Institutional Repository of Chengdu Institute of Biology, CAS
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    基于纳米SiO2的酶联免疫分析及应用

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    酶联免疫分析(ELISA)由于具有特异性强、灵敏度高、方法简捷、分析容量大、检测成本低等优点,且一般不需要昂贵仪器,可以简化或省去前处理步骤等,其应用范围涉及到生物分析化学各个领域,可广泛应用于抗原、抗体、药物、激素、毒素等物质的定性定量检测。但传统的ELISA多利用96孔酶标板作为包被载体,从而产生一些不可避免的缺点:检测范围窄,易受扩散系数的影响,检测结果变异系数较大等。为改善分析效果,我们建立了一种基纳米二氧化硅(nano-SiO2)的ELISA分析方法,其特点是将nano-SiO2作为包被载体从而避免了上述缺点,并将所建立的方法应用于2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、牛血清白蛋白(BSA)和布洛芬的检测。本学位论文主要内容如下:第一章报道了基于纳米SiO2对豆芽中残留2,4-D检测的直接竞争ELISA法。2,4-D是一种常用的除草剂和生长调节剂,其在食物中的残留会对人体造成严重的危害,为了考察豆芽中2,4-D的残留情况。我们首先通过碳二亚胺交联法将2,4-D与载体蛋白偶联,获得2,4-D的免疫原(BSA-2,4-D)和包被原(OVA-2,4-D),通过免疫成年健康雄兔获得可以特异性识别2,4-D的多克隆抗体。利用经修饰的St?ber法制备出SiO2纳米粒子,在其表面修饰氨基,最终完成与OVA-2,4-D的偶联。随后,通过高碘酸钠氧化法获得HRP标记的2,4-D多克隆抗体,并分别建立基于酶标板和纳米材料的直接竞争ELISA法,完成对该方法的优化和其特异性、精密度、准确度的验证,并对二者的检测结果进行比较。第二章报道了基于纳米SiO2对疫苗中残留BSA检测的直接竞争ELISA法,实现了对生物大分子的检测。牛血清是利用细胞培养基制备疫苗过程中的重要成分,而BSA牛血清中主要蛋白,其在疫苗中过量残留可能会引起严重的过敏反应,威胁人们的健康,因此有必要对疫苗中残留的BSA进行检测。本部分是用该方法检测疫苗中BSA的残留情况。首先利用经修饰的St?ber法制备出SiO2纳米粒子,在其表面修饰氨基,最终完成与BSA的偶联。通过高碘酸钠氧化法获得HRP标记的BSA多克隆抗体。随后,将其和样品中的BSA竞争地与HRP标记的BSA抗体结合,在经过离心、洗涤、底物显色后实现对样品中BSA的定量分析。在对方法的特异性、精密度、准确度验证后,证明该方法可以准确的实现对疫苗中残留BSA的检测。第三章是基于纳米SiO2对尿液中布洛芬检测的酶联配体分析法的建立。上两章报道的两种方法是基于抗原抗体的特异性结合反应而建立。但抗体通常难以得到、且价格昂贵,故利用人血清白蛋白(HSA)与小分子药物的高亲和性代替抗原、抗体的特异性反应建立了酶联配体分析法。布洛芬是一种重要的非甾体抗炎药,用于治疗风湿病和肌肉骨骼疾病引起的急性和慢性疼痛,对其在生物样品的含量进行检测具有重要的意义。本部分是利用酶联配体分析法实现对尿液中布洛芬的含量检测。首先,利用经修饰的St?ber法制备出SiO2纳米粒子,在其表面修饰氨基,最终完成与HSA的偶联。利用活化酯法完成布洛芬和HRP的偶联。随后,将样品中的布洛芬和HRP标记的布洛芬竞争地与SiO2-HSA结合,经离心、洗涤、底物显色后实现对样品中布洛芬含量的定量分析。该方法的线性范围和检测限良好,经验证该方法的精密度和准确度高。最后,利用该方法完成了对服药后36 h内尿液中布洛芬含量的监测。第四章为综述,概述了酶联免疫吸附分析方法及其应用

    龙葵和香加皮的甾体成分及其抗肿瘤活性研究

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    本论文对龙葵和香加皮这两位传统中药材的甾体类成分进行了较为系统深入的研究,并对其细胞毒活性进行了筛选评价。共分离鉴定了33个化合物,其中8个为新化合物,活性评价发现部分化合物具有较好的细胞毒活性。现分为三章进行报道:第一章报道了龙葵的化学成分及其细胞毒活性。从龙葵果的甲醇提取物中共分离鉴定了11个化合物(1–11),其中新化合物4个(1–4),结构鉴定为:Solanine A (1), 7α-羟基客西茄碱 (2), 7α-羟基澳洲茄边碱 (3), 7α-羟基澳洲茄碱 (4)。Solanine A (1)具有新颖的6-5-6-5 稠环结构,为首次发现的具有这类结构的螺甾碱烷型生物碱,其绝对立体构型通过单晶X-Ray衍射分析确定。新化合物2–4为不常见的甾体糖苷类化合物,其苷元在天然产物中罕见报道。对所分离到的化合物的细胞毒活性测试结果显示,化合物1, 5, 8和9对肿瘤细胞MGC803,HepG2和SW480均有细胞毒活性,其IC50值为5.02到23.79 μM。化合物5对胃癌细胞MGC803的细胞毒活性最强,其IC50值为5.02 μM,化合物1对肝癌细胞HepG2和结肠癌细胞SW480的活性最好,其IC50值为9.25 μM和6.23 μM。第二章报道了香加皮的化学成分研究及甾体糖苷和低聚糖的细胞毒活性评价,并对构效关系进行了分析探讨。从香加皮甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中共分离鉴定了22个化合物(12–33),其中新化合物4个(12–15),结合核磁和质谱数据分析以及化学方法,新化合物结构鉴定为:Perisepiumosides F–I (12–15)。新化合物12–14为不常见的甾体糖苷类化合物,其苷元在天然产物中少见报道。对化合物12–25, 30–33的细胞毒活性测试显示,化合物19, 21和32对肿瘤细胞A-549和HepG2均有细胞毒活性,其IC50值为0.61-7.86 μM。化合物13只对肿瘤细胞HepG2显示细胞毒活性,IC50值为2.72 μM。通过对化合物19–21的活性数据分析表明,糖链中原酸酯结构的存在使活性增强;化合物32为31中毛地黄糖核上C-2的乙酰基衍生物,其细胞毒活性与31相比有所增强,说明乙酰基的存在能增强细胞毒活性。第三章综述了杠柳属植物的化学成分及其药理活性研究进展

    Quantification of methane emissions from municipal solid waste landfills in China during the past decade

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    Methane is responsible for 20% of the global warming resulting from greenhouse gas emissions. Municipal solid waste (MSW) landfills are the third largest anthropogenic source of methane and are thus important to estimating the global methane budget and evaluating its contribution to global greenhouse gas emissions. Based on the greenhouse gas inventory guidelines from the Intergovernmental Panel on Climate Change (IPCC) and the first-order decay method used to estimate emissions from MSW landfills - and in line with MSW management in various regions we calculated methane emissions from MSW landfills in various Chinese provinces from 2003 to 2013. During this period, methane emissions from MSW landfills increased from 1141.10 Gg to 1858.98 Gg, representing a mean annual increase of 71.79 Gg. MSW emissions tended to increase more in the northern and western provinces than in the southern and eastern provinces, as methane emissions strongly and positively correlated with population and socioeconomic demographics. MSW decontamination is growing rapidly in China, and landfills predominate in all MSW treatments; moreover, incineration has also dramatically increased in recent years

    Seasonal variations in the soil amino acid pool and flux following the conversion of a natural forest to a pine plantation on the eastern Tibetan Plateau,China

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    Although the importance of amino acids to plant nitrogen (N) nutrition in most terrestrial ecosystems is being increasingly recognized, the availability and seasonal variations of soil amino acids in subalpine coniferous forests are poorly understood. Few studies have investigated the differences in the soil amino acid pool and the cycling between forest types caused by land-use changes. In this study, we quantified the concentrations and fluxes of soil amino acids in a dragon spruce plantation and an adjacent natural forest (NF) on the eastern Tibetan Plateau, China. Soil samples from organic and mineral soil horizons were collected in May, July, September, and December of 2015 and March of 2016. The pools and fluxes of soil amino acids in the plantation converted from NF decreased significantly during the growing season and increased during the non-growing season. Meanwhile, greater pools and fluxes of soil amino acids were observed in the organic horizon than in the mineral soil horizon in both forest types. Our results indicate that distinct nutrient economies were likely formed in the plantation compared with the NF because the quality of the input litter decreased in the plantation. In addition, the importance of soil amino acids in the subalpine coniferous forest ecosystem was evaluated based on published literature. The ratios of amino acids to dissolved inorganic N (DIN) in the soils from the two studied forests were generally much lower than the range of ratios reported for other ecosystems. However, the relative high amino acid: DIN ratio in the plantations during the non-growing season suggests that the plants in the plantation may have the potential to modify their strategies for acquiring N due to the changed relative dominance between the DIN and amino acids in the soils. (C) 2016 Elsevier Ltd. All rights reserved

    Stoichiometric characteristics of carbon, nitrogen and phosphorus of Sibiraea angustata shrub on the eastern Qinghai-Xizang Plateau

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    为了探究青藏高原东部窄叶鲜卑花(Sibiraea angustata)灌木不同器官碳(C)、氮(N)、磷(P)含量的分配格局及其生态化学计量特征,该文采用分层随机抽样方法布设样地,选择16个窄叶鲜卑花灌丛样地,分别采集窄叶鲜卑花灌木根、茎、叶、当年枝和果等植物器官样品,并分析样品C、N、P含量及其计量比。结果表明: C、N、P在不同器官中的含量分别表现为茎>当年枝>果>根>叶,叶>果>当年枝>茎>根,果>叶>当年枝>根>茎。窄叶鲜卑花各器官中C含量相对稳定, N、P含量变异系数较大,在根部的变异系数最大。在不同器官中N:P的范围为7.12-12.41,其值变化不大, N:P变异系数的最小值在当年枝中,说明N:P在当年枝中的内稳性较高。在该灌木植物体中C与N之间、C与P之间呈极显著的负相关关系, C对N、P具有稀释作用; N与P呈极显著正相关关系, N与P间具有较好的耦合协同性。分析发现:窄叶鲜卑花不同器官C、N、P化学计量特征在一定程度上符合内稳态理论和生长速率理论,其元素分配与器官所执行的功能密切相关;同时指出在物种水平上应当谨慎使用生态化学计量比来判断养分的限制情况

    α-淀粉酶对小麦糊化特性及面条品质的影响

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    小麦在中国具有广泛的种植面积,但不同麦区的小麦品质差异较大。淀粉是组成小麦籽粒的主要成分之一,其品质与产品加工和谷物营养密切相关。反应淀粉品质的重要参数是淀粉糊化特性,而小麦糊化特性和食品品质受α-淀粉酶活性影响很大,但α-淀粉酶活性对我国正常成熟小麦的糊化特性和产品品质的影响的相关研究较少。因此本研究筛选了30份α-淀粉酶活性差异较大的小麦材料进行降落值、总α-淀粉酶活性测定、籽粒中的α-淀粉酶蛋白的电泳分离及糊化特性差异分析,从感官评价、TPA测定和烹调特性三个方面,全面客观的评价了籽粒中的α-淀粉酶活性对小麦干白面条品质的影响,比较了加入细菌α-淀粉酶前后的糊化特性和面条品质的差异,研究了籽粒中高等电点α-淀粉酶的主要编码基因TaAMY1的DNA和氨基酸的多态性。研究结果如下:1. 供试材料的降落值和总α-淀粉酶活性(OD值)差异很大,变幅为62~524 s和0.12~2.87。根据降落值和总α-淀粉酶活性可分为3类(I、Ⅱ、Ⅲ),3类材料降落值的平均值分别为122.40 s、373.67 s、452.00 s;总α-淀粉酶活性(OD值)的平均值分别为2.35、0.74、0.22;3类材料的α-淀粉酶电泳条带在40-45KDa区间浓度差异明显;供试材料的糊化特性在2014-2016三年间无显著差异,糊化特性的差异受环境影响较小,主要受基因型控制;迟熟α-淀粉酶显著降低小麦粉的峰值粘度、低谷粘度、最终粘度等多项糊化参数,并扩大材料间糊化特性差异。小麦籽粒α-淀粉酶活性与降落值(r = -0.97,P<0.01)呈现极显著负相关性,与峰值粘度差值(r = 0.84,P<0.01)极显著正相关,材料间α-淀粉酶活性的差异都能较好地被降落值和峰值粘度差值预测出。2. 不同品种的面条色泽、外观、食味无明显差异,但面条的软硬度及粘弹性差异较大,具有太高的迟熟α-淀粉酶活性的小麦材料不适合做面条。α-淀粉酶活性与感官品质中的软硬度、粘弹性、总评分均有显著负相关关系,相关系数分别为-0.59(p<0.05)、-0.76(p<0.01)、-0.71(p<0.01),TPA特性的数据也进一步支持此结果。α-淀粉酶活性与吸水率(r=0.75,p<0.01)和干物质损失率(r=0.56,p<0.05)均呈显著正相关。小麦籽粒中α-淀粉酶活性越强,其面条的品质越差,表现在面条的硬度下降,粘弹性减小,口感差且不耐煮。细菌α-淀粉酶对面条的总评分并无明显影响,更多的是影响面条的软硬度与蒸煮品质。α-淀粉酶活性可以作为预测面条品质的指标之一,品质好的面条小麦α-淀粉酶活性(OD值)应在0.2-0.7之间,峰值粘度差值应在100-300 BU之间或降落值在350~550 s之间。3. TaAMY1基因的DNA全长约1625 bp,包括3个外显子和2个内含子,编码427个氨基酸。436个多态位点在14份小麦TaAMY1基因的序列中被检测出,其中包括408个SNPs和28个Indels。某些突变的氨基酸参与了α-螺旋的形成,但并未对酶蛋白的二级结构产生影响。TaAMY1基因全长序列及CDS区聚类分析的结果显示,TaAMY1基因的多态性位点与酶活性之间无明显的相关性,TaAMY1基因变异几乎不影响小麦籽粒α-淀粉酶活性的大小。由于该基因为多拷贝,具有序列差异的克隆片段很可能代表了同一基因簇或不同位点的不同的拷贝片段;将14 份材料的202个单克隆片段与12条参考序列比对,发现这202个克隆序列可能存在小麦TaAMY1基因的12-14个拷贝。结果显示,正常成熟的小麦籽粒中α-淀粉酶活性差异很大,α-淀粉酶显著降低多项小麦淀粉糊化指标和面条品质;需要进一步研究α-淀粉酶活性差异的分子机制。本研究得到了适合制作面条的小麦材料的α-淀粉酶活性范围,为小麦品质育种提供了理论指导和技术支撑

    中国小麦主效休眠基因单倍型及与穗发芽抗性的相关性研究

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    小麦是全球食用人数最多、种植范围最广的重要粮食作物,被称为“世界性的粮食”。穗发芽( Pre- harvest sprouting,简称 PHS) 指小麦收获前遇到阴雨天气或潮湿环境下籽粒在穗上发芽的现象,是一种世界性的农业气候灾害。穗发芽是受遗传基因控制和环境因素影响的复杂数量性状。籽粒休眠特性与穗发芽密切相关,是影响小麦穗发芽抗性的主要遗传因素。国内外学者利用不同的遗传分析群体在多个染色体上鉴定了控制小麦籽粒休眠或穗发芽抗性的多个 QTL位点,并建立了与基因位点连锁的分子标记。近年来的研究表明,位于染色体3BL、3AS和4AL上的QTL位点是控制籽粒休眠的主效基因位点,并克隆了其对应的候选基因Vp-1B、TaPHS1和PM19-A1,以上主效休眠基因的单倍型与籽粒休眠或穗发芽抗性密切相关。本研究针对Vp-1B、TaPHS1和PM19-A1控制种子休眠的主效基因序列设计引物,建立适用于多重PCR的基因特异分子标记及检测方法,利用建立的多重PCR检测体系调查了123份四川小麦育成品种,262份中国小麦微核心种质和240份黄淮麦区品种主效休眠基因的单倍型及分布,同时结合小麦品种发芽指数(GI值)的调查结果,对基因单倍型与品种穗发芽抗性的相关性进行了初步分析,获得主要结果如下: 1. 针对Vp-1B、TaPHS1和PM19-A1主效休眠基因,已建立一次PCR能鉴定三个主效休眠基因等位变异的分子标记多重PCR检测体系; 2. TaPHS1基因在中国小麦中存在2种单倍型,TaPHS1a和TaPHS1b,分别为与穗发芽敏感和穗发芽抗性相关的单倍型。其中,TaPHS1a在四川小麦和黄淮麦区均为优势单倍型,频率分别为96%和99%; 3. 除已经报道的六种Vp-1B基因单倍型(Vp-1Ba~Vp-1Bf)外,在中国微核心小麦种质中还发现3个新的单倍型,分别命名为Vp-1Bj 、Vp-1Bh 、Vp-1Bk。其中,与种子强休眠性相关的单倍型Vp-1Bb和Vp-1Bf频率极低,而Vp-1Ba和Vp-1Bc/e分别为黄淮麦区和四川小麦的优势单倍型,频率分别为55%和88%; 4. PM19-A1基因在中国小麦中存在2种单倍型,PM19-A1a和PM19-A1b,分别为种子强休眠性和弱休眠性相关的单倍型。其中,PM19-A1b是黄淮麦区和四川小麦的优势单倍型,分布频率分别为91%和88%; 5. 从中国小麦微核心种质中鉴定出3种主效休眠基因优良单倍型组合。其中,携有2个优良单倍型的小麦材料64份;同时含有3个优良单倍型的材料6份,分别是北京8号、原冬822,旱洋麦、大春白四棱麦、墨脱小麦、猪屎麦; 6. 在田间种植条件下,根据成熟籽粒发芽指数(GI),将供试材料划分为高、中感穗发和高、中抗穗发芽四种类型。其中,GI<0.1的高抗材料比例为12.8%,0.1<GI<0.3的中抗材料比例为23.9%,0.3<GI<0.6的中感材料比例为29.4%;GI>0.6的高感材料比例为33.9%,供试小麦材料穗发芽抗性普遍较差。 7. 田间种植条件下,上主效休眠基因TaPHS1和PM19-A1的优良单倍型与非优良单倍型之间的穗发芽表型无显著差异,而Vp-1B基因位点单倍型Vp-1Bb 的GI值均显著低于其它单倍型。优良单倍型组合(TaPHS1a+Vp-1Bb和TaPHS1a+PM19-A1a)的GI值均低于单一的优良单倍型TaPHS1a,且TaPHS1a+Vp-1Bb与TaPHS1a之间差异达显著水平,表明Vp-1Bb具有环境不敏感的抗穗发芽特性; 8. 小麦穗发芽抗性育种中,应加强TaPHS1a、PM19-A1a和Vp-1Bb优良单倍型向优良品种的转移聚合,尤其要重视Vp-1Bb优良单倍型的挖掘和利用

    喜树悬浮细胞、内生菌LY214及CaSLS异源表达体系中的天然产物研究

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    喜树碱(Camptothecin,CAM)及其衍生物为诸多肿瘤的治疗药物。CAM主要是从植物提取,喜树(Camptotheca acuminata)是CAM的主要来源植物之一,但植物生长缓慢、代谢产物含量低且其积累缓慢等因素制约了CAM的大量供给。从获取CAM的目的出发,我们建立了喜树细胞悬浮培养体系,研究了影响CAM产量的因素,发现了提高喜树悬浮细胞CAM产量的方法;对产CAM的喜树内生细菌多粘类芽孢杆菌LY214(Paenibacillus polymyxaLY214)的代谢产物进行了研究,为该菌的利用提供线索;对CAM生物合成关键酶—裂环马钱子苷合成酶(CaSLS)的进行了分子克隆和体外功能表征,在大肠杆菌表达系统中发现了选择性O-乙酰化产物。首先,利用喜树种子培养无菌幼苗,以该幼苗为外植体诱导产生愈伤组织,进而建立了喜树细胞悬浮培养体系。通过培养、发酵,我们发现大部分CAM存在于喜树悬浮细胞的培养液中;在无菌条件下继代培养喜树悬浮细胞,其CAM的产量逐渐降低。为此我们发展了低温保存和复苏培养方法以保存喜树悬浮细胞。通过向喜树悬浮细胞培养液中添加诱导因子,我们发现在部分诱导因子的作用下,CAM的产量得以恢复和提高。山梨糖醇表现出最强的诱导作用,与同代对照组相比,CAM产量能提高~500倍。添加CAM生物合成前体—色胺和马钱子苷到喜树悬浮细胞培养液中,CAM的产量无明显提高。但在添加色胺的喜树悬浮细胞培养液中,分离并鉴定了N1-乙酰犬尿胺(NKA)。色胺转化为NKA的发现为阐明喜树碱生物合成途径中吡咯并喹啉结构单元的形成提供了参考。通过培养、发酵喜树内生菌多粘芽孢杆菌LY214,我们获得了LY214代谢产物粗提物。采用薄层色谱、柱层析、HPLC等分离、纯化手段,我们从LY214发酵产物中分离得到27个化合物,主要为环二肽、氨基酸衍生物、芳香族化合物及衍生物、环肽等。通过质谱,核磁共振1-D、2-D谱,化学水解、Marfey’s衍生等方法,我们已鉴定2个新小分子化合物、1个新环九肽;尚有9个由7~9个氨基酸组成的环肽类化合物的确切结构在鉴定中。通过比较、分析现有转录组数据,我们克隆得到4个注释为CaSLS的获选基因。利用大肠杆菌表达系统对CaSLS进行异源表达、酶活测试等,结果表明CaSLS催化马钱子苷(loganin)转化为裂环马钱子苷(secologanin)的活性较弱。我们发现大肠杆菌能将马钱子苷和马钱子苷酸分别转化为6¢-O-乙酰化马钱子苷和6¢-O-乙酰化马钱子苷酸。利用 lRed重组系统成功敲除大肠杆菌JM109(DE3)基因组中乳糖乙酰转移酶基因(MAT),得到大肠杆菌JM109 △MAT(DE3)表达菌株。利用该菌株对候选CaSLS进行蛋白酶活测试,发现底物的O-乙酰化基本消失,但没有检测到CaSLS的催化活性。基于上述结果,我们准备在酵母系统中表达CaSLS,进而表征其功能。目前已经构建了适合在酵母中的表达载体,正在酿酒酵母WAT11(Saccharomyces cerevisiae WAT11)中进行表达及活性测试

    吖啶磺酰胺的合成工艺优化及衍生物的合成研究

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    吖啶是一类重要的含氮杂环化合物,其衍生物在抗肿瘤、抗菌、抗HIV等方面有良好的生物活性。此外,吖啶类衍生物的化学发光背景低,信噪比高,干扰因素少,发光效率高,因此,也是一类应用较广的化学发光试剂。目前,吖啶类衍生物用于发光试剂主要有光泽精、吖啶酯和吖啶磺酰胺。在这些化合物中,应用较多的是吖啶酯类,但相比较吖啶酯,吖啶磺酰胺水解稳定性好、热稳定性好和信噪比高,因此,吖啶磺酰胺NSP-SA-NHS有更好的应用前景,但现在用于发光试剂的吖啶磺酰胺NSP-SA-NHS的工艺路线放大合成比较困难,其中间体9-[[(4-甲氧基-氧代丁基)-[(4-甲基苯基)磺酰基]氨基]羰基]吖啶需柱层析纯化。因此,设计可用于生产放大的吖啶磺酰胺合成工艺具有重要意义。本文设计了一条合成吖啶磺酰胺NSP-SA-NHS的路线,中间体9-[[(4-甲氧基-氧代丁基)-[(4-甲基苯基)磺酰基]氨基]羰基]吖啶可经重结晶得到,收率可达86.4%。 此外,本文基于吖啶磺酰胺NSP-SA-NHS设计合成了两个带氨基酸的侧链衍生物,侧链的设计中含有人体必需氨基酸赖氨酸和抑制性神经递质γ-氨基丁酸,希望进一步提高吖啶磺酰胺NSP-SA-NHS的生物活性

    PhI(OAc)2催化的末端炔烃硼氢化反应及其机理研究

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    烯基硼(特别是烯基频哪醇硼酸酯)是一类构建功能性分子的关键化合物,在有机化学与药物合成领域扮演着重要的角色。利用它可以实现碳-碳键,碳-卤键,碳-氮键,碳-氧键以及氟-硼键和氮-硼键等多种化学键的构建。炔烃的催化硼氢化反应是烯基硼酸酯最直接和最有效的制备方法。在过去的几年中,诸如Cu, Pd, Ag, Ir, Pt 和 Au等过渡金属催化的炔烃硼氢化在烯基硼酸酯的制备中发挥了巨大的作用。然而,过渡金属的成本高,毒性大,环境不友好等缺点,使得烯基硼酸酯在有机合成和药物合成领域的应用受到限制。近年来,非过渡金属催化炔烃硼氢化制备烯基硼酸酯的方法开始兴起。我们在无需额外添加过渡金属和氧化剂的条件下,发展了一种PhI(OAc)2催化末端炔烃硼氢化的方法。利用该方法,我们在无需惰性气体保护的情况下,高产率且高选择性地合成得到了一系列的E - 烯基频哪醇硼酸酯。随后,本论文还对该反应的机理进行了初步的探讨。我们首次捕捉到了具有B-I键的反应中间体,提出了高价碘催化B-B键断裂和B-I中间体参与的亲电型硼氢化反应历程。综上所述,我们在室温和空气条件下,发展了一种PhI(OAc)2催化末端炔烃硼氢化的方法。利用该方法,我们高产率且高选择性地合成得到了一系列的E - 烯基频哪醇硼酸酯。我们还首次捕捉到了具有B-I键的反应中间体,进一步佐证了我们提出反应历程。本论文为E - 烯基频哪醇硼酸酯的制备和高价碘试剂的开发和利用提供了一种的新思路

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