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Intervalos de referência da bioquímica geral em cães, por sexo e faixa etária, usando o analisador bioquímico Respons 920
As análises bioquímicas são uma componente importante no diagnóstico de determinadas doenças e servem como indicador dos processos adaptativos do organismo, como o metabolismo energético, proteico e mineral, bem como, auxiliam na interpretação do funcionamento hepático, renal, pancreático, ósseo e muscular. Os intervalos de referência (IR) são um recurso de fundamental importância para que o médico possa interpretar os valores das análises e assim tomar uma decisão na avaliação do paciente. No Hospital Veterinário da Universidade de Trás- os-Montes e Alto Douro tratam-se todos os anos milhares de animais, sendo na sua maioria cães, pelo que, é muito importante que o Laboratório de Patologia Clínica do hospital tenha os seus IR bem ajustados para esta espécie, de forma a poder fornecer os melhores resultados possíveis e assim auxiliar num melhor diagnóstico dos cães que ali são consultados. Este estudo teve como objetivo a criação de intervalos de referência, específicos para a espécie canina, no aparelho de bioquímica líquida Respons®920, para utilização na prática diária do Laboratório de Patologia Clínica do HVUTAD. Para além disso, pretendeu-se avaliar qual o efeito do sexo e da idade dos animais nos valores obtidos para os diferentes parâmetros bioquímicos. Neste estudo, foram incluídos 193 animais e foi possível criar os seguintes IR para os parâmetros: Proteínas totais g/dL (5,4-7,6); Albumina g/dL (2,7-4,1); Alanina aminotransferase U/L (23,3-92,3); Aspartato aminotransferase U/L (14,6-48,1); Fosfatase alcalina U/L (14,3-91,7); Fósforo mg/dL (2,4-6,2); Cálcio mg/dL (8,4-11,2); Creatinina mg/dL (0,6- 1,4); Ureia mg/dL (20,2-64,3); Colesterol mg/dL (102,1-326,5); Triglicéridos mg/dL (29,1- 119,5); Sódio mmol/L (143,3-158,8); Potássio mmol/L (3,4-5,2); Cloro mmol/L (108,6-118,1). Para os parâmetros bilirrubina total (BILT) e gama glutamiltransferase (GGT), não foi possível criar IR, uma vez que, o número de amostras para esses parâmetros era demasiado reduzido para fornecer intervalos confiáveis. Quanto ao estudo da influência do sexo e da idade nos diversos analitos bioquímicos, detetaram-se variações entre machos e fêmeas nos parâmetros ALT, AST e ureia, com valores superiores nos machos em relação ao sexo oposto e verificaramse alterações com base na idade entre várias faixas etárias, com uma diminuição progressiva dos parâmetros fosfatase alcalina e fósforo e um aumento com a idade do parâmetro proteínas totais, sendo a faixa etária “jovem” a que mais se destacou das restantes. Estas variações não nos parecem, suficientes para justificar a partição dos intervalos obtidos, contudo, devem ser tidas em conta pelo clínico quando interpretar os resultados das análises. Este estudo mostrou-se muito importante, porque permitiu a criação de intervalos de referência que serão usados no Laboratório de Patologia Clínica do HVUTAD e também porque nos ajudou a perceber melhor como o sexo e a idade podem influenciar os valores obtidos para um mesmo analito no cão.Biochemical analyzes are an important component in the diagnosis of certain diseases and serve as an indicator of the body's adaptive processes, such as energy, protein and mineral metabolism, as well as helping to interpret liver, kidney, pancreatic, bone and muscle functioning. Reference intervals (RI) are a very important resource so that the doctor can interpret the analysis values and make a decision when evaluating the patient. At the Veterinary Hospital of the University of Trás-os-Montes e Alto Douro, thousands of animals are treated every year, the majority of which are dogs, so it is very important that the hospital's Clinical Pathology Laboratory has its RI well adjusted for this species, in order to provide the best possible results and thus assist in a better diagnosis of the dogs that are consulted there. This study aimed to create RI, specific to the canine species, in the Respons®920 liquid biochemistry device, for use in daily practice at the HVUTAD Clinical Pathology Laboratory. Furthermore, we intended to evaluate the effect of sex and age on the values obtained for the different biochemical parameters. In this study, 193 animals were included, and RI were created for the parameters, which are as follows: Total proteins g/dL (5.4-7.6); Albumin g/dL (2.7-4.1); Alanine aminotransferase U/L (23.3-92.3); Aspartate aminotransferase U/L (14.6-48.1); Alkaline phosphatase U/L (14.3-91.7); Phosphorus mg/dL (2.4-6.2); Calcium mg/dL (8.4-11.2); Creatinine mg/dL (0.6-1.4); Urea mg/dL (20.2-64.3); Cholesterol mg/dL (102.1-326.5); Triglycerides mg/dL (29.1-119.5); Sodium mmol/L (143.3-158.8); Potassium mmol/L (3.4-5.2); Chloride mmol/L (108.6-118.1). For the total bilirubin (TBIL) and gamma glutamyltransferase (GGT) parameters, it was not possible to create RI, as the number of samples for these parameters was too small to provide reliable intervals. Regarding the study of the influence of sex and age on the various biochemical analytes, variations were detected between males and females in the parameters ALT, AST and urea, with higher values in males compared to the opposite sex and changes were observed based on age between various age groups, with a progressive decrease in alkaline phosphatase and phosphorus and an increase with age in total proteins, with the “young” age group being the one that differed more from the rest. These variations do not seem sufficient to justify the partitioning of the obtained intervals, however, they must be taken into account by the clinician when interpreting the analysis results. This study proved to be very important, because it allowed the creation of RI that will be used in the HVUTAD Clinical Pathology Laboratory and also because it helped us to better understand how sex and age can influence the values obtained for the same analyte in dogs
Síndrome do gatinho evanescente em Pediatria Felina: estudo Anátomo-histopatológico
O presente trabalho visa reunir um conjunto de fatos, o mais completo e pormenorizado possível, sobre a síndrome do gatinho evanescente (ou fading kitten syndrome, segundo as siglas em inglês). Esta situação clínica de natureza multifatorial e de difícil abordagem médica é muito comum em gatinhos jovens, e representa a principal causa de mortalidade neste grupo de animais. Assim, o objetivo é dar visibilidade à área da neonatologia e pediatria felina e fornecer possíveis estratégias que possam aumentar o êxito no maneio clínico destes pequenos animais e, eventualmente reduzir a alta taxa de mortalidade associada. Esta síndrome pode estar causada por diversas entidades nosológicas que são descritas nesta dissertação, nomeadamente: malformações congénitas, isoeritrólise neonatal, doenças virais (como a síndrome respiratória infeciosa felina, a panleucopenia, a leucemia felina, a imunodeficiência felina e a peritonite infeciosa felina), doenças parasitárias, infeções bacterianas, e algumas complicações derivadas do maneio inadequado. A natureza aguda e inespecífica deste quadro clínico, junto com as dificuldades próprias associadas à imaturidade fisiológica e imunitária destes animais, torna o seu diagnóstico e tratamento muito complexos, razão pela qual é prioritária a aposta na profilaxia. Este estudo aborda inicialmente a fisiologia do neonato, incluindo a definição dos intervalos de referência dos parâmetros analíticos e os cuidados que este requer, com o objetivo de evitar as complicações derivadas do maneio inadequado. De seguida, é descrito o protocolo de abordagem clínica a estes pacientes, que inclui o exame neurológico adaptado e a identificação precoce dos primeiros sinais clínicos, de modo a podermos agir de maneira atempada e agressiva. Uma vez que a terapêutica nestes pequenos animais pressupõe um grande desafio, foi também imperioso abordar os fármacos recomendados em cada situação, embora é necessária muita mais investigação sobre este assunto. Para investigar as principais causas de morte em gatinhos, foram realizadas necropsias a 68 animais de até 2 meses de idade, no âmbito das quais foram recolhidas, de cada um deles, e analisadas no laboratório de anatomia patológica da UTAD, amostras de baço, cérebro, coração, estômago, fígado, intestino, linfonodo pré-escapular, rim, pulmão e timo. Os resultados obtidos a partir da análise macroscópica e histopatológica das amostras recolhidas permitiu-nos identificar a afeção respiratória como principal causa de morte no grupo de animais com menos de uma semana de idade, enquanto o sistema digestivo foi o mais afetado nos outros grupos etários – resultados que coincidem com o que descreve a literatura. Relativamente à etiologia, a principal causa de morte foi aparentemente de origem infeciosa. Com base no suporte bibliográfico e nos resultados obtidos pode-se concluir que é de extrema importância fomentar a esterilização e o controlo sanitário, de gatos caseiros ou errantes, para conseguir diminuir a sobrepopulação, melhorar as condições de vida e garantir os cuidados de higiene adequados, que permitam a prevenção de infeções e suas complicações médicas.This dissertation aims to provide a comprehensive and detailed overview of the fading kitten syndrome (FKS). This multifactorial and challenging clinical condition is highly prevalent in young kittens and represents the leading cause of mortality in this animal group. The primary objective is to raise awareness in the field of feline neonatology and pediatrics and to propose potential strategies that can improve the clinical management of these small animals and potentially reduce the associated high mortality rate. The syndrome can be caused by various disease entities, which are described in this dissertation, including congenital malformations, neonatal isoerythrolysis, viral diseases (such as feline infectious respiratory syndrome, panleukopenia, feline leukemia, feline immunodeficiency virus, and feline infectious peritonitis), parasitic diseases, bacterial infections, and complications arising from inadequate management. The acute and nonspecific nature of this clinical picture, along with the inherent challenges associated with the physiological and immune immaturity of these animals, renders diagnosis and treatment highly complex. Therefore, emphasis is placed on preventive measures. This study initially addresses the physiology of the neonate, including the definition of reference intervals for analytical parameters and the required care, aiming to avoid complications from inadequate management. Subsequently, the clinical approach protocol for these patients is described, which includes an adapted neurological examination and early identification of the first clinical signs, enabling timely and aggressive intervention. Since therapy in these small animals presents a significant challenge, it was also essential to address the recommended drugs in each situation, although further research on this topic is highly necessary. To investigate the main causes of death in kittens, necropsies were performed on 68 animals up to 2 months of age. Samples of the spleen, brain, heart, stomach, liver, intestine, pre-scapular lymph node, kidney, lung, and thymus were collected from each animal and analyzed at the UTAD's pathology laboratory The results obtained from the macroscopic and histopathological analysis of the collected samples allowed us to identify respiratory affection as the main cause of death in the group of animals under one week of age, while the digestive system was the most affected in the other age groups – results that coincide with the literature. Regarding the etiology, the main cause of death was apparently of infectious origin. Based on the literature review and the obtained results, it can be concluded that it is of utmost importance to promote sterilization and sanitary control of domestic and stray cats to reduce overpopulation, improve living conditions, and ensure adequate hygiene care, which can prevent infections and their medical complications
Canine mast cell tumours: A 9-year retrospective study in two Veterinary hospitals of northern Portugal
The canine mast cell tumour or mastocytoma is a pathology of frequent diagnosis in small animal oncology, representing 16-21% of all skin cancers in dogs and the most frequent malignant cutaneous tumour. These growths are characterized by the proliferation of mast cells that can degranulate and lead to host of different clinical signs related to the release of inflammatory mediators. Understanding the pathogenesis, diagnosis, and treatment of mastocytomas is essential for improving the prognosis and quality of life for affected dogs. The objective of this study is to describe and characterize 184 cases of mast cell tumours presenting to Hospital veterinário do Porto (HVP) and Centro Hospitalar Veterinário (CHV), in Portugal, between 2015 and 2024 aiming to improve the oncological management of this type of neoplasia in canine patients. Included in this study were a total of 156 cutaneous tumours and 28 subcutaneous tumours. Emphasis was given to compare different tumour grading methods and staging protocols. The average age for animals in this study was 8,81 years with a minimum of 2 and a maximum of 15 years. Dogs in this analysis developed primarily single masses of varying sizes (0,2cm to 20cm). Treatment options varied from surgical approaches to medical management/chemotherapy or a combination of all. Of the 184 cases 10,3% of studied animals developed “De novo” mastocitomas. Factors like mitotic index, tumour ulceration and dog breed were associated with tumour grade. Clinical and histopathological parameters were studied and evaluated regarding prognosis with resort to overall survival times (OST) and disease-free intervals (DFI
Avaliação de vários compostos na luta contra o oídio da alface em modo de produção biológico
Neste trabalho pretendeu-se avaliar a eficácia de alguns produtos no controlo do oídio da alface em modo de produção biológico em cultura em estufa. Para tal foram criadas seis modalidades diferentes, sendo uma delas a testemunha, isto é, não teve qualquer aplicação. Os produtos utilizados foram os seguintes: Actileaf, Quitobasic, Equibasic, S-System e Liquid’s. As doses para a preparação das caldas foram as indicadas pelos rótulos e efetuadas de acordo com as informações obtidas da empresa que forneceu os produtos. As pulverizações das diferentes modalidades foram efetuadas sempre na mesma data. A primeira pulverização foi realizada um dia após a plantação, tendo sido feitas 8 pulverizações intervaladas por uma semana. Os primeiros resultados evidenciaram-se na altura da quinta pulverização, ou seja, aproximadamente 30 dias após a plantação, onde já se observaram sinais de oídio nas folhas mais basais da alface em algumas modalidades. Com o decorrer do trabalho verificou-se que a modalidade isenta de tratamento era cada vez mais atacada pelo fungo enquanto em algumas modalidades não se observava a presença de oídio. Ao longo do ensaio foi bem clara a evolução da doença, no entanto, por questões logísticas não se alteraram as concentrações dos produtos de modo a manter as indicações das empresas. Os produtos que melhor resultaram no controlo ao oídio da alface foram o Equibasic e o S-System. Pelo contrário os produtos que se mostraram menos eficazes foram Quitobasic e ActileafThis work aimed to evaluate the effectiveness of some products in controlling powdery mildew on lettuce in organic production mode in greenhouse cultivation. To this end, six different modalities were created, one of which was the witness, that is, it had no application. The products used were the following: Actileaf, Quitobasic, Equibasic, SSystem and Liquid’s. The doses for preparing the syrups were those indicated on the labels and carried out in accordance with the information obtained from the company that supplied the products. The spraying of the different modalities was always carried out on the same date. The first spray was carried out one day after planting, with 8 sprays being carried out at intervals of one week. The first results were evident at the time of the fifth spraying, that is, approximately 30 days after planting, where signs of powdery mildew were already observed on the most basal leaves of the lettuce in some types. As the work progressed, it was found that the modality exempt from treatment was increasingly attacked by the fungus, while in some modalities the presence of powdery mildew was not observed. Throughout the trial, the evolution of the disease was very clear, however, for logistical reasons, the concentrations of the products were not changed in order to maintain the companies' indications. The products that best resulted in controlling powdery mildew on lettuce were Equibasic and S-System. On the contrary, the products that proved to be least effective were Quitobasic and Actileaf
Utilização de métodos objetivos e não invasivos na avaliação do bem-estar em Cavalos de Desporto
A função dos equinos tem vindo a sofrer, ao longo dos tempos, grandes alterações, sendo que, atualmente, o desporto é o principal papel atribuído à arte de equitação. Este trabalho teve, por objetivo, avaliar o stresse de cavalos de desporto através de métodos objetivos e não invasivos. Para isso, foram eleitos dois métodos para quantificação de dois indicadores: a temperatura ocular, medida a partir de imagens obtidas por termografia de infravermelhos (IRT), e a determinação do cortisol salivar. Para a determinação destes indicadores foram recolhidas imagens de IRT e de saliva numa amostra de dezasseis cavalos, em três momentos distintos durante o decorrer de provas equestres na modalidade de Equitação de Trabalho. Esses momentos foram: antes do cavalo iniciar o aquecimento e a prova (antes do exercício); após a prova (imediatamente após o exercício) e duas a três horas após a conclusão da prova (durante o repouso). Para a captura das imagens de IRT foi utilizada uma câmara FLIR F4 (FLIR Systems AB, Sweden) e as imagens foram analisadas com recurso ao programa FLIR Tools+. Para a determinação do cortisol salivar e após a recolha da saliva, as amostras foram preparadas em laboratório e utilizado o Cortisol Enzyme Immunoassay Kit®. A análise estatística foi realizada no programa GraphPad Prism (versão 8). Foram realizadas análises de variância (ANOVA) simples, para medidas repetidas e utilizado o teste Tukey a p < 0,05, para comparação entre grupos. Após o exercício, todos os animais aumentaram os níveis de cortisol salivar, porém, após o tempo de repouso estipulado, estes níveis voltaram a valores perto dos basais. No mesmo sentido, a temperatura ocular aumentou significativamente (p<0.01) após o exercício, diminuindo para valores basais durante o repouso. Como era de esperar, verificou-se que a variação da temperatura ocular se situou entre 3 e 6%. Já para o cortisol salivar essa variação foi muito superior (coeficiente de variação entre 60 e 88%). Finamente, a IRT e a determinação do cortisol salivar permitiram avaliar - sem perturbar a performance dos conjuntos (cavaleiro-cavalo) - o stresse e, apesar deste não determinar perentoriamente se os animais se encontram em bem-estar, estes métodos constituem uma ferramenta potencialmente útil para a sua avaliação.The role of horses suffered major changes and, currently, sport is the main role attributed to the art of horse riding. This work aimed to evaluate the stress of sport horses using objective and non-invasive methods. To this end, two methods were chosen to quantify the ocular temperature, measured from infrared thermography (IRT) images and salivary cortisol. To determine these indicators, IRT images and saliva were collected from sixteen horses at three different times during equestrian events in the working riding modality. These moments were before the horse started the warm-up and test (before the exercise), after the test (immediately after exercise), and two to three hours after completing the test (during rest). To capture the IRT images, a FLIR F4 camera (FLIR Systems AB, Sweden) was used, and the images were analysed using the FLIR Tools+ program. To determine salivary cortisol, samples were prepared in the laboratory, and the Cortisol Enzyme Immunoassay Kit® was used. Statistical analysis was performed using the GraphPad Prism program (version 8). One-way ANOVA analyses were performed for repeated measures, and the Tukey test was used at p < 0.05 for comparison between groups. After exercise, all animals had increased salivary cortisol levels, but after the designated rest, these levels returned to values close to baseline. Similarly, ocular temperature increased significantly (p<0.01) after exercise, decreasing to baseline values during rest. As expected, it was found that the variation in ocular temperature was between 3 and 6%. For salivary cortisol, this variation was much higher (CV between 60 and 88%). Infrared thermography and salivary cortisol measurement allow us – without disturbing the performance of groups (rider-horse) - to evaluate stress, and, although this does not necessarily determine whether the animals are in good health, these methods constitute a potentially helpful tool for its assessment
Klebsiella spp. in aquatic environments: prevalence, antibiotic resistance, and virulence profiles
Klebsiella spp. is recognized as an emerging threat to public health worldwide, mainly due to its increasing prevalence in healthcare-associated infections caused by multidrugresistant strains that produce broad-spectrum β-lactamases (ESBL). This organism has great metabolic versatility and the ability to grow in different ecological niches. It is generally multidrug-resistant and is associated with risks of morbidity and mortality. However, comparable data on its occurrence in surface waters and hospital wastewater are scarce. This dissertation aimed to study the prevalence of Klebsiella spp. and K. pneumoniae in samples of surface water and hospital wastewater, the determination of their antimicrobial resistance phenotype and genotype, the prevalence of virulence genes and, finally, the assessment of the biofilm formation capacity. Therefore, seventy-eight samples were collected from different surface waters in the North of Portugal, of which 14 (17.9%) were positive for Klebsiella spp. and 20 (25.6%) for K. pneumoniae. Forty-four samples were collected from hospital wastewater in Northern Portugal, of which 25 (56.8%) were positive for Klebsiella spp. and 16 (36.4%) were positive for K. pneumoniae. Antimicrobial susceptibility was assessed by the Kirby-Bauer disk diffusion method against 11 antibiotics (Sulfamethoxazole-trimethoprim, Ciprofloxacin, Tobramycin, Streptomycin, Gentamicin, Tetracycline, Meropenem, Cefotaxime, Ceftazidime, Cefoxitin, and Amoxicillin-clavulanic acid). Phenotypic production of ESBL was assessed by double-disk synergy. The presence of different resistance genes (blaCTX-U; blaCTX-M3; blaCTX-M9; blaSHV; blaTEM; ampC; tet(A); tet(B); aac(3)-II; aac(3)-IV; ant(2); strA; strB; aadA1; aadA5; sul1; sul2; sul3; blaOXA; blaOXA-48; blaVIM; blaIMP; blaKPC; parC; mcr-1) was analyzed by PCR in Klebsiella spp. and K. pneumoniae isolates, as well as the presence of virulence genes (papC, papG-III, cnf1, aer and bfp). Biofilm production was evaluated using the Violet Crystal Microplate method. In surface waters under study, seven (35%) K. pneumoniae isolates had a multidrugresistant (MDR) phenotype, on the other hand, of the thirteen Klebsiella spp. isolates, only 1 (7.7%) has an MDR phenotype. In relation to hospital wastewater, of the 41 Klebsiella isolates, 16 K. pneumoniae and 25 Klebsiella spp., 62.5% (n=10) K. pneumoniae and 40.0% (n=10) Klebsiella spp. had an MDR phenotype, that is, they are resistant to three or more classes of antibiotics. The results obtained for resistance genes showed high rates of resistance to blaCTX U, blaCTX-M9, blaTEM and blaSHV in isolates of Klebsiella spp. and K. pneumoniae from surface water and hospital wastewater. Regarding virulence factors, a higher prevalence of the papC gene was observed in both. In both surface water and hospital wastewater, most strains had a moderate capacity for biofilm formation. It is concluded that the work developed is of great importance in the epidemiology, antimicrobial resistance, and virulence in environmental isolates of Klebsiella spp. and K. pneumoniae. Furthermore, it is important to note that detecting and controlling the spread of multi-resistant microorganisms and applying a One Health approach is essential to keep this problem under control.Klebsiella spp. é reconhecida como uma ameaça emergente à saúde pública em todo o mundo, principalmente devido à sua crescente prevalência em infeções associadas aos cuidados de saúde causadas por estirpes multirresistentes que produzem β-lactamases de largo espectro (ESBL). Este organismo possui uma grande versatilidade metabólica e capacidade de crescer em diferentes nichos ecológicos. É geralmente multirresistente e está associada a riscos de morbilidade e mortalidade. No entanto, dados comparáveis acerca da sua ocorrência em águas superficiais e águas residuais hospitalares são escassos. Esta dissertação teve como objetivo o estudo da prevalência de Klebsiella spp. e K. pneumoniae em amostras de águas superficiais e de águas residuais hospitalares, a determinação do seu fenótipo e genótipo de resistência antimicrobiana, a prevalência de genes de virulência e, por fim, a avaliação da capacidade de formação de biofilme. Assim sendo, foram colhidas setenta e oito amostras em diferentes águas superficiais no Norte de Portugal, das quais 14 (17,9%) foram positivas para Klebsiella spp. e 20 (25,6%) para K. pneumoniae. No entanto, 44 amostras foram colhidas em águas residuais hospitalares no Norte de Portugal, das quais 25 (56,8%) foram positivos para Klebsiella spp. e 16 (36,4%) foram positivos para K. pneumoniae. A suscetibilidade antimicrobiana foi avaliada pelo método de difusão em disco Kirby-Bauer contra 11 antibióticos (Sulfametoxazol-trimetoprim, Ciprofloxacina, Tobramicina, Estreptomicina, Gentamicina, Tetraciclina, Meropenemo, Cefotaxima, Ceftazidima, Cefoxitina, e Amoxicilina-ácido clavulânico). A produção fenotípica de ESBL foi avaliada por sinergia de disco duplo. A presença de diferentes genes de resistência (blaCTX-U; blaCTX-M3; blaCTX-M9; blaSHV; blaTEM; ampC; tet(A); tet(B); aac(3)-II; aac(3)-IV; ant(2); strA; strB; aadA1; aadA5; sul1; sul2; sul3; blaOXA; blaOXA-48; blaVIM; blaIMP; blaKPC; parC; mcr-1) foi analisada por PCR em Klebsiella spp. e isolados de K. pneumoniae, bem como a presença de genes de virulência (papC, papG-III, cnf1, aer e bfp). A produção de biofilme foi avaliada pelo método de Microplaca com cristal violeta. Nas águas superficiais em estudo, sete (35%) isolados de K. pneumoniae apresentam fenótipo multirresistente (MDR), por outro lado, dos treze isolados de Klebsiella spp., apenas 1 (7,7%) possui fenótipo MDR. Em relação às águas residuais hospitalares, dos 41 isolados de Klebsiella, 16 K. pneumoniae e 25 Klebsiella spp., 62,5% (n=10) K. pneumoniae e 40,0% (n=10) Klebsiella spp. têm um fenótipo MDR, isto é, apresentam resistência a três ou mais classes de antibióticos. Os resultados obtidos para os genes de resistência apresentaram altas taxas de resistência a blaCTX-U, blaCTX-M9, blaTEM e blaSHV em isolados de Klebsiella spp. e K. pneumoniae de águas superficiais e de águas residuais hospitalares. Relativamente aos fatores de virulência, uma maior prevalência do gene papC foi observada em ambas. Tanto em águas superficiais como em águas residuais hospitalares a maioria das estirpes possuíam uma capacidade moderada de formação de biofilme. Conclui-se que o trabalho desenvolvido é de grande importância na epidemiologia, resistência antimicrobiana e virulência em isolados ambientais de Klebsiella spp. e K. pneumoniae. Para além disso, é importante referir que a deteção e controlo da disseminação de microrganismos multirresistentes e a aplicação de uma abordagem One Health é essencial para manter este problema sob controlo
Cirurgia de tecidos moles em animais de companhia: apresentação e discussão de casos clínicos
O presente relatório de estágio enquadra-se no âmbito da Unidade Curricular Dissertação do Mestrado Integrado em Medicina Veterinária e tem como fundamento os estágios realizados no Hospital Veterinário Universitário de Coimbra (HVUC), Portugal, com a duração de 3 meses, e no Hospital Veterinário Universitário Rof Codina, em Lugo, Espanha, com a duração de 2 meses e 22 dias. Ambos os estágios, dedicados a animais de companhia, permitiram-me acompanhar e realizar consultas, refletir sobre os possíveis diagnósticos diferenciais, realizar e interpretar exames complementares de diagnóstico, observar e auxiliar em vários procedimentos cirúrgicos, além de auxiliar nos cuidados aos animais durante o internamento. Deste modo, o objetivo deste relatório é detalhar as atividades médico-veterinárias realizadas durante o período de estágio, com foco em quatro casos clínicos acompanhados no Hospital Veterinário Universitário Rof Codina, especificamente na área de cirurgia de tecidos moles. O primeiro caso clínico apresentado é relativo a um cão com duas anomalias primárias do Síndrome Braquicefálico, nomeadamente a estenose das narinas e o palato mole alongado. O animal apresentou-se à consulta, uma vez que apresentava ruídos respiratórios, na qual foram identificadas dificuldades respiratórias, bem como o palato alongado e a estenose das narinas. Estas condições foram abordadas através de procedimentos cirúrgicos, incluindo uma estafilectomia para corrigir o palato mole longo e uma ressecção nasal em cunha bilateral para corrigir a estenose das narinas. O segundo caso clínico respeita a um cão que veio referenciado de outra clínica veterinária com o diagnóstico de hérnia de hiato deslizante. As cirurgias de encerramento do hiato esofágico, esofagopexia e gastropexia fúndica à esquerda foram realizadas com sucesso. O terceiro caso clínico é relativo a um cão que com história clínica de ingestão de um corpo estranho. Realizou-se uma radiografia que confirmou a presença de um corpo estranho no intestino. Foi necessário realizar uma cirurgia de enterotomia para remover o objeto, e durante o procedimento, ao revisar todo o trato gastrointestinal, foi identificado um segundo corpo estranho no estômago, que foi removido através de gastrotomia. Nos dias seguintes de internamento, o animal continuou a vomitar e não tinha apetite. Para esclarecer a situação, foram realizados exames complementares, incluindo uma ultrassonografia e uma gastroscopia. Durante a gastroscopia, foram identificadas ulcerações e esofagite relevantes. O último caso exposto é relativo a um gato que veio referenciado de outra clínica veterinária após uma tentativa sem sucesso de cateterização urinária. O gato apresentava sinais clínicos de estrangúria, hematúria e hiporexia. Foi identificado um cálculo urinário no pénis distal através de radiografia. Para resolução da obstrução, realizou-se uma cirurgia de uretrostomia perineal com o animal posicionado em decúbito dorsal. A seleção destes casos clínicos baseou-se principalmente na necessidade de intervenção cirúrgica, na sua resolução por meio de procedimentos cirúrgicos e no meu profundo interesse nesta área. Trataram-se de casos com histórias clínicas detalhadas que me permitiram aprimorar a habilidade de coleta de informações, diagnóstico e planeamento de tratamento. Com estes casos tive a oportunidade de estudar diversas técnicas cirúrgicas e expandir o meu conhecimento acerca das mesmas.This internship report falls within the scope of the Dissertation course of the Integrated Master's in Veterinary Medicine and is based on internships carried out at the University Veterinary Hospital of Coimbra (HVUC), Portugal, lasting for 3 months, and at the University Veterinary Hospital Rof Codina, in Lugo, Spain, lasting for 2 months and 22 days. Both internships, dedicated to companion animals, allowed me to attend and conduct consultations, reflect on possible differential diagnoses, perform and interpret complementary diagnostic tests, observe and assist in various surgical procedures, as well as assist in the care of animals during hospitalization. Thus, the objective of this report is to detail the veterinary activities carried out during the internship period, with a focus on four clinical cases observed at the University Veterinary Hospital Rof Codina, specifically in the field of soft tissue surgery. The first clinical case presented is related to a dog with two primary anomalies of Brachycephalic Syndrome, namely stenosis of the nostrils and elongated soft palate. The dog presented for a consultation due to respiratory noises and was found to have breathing difficulties, as well as an elongated palate and narrowed nostrils. These conditions were addressed through surgical procedures, including a staphylectomy to correct the elongated soft palate and bilateral wedge nasal resection to correct nostril stenosis. The second clinical case concerns a dog that was referred from another veterinary clinic with a diagnosis of sliding hiatal hernia. Successful surgeries for hiatal closure, esophagopexia, and left fundic gastropexy were performed. The third clinical case involves a dog with a clinical history of ingesting a foreign body. A radiograph confirmed the presence of a foreign body in the intestine. It was necessary to perform an enterotomy surgery to remove the object, and during the procedure, a second foreign body in the stomach was identified and removed through gastrotomy. In the following days of hospitalization, the dog continued to vomit and had no appetite. To clarify the situation, complementary examinations, including an ultrasound and gastroscopy, were performed. During the gastroscopy, significant ulcerations and esophagitis were identified. The last case presented concerns a cat referred from another veterinary clinic after an unsuccessful attempt at urinary catheterization. The cat exhibited clinical signs of stranguria, hematuria, and hyporexia. A urinary calculus was identified in the distal penis through radiography. To resolve the obstruction, a perineal urethrostomy surgery was performed with the cat positioned in dorsal recumbency. The selection of these clinical cases was primarily based on the need for surgical intervention, their resolution through surgical procedures, and my deep interest in this area. These were cases with detailed medical histories that allowed me to enhance my ability to gather information, diagnose, and plan treatment. With these cases, I had the opportunity to study various surgical techniques and expand my knowledge about them
Omic tools to characterize methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) recovered from wild animals: the labile epidemiology of virulence and drug resistance
Antibiotic resistance is an emerging public health concern, and the scientific community recognizes the need to evaluate its epidemiology. Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) are one of the keys to this problem. Apart from the hospital concern, MRSA are becoming increasingly common in infections associated to both human and animal communities with high rates of antibiotic resistance. In 2012, more than 50% of the Portuguese hospital S. aureus isolates were methicillin-resistant: the highest rate in Europe, anyhow, with corrective measures this number decreased to 25% in 2021. Many countries have developed and implemented national recommendations and guidance documents on the prevention of spread of MRSA, focusing on both improved infection prevention and control and prudent antimicrobial use. There was no information on the prevalence of MRSA in wild animals at the time. For this reason, this thesis aimed to determine the prevalence of these bacteria in wild animals as well as to characterize the resistance genes, virulence and genetic lineages circulating in this ecosystem, supposedly free from antibiotic use. We present a study on antimicrobial resistance associated with antibiotics in clinical use, the expression of resistance/virulence genes and the results are compared with the respective genome sequencing, transcriptome, and available protein profile. These results will help us to understand the epidemiology of MRSA. Epidemiology of antibiotic resistance provides an effective approach to understand the complex multidirectional exchange of pathogens among humans, wildlife, and domestic animals in a one health perspective
Efeito do fumo de tabaco e da sobre-temperatura na fertilidade masculina: um estudo em Drosophila melanogaster in vivo e em linfócitos humanos in vitro
No decorrer das últimas décadas, a fertilidade em humanos tem decrescido, o que pode ser devido a mudanças ambientais como a poluição, a sobre-temperatura e hábitos sociais como o aumento do consumo de tabaco. Existe uma controvérsia na literatura no que se refere à influência que a sobre-temperatura e o consumo do tabaco possa ter na fertilidade masculina. O presente trabalho visa estudar o impacto de dois agentes ambientais (a sobre-temperatura e o fumo do tabaco) na fertilidade masculina usando como modelo a D. melanogaster (in vivo) e os linfócitos humanos (in vitro). Os principais objetivos deste trabalho foram determinar a fertilidade, prolificidade, toxicidade dos progenitores, a longevidade da primeira geração (F1) e os efeitos genotóxicos nos espermatozoides de D. melanogaster, como também, a análise morfológica dos espermatozoides e a análise do comportamento sexual dos machos aplicando estes dois agentes. Nestes ensaios foram utilizadas duas linhagens, a do tipo selvagem (Oregon K, OK) que devido as suas características permitem compreender a influência destes agentes e a possível extrapolação para o homem, e a linhagem mus 308 deficiente para a proteína Mus308 (proteína, homóloga da polimerase humana POLQ DNA polymerase) de forma a aumentar a sensibilidade a estes agentes. Os machos de cada linhagem com diferentes idades foram expostos aos agentes ambientais (no caso da sobre-temperatura a 30ºC durante 2 h e no caso do fumo de tabaco durante 1 min). Paralelamente, avaliámos os efeitos genotóxicos em linfócitos humanos usando o ensaio do cometa de forma a medir os danos basais e oxidativos no ácido desoxirribonucleico (DNA). Pode-se verificar que em D. melanogaster ocorreu diferenças nas duas linhagens devido a linha mus 308 ser deficiente no sistema de reparação. Podemos concluir que em ambos os agentes foram afetados a fertilidade, prolificidade e longevidade da descendência de modos diferentes nas duas linhagens. O fumo do tabaco foi tóxico principalmente para a linha mus 308. Apenas foi verificada alterações morfológicas na linha mus 308 em ambos os agentes. Foi verificado um aumento do tempo entre o visionamento da fêmea e os primeiros passos no comportamento sexual do macho em ambas as linhas. No caso dos linfócitos humanos em ambos os agentes provocaram danos basais no DNA.Over the last few decades, fertility in humans has decreased, which may be due to environmental changes such as pollution, over-temperature and social habits such as increased tobacco consumption. There is controversy in the literature regarding the influence that high temperature and tobacco consumption may have on male fertility. The present work aims to study the impact of two environmental agents (overtemperature and tobacco smoke) on male fertility using D. melanogaster (in vivo) and human lymphocytes (in vitro) as a model. The main objectives of this work were to determine the fertility, prolificacy, toxicity of the progenitors, the longevity of the first generation (F1) and the genotoxic effects on the sperm of D. melanogaster, as well as the morphological analysis of the sperm and the analysis of the sexual behavior of the males applying these two agents. In these tests, two strains were used, the wild type (Oregon K, OK) which, due to its characteristics, allows us to understand the influence of these agents and the possible extrapolation to humans, and the mus 308 strain deficient for the Mus308 protein (protein, homologous of human polymerase POLQ DNA polymerase) in order to increase sensitivity to these agents. Males of each strain at different ages were exposed to environmental agents (in the case of overtemperature at 30ºC for 2 h and in the case of tobacco smoke for 1 min). In parallel, we evaluated the genotoxic effects on human lymphocytes using the comet assay to measure basal and oxidative damage to deoxyribonucleic acid (DNA). It can be seen that in D. melanogaster there were differences in the two lineages due to the mus 308 line being deficient in the repair system. We can conclude that in both agents the fertility, prolificacy and longevity of offspring were affected in different ways in the two lineages. Tobacco smoke was mainly toxic to the mus 308 line. Morphological changes were only observed in the mus 308 line in both agents. An increase in the time between the sighting of the female and the first steps in the male's sexual behavior was observed in both lines. In the case of human lymphocytes, both agents caused basal DNA damage
Comparative study of tartaric stabilization techniques in white wine from Loureiro variety: stabilization by continuous cold and use of oenological additives
Consumers are increasingly demanding in their perception of wine quality, leading producers to look for more effective alternatives. One issue is the instability of tartaric acid salts, resulting in the formation of potassium bitartrate and calcium tartrate crystals, which create sediments at the bottom of the bottle. This work studied the stabilising capacity and the effect on the wine chemical composition of different oenological additives, such as metatartaric acid (AM), sodium carboxymethylcellulose (CMC), potassium polyaspartate (PPK), alginic acid (Alg) and chitosan (QTA). These additives were applied in two different doses (100 mg/L and 200 mg/L) and compared with the continuous cold stabilisation process in white wines from the Loureiro grape variety. Alginic acid and chitosan, which are not yet approved by the OIV for tartaric stabilisation and lack comprehensive studies, were included to understand their effects on wines. The study concluded that most wines achieved stabilisation for potassium bitartrate, except for those treated with chitosan, which proved to be unstable. Although alginic acid showed potential as a stabiliser, its effectiveness was lower than those of metatartaric acid, CMC, and potassium polyaspartate. According to the results, none of the oenological additives used had a statistically significant impact p<0.05) on the chemical composition of the wines. Compared to the continuous cold stabilisation process, the oenological stabilisers proved to be excellent alternatives for white wines from the Loureiro grape variety.Cada vez mais exigente na perceção de qualidade dos vinhos, o consumidor leva os produtores a procurar alternativas mais eficazes. A instabilidade dos sais de ácido tartárico é um dos problemas, devido à formação de cristais de bitartarato de potássio e tartarato de cálcio, levando ao aparecimento de precipitado no fundo da garrafa. Este trabalho estudou a capacidade estabilizante e o efeito na composição química de diferentes aditivos enológicos, como o ácido metatartárico (AM), a carboximetilcelulose de sódio (CMC), o poliaspartato de potássio (PPK), o ácido alginico (Alg) e a quitosana (QTA), aplicados em duas doses diferentes (100 mg/L e 200 mg/L) e comparados com o processo de estabilização contínua a frio aplicado em vinhos brancos da casta Loureiro. No caso dos dois últimos aditivos (ácido alginico e quitosana), estes ainda não foram aprovados pela OIV para a estabilização tartárica e, devido à falta de estudos, foram incluídos para conhecer os seus efeitos no vinho. O estudo concluiu que a maioria dos vinhos conseguiu estabilizar-se em relação ao bitartarato de potássio, ao contrário dos vinhos tratados com quitosana, que se mostraram instáveis. Embora o ácido alginico tenha demonstrado um bom potencial estabilizador, a sua eficácia foi inferior à do ácido metatartárico, da CMC e do poliaspartato de potássio. Novos trabalhos devem ser realizados para melhor caraterizar as suas propriedades enológicas. De acordo com os resultados do estudo, nenhum dos aditivos enológicos utilizados teve um impacto estatisticamente significativo (p<0,05) na composição química dos vinhos. Comparativamente ao método de estabilização contínua a frio, os aditivos enológicos revelaram-se excelentes alternativas para os vinhos brancos da casta Loureiro