se que os resultados foram concordantes entre si, indicando que as células neuronais derivadas do C4 apresentavam um aumento da expressão do principal marcador de astrócitos, GFAP, em comparação com células controlo.
A terceira parte deste trabalho consistiu em usar o mesmo inibidor, BAY1816032, em embriões de galinhas durante o seu desenvolvimento neuronal. Resultados anteriores do laboratório demonstraram que a injeção de BAY1816032 no tubo neural após 51 horas de incubação induziu microcefalia em embriões de galinha nos estadios HH18/HH19. Neste trabalho conduzimos o mesmo protocolo, mas analisamos os estadios HH16/HH17, no qual se concluiu que não havia diferença. Isto sugere que a severidade da microcefalia depende do estadio de desenvolvimento. Esta observação vai ao encontro do resultado obtido anteriormente quando o inibidor foi utilizado em diferentes fazes de diferenciação neuronal de células controlo (em que células maduras são mais sensíveis a BAY1816032 que células multipotentes).
Em sumário, este projeto permitiu o desenvolvimento de uma nova linha celular para o estudo de BUB1, disponibilizada à comunidade científica (Ferreira et al., 2024), e que, apesar de preliminares, os nossos resultados apoiam a hipótese de que o BUB1 desempenha um papel crucial na manutenção das células progenitoras neuronais e num adequado neuro desenvolvimento do prosencéfalo
"Telalternativas", de Junia Barreto e Telmo Fadul (orgs.)
No full textÉ a noção mesma de tela enquanto suporte para expressão humana que é posta em questão na coletânea Telalternativas organizada por Junia Barreto e Telmo Fadul. Esse volume é o resultado do encontro “Entre TELAAS”, organizado pelo Núcleo TELAA (Telas Eletrônicas, Literatura & Artes Audiovisuais), da Universidade de Brasília, em dezembro de 2016, reunindo acadêmicos e agentes das artes e da cultura para discutir o papel das telas no contexto atual. Os vários textos aí reunidos debruçam-se sobre a multiplicação da noção de tela na contemporaneidade. Das paredes da caverna ou placas de madeiras e pelas páginas de papel, passando pelas transformações do final do século XIX e ao longo do século XX, com as imagens em movimento, em que se viu nascer a tela do cinema assim como seus desdobramentos pelos meios eletrônicos como a televisão e o vídeo.info:eu-repo/semantics/publishedVersio