University of Zagreb
Repository of Faculty of Pharmacy and Biochemistry University of ZgrebNot a member yet
2946 research outputs found
Sort by
Novel pharmacotherapy possibilities for treatment of infections caused by ESKAPE pathogens
Antibiotici su nam godinama služili kao dragocjeno oružje u borbi s bakterijskim infekcijama i u
današnje doba teško je zamisliti život bez njih. Visoka učestalost višestrukorezistentnih sojeva
bakterija, s naglaskom na patogene okrunjene akronimom ESKAPE, i otežan razvoj novih
antibiotika značajno ograničavaju mogućnosti u terapiji bakterijskih infekcija i često dovode do
nepovoljnih kliničkih ishoda. Osim zbog neadekvatne mogućnosti osiguranja zdravlja različitih
skupina pacijenata, ove su infekcije i financijski teret za zdravstvo. Problem je prisutan na globalnoj
razini i nužno je što brže djelovanje u razvoju lijekova s drukčijim mehanizmima djelovanja. Pojava
višestrukorezistentnih sojeva predstavlja veliku opasnost u zdravstvenom sustavu, što se posebice
odnosi na pacijente već narušenog zdravlja koji ovakve infekcije najčešće steknu boravkom u
ustanovama povezanim sa zdravstvenom skrbi. Kako bismo si osigurali dovoljno vremena za
istraživanje novih terapijskih opcija za sprječavanje i liječenje bakterijskih infekcija, moramo se
fokusirati na očuvanje učinkovitosti postojećih antibiotika. Iako mnoge alternative antibioticima
pokazuju potencijal u rješavanju gorućeg problema antimikrobne rezistencije, u ovom trenutku i
dalje nemamo ništa konkretno, stoga nam ne preostaje ništa osim ulagati više napora u bazična i
klinička istraživanjaFor decades antibiotics have served as a valuable weapon in the fight against bacterial infections
which is why it is impossible to imagine a world without them. However, increasing incidence of
MDR strains, especially pathogens summarised by acronym ESKAPE, along with challenges in
development of new antibiotics, all contribute to significant limitations in antimicrobial therapies
which often result in unwanted clinical outcomes. Besides inadequate care for various groups of
patients, these infections act as a financial burden to healthcare systems. The problem is present
across the globe and it is important to act quicker when it comes to development of new drugs with
different acting mechanisms. The MDR phenomenon presents a serious threat to healthcare systems,
which is particularly important for patients with pre-existing comorbidity who are usually the most
prone to these types of pathogens by residing in various health care facilities. Although alternatives
to antibiotics demonstrate some potential in resolving antimicrobial resistance, we do not have a
conclusive solution which is why it is important to invest more effort into basic and clinical trials
Lipidni nanosustavi za primjenu lijekova na kožu
CILJ ISTRAŽIVANJA: Cilj ovog specijalističkog rada je bio sistematizirano prikazati
dosadašnja istraživanja i najnovije spoznaje u području razvoja biokompatibilnih i
birazgradljivih lipidnih nanosustava za unaprjeđenje (trans)dermalne dostave lijekova.
MATERIJALI I METODE: Istraživanja u okviru ovog specijalističkog rada su bila teorijskog
karaktera te su uključivala detaljan pregled dostupne novije znanstvene literature (unatrag 5
godina) u području razvoja lipidnih terapijskih nanosustava za (trans)dermalnu primjenu
lijekova. Pretraživane su bibliografske baze podataka: PubMed, ScienceDirect i Scopus, uz
primjenu ključnih riječi povezanih s temom istraživanja.
REZULTATI: Lipidni nanosustavi su uvelike istraživani za liječenje brojnih kožnih oboljenja,
u antimikrobnoj terapiji, fotodinamskoj terapiji prekanceroznih tvorbi, dermalnoj dostavi
antitumorskih lijekova, imunosupresiva, liječenju kožne lišmanioze i zacjeljivanju rana. Osim
toga, ispitivani su i za transdermalnu dostavu hormona (inzulin), cjepiva, antihipertenziva,
antilipemika, lijekova za liječenje osteoporoze, gihta i nesteroidnih protuupalnih lijekova.
Brojna pretklinička i klinička istraživanja su dokazala bolju podnošljivost i veću uspješnost
lipidnih nanosustava od konvencionalnih dermalnih farmaceutskih oblika u liječenju brojnih
bolesti.
ZAKLJUČAK: Primjenom lipidnih nanoformulacija lijekova koje poboljšavaju
bioraspoloživost lijeka i omogućuju njegovu kontroliranu dostavu u oboljelo područje, uz
smanjenje neželjenih nuspojava i iritacija, značajno bi se unaprijedila postojeća terapija i
kvaliteta života pacijenata. Brojna istraživanja su dokazala veliki potencijal lipidnih
nanosustava u liječenju mnogih bolesti, veću učinkovitost i smanjenje nuspojava u odnosu na
konvencionalnu terapiju, a određeni broj dermalnih lijekova na bazi lipidnih nanosustava je i
komercijalno dostupan.OBJECTIVES: The aim of this thesis was to systematize the previous research and the latest
knowledge in development of biocompatible and biodegradable lipid-based nanosystems for
advanced (trans)dermal drug delivery.
MATERIALS AND METHODS: The research within this specialist thesis was of a
theoretical nature and included a detailed review of available recent scientific literature (last 5
years) in the field of development of lipid therapeutic nanosystems for (trans)dermal
application of drugs. Bibliographic databases: PubMed, ScienceDirect and Scopus were
searched, using keywords related to the research topic.
RESULTS: Lipid-based nanosystems have been widely investigated for the treatment of
numerous skin diseases, in antimicrobial therapy, photodynamic therapy of precancerous
formations, dermal delivery of antitumor drugs, immunosuppressants, treatment of cutaneous
leishmaniasis and wound healing. In addition, they were investigated for transdermal delivery
of hormones (insulin), vaccines, antihypertensives, antilipemics, drugs for the treatment of
osteoporosis, gout and non-steroidal anti-inflammatory drugs. Numerous preclinical and
clinical studies have proven better tolerability and greater success of lipid-based nanosystems
in the treatment of numerous diseases.
CONCLUSION: The use of lipid-based nanoformulations that can increase the poor
bioavailability of the drug and enable its controlled delivery to the diseased area, while
reducing unwanted side effects and irritations, would significantly improve the existing therapy
and the quality of patients’ life. Numerous studies have proven the great potential of lipid-based
nanosystems in the treatment of many diseases, greater efficiency and reduction of side effects
compared to conventional therapy, and a certain number of products based on lipid-based
nanosystems are also commercially available
Regulativni okvir i klinička ispitivanja pedijatrijskih lijekova u Europskoj uniji
Cilj istraživanja: Cilj rada bio je pružiti pregled Uredbe o lijekovima za pedijatrijsku upotrebu u Europskoj uniji i njenog utjecaja na pedijatrijska klinička ispitivanja i na dostupnost lijekova za djecu te opisati regulativne okvire kliničkih ispitivanja u pedijatrijskoj populaciji.
Materijali i metode: Pri izradi rada pretraživane su mrežne stranice Europske agencije za lijekove (engl. European Medicines Agency, EMA), baze podataka, znanstvene publikacije (Pub Med) te je detaljno bila pregledana Uredba o lijekovima za pedijatrijsku upotrebu u Europskoj Uniji.
Rezultati: Rad pruža sveobuhvatni pregled regulativnih okvira lijekova za pedijatrijsku primjenu i kliničkih ispitivanja u pedijatrijskog populaciji. Detaljno je analizirana Uredba (EZ) br. 1901/2006 o lijekovima za pedijatrijsku upotrebu u Europskoj uniji te specifičnosti kliničkih ispitivanja kod djece, s posebnim naglaskom na zaštitu prava djece kao posebno ugrožene skupine potencijalnih ispitanika u kliničkim ispitivanjima.
Zaključak: Tijekom posljednja dva desetljeća učinjeni su značajni koraci u poboljšanju dostupnosti i sigurnosti lijekova za djecu unutar Europske unije. Ključnu ulogu u tome imala je Uredba (EZ) br. 1901/2006 o lijekovima za pedijatrijsku upotrebu iz 2007. godine koja uspostavlja okvir obaveza i sustava poticaja za farmaceutske tvrtke kako bi se potaknuo razvoj lijekova za djecu te poboljšala dostupnost informacija o upotrebi lijekova u pedijatrijskoj populaciji. Provedba Uredbe rezultirala je porastom pedijatrijskih ispitivanja i novoodobrenih lijekova za pedijatrijsku upotrebu. Iako je vidljiv napredak u razvoju pedijatrijskih lijekova nakon uvođenja Uredbe, još uvijek postoje izazovi i područja za poboljšanje kako bi se unaprijedio razvoj pedijatrijskih lijekova i zadovoljile terapijske potrebe djece.Objectives: The objective of the paper was to provide an overview of the Regulation on medicines for pediatric use in the European Union and its impact on pediatric clinical trials and the availability of medicines for children, as well as to describe the regulatory framework of clinical trials in the pediatric population.
Materials and Methods: During the preparation of the paper, the website of European Medicines Agency (EMA), databases and scientific publications (Pub Med) were searched, and the Regulation on medicines for pediatric use in the European Union was reviewed in detail.
Results: This paper provides a comprehensive overview of the regulatory framework of medicines for pediatric use and clinical trials in the pediatric population. Regulation (EC) no. 1901/2006 on medicinal products for pediatric use in the European Union has been described in details, as well as the specifics of clinical trials in children, paying attention to the protection of children's rights as a particularly vulnerable group of potential participants in clinical trials.
Conclusion: Over the past two decades, significant efforts have been made in improving the availability and safety of medicines for children within the European Union. A key role represented the Regulation (EC) no. 1901/2006 on medicines for pediatric use from 2007, which established a framework of obligations and incentives for pharmaceutical companies to encourage the development of medicines for children and to improve the availability of information on the use of medicines in the pediatric population. The implementation of the Regulation resulted in an increase in pediatric trials and newly approved drugs for pediatric use. Although there is a notable progress in the development of pediatric medicines after the introduction of the Regulation, there are still challenges and areas for improvement to advance the development of pediatric medicines and meet the therapeutic needs of children
imunorekonstitucijska terapija; multipla skleroza; indukcijska terapija; eskalacijska terapija
Cilj istraživanja: Cilj ovog rada je pregledom dostupne i relevantne literature istražiti koje su
to imunorekonstitucijske terapije te njihove mehanizme djelovanja u liječenju multiple
skleroze, istražiti pozicioniranje ove terapije u algoritmu liječenja multiple skleroze te prednosti
i nedostatke u odnosu na druge postojeće terapije za određeni profil bolesnika.
Materijali i metode: Pri izradi ovog preglednog rada napravljen je sustavni pregled relevantne
znanstvene i stručne literature s naglaskom na znanstvene članke s podacima iz svakodnevne
kliničke prakse i službene smjernice hrvatskih i svjetskih stručnih društava. Tijekom
istraživanja korištene su ključne riječi i pojmovi MS treatment algorithm, immune
reconstitution therapy in MS, induction therapy, escalation therapy, mechanism of action for
immune reconstitution therapy (IRT) in MS, disease – modifying therapies (DMTs), smjernice
za liječenja multiple skleroze.
Rezultati: Imunorekonstitucijska terapija je jedna od mogućnosti liječenja multiple skleroze,
čiji se mehanizam djelovanja temelji na redukciji, repopulaciji i rekonstituciji imunološkog
sustava, aplicira se u kratkom vremenskom intervalu, a učinci koje postiže u liječenju MS su
dugoročni. Dio je eskalacijskog i indukcijskog pristupa liječenju te se može sekvencijalno
aplicirati. Uz visoku učinkovitost IRT karakteriziraju nuspojave kao što su odgođena
sekundarna autoimunost, limfopenije i herpes zoster. Prema preporukama spomenutim u ovom
radu, najviše koristi od primjene IRT u liječenju MS imat će bolesnice koje planiraju trudnoću,
bolesnici koji imaju agresivan početak bolesti te sami žele jednu od ovih terapija jer tako
zahtjeva njihov životni stil.
Zaključak: Iako imaju različite mehanizme djelovanja, IRT dovode do kvalitativnih i
kvantitativnih promjena u stanicama imunološkog sustava te time djeluju na smanjenje
aktivnosti MS. U algoritmu liječenja RRMS IRT se primjenjuje nakon progresije bolesti unatoč
liječenju nekom od DMT umjerene učinkovitosti (eskalacijski pristup) ili odmah po
postavljanju dijagnoze visoko aktivne bolesti s lošim prognostičkim faktorima (indukcijski
pristup). IRT su vrijedna visokoučinkovita terapijska opcija liječenja MS, mogu se sekvencijski
aplicirati, potrebno je dugoročno pratiti pacijente kako bi se smanjio rizik od nastanka
nuspojava. Ne postoje usporedne studije učinkovitosti isigurnosti ovih terapija,stoga su podatci
iz svakodnevne kliničke prakse iznimno vrijedni te su potrebne dodatne retrospektivne studije
kako bi se bolje odredile sličnosti i razlike ovih terapija.Objectives: The aim of this review paper is to investigate definition of immune reconstitution
therapies and their mechanisms of action in the of multiple sclerosis treatment, to investigate
the positioning of this therapy in the multiple sclerosis treatment algorithm and the advantages
and disadvantages versus other existing therapies for a specific patient profile, by reviewing the
available and relevant literature.
Materials and methods: During the preparation of this review paper, a systematic and
retrospective review of the relevant scientific and professional literature was made,
emphasizing scientific articles with real world evidence and official guidelines of Croatian and
international professional societies. During the research, key words and terms were used: MS
treatment algorithm, immune reconstitution therapy in MS, induction therapy, escalation
therapy, mechanism of action for immune reconstitution therapy (IRT) in MS, disease –
modifying therapies (DMTs), guidelines for the treatment of multiple sclerosis.
Results: Immune reconstitution therapy is one of the treatment options for multiple sclerosis,
which mechanism of action is based on the reduction, repopulation, and reconstitution of the
immune system, it is applied in a short time interval but achieves long-term efficacy. It is part
of the escalation and induction treatment approach and can be administered sequentially. In
addition to high efficacy, IRT is characterized by side effects such as delayed secondary
autoimmunity, lymphopenia, and herpes zoster. According to the recommendations mentioned
in this paper, the most benefit from the use of IRT in the treatment of MS will have patients
who plan to become pregnant, patients who have an aggressive onset of the disease and want
one of these therapies because their lifestyle demands it.
Conclusion: Despite different mechanisms of action, IRT leads to qualitative and quantitative
changes in the cells of the immune system. In the RRMS treatment algorithm, IRT is applied
after disease progression despite treatment with one of the moderately effective DMTs
(escalation approach) or immediately after the diagnosis of highly active disease with poor
prognostic factors (induction approach). IRTs are a valuable highly effective therapeutic option
for the MS treatment, they can be applied sequentially, it requires long term patient monitoring
to reduce the risk of side effects. There are no efficacy and safety comparative studies, therefore
data from daily clinical practice are extremely valuable and additional retrospective studies are
needed to determine the similarities and differences between these therapies
Psihološki aspekti i adherencija pacijenata s atopijskim dermatitisom u primjeni lokalne terapije
Cilj istraživanja
Cilj je specijalističkog rada opisati složenost terapijskog pristupa atopijskom dermatitisu, kroničnoj recidivirajućoj upalnoj bolesti kože, u čijem tijeku liječenja važnu ulogu imaju psihološki aspekti bolesti, koji utječu na adherenciju pacijenta.
Materijali i metode
Za potrebe izrade ovog teorijsko-specijalističkog rada pretražene su baze podataka znanstvenih radova, znanstveni izvori i mrežne stranice sa srodnom tematikom.
Rezultati
Psihološka i socijalna podrška, suočavanje s psihološkim izazovima, izbjegavanje čimbenika pogoršanja bolesti, pravilna njega kože i edukacija bolesnika temelj su liječenja i adekvatne adherencije bolesnika.
Zaključak
Multidisciplinaran pristup liječenju atopijskog dermatitisa, adekvatna skrb i edukacija pacijenata imaju važnu ulogu u poboljšanju adherencije pacijenata u liječenju atopijskog dermatitisa lokalnom terapijom i psihosocijalnom doživljaju same bolesti.Research goal
The aim of this specialist paper is to describe the complexity of the treatment approach to atopic dermatitis, a chronic recurrent inflammatory disease of the skin, in the course of which the psychological aspects of the disease that affect the patient's adherence play a significant role.
Materials and methods
For the purposes of writing this theoretical thesis, scientific paper databases, scientific sources and web pages with related topics were searched.
Results
Psychological and social support, coping with psychological challenges, avoiding factors that aggravate the disease, proper skin care and patient education are the basis of treatment and adequate patient adherence.
Conclusion
A multidisciplinary approach to the treatment of atopic dermatitis, adequate care and education of patients play an important role in improving patient adherence in the treatment of local atopic dermatitis and the psychosocial experience of the disease itself
Content of total polyphenols, flavonoids and antioxidant activity of Globularia alypum L., G. cordifolia L., G. meridionalis (Podp.) O. Schwarz and G. punctata Lapeyr.
Najviše istražena vrsta roda Globularia L. (Plantaginaceae Juss.) je Globularia alypum L.,
aromatična i ljekovita biljka koja se uvelike koristi zbog svojih terapeutskih učinaka te ima široku
tradicionalnu primjenu u liječenju mnogih bolesti. U ovom radu istražen je sadržaj ukupnih
polifenola i flavonoida te antioksidativni učinak metanolnih ekstrakata nadzemnih dijelova vrsta G.
alypum, G. cordifolia L., G. meridionalis (Podp.) O. Schwarz i G. punctata Lapeyr. Korištene su
četiri in vitro metode određivanja antioksidativne aktivnosti: test keliranja metala te FRAP, ABTS i
DPPH testovi. Vrsta G. alypum sadržavala je najveću količinu polifenola (109,39 ± 5,94 mg
ekvivalenta galne kiseline/g suhog ekstrakta), a vrsta G. punctata najveću količinu flavonoida (31,80
± 0,10 mg ekvivalenta kvercetina/g suhog ekstrakta). Sve istražene vrste pokazale su antioksidativnu
aktivnost u provedenim testovima. Antioksidativni učinak procijenjen testom keliranja metala bio je
najveći za vrstu G. meridionalis (2,73 ± 0,04 mg ekvivalenta EDTA/g suhog ekstrakta), a najmanji
za vrstu G. alypum (1,10 ± 0,04 mg ekvivalenta EDTA/g suhog ekstrakta). U svim ostalim testovima
navedena je vrsta pokazala najveću antioksidativnu aktivnost (FRAP: 247,45 26,84 mg
ekvivalenta troloksa (ET)/g suhog ekstrakta (SE); ABTS: 152,45 3,56 mg ET/g SE; DPPH: 204,48
7,24 mg ET/g SE). Dobiveni rezultati upućuju na to da vrsta G. alypum može poslužiti kao
potencijalni izvor prirodnih antioksidansa što promiče njenu medicinsku uporabu.The most researched species of the genus Globularia L. (Plantaginaceae Juss.) is Globularia alypum
L., an aromatic and medicinal plant that is widely utilized for its therapeutic effects and has a broad
range of traditional uses in the treatment of various diseases. In this work the content of total
polyphenols and flavonoids, as well as the antioxidant effect of methanolic extracts from aerial parts
of G. alypum, G. cordifolia L., G. meridionalis (Podp.) O. Schwarz, and G. punctata Lapeyr. were
investigated. Four in vitro methods were used to determine the antioxidant activity: metal chelating
assay as well as FRAP, ABTS, and DPPH assays. Globularia alypum had the highest amount of
polyphenols (109.39 ± 5.94 mg gallic acid equivalent/g dry extract), while G. punctata had the
highest amount of flavonoids (31.80 ± 0.10 mg quercetin equivalent/g dry extract). All studied
species showed antioxidant activity in the conducted assays. The antioxidant effect assessed by the
metal chelating assay was highest for G. meridionalis (2.73 ± 0.04 mg EDTA equivalent/g dry
extract) and lowest for G. alypum (1.10 ± 0.04 mg EDTA equivalent/g dry extract). In all other
assays the latter species showed the highest antioxidant activity (FRAP: 247.45 ± 26.84 mg Trolox
equivalent (TE)/g dry extract (DE); ABTS: 152.45 ± 3.56 mg TE/g DE; DPPH: 204.48 ± 7.24 mg
TE/g DE). Obtained results indicate that G. alypum could serve as a potential source of natural
antioxidants, which promotes its medicinal use
Bakuchiol as a functional retinoid analog: biological effects and formulations
Bakuchiol je prenilirani fenolni monoterpen ekstrahiran iz ploda Cullen corylifolium L., koji pripada porodici biljaka Fabaceae (Leguminosae). Bakuchiol je odobren u zemljama Europske unije kao sigurna komponenta kozmetičkih proizvoda. Cosmetic ingredient database Europske komisije (CosIng) preporučuje ga za upotrebu kao sastojak s antimikrobnim, antioksidativnim i emulgirajućim svojstvima. Najnovije preporuke vezane uz kozmetičku primjenu predstavljaju bakuchiol kao fitoalternativu retinolu, s potencijalno puno višom razinom sigurnosti prilikom uporabe. Ovaj spoj, poput retinola i njegovih derivata, može se naširoko koristiti u dermatologiji i njezi kože za sprječavanje nastanka bora, akni i hiperpigmentacije kože. Iako retinol i bakuchiol ne pokazuju strukturne sličnosti, imaju sličan profil ekspresije gena, posebno u nekim ključnim genima i proteinima uključenima u procese starenja kože. Kako se tržište proizvoda za prevenciju i regresiju (foto)starenja kože koji se izdaju bez recepta kontinuirano širi, želja za proizvodima sličnim retinoidima, ali s boljim profilom nuspojava, raste. Bakuchiol ima nekoliko značajnih prednosti u odnosu na retinol, uključujući izvrsnu fotokemijsku i hidrolitičku stabilnost, dobar sigurnosni profil i lakoću formuliranja zbog mogućnosti miješanja s velikim brojem emolijensa i solubilizatora. Također, bakuchiol se može koristiti u dnevnoj njezi kože zbog svoje fotostabilnosti.Bakuchiol is a prenylated phenolic monoterpene extracted from the fruit of Cullen corylifolium L., which belongs to the plant family Fabaceae (Leguminosae). Bakuchiol is approved in the European Union as a safe component of cosmetic products. The cosmetic ingredient database of the European Commission (CosIng) recommends its use as an ingredient with antimicrobial, antioxidant and emulsifying properties. The latest recommendations related to cosmetic application present bakuchiol as a phytoalternative to retinol, with a potentially much higher level of safety when used. This compound, like retinol and its derivatives, can be widely used in dermatology and skin care to prevent wrinkles, acne and hyperpigmentation. Although retinol and bakuchiol do not show structural similarities, they have similar gene expression profiles, especially in particular key genes and proteins involved in skin aging. As the market for over-the-counter anti-aging products continues to expand, the demand for products similar to retinoids, but with a better side effect profile, is growing. Bakuchiol has several significant advantages over retinol, including excellent photochemical and hydrolytic stability, a good safety profile, and ease of formulation due to its ability to be mixed with a wide variety of emollients and solubilizers. Moreover, due to its photostability, bakuchiol can be used during the daytime
Verification of hematology POCT device Sysmex XP 300
Kod uvođenja novog analizatora ili nove metode u rutinski rad potrebno je prethodno provesti validaciju ili verifikaciju
uređaja. Najčešće je potrebno napraviti samo verifikaciju kojoj je prethodila tvornička validacija koju je proveo
proizvođač, a verifikacijom se potvrđuju specifikacije koje je naveo proizvođač u deklaraciji. Za provođenje verifikacije
potrebno je osmisliti verifikacijski protokol i postaviti kriterije prihvatljivosti. Karakteristike koje se ispituju
verifikacijom najčešće su one koje je ispitao i sam proizvođač: preciznost, točnost, linearnost, usporedivost, carryover,
mjerna nesigurnost. POCT analizatori su uređaji koji se koriste na odjelima bolnice, domovima zdravlja, u ambulantama.
Analize se provode izvan medicinsko biokemijskog laboratorija, operateri su najčešće liječnici, medicinske sestre,
tehničari i sami pacijenti. Kod implementacije POCT analizatora potrebno je obratiti posebnu pažnju na edukaciju
osoblja koje radi analize, redovnu provedbu kontrole kvalitete i uspostavu komunikacije između medicinskih
biokemičara u laboratoriju i osoblja koje radi na analizatoru. POCT uređaji imaju veliku važnost na onkološkim i
hematološkim odjelima bolnice. Budući da se radi o pacijentima koji često moraju boraviti u bolnici radi praćenja tijeka
bolesti i terapije POCT hematološki analizatori idealno su rješenje za tu svrhu. Skraćenje TAT-a skraćuje vrijeme
boravka pacijenata u bolnici i olakšava liječnicima donošenje odluka. Cilj ovog rada bio je verificirati hematološki
analizator Sysmex XP 300 na odjelu hematologije u KBC-u Zagreb u svrhu njegova korištenja kao POCT uređaja.
Verifikacijski protokol osmišljen je za ispitivanje preciznosti, istinitosti, linearnosti i carryover-a. Kriteriji prihvatljivosti
definirani su prema deklaraciji proizvođača i EFLM smjernicama. Analizator je pokazao izvrsno slaganje s dobivenim
vrijednostima koje je definirao proizvođač. Prema EFLM smjernicama nisu bili zadovoljeni kriteriji prihvatljivosti za
računske parametre (MCH, MCHC i MPV). Usporedbom s laboratorijskim analizatorom Sysmex XN 1000 dobivena je
zadovoljavajuća korelacija između dvaju analizatora. Provedena verifikacija potvrdila je tehničke specifikacije
proizvođača te se analizator može koristiti u rutinskom radu.Every new analyzer or method needs to be validated or verified before being used in routine practice. Verification is
often necessary after the manufacturer's validation. It confirms the manufacturer's stated specifications. To conduct
verification, a verification protocol and acceptance criteria need to be established. The characteristics tested during
verification are usually those tested by the manufacturer, such as precision, accuracy, linearity, comparability, carryover,
and measurement uncertainty. POCT analyzers are devices that are used in hospital departments, health centers and
clinics. Analyzers are used outside the medical biochemical laboratory, the operators are usually doctors, nurses,
technicians and patients themselves. When implementing a POCT analyzer, it's important to focus on operator education,
regular quality control, and communication between the medical biochemists in the laboratory and the personnel working
with the analyzer. POCT devices are especially important in oncology and hematology departments where they help
monitor the course of diseases and therapies. POCT hematology analyzers are particularly useful for patients who need
frequent monitoring, reducing their time in the hospital and aiding doctors in making decisions more quickly. The aim
of this study was to verify the hematology POCT analyzer Sysmex XP 300 at the hematology department at UHC
Zagreb. A verification protocol was created to test precision, trueness, linearity, and carryover. Acceptance criteria were
defined based on the manufacturer's declaration and EFLM Biological Variation Database. The analyzer showed
excellent agreement with the values defined by the manufacturer. However, the acceptance criteria for certain parameters
(MCH, MCHC, and MPV) were not met according to the EFLM Biological Variation Database. Comparison of the
results with the Sysmex XN 1000 laboratory analyzer showed a satisfactory correlation. The verification confirmed the
manufacturer's technical specifications, allowing the analyzer to be used in routine practice
Determination of essential oil content and composition in cardamom (Elettaria cardamomum (L.) Maton)
Kardamom (Elettaria cardamomum (L.) Maton) je aromatična, zeljasta trajnica koja pripada porodici đumbirovki (Zingiberaceae). Plodovi kardamoma cijenjeni su i naširoko korišteni kao začin i aroma u hrani i napitcima no poznato je i njihovo blagotvorno djelovanje na zdravlje. Ljekarnička droga Cardamomi fructus (Cardamomi semen) ima dugu povijest primjene u Ajurvedi, tradicionalnoj indijskoj medicini, gdje se koristi uglavnom u liječenju gastrointestinalnih i respiratornih tegoba. Ljekovito djelovanje kardamoma temelji se poglavito na sadržaju eteričnog ulja no, s obzirom da se radi o egzotičnoj i relativno skupoj biljnoj drogi te da je njeno farmakološko i kliničko djelovanje još uvijek nedovoljno istraženo, u suvremenoj europskoj fitoterapiji rijetko se koristi. U okviru ovog diplomskog rada provedena je fitokemijska analiza temeljena na određivanju sadržaja i sastava eteričnog ulja u osam komercijalno dostupnih uzoraka kardamomovog ploda s hrvatskog tržišta. Farmakopejskom metodom destilacije pomoću vodene pare utvrđeno je da uzorci biljne droge dostupni u obliku praha sadrže 4-40 mL eteričnog ulja/kg, dok je udio eteričnog ulja u in toto plodovima bio značajno viši i kretao se u rasponu 44-56 mL eteričnog ulja/kg. Analiza provedena metodom plinske kromatografije spregnute s tandemskom spektrometrijom masa (GC-MS/MS) pokazala je da su glavne sastavnice eteričnog ulja kardamoma α-terpinil acetat (35,99-62,28 %) i 1,8-cineol (0,24-30,62 %). Među ostalim manje zastupljenim spojevima ističu se α-terpineol (2,18-16,75 %), linalol (0,81-7,25 %) i sabinen (0-3,76 %). Dobiveni rezultati upućuju na značajne razlike u sadržaju i sastavu eteričnog ulja kao glavog pokazatelja kakvoće kardamomovog ploda i nositelja ljekovitog djelovanja te ističu superiorniju farmaceutsku kakvoću cjelovite droge u odnosu na onu komercijalno dostupnu u obliku praha.Cardamom (Elettaria cardamomum (L.) Maton) is an aromatic, herbaceous perennial, plant belonging to the ginger family (Zingiberaceae). Cardamom fruits are valued and widely used as a spice and aroma in food and beverages, but their beneficial effects on human health are also well-known. The herbal drug Cardamomi fructus (Cardamomi semen) has a long history of usage in Ayurveda, traditional Indian medicine, where it is used mainly in treating gastrointestinal and respiratory ailments. The healing effect of cardamom is based mainly on the content of essential oil, since it is an exotic and relatively expensive herbal drug and its pharmacological and clinical effects are still insufficiently researched, it is rarely used in modern phytotherapy in Europe. As part of this thesis, a phytochemical analysis based on the determination of the content and composition of essential oil in eight commercially available samples of cardamom fruit from the Croatian market was performed. The pharmacopoeial method of steam distillation showed that samples of herbal drugs available in powder form contained 4-40 mL of essential oil/kg, while the content of essential oil in in toto fruits was significantly higher and ranged from 44 to 56 mL essential oil/kg. Analysis by gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry (GC-MS/MS) showed that the main components of cardamom essential oil were α-terpinyl acetate (35.99-62.28%) and 1,8-cineole (0.24 -30.62%). Other less common components include α-terpineol (2.18-16.75%), linalool (0.81-7.25%) and sabinene (0-3.76%). The obtained results indicate significant differences in the content and composition of essential oil as the main indicator of the quality of cardamom fruit and basis of medicinal effects and also emphasize the superior pharmaceutical quality of the whole drug compared to commercially available powder
Optimization of hyaluronidase inhibition method and determination of inhibition by olive leaf extracts (Olea europaea, L.)
Hijaluronska kiselina jedna je od esencijalnih komponenata tkiva koja sudjeluje u održavanju hidratacije, međustaničnoj komunikaciji i djeluje kao fiziološki lubrikant. Hijaluronidaza, kao enzim koji razgrađuje hijaluronsku kiselinu, sve više je u fokusu znanstvenih istraživanja u svrhu prevencije preuranjenog starenja kože i usporavanja progresije pojedinih bolesti. Cilj ovog diplomskog rada bila je optimizacija spektrofotometrijske metode inhibicije hijaluronidaze i njezina primjena na ekstraktima lista masline. U eksperimentima je korištena hijaluronidaza iz goveđih testisa i natrijeva sol hijaluronske kiseline. Metoda je prilagođena laboratorijskim uvjetima i primijenjena na ekstraktima lista masline te je ispitan njihov inhibicijski potencijal za enzim hijaluronidazu. Pozitivna kontrola bila je taninska kiselina, no najniži IC50, odnosno ukupno najjaču inhibiciju ostvarilo je otapalo B (IC50=3,47 ± 1,45 μg/mL; sastav: 28,8% PPG, 63,8% destilirana voda, 7,4% mliječna kiselina). Najsnažniju inhibiciju među ekstraktima pokazao je uzorak B042M, s IC50 vrijednošću od 4,91 ± 0,56 μg/mL. IC50 vrijednosti čistih otapala (A i B) usporedive su s IC50 vrijednostima dobivenima za ekstrakte priređene s pripadajućim otapalima, stoga se može zaključiti kako sama otapala najviše utječu na izmjerenu inhibiciju. Za potvrdu i točnije definiranje inhibicijskog učinka sastavnica iz lista masline potrebno je provesti dodatna istraživanja.Hyaluronic acid is an essential component of tissues and some of its roles are retaining hydration, intercellular communication, and lubrication. Hyaluronidase, as an enzyme that degrades hyaluronic acid, attracts the attention of researchers who study premature skin aging and different diseases connected to disbalanced hyaluronan homeostasis. The goal of this diploma thesis is to optimize the spectrophotometric method for determining hyaluronidase inhibition. Bovine testicular hyaluronidase was the experimental enzyme and sodium hyaluronate was its substrate. The method has been adjusted to laboratory requirements and was used for measuring hyaluronidase - inhibiting potential of olive leaf extracts. Tannic acid was used as positive control, but the lowest IC50 and overall strongest inhibition was exhibited by solvent B (IC50=3,47 ± 1,45 μg/mL; 28,8% PPG, 63,8% purified water, 7,4% lactic acid). Sample B042M exhibited the strongest inhibition of all the extracts, with IC50 of 4.91 ± 0.56 μg/mL. IC50 values of pure solvents (A and B) is comparable to the values measured for the extracts. This result indicates that the solvents alone act as strong inhibitors of the hyaluronidase enzyme. For exact defining of inhibition by olive leaf extracts, more research needs to be done