Biotecnia (E-Journal)
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Degradación simultánea de compuestos fenólicos bajo condiciones desnitrificantes en un reactor UASB provisto con carbón activado granular
This work studied the removal capacity of a mixture of phenolic compounds (phenol, p-cresol, o-cresol) by denitrification; in addition, the effect of granular activated carbon (GAC) in the process carried out in UASB (up-flow anaerobic sludge blanket) reactors. The organic load was increased from 450 to 3250 mg C L-1d-1 by adjusting the HRT from 2 to 0.25 d in the reactor with GAC and the control reactor without GAC. The removal efficiencies of phenolic compounds increased as the organic load increased, obtaining values from 89.7 % to 95.5 % in the reactor without GAC and 95.8 % to 99.1 % in the reactor with GAC. The nitrate removal in the reactor with GAC reached 79.3 % to 98.0 % efficiencies, while the control obtained 64.8 % to 96.9 %. Finally, the maximum capacities of GAC were evaluated by adsorption isotherms, obtaining the following values (mg g-1): 164.6 for o-cresol, 134.5 for p-cresol, 110.7 for phenol, and 44.4 for nitrate. The results show the capacity of a denitrification process to remove a mixture of phenolic compounds. In addition, the reactor with GAC increased the removal efficiency of all compounds.El presente trabajo, estudió la capacidad de eliminación de una mezcla de compuestos fenólicos (phenol, p-cresol, o-cresol) por vía desnitrificante; además, el efecto del carbón activado granular (CAG) en el proceso realizado en reactores UASB (up-flow anaerobic sludge blanket). La carga orgánica se fue incrementando de 450 a 3250 mg C L-1d-1, mediante el ajuste del TRH de 2 to 0.25 d en el reactor con CAG y en el reactor control sin CAG. Las eficiencias de eliminación de los compuestos fenólicos aumentaron a medida que se incrementó la carga orgánica, obteniéndose valores del 89.7 % al 95.5 % en el reactor sin CAG, y del 95.8 al 99.1 % en el reactor con CAG. Para la eliminación de nitrato, el reactor con CAG alcanzó eficiencias de 79.3 % a 98.0 %, mientras que el control obtuvo 64.8 % a 96.9 %. Finalmente, se evaluaron las capacidades máximas del CAG mediante isotermas de ad[1]sorción, obteniéndose los siguientes valores (mg g-1): 164.6 para o-cresol, 134.5 para p-cresol, 110.7 para fenol y 44.4 para nitrato. Los resultados muestran la capacidad de un proceso desnitrificante de eliminar simultáneamente una mezcla de compuestos fenólicos, además, se observó que el CAG incrementó la eficiencia eliminación de todos los compuestos
La tubería de comandos Not-alike3 encuentra blancos genómicos para el diagnóstico molecular de enfermedades causadas por microorganismos patógenos
DNA-based molecular techniques are crucial for the precise identification of microorganisms. Despite their speed and sensitivity, specificity hinges on primer or probe design. The search for unique sequences in organisms’ genomes has various applications such as microorganism identification. There are published bioinformatic tools that employ the concept of in silico genomic subtractive hybridization analysis to identify species-specific/unique regions within a genome of interest. However, they use deprecated tools and program[1]ming languages that are not currently used in bioinformatics, some of them are specialized or difficult to obtain because the repositories, where these tools were hosted, are not public or the web servers are currently down. To address these issues, we implemented the in silico genomic subtractive hybridization idea in a user-friendly, open-source, freely available, easy-to-install command pipeline application written in Python (called Not-alike3). We designed PCR primers over the sequence of unique regions identified in the genomes of two Mucorales species, Rhizopus oryzae and Cuninghamlla bertholletiae, employing Not-alike3 command pipeline; we made specificity tests to challenge these primers and we observed that they were species-specific.Las técnicas moleculares basadas en ADN son cruciales para la identificación correcta de microorganismos. A pesar de su velocidad y sensibilidad, la especificidad depende en el diseño de la sonda o el primer de PCR. La búsqueda por secuencias únicas en gnomas de organismos tiene varias aplicaciones como la misma identificación de microorganismos. Existen herramientas bioinformáticas publicadas que emplean el concepto de hibridación genómica sustractiva in silico para la identificación de regiones únicas o específicas de especie dentro de un genoma de interés. Sin embargo, éstas usan herramientas desactualizadas y/o lenguajes de programación que actualmente no son usados en el área de la bioinformática, otras herramientas son muy especializadas o son difíciles de obtener debido a que los repositorios (acervos) donde se hospedan las herramientas no son públicas o están apagados actualmente. Para abordar estos problemas, implementamos el concepto de hibridación genómica sustractiva in silico en una tubería de comandos escrita en Python que es amigable, de código abierto, gratis y fácil de instalar (llamada Not-alike3). Adicionalmente, diseñamos primers de PCR utilizando como molde la secuencia de regiones únicas identificadas en los genomas de dos especies de Mucorales, Rhizopus oryzae y Cuninghamella bertholletiae empleando la tubería Not-alike3, después realizamos evaluaciones de especificidad para desafiar esos primers que diseñamos y observamos que dichos primers fueron específicos de especie
Percepción y conocimiento de los agricultores sobre el manejo sostenible de plagas en una comunidad indígena, Salasaka, Ecuador
The agrarian tradition of Salasaka in Ecuador is characterized by its ancestral heritage. However, the use of chemical inputs and the monoculture have led to a decline in productive capacity. This study evaluated the perception of Salasaka farmers regarding the use of chemical pesticides and their knowledge of sustainable agricultural pest management strategies. A cross-sectional study was conducted using a structured questionnaire applied to agricultural producers from the Manguihua Cochapamba Katitawa Community (Salasaka parish). The results showed that 60 % of farmers believe pesticides are effective for rapid pest and disease control, as well as for increasing productivity and stimulating plant growth. However, farmers also perceive negative aspects such as high cost (73.3 %), potential harm during handling (46.7 %), and environmental damage (73.3 %). Despite a high proportion of farmers claiming to know about sustainable pest control alternatives, only a small percentage use them. This highlights the need for the development and implementation of training programs to demonstrate the potential of sustainable pest control practices.La tradición agraria de Salasaka en Ecuador está caracterizada por su herencia ancestral, sin embargo, el uso de insumos químicos y el monocultivo han provocado disminución de la capacidad productiva. En el presente estudio se evaluó la percepción de los agricultores de Salasaka con relación al uso de plaguicidas químicos, además de su conocimiento sobre las estrategias de manejo sustentable de plagas agrícolas. Se realizó un estudio transversal mediante el uso de un cuestionario estructurado aplicado a productores agrícolas de la Comunidad Manguihua Cochapamba Katitawa (parroquia Salasaka). Los resultados demostraron que el 60 % de los agricultores considera que los plaguicidas son eficaces para el control de plagas y enfermedades, de manera rápida, y además aumentan la productividad y estimulan el crecimiento de las plantas. Sin embargo, los agricultores también perciben aspectos negativos como el alto costo (73,3 %), el daño potencial al manipularlos (46,7 %) y causar daño al ambiente (73,3 %). A pesar de que una alta proporción de los agricultores dijo conocer sobre alternativas sustentables de control de plagas, un bajo porcentaje las utiliza. Esto pone en evidencia la necesidad del desarrollo e implementación de capacitaciones que muestren la potencialidad de las prácticas sustentables de control de plagas
Recuperación de un aditivo para carne de cerdo a partir de Pleurotus ostreatus cultivado en residuos agroindustriales
This study aims to evaluate the polyphenol content and antioxidant activity of Pleurotus ostreatus grown in different agroindustrial wastes (wheat straw partially replaced with spent coffee grounds and potato peel) and its potential as an additive to increase the oxidative stability of a meat product subjected to thermal-treatment and in vitro gastrointestinal digestion. The bioactive compounds were obtained from the dried mushroom powder by ultrasound, using water as an extraction solvent. The extract was subjected to evaluation of polyphenol content and antioxidant activity. In addition, pork meat homogenates were antioxidant treated (mushroom extract and synthetic antioxidant), stored (65 °C for 120 min), and subjected to in vitro gastrointestinal digestion for oxidative stability evaluation. Results demonstrated that the type of substrate used to produce P. ostreatus affects (p < 0.05) the polyphenol content and antioxidant activity. In addition, the incorporation of the aqueous extract of P. ostreatus cultivated with agroindustrial waste reduced (p < 0.05) changes in the pH values, lipid oxidation, and color of meat samples. While, the presence of phenolic compounds (tannins, phenols, flavonoids, and chlorogenic acid) and the antioxidant activity (antiradical activity and reducing power) increased (p < 0.05) in the meat samples during in vitro gastrointestinal digestion. P. ostreatus can be considered a novel additive for the meat industry.Este estudio tiene como objetivo evaluar el contenido de polifenoles y la actividad antioxidante de Pleurotus ostreatus cultivado en diferentes residuos agroindustriales (paja de trigo parcialmente reemplazada por granos de café gastados y cáscara de papa) y su potencial como aditivo para aumentar la estabilidad oxidativa de un producto cárnico sometido a tratamiento térmico y digestión gastrointestinal in vitro. Los compuestos bioactivos se obtuvieron a partir de la harina de hongo seco mediante ultrasonido, utilizando agua como disolvente de extracción. El extracto fue sometido a evaluación del contenido de polifenoles y actividad antioxidante. Además, los homogenizados de carne de cerdo se trataron con antioxidantes (extracto de hongo y antioxidante sintético), se almacenaron (65 °C durante 120 min) y se sometieron a digestión gastrointestinal in vitro para evaluar la estabilidad oxidativa. Los resultados demostraron que el tipo de sustrato utilizado para producir P. ostreatus afectó (p < 0.05) el contenido de polifenoles y la actividad antioxidante. Además, la incorporación del extracto acuoso de P. ostreatus cultivado con residuos agroindustriales redujo (p < 0.05) los cambios en los valores de pH, oxidación de lípidos y color de las muestras de carne. Mientras que, la presencia de compuestos fenólicos (taninos, fenoles, flavonoides y ácido clorogénico) y la actividad antioxidante (actividad antirradicalaria y poder reductor) aumentaron (p < 0.05) en las muestras de carne durante la digestión gastrointestinal in vitro. P. ostreatus puede considerarse un aditivo novedoso para la industria cárnica
Efecto de los extractos herbales comerciales Tetrayou® y Feed Ad® sobre la supervivencia del camarón blanco del Pacífico, Penaeus vannamei, expuesto a una cepa patogénica de Vibrio parahaemolyticus-AHPND
Acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND) is the most critical shrimp disease due to the economic losses registered worldwide. Herbal remedy is one of the most important eco-friendly strategies due to its content of natural bioactive compounds than can act against bacterial diseases. In the present study, organisms of P. vannamei were challenged with a strain of V. parahaemolyticus-AHPND. A simple experimental design was performed to compare the survival rate among five different commercial herbal extracts concentrations of Tetrayou® and Feed Ad® against a control treatment. Gross observation and histopathology were carried out on moribund organisms. Significant differences were observed (p<0.05) where organisms fed with T5 (400 mg Tetrayou®/Kg of commercial feed + 1g Feed Ad®/Kg of commercial feed), showed the highest survival value (73 ± 5.8%) in comparison to the rest of experimental treatments. Gross observation showed the characteristic signs of AHPND which were supported by histopathological analysis. It was concluded that Tetrayou® and Feed Ad® are suitable products to enhance the survival rate of P. vannamei when exposed to AHPND.La enfermedad de la necrosis aguda del hepatopáncreas (AHPND) es la enfermedad emergente más crítica en la camaronicultura debido a las pérdidas económicas que se han presentado a nivel mundial. Una de las estrategias ecológicamente amigables para el tratamiento de enfermedades en acuacultura es la utilización de los compuestos herbales debido a su gran contenido de compuestos bioactivos con efecto antimicrobiano. En este estudio, se evaluó la supervivencia de P. vannamei ante una cepa de V. parhaemolyticus-AHPND. Se llevó a cabo un diseño experimental simple para comparar la tasa de supervivencia de los organismos de P. vannamei alimentados con cinco diferentes concentraciones de los productos herbales Tetrayou® y Feed Ad® contra un tratamiento control. Adicionalmente, se realizaron análisis en fresco, así como análisis histológico de rutina. Al final del experimento, se observaron diferencias significativas (p<0.05) donde el tratamiento T5 (400 mg Tetrayou®/Kg de alimento + 1g Feed Ad®/Kg de alimento) mostró el mayor valor de supervivencia (73 ± 5.8%). La observación en fresco mostró el daño característico de AHPND, los cuales fueron respaldados por histopatología. Se concluye que Tetrayou® y Feed Ad® son productos efectivos que pueden ser utilizados para ayudar a incrementar la supervivencia de P. vannamei ante AHPND
Influencia del uso de levaduras en la fermentación de la pulpa de café sobre su calidad aromática y sensorial
Coffee processing generates by-products, mainly coffee pulp, which represents 45 - 50 % of the weight of the fruit. There is interest in using this by-product in food formulation since it contains bioactive compounds with potential health benefits. A S. cerevisiae strain was studied to ferment coffee pulp and evaluate its impact on the volatile fraction, physicochemical composition, and sensory quality. Four treatments were studied: natural dry and submerged fermentation (FN, FNS), and fermentation with dry and submerged S. cerevisiae (L1, L1S). Volatile organic compounds (VOCs) were identified by HS-SPME-GC-FID; caffeine and chlorogenic acids were quantified by HPLC, and a sensory analysis was performed. Seventy-one VOCs distributed in 13 chemical families were identified; treatment L1 presented the highest concentration of VOCs with fruity and pleasant notes; FN was distinguished by its herbal notes. All treatments presented similar concentrations of polyphenols and chlorogenic acids. The infusion of treatment L1 presented sensory notes of hibiscus and tamarind that were corroborated by identifying linalool, geraniol, benzaldehyde, (z)-3-hexenal and ץ-undecalactone. Using a starter culture like S. cerevisiae is a promising alternative to improve the sensory quality of coffee pulp beverages and increase its commercial value.El procesamiento del café genera subproductos principal mente la pulpa de café que representa un 45 - 50 % del peso del fruto. Existe interés para utilizar este subproducto en la formulación de alimentos ya que contiene compuestos bioactivos con potencial beneficio en la salud. Se estudió una cepa de S. cerevisiae para fermenter pulpa de café y evaluar su impacto sobre la fracción volatil, la composición fisicoquímica y su calidad sensorial. Se estudiaron cuatro tratamientos: fermentación natural seca y sumergida (FN, FNS) y fermentación con S. cerevisiae seca y sumergida (L1, L1S). Se identificaron los compuestos orgánicos volatiles (VOC’s) por HS-SPME-GC-FID; se cuantificaron la cafeína, los ácidos clorogénicos y se realizó un análisis sensorial. Se identificaron 71 VOC’s distribuídos en 13 familias químicas; el tratamiento L1 presentó la mayor concentración VOC’s con notas afrutadas y agradables, la FN destacó por sus notas herbales. Todos los tratamientos presentan concentraciones similares de polifenoles y ácidos clorogénicos. La infusion del tratamiento L1 presentó notas sensoriales a jamaica y tamarindo que se corroboró con la identificación de linalool, geraniol, benzaldehído, (z)-3-hexenal y la ץ-undecalactona. El uso de cultivos iniciadores como S. cerevisiae es una alternativa prometedora para mejorar la calidad sensorial de la bebida de pulpa de café y aumentar su valor comercial
Caracterización del genoma completo y análisis de microsatélites mediante un enfoque in silico en pavos domésticos (Meleagris gallopavo)
Turkey (Meleagris gallopavo) is the second largest contributor in poultry meat production after chickens. The study of microsatellite organization and distribution is of highly important in genomics and evolutionary students. The in silico mining for microsatellites leverages the power of computational biology to streamline and enhance the discovery of microsatellite markers, and reduce the cost of microsatellite detection. This study aimed at in silico mining microsatellite loci in the genome of domestic turkey. Reference sequences of the different chromosome obtained from NBCI and analyzed using Krait software. Chromosome 4 had the highest number of perfect microsatellites, while chromosome 18 had the lowest. However, chromosome 27 had the highest relative abundance, followed by chromosome. Chromosome 18 again had the lowest relative abundance. For imperfect microsatellites, chromosome 4 had the most imperfect microsatellites and chromosome 18 had the least. A total of 121248 SSR primers were designed. These SSR loci and markers will be instrumental for linkage mapping and significantly improve research on turkey population genetics.El pavo doméstico (Meleagris gallopavo) es el segundo mayor contribuyente a la producción de carne de aves de corral, después de los pollos. El estudio de la organización y distribución de microsatélites es muy importante en los estudios genómicos y evolutivos. La minería in silico de microsatélites aprovecha el poder de la biología computacional para agilizar, mejorar el descubrimiento de marcadores de microsatélites y reducir el costo de la detección de microsatélites. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la minería in silico de loci de microsatélites en el genoma del pavo doméstico. Se obtuvieron secuencias de referencia de varios cromosomas de NBCI y se analizaron utilizando el software Krait. El cromosoma 4 tuvo el mayor número de microsatélites perfectos, mientras que el cromosoma 18 tuvo el menor número. Sin embargo, el cromosoma 27 tuvo la mayor abundancia relativa, seguido por el cromosoma 13. El cromosoma 18 nuevamente tuvo la menor abundancia relativa. El cromosoma 4 tuvo la mayor cantidad de microsatélites imperfectos y el cromosoma 18 tuvo la menor cantidad. Se diseñaron un total de 121.248 cebadores de microsatélites. Estos loci y marcadores microsatélites desempeñarán un papel importante en el mapeo de ligamiento y mejorarán significativamente la investigación sobre la genética del pavo
La correlación entre la fuerza de los isquiotibiales nórdicos y el rendimiento en agilidad y velocidad en atletas nacionales de bádminton
The purpose of this research was to determine the connection between Nordic hamstring power, and agility and speed performance among Turkish national badminton players. The study included 11 male and 6 female national badminton players. The hamstring muscle power of the athletes was measured using the H-Bord machine. Additionally, agility performance was evaluated using the Agility T-Test, and the 10-meter sprint performance was measured using an electronic photocell. An analysis of the study findings revealed a statistically significant difference between NHTecc(a) and NHTecc(b) hamstring muscle strength, and the T-test and 10-meter sprint scores in terms of the gender variable. Furthermore, a strong negative correlation was observed between participants’ NHTecc(a) and NHTecc(b) leg strength and their T-test performance. Supporting this finding, a negative correlation was also identified between NHTecc(a) and NHTecc(b) leg power and 10-meter sprint performance. In conclusion, this research analyzed the effects of Nordic hamstring strength on agility and speed performance in badminton athletes and identified a strong negative correlation between these variables. In this context, it is suggested that training programs aimed at improving eccentric muscle strength may help optimize agility and speed performance, particularly in the sport of badminton.El propósito de esta investigación es determinar la conexión entre la potencia de los isquiotibiales nórdicos y el rendimiento en agilidad y velocidad entre los jugadores nacionales turcos de bádminton. En el estudio participaron 11 jugadores y 6 jugadoras nacionales de bádminton. La fuerza de los músculos isquiotibiales de los atletas se midió utilizando la máquina H-Bord. Además, el rendimiento en agilidad se evaluó utilizando la prueba T de agilidad, y el rendimiento en sprint de 10 m se midió utilizando una fotocélula electrónica. Un análisis de los resultados del estudio reveló una diferencia estadísticamente significativa entre la fuerza muscular isquiotibial NİPecc(a) y NİPecc(b) y las puntuaciones de la prueba T y del sprint de 10 m en cuanto a la variable de género. En conclusión, esta investigación analizó los efectos de la fuerza de los isquiotibiales nórdicos en el rendimiento de agilidad y velocidad en atletas de bádminton e identificó una fuerte correlación negativa entre estas variables. En este contexto, se sugiere que los programas de entrenamiento dirigidos a mejorar la fuerza muscular excéntrica pueden ayudar a optimizar el rendimiento en agilidad y velocidad, particularmente en el deporte del bádminton
Actividad de enzimas de biosíntesis de almidón y su asociación con la modificación del endospermo en maíz de calidad proteínica
The formation of vitreous endosperm in quality protein maize (QPM) is associated with changes in the composition and structure of starch granules, but little is known about the role of alterations in the structure and activity of the main starch biosynthetic enzymes. Developing endosperms from K0326Y-QPM, W64Ao2, and derived recombinant inbred lines were used to analyze the activity of ADP-glucose pyrophosphorylase (AGPase), granule-bound starch synthase (GBSS), starch-branching enzyme (SBE) and pullulanase (PULL). GBSS activity correlated positively with kernel vitreousness and the opposite was observed for SBE. SBEIIb enzymes from K0326Y-QPM and W64Ao2 differed in five amino acids. Three amino acid changes appear to affect the SBEIIb catalytic site, which may be responsible for the lower activity and amylopectin content in vitreous lines. However, recombinant SBEIIb enzymes produced in Escherichia coli showed similar activities. The results suggest that endosperm modification in QPM is associated with changes in the activity of starch biosynthetic enzymes, which affect the starch composition, physicochemical and structural properties during endosperm development. The higher activity of GBSS and the lower activity of SBE produce starch granules with larger proportions of amylose and amorphous regions, favoring a greater compaction between these structures, contributing to the vitreous phenotype in QPM.La formación del endospermo vítreo en el maíz de calidad proteínica (QPM) está asociado con cambios en la composición y estructura de gránulos de almidón, pero se conoce poco acerca del papel de alteraciones en la estructura y actividad de las principales enzimas biosintéticas. Endospermos en desarrollo de K0326Y-QPM, W64Ao2 y líneas recombinantes puras derivadas se utilizaron para analizar la actividad de ADP-glucosa pirofosforilasa (AGPasa), almidón sintasa unida al gránulo (GBSS), enzima ramificadora de almidón (SBE) y pululanasa (PULL). La actividad de GBSS correlación positivamente con la vitrosidad del grano y lo opuesto se observó para SBE. Las enzimas SBEIIb de K0326Y-QPM and W64Ao2 difieren cinco aminoácidos. Tres de los cambios de aminoácidos parecen afectar el sitio catalítico de SBEIIb, lo cual podría ser responsable de la menor actividad y contenido de amilopectina en líneas vítreas. Sin embargo, enzimas SBEIIb recombinantes producidas en Escherichia coli mostraron actividades similares. Los resultados sugieren que la modificación del endospermo en QPM está asociada con cambios en la actividad de enzimas de síntesis de almidón, lo cual afecta la composición, propiedades fisicoquímicas y estructurales del almidón durante el desarrollo del endospermo. La mayor actividad de GBSS y la menor actividad de SBE produce gránulos de almidón con mayor proporción de amilosa y regiones amorfas, favoreciendo una mayor compactación entre estas estructuras, contribuyendo al fenotipo vítreo en QPM
Efecto de Bacillus subtilis ANT01 sobre la severidad de sigatoka negra en plátano “macho” (Musa balbisiana)
The Black Sigatoka (BS) is a disease caused by the fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet, the main risk for plantain production. Conventionally, chemical fungicides are sprayed, which generates negative impacts on the environment and non-target organisms. Biological alternatives have been sought to control BS, and strains of the Bacillus genus have shown potential, ranking between 25 % and 33.6 % of biocontrol. Additionally, extracts from various plants have also shown potential for the control of BS and one of these is the mixture of clove (Sysygium aromaticum) and garlic (Allium sativum) extracts with 35 % of efficiency. The objective of this work was to determine the effect of injecting Bacillus subtilis in the vascular system of “macho” banana plants, on the severity of BS. The most effective treatment involved foliar spraying of garlic and clove extracts along with injection ofBacillus subtilis ANT01 (108 CFU mL-1) every 14 d, since reduced BS severity by 58.1 % compared to only spray the mixture of clove and garlic extracts.La Sigatoka Negra (SN) es causada por el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet, principal enfermedad en la producción de bananos y plátanos. Convencionalmente se aplican fungicidas químicos (prinipalmente mancozeb y clorotalonil), lo cual genera impacto negativo en el ambiente y organismos vivos no blanco. Se han buscado alternativas de biocontrol de la SN, donde ha resaltado el potencial del género Bacillus, con eficiencias de biocontrol de la SN entre 25 % y 33.6 %. Adicionalmente, algunos extractos vegetales como la mezcla de extracto de clavo (Zysygium aromaticum) y ajo (Allium sativum) mostraron 35 % de efectividad. El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la inyección de Bacillus subtilis ANT01 en el sistema vascular de plantas de plátano “Macho” (Musa balbisiana, var. Chifle) sobre la severidad de la SN. El tratamiento más efectivo fue la aspersión foliar de extracto de ajo y clavo con Bacillus subtilis ANT01 (108 UFC mL-1) inyectado cada 14 d, ya que redujo la severidad en 58.1 % comparado con solamente asperjar los extractos de clavo y ajo