Publicaciones seriadas del CENSA (E-Journals)
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Identificación de Streptococcus agalactiae en leche de bovinos afectados por mastitis en el occidente de Cuba
Get PDFStreptococcus agalactiae is one of the main agents causing mastitis in dairy cattle, with important implications for humans; whereby the diagnosis, control and prevention of this microorganism is fundamental to animal and human health as well for the economy. The objective of this work was to detect the presence of S. agalactiae in milk from cattle herds affected by mastitis. Five hundred and seventy-four samples of milk were collected from quarters affected with mastitis (840 production cattle of Siboney de Cuba, Holstein and Jersey breeds of 14 dairy farms in western Cuba). Bacteriological diagnosis was performed in all samples. DNA and PCR were extracted with primers that amplified a segment of the 16S-23S rRNA intergenic region, from colonies with morphological characteristics and biochemical tests indicative of S. agalactiae. The 43.45 % of animals showed symptoms of clinical or subclinical mastitis. In 57 samples (9.97 %), colonies characteristic of S. agalactiae were isolated, and 43 (75.43 %) were positive by PCR. Of the latter, 26 (60.46 %) corresponded to quarters with three crossings, 14 (32.55 %) to two crossings and 3 (6.97 %) to clinical rooms. S. agalactiae was isolated in eight dairy farms and the most affected breeds were Holstein and Siboney de Cuba. Strains of S. agalactiae were isolated and identified in mastitis-affected cows, indicating the need for programs to control mastitis caused by S. agalactiae to mitigate the effects caused by this microorganism on human-animal-environment interfaces.Streptococcus agalactiae es uno de los principales agentes causantes de mastitis en el ganado lechero, con importantes implicaciones para el humano; por tanto, el diagnóstico, el control y la prevención de este microorganismo resulta fundamental para la salud animal, humana y la economía. El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de S. agalactiae en leche de rebaños bovinos afectados con mastitis. Se colectaron 574 muestras de leche de cuartos afectados con mastitis (840 bovinos en producción de las razas Siboney de Cuba, Holstein y Jersey en 14 lecherías del occidente de Cuba). Se realizó el diagnóstico bacteriológico a todas las muestras. A partir de las colonias con características morfológicas y pruebas bioquímicas indicativas de S. agalactiae, se realizó la extracción de ADN y PCR con cebadores, que amplificaban un segmento de la región intergénica 16S-23S rRNA. El 43,45 % de los animales mostró síntomas de mastitis clínica o subclínica. En 57 muestras (9,97 %) se aislaron colonias características de S. agalactiae; 43 (75,43 %) resultaron positivas por PCR. De estas últimas, 26 (60,46) correspondieron a cuartos con tres cruces, 14 (32,55 %) a dos cruces y 3 (6,97 %) a cuartos clínicos. S. agalactiae fue aislado en ocho lecherías y las razas más afectadas fueron Holstein y Siboney de Cuba. Se aislaron e identificaron cepas de S. agalactiae en vacas afectadas con mastitis, lo cual indica la necesidad de programas para el control de la mastitis causada por S. agalactiae para mitigar los efectos causados por este microorganismo en las interfaces hombre-animal-medio ambiente
Vacunas parasitarias: un recuento bibliográfico
Get PDFA bibliographic compilation was carried out in informative databases: Academic Search Complete (EBSCO), Scopus and Web of Science, from 1965 to 2019, with the aim of compiling the main researches carried out with a view to achieving immunogens against the most important parasites in humans and animals. The advances obtained are mainly evidenced in Plasmodium falciparum, Giardia lamblia, Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Taenia solium, Schistosoma mansoni, and Rhipicephalus microplus, among other pathogenic parasites. It is concluded that the development of parasite vaccines is a major challenge and it is currently focused on new works on molecular biology to select more effective antigens, as well as strategies to search for new adjuvants to support the appropriate targeting of the immune response.Se realizó una recopilación bibliográfica en bases de datos informativas: Academic Search Complete (EBSCO), Scopus y Web de la Ciencia, desde el año 1965 hasta 2019, con el objetivo de recopilar las principales investigaciones realizadas con vistas a lograr inmunógenos contra los parásitos más importantes que afectan a humanos y animales. Se evidencian los avances obtenidos, fundamentalmente, en Plasmodium falciparum, Giardia lamblia, Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Taenia solium, Schistosoma mansoni, Rhipicephalus microplus, entre otros agentes parásitos patógenos. Se concluye que la elaboración de vacunas contra parásitos resulta un gran reto y actualmente se enfoca en nuevos trabajos de biología molecular para seleccionar antígenos más eficaces, así como se consideran estrategias para buscar nuevos adyuvantes que favorezcan la orientación apropiada de la respuesta inmune
Comportamiento de genotipos de yuca frente a la enfermedad del mosaico africano de la yuca en Namibe, Angola
Get PDFThe response of 19 foreign genotypes and 21 national genotypes to the African cassava mosaic virus (ACMV) was evaluated, and the disease incidence and severity were analyzed. The total number of the plants planted by genotypes at the Namibe Agricultural Experiment Station, Angola, was sampled in February 2017, June 2017, and February 2018. The whitefly adult density per genotype was averaged to calculate the density index on each date, which was compared using a simple analysis of variance and the Duncan´s multiple range test for a confidence level of 95 %. The cluster analysis showed that the genotypes were grouped according to the disease severity. Some genotypes were detected with high severity indexes (0.8-1); however, TMS-84004, TMS-0276, TMS-300027, TMS-40142, TMS-800098, TMS-3021, TMS-300027, TMS-42025, Mz-3, Kassakala, and Canfufu, showed severity indexes of 0.2, the lowest index obtained. This result allowed suggesting genotypes that under high vector density conditions showed lower rates of disease severity, which can be used under adequate pest management conditions.Este estudio se realizó en Angola con el objetivo de determinar el comportamiento de 19 genotipos foráneos y 21 nacionales de yuca (Manihot esculenta Crantz) frente al mosaico africano de la yuca (CMD-del inglés Cassava Mosaic Disease). Se analizaron la incidencia y la severidad del CMD. Se realizaron muestreos del total de plantas sembradas, de cada genotipo, en la Estación Experimental Agrícola de Namibe, Angola, en los periodos de febrero de 2017, junio de 2017 y febrero de 2018. La densidad de adultos de moscas blancas por genotipos se promedió para calcular el índice de densidad en cada fecha, y los datos se analizaron mediante análisis de varianza simple y se compararon (Duncan, nivel de confianza del 95 %). Se efectuó un análisis de conglomerados, lo que evidenció que los genotipos se agrupan de acuerdo a la severidad. Se detectaron genotipos con índices de severidad alto (0,8-1); sin embargo, TMS-84004, TMS-0276, TMS-300027, TMS-40142, TMS-800098, TMS-3021, TMS-300027, TMS-42025, Mz-3, Kassakala y Canfufu, tuvieron los valores de índices de severidad más bajos (0.2). Este resultado permitió sugerir genotipos que, en condiciones de alta densidad del vector, alcanzaron menores índices de severidad de la enfermedad, los cuales pueden ser usados bajo adecuadas condiciones de manejo de la enfermedad
Detección de infección mixta de ‘Candidatus phytoplasma sp.’ y begomovirus afectando el cultivo de la soya en la región oriental de Cuba
Get PDFThe objective of the work was to detect the presence of mixed infections of phytoplasmas and begomoviruses associated with symptomatic soybean plants collected in production areas of the eastern region of Cuba. A total of 545 foliar samples of the cultivar Incasoy 27 with symptoms associated with phytoplasmas and begomoviruses were taken from 11 soybean producing localities. The samples were evaluated by nPCR to detect the presence of phytoplasmas and by RCA / RFLP to determine infection by begomoviruses. The evaluation by nPCR showed the presence of phytoplasmas in 39.45 % of the total samples collected. The analysis by RCA / RFLP showed that 47.88 % of these plants were infected by begomoviruses. The presence of mixed infections in the crop was determined in 15.96 % of the samples. Infections by both pathogens, both single and mixed, occurred in all the provinces of the country, where Holguín and Las Tunas provinces showed the highest percentages of infection. The study showed that the variability of symptoms associated with the presence of phytoplasmas and begomoviruses and mixed infections by both did not allow establishing specific relationships between symptoms and pathogens, being required the use of other diagnostic tools to confirm their specific presence. To our knowledge, this is the first report of the presence of mixed infections by begomoviruses and phytoplasmas in the soybean crop in Cuba.El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de infecciones mixtas de fitoplasmas y begomovirus asociados a plantas de soya sintomáticas, colectadas en áreas de producción de la región oriental de Cuba. Se recolectaron 545 de muestras foliares del cultivar Incasoy 27, de 11 localidades productoras, con síntomas asociados a fitoplasmas y begomovirus. Las muestras se evaluaron mediante nPCR para detectar la presencia de fitoplasmas y por ACR/RFLP para determinar la infección por begomovirus. La evaluación mediante nPCR mostró la presencia de fitoplasmas en 39,45 % en el total de muestras recolectadas. El análisis por ACR/RFLP mostró que 47,88 % de estas plantas estaba infectado por begomovirus. Se determinó la presencia de infecciones mixtas en el cultivo en 15,96 % de las muestras. Las infecciones por ambos patógenos, tanto en forma simple como mixta, se presentaron en todas las provincias del país. Las provincias Holguín y Las Tunas mostraron los mayores porcentajes de infección. El estudio demostró que la variabilidad de síntomas asociados a la presencia de fitoplasmas y begomovirus e infecciones mixtas entre ambos no permitió establecer una relación específica entre síntomas y patógenos, por lo que se requiere el uso de otras herramientas de diagnóstico que permitan confirmar de forma específica la presencia de estos. A nuestro conocimiento, este resultado constituye el primer informe de la detección de infecciones mixtas de fitoplasmas y begomovirus en el cultivo de la soya en Cuba
Staphylococcus aureus en la cadena de producción de queso fresco artesanal
Get PDFArtisan fresh cheese is a nutritious and highly preferred food for populations in many countries. The production of artisan fresh cheeses constitutes one of the main sources of income and a tradition for the agricultural sector of many countries of Latin America, and Cuba is no exception. The cheese produced in Cuba is a typical product from raw milk, with the use of the artisan coagulant agent, whose quality is strongly influenced by the geographical area of production and its traditions. The hygiene of the milk and cheese obtain depends on the habits and production procedures of the microflora present in the milk and the local environment in which they are produced. However, this kind of food does not have a quality system associated with production. Different studies have reported deficiencies in the sanitary conditions of production of this food. The consumption of fresh cheese represents one of the greatest risks in the transmission of pathogenic microorganisms. Staphylococcus aureus can be transmitted to the food chain of dairy products, leading to contaminated dairy products and possible staphylococcal poisoning by the production of enterotoxins. These elements justify the objective of this study regarding the description of the food safety problem associated with the presence of Staphylococcus aureus in the production chain of artisan fresh cheese in Cuba.El queso fresco artesanal es un alimento nutritivo y de alta preferencia en muchos países. La producción de quesos frescos artesanales constituye una de las principales formas de ingreso y tradición para el sector agrícola en América Latina; Cuba no es una excepción. El queso producido en Cuba es un producto a partir de leche cruda, con el uso de agente coagulante artesanal, cuya calidad está fuertemente influenciada por el área geográfica de producción y sus tradiciones. La higiene de la leche y del queso que se obtienen depende de los hábitos y procedimientos productivos, de la microflora presente en la leche y del ambiente del local en el que se producen. Sin embargo, este tipo de alimentos no tiene un sistema de calidad asociado con la producción. Diferentes estudios han informado deficiencias en las condiciones sanitarias de producción de este alimento. El consumo de queso fresco representa uno de los mayores riesgos en la transmisión de microorganismos patógenos. Staphylococcus aureus se puede transmitir a la cadena alimenticia de los productos lácteos, lo que lleva a productos lácteos contaminados y la posible intoxicación estafilocócica por la producción de enterotoxinas. Estos elementos justifican el objetivo del presente estudio, donde se describe el problema de inocuidad de los alimentos asociado a la presencia de Staphylococcus aureus en la cadena de producción de queso fresco artesanal en Cuba
Ensayo de PCR en tiempo real basado en SYBR-Green I para la detección de herpesvirus bovino tipo 1
Get PDFBovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) infects the respiratory and genital tracts of cattle and several species of ruminants. The infection can result in different diseases such as infectious bovine rhinotracheitis, infectious pustular vulvovaginitis in females and infectious pustular balanoposthitis in males, with a severe economic impact on livestock production. The infection causes respiratory symptoms, conjunctivitis, abortions, enteritis, and fatal systemic infection in newborn calves. One of the most important characteristics of bovine herpesvirus type 1 is the establishment of a latent infection that can be reactivated under stress conditions or by treatment with high doses of corticosteroids. The present work was aimed at developing an SYBR Green I Based Real-Time RT-PCR assay for the detection of bovine herpesvirus type 1, by amplifying a fragment of the viral thymidine kinase gene. The parameters of the critical components of the PCR reaction as well as the thermodynamic conditions were established. Dissociation curve analysis showed that the amplification curves were specific (Tm = 93°C ± 1°C) and that there were no unspecific amplifications. High levels of specificity, repeatability and sensitivity were obtained, with a detection limit of 100.5 TCID50/mL. Diagnostic sensitivity was assessed on the basis of nasal exudates from experimental breeding animals, reactivation of latent infection and experimental dairy farms. The SYBR Green I Based Real-Time RT-PCR assay proved to be more sensitive for the diagnosis of BoHV-1 than the endpoint PCR assay and virus isolation.El herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) infecta los tractos respiratorio y genital del ganado bovino y varias especies de rumiantes. La infección puede resultar en diferentes enfermedades como rinotraqueitis infecciosa bovina, vulvovaginitis pustular infecciosa en hembras y balanopostitis pustular infecciosa en machos, con un severo impacto económico en la producción ganadera. La infección produce diferentes cuadros clínicos como respiratorios, conjuntivitis, abortos, enteritis e infección sistémica fatal en terneros recién nacidos. Una de las características más importante del herpesvirus bovino tipo 1 es el establecimiento de una infección latente que puede ser reactivada bajo condiciones de estrés o por tratamientos con altas dosis de corticosteroides. El presente trabajo tuvo como objetivo el desarrollo de un ensayo de PCR en tiempo real basado en SYBR-Green I para la detección de herpesvirus bovino 1, mediante la amplificación de un fragmento del gen de la timidina quinasa viral. Se establecieron los parámetros de los componentes críticos de la reacción de PCR, así como de las condiciones termodinámicas. Mediante el análisis de la curva de disociación se verificó que las curvas de amplificación fueron específicas (Tm = 93°C ± 1°C) y que no hubo amplificaciones inespecíficas. Se obtuvieron altos niveles de especificidad, repetibilidad y sensibilidad, con un límite de detección de 100.5 DICT50/mL. Se evaluó la sensibilidad diagnóstica a partir de exudados nasales procedentes de animales de una reproducción experimental, de reactivación de la infección latente y de vaquerías experimentales. El ensayo de PCR en tiempo real con SYBR-Green I demostró ser más sensible para el diagnóstico de BoHV-1, que el ensayo de PCR en punto final y el aislamiento viral
Agresividad diferencial entre aislados de Botrytis cinerea Pers. en Fragaria vesca L. cv. Albion
Get PDFAggressiveness in plant pathogenic fungi is defined as the negative quantitative effect they cause on their respective hosts. In the present work, fruits of strawberry (Fragaria vesca cv. Albion) with symptoms of gray mold (Botrytis cinerea Pers.) were collected from the farm property of Mr. Juan Panimboza Yanzapanta in the Cevallos canton of the Tungurahua province. Ecuador, from December 2016 to March 2017. The inoculation trials were performed on ripe strawberry fruits of the cv. Albion. The fruits were immersed in conidial suspensions of the different fungal isolates and left in the laminar flow cabinet. They were then placed in hermetic bags with a piece of moistened cotton wool and incubated at 20°C in the dark for 10 days. Nine isolates of B. cinerea pathogenic to the strawberry fruit were obtained, but the most aggressive were the isolates CC-ESPOCH-Bc-6, CC-ESPOCH-Bc-4, and CC-ESPOCH-Bc-7. This is the first report on differential aggressiveness of B. cinerea isolates in F. vesca cv. Albion in Ecuador, which provides the basis for future studies on the identification of virulence factors developed by the Ecuadorian populations of B. cinerea in strawberry and, with it, the selection of durable sources of resistance.La agresividad de los hongos fitopatógenos se define como el efecto cuantitativo negativo que causan sobre sus respectivos hospedantes. En el presente trabajo se recolectaron frutos de fresa del cultivar Albion con síntomas del moho gris en la finca del señor Juan Panimboza Yanzapanta, del cantón Cevallos en la provincia Tungurahua de Ecuador, en el periodo de diciembre 2016 a marzo de 2017. Los ensayos de inoculación se realizaron sobre frutos maduros de fresa del cv. Albion. Los frutos fueron sumergidos en suspensiones conidiales de los diferentes aislados y se dejaron secar en cabina de flujo laminar. Posteriormente, se colocaron en bolsas herméticas con una porción de algodón humedecido y se incubaron a 20°C y en oscuridad durante 10 días. Mediante la técnica del cultivo monospórico, se obtuvieron nueve aislados de B. cinerea, patogénicos en frutos del cultivo de fresa cv Albion, aunque los más agresivos fueron los aislados CC-ESPOCH-Bc-6, CC-ESPOCH-Bc-4 y CC-ESPOCH-Bc-7. Los resultados presentados constituyen el primer informe que muestra agresividad diferencial de aislados de B. cinerea en F. vesca cv. Albion en Ecuador, lo cual sienta las bases para estudios futuros que permitan identificar los factores de virulencia de poblaciones ecuatorianas de B. cinerea en fresa y con ello seleccionar fuentes de resistencia durables
Bioactividad de Spilanthes acmella (Asteraceae) a Raoiella indica (Acari: Tenuipalpidae) y selectividad al depredador Amblyseius largoensis (Acari: Phytoseiidae)
Get PDFThe jambu, Spilanthes acmella (Asteraceae), has bioactivity on pests, but little is known of the effect on phytophagous mites and its compatibility with predatory mites. The red palm mite, Raoiella indica, is a severe pest of several crops, coconut trees among them. The predatory mite Amblyseius largoensis (Acari:Phytoseiidae) is found in association with R. indica in several countries, and it can assist in the control of this pest in the field. Associated with biological control, products that are compatible with natural enemies could help control this pest. Therefore, the acaricidal activity of S. amella on R. indica and its selectivity for the predator A. largoensis was evaluated using concentration-mortality bioassays of its ethanolic extract (EE). Additionally, the repellent effect and the population growth rate were evaluated in the LC50 and LC80. The EE of S. acmella was highly toxic to R. indica, but it did not kill A. largoensis. The LC50 and LC80 of the EE from S. acmella, estimated for R. indica, were repellent to the pest untill 48 hours after application, while, at its highest concentration, it repelled.El jambu, Spilanthes acmella (Asteraceae), posee bioactividad contra plagas; sin embargo, es poco conocido sobre el efecto a ácaros fitófagos y su compatibilidad con ácaros depredadores. El ácaro rojo del cocotero Raoiella indica es una plaga severa de diversos cultivos agrícolas, dentro de los cuales está el cocotero. El ácaro depredador Amblyseius largoensis (Acari: Phytoseiidae) se encuentra en asociación con R. indica en diversos países y puede auxiliar en el control de esta plaga en campo. Asociado al control biológico, los productos que sean compatibles con los enemigos naturales pueden ayudar en el control de esta plaga. Se evaluó la actividad acaricida por medio de bioensayos de concentración-mortalidad del extracto etanólico (EE) de S. acmella contra R. indica y su selectividad al depredador A. largoensis. Además, se evaluaron el efecto repelente y la tasa de crecimiento poblacional en la CL50 y la CL80. La CL50 y la CL80 de EE de S. acmella, estimada para R. indica, fueron repelentes a la plaga hasta 48 horas después de la aplicación y repelió al depredador solamente hasta una hora en la mayor concentración. Esas concentraciones del EE de S. acmella redujeron drásticamente la tasa de crecimiento de R. indica y no afectaron el aumento poblacional del depredador. Se concluye que el EE de S. acmella podría ser utilizado en el manejo de R. indica por ser tóxico, repelente y reducir el crecimiento poblacional de esta plaga, además de ser selectivo al ácaro depredador A. largoensis
Actividad antagónica de bacterias endófitas de Leucocroton havanensis Borhidi frente a hongos fitopatógenos
Get PDFThe objective of the study was to evaluate the antagonistic activity of Bacillus strains, endophytes of the nickel hyperaccumulator plant Leucocroton havanensis Borhidi, against the fungi Alternaria alternate (Fr.) Keissl. and three species of the genus Fusarium. The production of siderophores, HCN and lytic enzymes, such as amylases, proteases, and lipases, was determined. The antagonistic activity of the bacteria against the fungi were evaluated in vitro in dual culture. The inhibition percentages were compared by analysis of variance and Tukey\u27s test. All strains produced proteases, amylases, and hydrogen cyanide (HCN), whereas 11 strains were detected to produce siderophores. All strains affected fungal growth in the antagonism test. The strain Bacillus sp. ER11 showed the highest percentages of fungal inhibition, more than 70% in all cases.El objetivo del estudio fue evaluar la actividad antagonista de cepas de Bacillus, endófitas de la planta hiperacumuladora de níquel Leucocroton havanensis Borhidi, frente a los hongos Alternaria alternata (Fr.) Keissl. y a tres especies del género Fusarium. Se determinó la producción de sideróforos, cianuro de hidrógeno (HCN) y de enzimas líticas como amilasas, proteasas y lipasas. La actividad antagonista de las bacterias, frente a los hongos fitopatógenos, se evaluó in vitro en un cultivo dual. Los porcentajes de inhibición del crecimiento se compararon mediante un análisis de varianza de clasificación simple, seguido de una prueba de Tukey. El 100 % de las cepas produjeron proteasas, amilasas y HCN; mientras que, 11 de ellas produjeron sideróforos. Todas las cepas afectaron el crecimiento de los hongos, durante el ensayo de antagonismo. La cepa Bacillus sp. ER11 mostró el mayor porcentaje de inhibición de los hongos, con valores superiores al 70 % en todos los casos
Factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de parvovirus canino en perros del municipio Boyeros, La Habana, Cuba
Get PDFA cross-sectional observational study was carried out in order to evaluate the risk factors associated to the seroprevalence of canine Parvovirus (CPV) in dogs from Boyeros municipality, Cuba. To determine the CPV-seropositive animals, blood samples were taken from 160 dogs and evaluated by an indirect ELISA standardized by the Biotechnology and Quality Control division at CENPALAB (National Center for the Production of Laboratory Animals). A mixture of previously titrated sera from animals vaccinated against CPV was used as a positive control, and a canine serum free of specific antibodies as a negative control. A survey was applied to the owners of the dogs and the risk factors associated to the seroprevalence of CPV were identified by the univariate and multivariate binary logistic regression models, using the statistical software SPSS version 22.0. It was concluded that the breed and the street access resulted in risk factors associated to a high seroprevalence of canine Parvovirus in dogs from Boyeros municipality, Cuba.Con el objetivo de evaluar los factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de parvovirus canino (PVC) en perros del municipio Boyeros, Cuba, se realizó un estudio observacional de tipo transversal. Para determinar los animales seropositivos a PVC se tomaron muestras de sangre a 160 canes y se evaluaron mediante un ELISA indirecto estandarizado por la división de Biotecnología y Control de la Calidad del CENPALAB. Como control positivo se empleó una mezcla de sueros previamente titulados de animales vacunados y, como control negativo, sueros de caninos libres de anticuerpos específicos. Se aplicó una encuesta a los propietarios de los canes y se identificaron los factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de PVC mediante análisis de regresión logística binaria univariada y multivariada, utilizando el software estadístico SPSS versión 22.0. Se concluyó que la raza y el acceso a la calle resultaron factores de riesgo asociados a una alta seroprevalencia de parvovirus canino en los perros del municipio Boyeros, Cuba