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Activación de genes de defensa en plantas de tomate de mesa lycopersicum esculentum L., a través de la aplicación de sustancias químicas y naturales
Get PDFLycopersicum esculentum L. is a plant whose cultivation in the country—both open and greenhouse cultivation—is subject to the use of agrochemicals to make it economically viable, since it is affected by a great variety of pests and adverse environmental conditions. Tomato consumption is widespread in our country because of its taste, for being low in calories, and its antioxidant properties. A diversity of substances has been used to control plant illnesses, it is worth mentioning that ancestrally the use of vegetable extracts has been replaced by the use of chemicals in large extensions of crops. For this work, three WRKY genes were chosen, which act as transcription factors, and have higher expression levels in tomato leaves. Gene activation of SlWRKY 8, SlWRKY 23 y SlWRKY 39 was assessed 24 and 48 hours after the application of: substances of plant origin (T 1), electrolytic chemical (T 2) and a commercial fungicide (T 3). The tomato plants were grown under controlled laboratory conditions. Once the treatments were applied, RNA was extracted, real time PCR was performed and also, relative quantification was used to analyze the expression of the aforementioned genes. These results were analyzed statistically using ANOVA and Tukey’s HSD test to discriminate the effectiveness of each treatment. From the analyzed WRKY genes, only SlWRKY 23 showed and activation reaching a Fold Change value of 4 at 24 hours with the agrochemical treatment. These results provide evidence for the expression of induced defensive genes by substances of biocide activity and the possibility to characterize other substances that may cause this activation in tomato plants.Lycopersicum esculentum L. es una planta cuyo cultivo en el país, tanto a cielo abierto como en invernadero, está sujeto a la utilización de agroquímicos para que sea económicamente rentable, puesto que se ve afectado por una gran variedad de plagas y condiciones ambientales adversas. El consumo de tomate de mesa se encuentra muy difundido en nuestro país debido a su sabor, bajo contenido calórico y propiedades antioxidantes. Para luchar contra las enfermedades de las plantas, se han aplicado una gran variedad de sustancias; cabe señalar que el uso ancestral de extractos vegetales ha sido reemplazado por la utilización de sustancias químicas en grandes extensiones de cultivos.Para el presente trabajo, se escogieron tres genes WRKY, que codifican como factores de transcripción, y que presentan mayores niveles de expresión en las hojas de tomate. Se evaluó la activación de los genes SlWRKY 8, SlWRKY 23 y SlWRKY 39, una vez transcurridas 24 y 48 horas de la aplicación tanto de una sustancia de origen vegetal como extracto (T 1), de una sustancia química (T 2) y de un fungicida de venta comercial (T 3). Las plantas de tomate de mesa fueron cultivadas bajo condiciones controladas. Una vez aplicados los tratamientos, se procedió a la extracción del ARN, se utilizó PCR en tiempo real y cuantificación relativa para el análisis de la expresión de los genes citados. Con los resultados obtenidos, se realizó el análisis estadístico ANOVA y la prueba HSD de Tukey para discriminar la efectividad de los tratamientos.De los genes WRKY analizados, únicamente SlWRKY 23 se activa alcanzando un valor Fold Change de 4 a las 24 horas con el tratamiento de agroquímico. Estos resultados informan la expresión de genes de defensa inducidos por sustancias con acción biocida y la posibilidad de caracterizar otras sustancias que puedan producir esta activación sobre plantas de tomate
Prevalencia de leucosis bovina en la comunidad Santo Domingo n° 1, Cayambe-Ecuador 2012
Get PDFIn the parish of Ayora, Santo Domingo community N? 1 was carried out a serological diagnosis for the detection of Bovine Leucosis by means of the ELISA test. The objectives of the research were to determine the prevalence of the disease, the related risk factors, and estimate the number of positive cases occurring in the slaughterhouse of the Canton Cayambe; through a postmortem anatomopathological clinical examination. According to the epidemiological research a prevalence of 5.6 % of a total of 250 samples was determined. The probability of infection in the relative risk of the disease is 16.86 times more in the exposed group and 0.059 times less than in the unexposed group due to inadequate sanitary practices, reproductive management, nutrition, contact with positive animals and replacements from farms that do not hold health certificates. Postmortem pathological lesions were diagnosed, clinical signs of the disease were observed in various organs. A prevalence of 46.38 %, from a total of 511 animals confirmed the presence of bovine Leucosis in dairy herds in the community N? 1 of Santo Domingo, and pathologic lesions in slaughtered animals in the slaughterhouse.En la Parroquia de Ayora, comunidad Santo Domingo N° 1 se realizó el diagnóstico serológico para la detección de Leucosis bovina mediante la prueba de ELISA. Los objetivos de la investigación fueron, estimar la prevalencia de la enfermedad y su relación con los factores de riesgo, determinar el número de casos positivos que ingresaron al camal del Cantón Cayambe mediante el examen clínico patológico posmorten.Según las medidas epidemiológicas establecidas en la investigación se determinó una prevalencia de 5,6% de un total de 250 muestras. La probabilidad de contagio en el Riesgo Relativo a la enfermedad es de 16,86 veces más en el grupo de los expuestos y de 0,059 veces menor en los no expuestos, debido a las inadecuadas prácticas de manejo sanitario, reproductivo, alimentación, convivencia con animales positivos, reemplazos provenientes de ferias y haciendas que no constan con certificado sanitarios.En el camal del Cantón Cayambe se diagnosticó lesiones anatomopatológicas posmorten en los animales faenados, presentando signos clínicos aparentes a la enfermedad en varios órganos, lo qué evidencio una prevalencia de 46,38%, de un total de 511 bovinos y que confirmo la presencia de Leucosis bovina en hatos lecheros en la comunidad Santo Domingo N° 1, y lesiones anatomopatológicas en animales faenados en camal
ESTANDARIZACIÓN DE PROTOCOLOS PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN CROMOSÓMICO EN CEPAS DE colletotrichum gloeosporioides AISLADOS EN PLANTAS DE MANGO (Mangifera indica l.).
Get PDFColletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc. is responsible for anthracnose in mango, a disease that affects all aerial parts of the plant, causing losses of up to 12 % of production. Microbial identification and characterization is important for determining prevention and pathogen control measure in plantations. This research aimed to standardize protocols for isolation of genomic DNA in strains of Colletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc., to ensure quality and concentration for future molecular studies in different representatives of this fungal species. Isolation of genomic DNA was performed by three methods: CTAB Doyle y Doyle (1990); Kuramane-Izioka (1997) with modifications and CTAB California modified by Ramirez et al., (2004) combined with NucleoSpin commercial reagent kits. The quality of the DNA obtained was tested by absorbance measurement at 260 and 280nm. The first method was not effective while the other methods yielded were obtained with genomic DNA with the appropriate concentrations for molecular research on the species. Modifications to the Kuramane-Izioka (1997) method, contributed to its effectiveness. The California CTAB method modified by Ramirez et al. (2004) constitutes the first report of its use for representatives of the Fungi kingdom.Colletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc. es la especie responsable de la antracnosis en el mango; esta enfermedad afecta toda la parte aérea de la planta, produciendo pérdidas hasta de 12% de la producción. La identificación y caracterización microbiana es importante para la toma de medidas de prevención y control del patógeno en plantaciones. Esta investigación tuvo como objetivo estandarizar protocolos de aislamiento de ADN genómico en cepas de Colletotrichum gloeosporioides (Penz) Penz & Sacc., que garantice calidad y concentración para futuros trabajos moleculares en diferentes representantes de esta especie fúngica. El aislamiento de ADN genómico se realizó por tres metodologías: CTAB Doyle y Doyle (1990), Kuramane-Izioka (1997) con modificaciones y CTAB California modificado por Ramírez et al., (2004) conjugadas con juegos de reactivos comerciales NucleoSpin. La calidad del ADN obtenido fue comprobada por absorbancia medida a 260 y 280nm. El primero de los métodos no resultó efectivo mientras que con los otros se obtuvo ADN genómico con la calidad y concentraciones adecuadas para investigaciones moleculares con la especie. Las modificaciones realizadas al método Kuramane-Izioka (1997), contribuyeron a la efectividad del mismo. El método CTAB California modificado por Ramírez et al., (2004) constituye el primer informe de su uso para representantes del reino Fungi
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS Y DE CONCENTRACIÓN DE CAPSAICINA EN CINCO ESPECIES NATIVAS DEL GÉNERO Capsicum CULTIVADAS EN ECUADOR
Get PDFGenetic resources in the genus Capsicum (chili), family (Solanaceae), are important for being a natural source of capsaicin. The information about this feature is scarce in native chili species in Ecuador. The aim of this study was to analyze main morphological characteristics in plants, fruits and seeds of five species of the genus Capsicum: C. baccatum, C. chinense, C. pubescens, C. annuum y C. frutescens, collected in the provinces of Loja, Santo Domingo de los Tsáchilas, Esmeraldas, Los Ríos and Morona Santiago. We also identified and quantified the capsaicin present in the oleoresin coming from fruits of these species. Identification of capsaicin was performed by Thin Layer Chromatography (TLC), comparing the oleoresins with the standard USP capsaicin (98.9 %), getting an Rf value of 0.184; capsaicin denotes a low fluorescence at a wavelength of 254nm. Capsaicin was quantified using High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Capsicum chinense presented the highest yield with an average of 11340 mg/kg, it was concluded that this species has a high potential for Capsaicin extraction, which can be used commercially in food and/or pharmaceutical industry.Los recursos genéticos del género Capsicum (ajíes), familia: (Solanaceae), son importantes por ser fuente natural de Capsaicina. Los reportes sobre esta característica en los ajíes nativos de Ecuador son escasos. En el presente estudio se analizaron variables morfológicas de plantas, frutos y semillas de cinco especies de este género: C. baccatum, C. chinense, C. pubescens, C. annuum y C. frutescens, procedentes de las provincias de Loja, Santo Domingo de los Tsáchilas, Esmeraldas, Los Ríos y Morona Santiago. Igualmente se identificó y cuantificó la Capsaicina presente en la oleorresina de los frutos de estas especies. La identificación de Capsaicina fue efectuada mediante Cromatografía en Capa Fina (TLC) comparando las oleorresinas con el estándar de Capsaicina USP (98,9%), obteniendo un Rf de 0,184; la Capsaicina presentó una leve fluorescencia a una longitud de onda de 254 nm. La cuantificación del metabolito fue realizada mediante Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC). Capsicum chinense presentó el rendimiento más alto con un promedio de 11340 mg/kg; se concluyó que esta especie posee un alto potencial para la extracción de Capsaicina, la misma que puede ser utilizada a nivel comercial en la industria farmacológica y/o alimenticia
DESARROLLO DE LA PITAHAYA (Cereus SP.) EN ECUADOR
Get PDFThe pitahaya (Cereus sp.) is an exotic tropical fruit, widely distributed in America and even present in the Asian continent. In Ecuador is located in the provinces of Pichincha, Morona Santiago and Loja. It is a climbing shrub whose fruit is a berry with a taste appeal. It is known that this plant has been used as a living fence or ornamental form by their morphological characteristics, however the nutritional characteristics have taken more prominence in the last decade because has been found that the fruit shows the property of being a complete nutritional food. The most important characteristic is its high content in bioflavonoids and concentration of fatty acid plus fiber, minerals and vitamins showing adjuvant effects on cardiac and gastrointestinal problems. Unfortunately few studies about the benefits of this fruit have been carried out in the country. In fact, the lack of research study by national researchers is due to the commercial competition with other fruits apparently more interesting such as banana, tree tomato and cacao.La pitahaya (Cereus sp.) es una fruta exótica tropical, ampliamente distribuida en América e incluso presente en el continente Asiático.En Ecuador se encuentra en provincias como Pichincha, Morona Santiago y Loja. Es un arbusto trepador cuyo fruto es una baya deatractivo sabor. Se conoce que esta planta ha sido empleada como cerca viva o de forma ornamental por sus características morfológicas,sin embargo sus características nutricionales han tomado más realce en la última década ya que le atribuyen la propiedad de serun fruto alimenticio completo. Las más relevantes, su alto contenido en bioflavonoides y la concentración de ácidos grasos, ademásde fibra, minerales y vitaminas los mismos que presentan efectos cardiotónicos y coadyuvantes en problemas gastrointestinales. Lamentablementeen el país se han generado escasos estudios acerca de los beneficios de esta fruta, debido a la competencia comercialcon otros frutos aparentemente de mayor interés como el banano, tomate de árbol y cacao
BIODEGRADACIÓN DE LOS FENOLES PRESENTES EN EL EXTRACTO DE GUARANGO (Caesalpinia spinosa) Y EN LOS COLORANTES ÍNDIGO CARMÍN, NARANJA II Y ROJO FENOL A TRAVÉS DE Trametes versicolor Y Aspergillus niger
Get PDFThis research was done to evaluate phenol biodegradation capacity in Guarango (Caesalpinia spinosa) tannic extract phenols and in indigo carmine, orange II and red phenols, common residues in the textile industry. Two types of fungi were used, white-rot Trametes versicolor fungus and the filamentous Aspergillus niger. Biological treatments were applied in triplicate through the spectrophotometric UV method for 15 days. When applying the Trametes versicolor fungus to the tannic extract, there was 69.45 % degradation, and a 100 % discoloration in the indigo carmine. When applying the Aspergillus niger fungus to the tannic extract and orange II dye, there was a 63,45 % and 32,78 % degradation, respectively. There was a discoloration no greater than 26 % when applying Trametes versicolor and Aspergillus niger to the red phenol. The fungi applied during the biological treatment presented tolerance to both the tannic extract composition as well as the concentration of each dye used, verified through growing kinetics of each fungus.Esta investigación se la realizó con el fin de evaluar la capacidad de biodegradación de los fenoles presentes en el extracto de tánico de guarango (Caesalpinia spinosa) y en los colorantes índigo carmín, naranja II y rojo fenol, presentes en los desechos de la industria textil. Se utilizaron dos tipos de hongos, el de podredumbre blanca Trametes versicolor y filamentoso Aspergillus niger. Los tratamientos biológicos se aplicaron por triplicado, realizados por el método espectrofotométrico UV por 15 días; los resultados obtenidos al aplicar el hongo Trametes versicolor en el extracto tánico fue del 69,45 % de degradación; y en el colorante índigo carmín fue del 100 % de decoloración. Los resultados de la degradación con el hongo Aspergillus niger sobre el extracto tánico fue del 63,45 % y en el colorante naranja II fue del 32,78 %. En la aplicación de Trametes versicolor y Aspergillus niger sobre el colorante rojo fenol se obtuvieron porcentajes de decoloración no mayores al 26 %. Los hongos aplicados en los tratamientos biológicos presentaron tolerancia tanto a la composición del extracto tánico como a las concentraciones de cada uno de los colorantes usados, esto fue comprobado con la cinética de crecimiento para cada hongo
Desarrollo de repelencia al agua en suelos afectados por incendios, en una zona del parque metropolitano del distrito metropolitano de Quito
Get PDFSoil exposure to high temperatures during wildfires can induce water repellency, in some cases having the following effects: changes in soil nutrient, carbon and organic matter admission rates; soil loss; changes in the stability of aggregates; the appearance of preferential flow of water; and eventually, erosion. This work determined the severity and persistence of water repellency on a previously scorched soil in an 13.4 hectares area of the Metropolitan Park of Quito. To determine the persistence of soil water repellency the time of penetration of a drop of water (WDPT) methodology was used, and to test the repellency severity the molarity of ethanol (MED) test was used. The highest values of water repellency and organic material were identified four months after the fire, as well as a decrease of both measures as time went by, which demonstrated that the fire created a transferring of hydrophobic organic compounds into the soil, generating temporary water repellencyLa exposición del suelo a temperaturas altas durante la ocurrencia de un incendio forestal, puede inducir el desarrollo de repelencia al agua y otros efectos que alteran la calidad del suelo, entre los que destacan: cambios en el contenido de carbono y de materia orgánica, pérdida de suelo, aparecimiento de flujos preferenciales y erosión. En este trabajo se determinó la severidad y persistencia de la repelencia al agua alcanzada por un suelo previamente quemado dentro de una zona de 13,4 has en el Parque Metropolitano en la Ciudad de Quito. La determinación de la persistencia de la repelencia al agua del suelo se realizó utilizando la metodología de tiempo de penetración de una gota de agua (WDPT) y la severidad de la repelencia se determinó utilizando el test de molaridad de etanol (MED). Los valores más altos de persistencia a la repelencia al agua, fueron determinados a los cuatro meses de haber ocurrido el incendio y permitieron clasificar al suelo afectado por fuego como “Fuertemente Repelente”. Se observó que la persistencia de la repelencia inducida por el fuego fue transitoria y disminuyó con relación al tiempo, determinándose un decremento de la repelencia en las muestras analizadas a los siete y nueve meses. No se encontró una relación definitiva entre el incremento de la repelencia al agua y el aumento de la materia orgánica, que presentó el promedio de concentración más alta a los cuatro meses de ocurrido el incendio (5,88 %)
Estudio de la actividad antibacteriana y tóxica del kuiship (jacaranda copaia)
Get PDFThe purpose of this study was to assess the antibacterial activity of gram positive and gram negative pathogens and evaluate their toxicity with respect to Artemia salina in Kuiship (Jacaranda copaia (Aubl.) D. Don) leaf extracts. First, three Uhi Shñu (wise man) were interviewed to determine their previous medicinal uses. Plant tissue was gathered from the Capirona Community and ethereal, ethanolic, and aqueous extracts were obtained from the J. copaia leaves. Then a phytochemical, antimicrobial screening process was undertaken, determining the minimum inhibitory concentration (MIC) of native bacteria that presented positive or sensitive antibacterial activity when faced with extracts in agar diffusion tests. Finally, an in vitro bioassay with Artemia salina was performed to determine the toxicity of the J. copaia extracts. The presence of the following secondary metabolites was identified: oils and fats, triterpenes-steroids, catechins, saponins, reducing sugars, alkaloids, quinones, bitter tannins and constituents. During the antibacterial assays, the sensitive bacterial strains were: S. aureus versus the ethereal extract, and E. coli versus the J. copaia aqueous extract. The MIC was determined for these two native bacteria. The bioassay for A. salina revealed that the J. copaia ethereal and ethanolic extracts presented moderate toxicity with a concentration of 1000 ppm.La presente es una investigación que valora la actividad antibacteriana frente a patógenos nativos gram positivos y gram negativos y evalúa la toxicidad frente a Artemia salina en extractos de las hojas del Kuiship (Jacaranda copaia (Aubl.) D.Don). En primer lugar se entrevistaron a tres Uhi Shñu (hombres sabios) para determinar usos medicinales previos. A continuación se recolectó el material vegetal en la Comunidad de Capirona y se obtuvo el extracto etéreo, etanólico y acuoso de las hojas de J. copaia. Se realizó un screening fitoquímico, antibiogramas y se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) sobre bacterias nativas que presentaron sensibilidad frente a los extractos en los ensayos de difusión en agar. Finalmente se realizó un bioensayo in vitro con Artemia salina para determinar la toxicidad de los extractos de J. copaia. Como metabolitos secundarios se identificaron: aceites y grasas, triterpenos-esteroides, catequinas, saponinas, azúcares reductores, alcaloides, quinonas, taninos y principios amargos. En los ensayos antibacterianos las cepas sensibles fueron: S. aureus frente al extracto etéreo y E. coli frente al extracto acuoso de J. copaia; se determinó la CMI para estas dos bacterias nativas. En el bioensayo con A. salina se puso de manifiesto que los extractos etéreo y etanólico de J. copaia presentan toxicidad moderada a una concentración de 1000 ppm
Comparación de la actividad acaricida de los aceites esenciales de ocimum basilicum, coriandrum sativum y thymus vulgaris contra tetranychus urticae
Get PDFEcuador is the third largest exporter of flowers in the world; their diversity and quality are internationally renowned and they are a major contribution to the country’s economy. However, this industry is threatened by numerous pests; one of the most harmful being the acarus known as “red spider mite” or Tetranychus urticae. Dangerous, synthetic pesticides are used in order to control this mite. Our research was carried out in the flower farm of “La Juliana” (north Andean zone of Ecuador, 00?03’00” N and 78?12’00”, 2840 mamsl). Its objective was to evaluate the acaricidal properties of three essential oils: coriander (Coriandrum sativum), basil (Ocimum basilicum), and thyme (Thymus vulgaris), against the Tetranychus urticae mite. The effects of the acaricide test were measured 24 and 48 hours after applying the essential oils, and the results were compared through non-parametric analysis. The effective concentration for Ocimum basilicum was of 1.60 %, for Thymus vulgaris was of 1.60 % and for Coriandrum sativum, 3.12 %. Furthermore, each concentration was compared to the research control “ethanol” group and a synthetic pesticide mixture used regularly by the flower farm technicians. After 24 hours, the thyme essential oil showed the best acaricidal effects, after 24 and 48 hours high effectiveness was observed for the thyme and basil essential oils. Finally, a natural product was formulated whose active ingredient was the thyme essential oil and compared to the Abamectin-Tetradifon synthetic blend, showing a similar acaricidal effect.Ecuador es el tercer país exportador de flores del mundo, su diversidad y calidad son un atractivo internacional y representan un gran aporte económico para el país; sin embargo, estos cultivos se encuentran amenazados por diversas plagas, una de las más perjudiciales es el ácaro “arañita roja”Tetranychus urticae. Para su control se usan plaguicidas sintéticos tóxicos. La presente investigación fue realizada en la Florícola “La Julian” (zona andina norte de Ecuador, 00?03’00” N y 78?12’00” O, 2840 msnm), su objetivo fue el de identificar la actividad acaricida de los aceites esenciales de albahaca (Ocimum basilicum), tomillo (Thymus vulgaris) y cilantro (Coriandrum sativum) contra el ácaro Tetranychus urticae. Los análisis de acción acaricida se realizaron 24 y 48 horas después de haber aplicado el aceite esencial, y los resultados fueron comparados mediante análisis no paramétrico. Para Ocimum basilicum la concentración efectiva fue de 1,6 %, para Thymus vulgaris 1,6 % y para Coriandrum sativum 3.12 %. Además, cada concentración se comparó con el control de la investigación “etanol” y con una mezcla de productos sintéticos utilizada regularmente en la Florícola. A las 24 horas, el aceite esencial de tomillo presentó el mejor efecto acaricida; a las 24 y 48 horas, la efectividad fue mayor con los aceites de tomillo y de albahaca. Finalmente, se formuló un acaricida natural cuyo principio activo fue el aceite esencial de tomillo; éste se comparó con la mezcla sintética Abamectina-Tetradifón, mostrando similar efecto acaricida