Azabu University Science Information Repository / 麻布大学学術情報リポジトリ
Not a member yet
1842 research outputs found
Sort by
Identification of multiple inter- and intra-genotype reassortment mammalian orthoreoviruses from Japanese black cattle in a beef cattle farm
Get PDFIntranasal tumors in dogs are malignant solid tumors that are primarily treated with radiotherapy and often recur post-treatment. Combination therapy is pivotal in cancer therapy. Effective drugs include fluoropyrimidine 5-fluorouracil (5-FU) and toceranib phosphate. TS-1, an oral formulation containing the 5-FU prodrug tegafur and enzyme modulators gimeracil and oteracil, is proven to be safe in dogs with solid tumors. While the oral drug toceranib phosphate (Palladia®) is safely administered, the combined toxicity with TS-1 is unknown. We aimed to determine the dosage of this combination in dogs. In the preclinical/clinical trials conducted here, we used a standard 3+3 cohort design with fixed doses of toceranib phosphate (2.4 mg/kg) administered thrice weekly. TS-1 administration was initiated at a dose of 0.5 mg/kg (upper limit 2.0 mg/kg) thrice weekly. Four cohorts were included to confirm the safety of TS-1 and toceranib phosphate. Each cohort was followed up for 1 month. The intranasal tumor types included in the clinical trial (n=13) were adenocarcinoma (n=7), squamous cell carcinoma (n=1), non-epithelial malignancy (n=2), undifferentiated carcinoma (n=1), and transitional carcinoma (n=2). The TS-1 dosage could be increased up to its dose limit in the preclinical/clinical trials. The TS-1 dose to combine with toceranib phosphate thrice weekly was 2.0 mg/kg. This regimen was well-tolerated in dogs. Thus, combined TS-1 and toceranib phosphate therapy is safe for dogs with intranasal tumors.journal articl
A study of 23 dairy cows with post‐partum uterine torsion
Get PDFBackground: Uterine torsion in dairy cows generally occurs during gestation. How-ever, some cows develop uterine torsion after calving, and the details of which are notknown.Objectives: The present study aimed to investigate the clinical signs, epidemiologicalcharacteristics and treatment methods of 23 cases of post-partum uterine torsion indairy cows.Methods: A total 23 Holstein dairy cows diagnosed with post-partum uterine torsionwere investigated. The clinical signs and epidemiological information were reviewedfrom medical records. The diagnostic methods, findings and treatment method of eachcase were recorded.Results and conclusions: Post-partum uterine torsion is typically observed in dairycows 9.6 ± 3.7 days after calving. That is, 21 out of 23 [91%] were multiparous and8 out of 23 [34.8%] were characterised by multiple births. The retained placenta wasobserved in at least 20 out of 23 [87%], and a standing abnormality was observed in18 out of 23 [78.3%]. The clinical signs observed in all cases included anorexia andaccumulation of lochia and gas with a putrid odour in the uterus. In addition, eight andnine cases treated with the transrectal manual method and laparotomy, respectively,were cured. In conclusion, post-partum uterine torsion in dairy cows developed around10 days after calving, with anorexia and accumulation of lochia and gas with a putridodour in the uterus. It has been suggested that torsion can be reconstructed using thetransrectal manual method or laparotomy.journal articl
Oral Exposure to Low Concentration of Fumonisin B2, but Not Fumonisin B1, Significantly Exacerbates the Pathophysiology of Imiquimod-Induced Psoriasis in Mice
Get PDFThis study aimed to determine whether oral fumonisin exposure contributes to the development of psoriasis. Oral administration of fumonisin B1 (FB1, 0.1 mg/kg) or fumonisin B2 (FB2, 0.1 mg/kg) was conducted for 10 days, in addition to the induction of psoriatic symptoms through topical application of 5% imiquimod cream from day 6 to day 10 (5 days) in female BALB/c mice. The results demonstrated that oral administration of FB2 significantly exacerbated psoriatic symptoms, including skin thickness, itching behavior, transepidermal water loss, immune cell infiltration in the dermis, and proinflammatory cytokine production. However, no changes were observed following exposure to FB1. Our results confirm that oral exposure to FB2 adversely affects the pathogenesis of psoriasis by increasing skin thickness and impairing barrier function.journal articl
The Phytochemical, Quercetin, Attenuates Nociceptive and Pathological Pain: Neurophysiological Mechanisms and Therapeutic Potential
Get PDFAlthough phytochemicals are plant-derived toxins that are primarily produced as a form of defense against insects or microbes, several lines of study have demonstrated that the phytochemical, quercetin, has several beneficial biological actions for human health, including antioxidant and inflammatory effects without side effects. Quercetin is a flavonoid that is widely found in fruits and vegetables. Since recent studies have demonstrated that quercetin can modulate neuronal excitability in the nervous system, including nociceptive sensory transmission via mechanoreceptors and voltage-gated ion channels, and inhibit the cyclooxygenase-2-cascade, it is possible that quercetin could be a complementary alternative medicine candidate; specifically, a therapeutic agent against nociceptive and pathological pain. The focus of this review is to elucidate the neurophysiological mechanisms underlying the modulatory effects of quercetin on nociceptive neuronal activity under nociceptive and pathological conditions, without inducing side effects. Based on the results of our previous research on trigeminal pain, we have confirmed in vivo that the phytochemical, quercetin, demonstrates (i) a local anesthetic effect on nociceptive pain, (ii) a local anesthetic effect on pain related to acute inflammation, and (iii) an anti-inflammatory effect on chronic pain. In addition, we discuss the contribution of quercetin to the relief of nociceptive and inflammatory pain and its potential clinical application.journal articl
Preclinical/clinical trials of thrice-weekly administration of a combination of tegafur/gimeracil/oteracil (TS-1) and toceranib phosphate in dogs with intranasal tumors
Get PDFIntranasal tumors in dogs are malignant solid tumors that are primarily treated with radiotherapy and often recur post-treatment. Combination therapy is pivotal in cancer therapy. Effective drugs include fluoropyrimidine 5-fluorouracil (5-FU) and toceranib phosphate. TS-1, an oral formulation containing the 5-FU prodrug tegafur and enzyme modulators gimeracil and oteracil, is proven to be safe in dogs with solid tumors. While the oral drug toceranib phosphate (Palladia®) is safely administered, the combined toxicity with TS-1 is unknown. We aimed to determine the dosage of this combination in dogs. In the preclinical/clinical trials conducted here, we used a standard 3+3 cohort design with fixed doses of toceranib phosphate (2.4 mg/kg) administered thrice weekly. TS-1 administration was initiated at a dose of 0.5 mg/kg (upper limit 2.0 mg/kg) thrice weekly. Four cohorts were included to confirm the safety of TS-1 and toceranib phosphate. Each cohort was followed up for 1 month. The intranasal tumor types included in the clinical trial (n=13) were adenocarcinoma (n=7), squamous cell carcinoma (n=1), non-epithelial malignancy (n=2), undifferentiated carcinoma (n=1), and transitional carcinoma (n=2). The TS-1 dosage could be increased up to its dose limit in the preclinical/clinical trials. The TS-1 dose to combine with toceranib phosphate thrice weekly was 2.0 mg/kg. This regimen was well-tolerated in dogs. Thus, combined TS-1 and toceranib phosphate therapy is safe for dogs with intranasal tumors.journal articl
Evaluation of the biofilm detection capacity of the Congo Red Agar method for bovine mastitis-causing bacteria
Get PDFThe Congo Red Agar method (CRAM), a method for detecting the presence of bacterial biofilm-forming capacity, does not provide sufficient knowledge on the criteria for each bacterial species. In this study, the biofilm detection capacity of the CRAM and the criteria for determining the presence of biofilm-forming capacity of bovine mastitis-causing bacteria were examined. 149 strains isolated from the milk of dairy cows with clinical mastitis were determined for biofilm-forming capacity using the CRAM. The Calgary Biofilm Device Method was also used as a comparative experiment. The study showed that the suitable medium and incubation time in the CRAM differed for each bacterial species, and the criteria for determining the presence of biofilm-forming capacity in each species could be determined.journal articl
チワワにおける粘液腫様変性性僧帽弁疾患に関する研究
Get PDF麻布大学博士(獣医学)粘液腫様僧帽弁疾患（MMVD）は犬で高率に発生する疾患であり、犬の心疾患の70%以上を占める。罹患率が加齢と共に上昇することや小型犬に好発するといった疾患の特徴から、病理学的な探索を含めたものでは8才以上の小型犬の90%がMMVDに罹患しているという報告まで存在する。
本疾患の病因は、弁尖や腱索における線維層の破壊、および海綿層における酸性ムコ多糖類の過剰な蓄積（粘液腫様変性）であり、その結果として弁尖同士の接合不良や腱索の伸長が起こり、僧帽弁逆流（MR）を生じる。病態はこのMRの量によって変化し、逆流量が少ない、つまりMMVDの初期であれば、レニン-アンジオテンシン-アルドステロン系、交感神経系、神経体液性因子の亢進により、MRによって減少した心拍出量を適度に代償することが可能である。しかし、逆流量が増加したMMVDでは、心拍出量を維持するために、前述の機序が生体にとって過度な代償機転として働き、左房、左室への容量負荷となる。最終的には左房圧、肺静脈圧が上昇することで、うっ血性心不全、すなわち肺水腫へと進行する。
MMVDの罹患率には、犬種差や動物種差が存在することから遺伝性因子の関与が考えられるものの、正確な発生機序は未だ不明である。したがって、罹患犬の交配を避ける繁殖プログラムを除けば、粘液腫様変性の発生を未然に防ぐ方法や粘液腫様変性そのものを治療する方法はない。実際にうっ血性心不全を発症した犬の予後は不良であり、内科治療のみでの生存期間中央値は9ヶ月程度とされている。
すべての犬種がMMVDに罹患する可能性はあるものの、本疾患は小型犬、特にチワワに好発する。欧米を中心とした多施設で行われた疫学調査（LOOK-Mitral registry）によれば、6,016頭のMMVDのうち、チワワは雑種犬、キャバリア・キングチャールズ・スパニエル（CKCS）に次いで3番目に多く、483例が罹患犬として組み入れられている。欧州と異なり本邦では、チワワはトイプードルに次いで2番目に多く、5万頭以上が飼育されているといった背景から、国内ではMMVDに罹患したチワワに遭遇する頻度はさらに高いと考えられる。
罹患率だけではなく、チワワではMMVDが重症化する。僧帽弁形成術は病態が進行したMMVDに適応となる治療法であるが、手術を受けた犬種の内訳に注目すると常にチワワが上位を占めている。犬種ごとに死因を調べた疫学研究においても、チワワの死因は循環器疾患が最も多いことが明らかとなっており、チワワではMMVDは生存に関わる疾患となっている。
このように、本邦の小動物獣医臨床ではチワワのMMVDは極めて重要な疾患である。しかしながら、チワワのみならず本疾患が発症する根本的な機序についてはこれまでに解明されていない。そこでMMVDがチワワで好発する要因を解明するには早期段階における病態について詳細に観察する必要があると考えた。本研究の目的は、チワワのMMVDの早期病態の把握と臨床的検査法の確立である。
研究1 健常なチワワの心形態の測定と基準値の確立
犬の心エコーの基準値は犬種ごとに異なる。ところが、過去に報告されている心エコーの基準値は、多犬種、主に大型犬を中心に集められたデータから構成されており、チワワの心エコーの参考値はこれまでに明らかとなっていない。したがって、研究1では健常なチワワの心エコー指標（心臓内腔径）の基準値の確立を目的とし、47例の臨床的に健康なチワワを用いて、体重に対して指数関数的に変化する心エコー値のアロメトリー式を求めた。
結果1 健常なチワワの心エコー値は過去に報告された基準値に準ずる
チワワにおける心臓内腔径は、一般臨床で汎用されている、大型犬を中心とした集団から求められた体重で補正する基準値から大きく逸脱するものはなく、チワワであっても過去に報告されている基準値に準ずることが明らかとなった。MMVDの病態評価に重要となる左心房と左心室の内腔径は、チワワにおいても体重に従い指数関数的に変化した。
さらに、偶発的な所見として、若齢の心雑音が聴取されない個体（一般的には健常と認識される）においても、非常に軽微なMRを有していることを高頻度に確認した（47例中38例）。本来MMVDは高齢期に発症する疾患であることから、この現象はチワワにおけるMMVDの特徴を示唆している可能性が考えられた。
なお、研究1はThe Journal of Veterinary Medical Science 2022 10;84(6):754-759に公表済みである。
研究2 心雑音が聴取されない若齢のチワワにおける僧帽弁逆流の特徴と保有率
研究1で心雑音が聴取されない若齢のチワワの多くにMRが認められたことから、MRの保有率と僧帽弁の形態およびMRの特徴について調べた。6歳以下の心雑音のない臨床的に健康なチワワ30例に対して心エコーを行い、僧帽弁逆流の有無および僧帽弁の形態（肥厚、逸脱）を評価した。
結果2 若齢時のチワワでは高い割合で僧帽弁逆流を有する
MRは30例中26例（86.7%）と極めて高い割合で認められた。MMVDを示唆する所見である僧帽弁の肥厚、左心房側への逸脱は、それぞれ17例（56.7%）、14例（46.7%）で認められた。これらの結果から、チワワでは若齢期からMRを有しており、若い個体であってもMMVD を発症している可能性が示唆された。
また、一般的なMRは収縮期のすべての時相（全収縮期）で逆流を生じるが、この本来のMRの時相とは異なり収縮期の後半部分のみに限定して生じるMR（収縮後期MR）が6例で確認された（MRを呈する26例中6例［23.1％］）。収縮後期MRは、これまでに獣医療では報告されていない現象であり、本犬種における高いMMVD発症率の一つの因子になりうると予想された。
研究2は2022年度のアメリカ獣医内科学会年次大会で発表済みであり、投稿準備中である。
研究3 心雑音が聴取されない若齢のチワワにおけるバイオマーカーと僧帽弁逆流との関連性
研究2の結果から、チワワではMRが若齢期から生じていることが明らかとなった。この極めて早期の変化がANPとNT-proBNPの値に及ぼす影響を検討した。ANP、NT-proBNPなどのバイオマーカーは近年、獣医療で心疾患の病態を評価するために用いられており、心房、心室への伸展刺激によって血中濃度が上昇する。心雑音の聴取されない28例の健常なチワワから採取した56検体のANPとNT-proBNPを前方視的に測定し、その結果とMRの程度を比較した。MRの程度は心エコー検査におけるMR面積をもとに、MR 20%以上群と20%未満群、さらに10%以上群と10%未満群に分類した。
結果3 早期MRをANPやNT-proBNPから推定することはできない
ANP、NT-proBNPのいずれの値もMR面積の違いにおける有意な差なく、すべての群で既報の基準値と同程度であった。以上のことから、チワワで認められる軽微なMRは、心臓バイオマーカーの異常値として検出されないことが明らかとなった。ただし、このMRは臨床的に治療の対象とならないものでもあるため、チワワにおいても他犬種と同様に、治療介入を決定するためのスクリーニング検査としてバイオマーカーを用いることが可能と解釈できる結果であった。
研究3は第10回神奈川県獣医師会学術大会（2023年3月）で発表済みであり、投稿準備中である。
本研究によりチワワは若齢期より軽微なMRを有していることが明らかとなり、この犬種がMMVDを好発する要因のひとつである可能性を示した。我々は、チワワが若齢時からMRを保有している原因は、犬種特異的な僧帽弁装置の形態によるものであると仮説を立てている。人医では、研究2で確認された収縮後期MR は、僧帽弁装置の時相変化（運動性）によって起こっていることが報告されているため、チワワにおいても同様の現象である可能性は高いと考えている。追加研究として僧帽弁を多面的に評価し、僧帽弁の形態、僧帽弁輪径、腱索長、さらにこれらの項目について時相による位置変化を観察することを予定している。
本研究は、本犬種のMMVD進行に伴う臨床的評価法として重要な心エコー検査指標と心臓バイオマーカーについて基準となる情報を提供した。doctoral thesi
Multifaceted approach for evaluating peripheral neurotoxicity in isoniazid-treated rats
Get PDF麻布大学博士(獣医学)In drug development, assessment of non-clinical peripheral neurotoxicity is important to ensure human safety. Clarifying the pathological features and mechanisms of toxicity enables the management of safety risks in humans by estimating the degree of risk and proposing monitoring strategies. Published guidelines for peripheral neurotoxicity assessment do not provide detailed information on which endpoints should be monitored preferentially and how the results should be integrated and discussed.
To identify an optimal assessment method for the characterization of peripheral neurotoxicity, we conducted pathological, biochemical (biomaterials contributing to mechanistic considerations and biomarkers), and behavioral evaluations of isoniazid-treated rats. We found a discrepancy between the days on which marked pathological changes were noted and those on which biochemical and behavioral changes were noted, suggesting the importance of combining these evaluations. Although pathological evaluation is essential for pathological characterization, the results of biochemical and behavioral assessments at the same time points as the pathological evaluation are also important for discussion. In this study, since the measurement of serum neurofilament light chain could detect changes earlier than pathological examination, it could be useful as a biomarker for peripheral neurotoxicity. Moreover, examination of semi-thin specimens and choline acetyltransferase immunostaining were useful for characterizing morphological neurotoxicity, and image analysis of semi-thin specimens enabled us to objectively show the pathological features.【背景及び目的】
医薬品開発における非臨床・臨床試験では、薬剤性末梢神経障害がしばしば報告される。ヒトの安全性を確保するために、非臨床試験において末梢神経毒性を正確に評価することが重要である。末梢神経毒性の病態生理や機序を明らかにする評価は、ヒトでのリスク程度の推定やモニタリング方法の提案を可能とし、ヒトでの安全性リスクマネジメントに繋がる。
末梢神経毒性評価に関する指針（OECDガイダンス等）では推奨評価項目の選択肢が公表されているが、どの評価項目を優先するべきか、結果をどう組み合わせて考察するべきか、といった情報は記されていない。例えば、末梢神経毒性を回避した候補化合物を取得するためのスクリーニングを目的として試験を実施するのであれば、神経毒性の推奨評価項目を広く含むような試験計画は困難なため、状況に合わせた評価項目の設定が求められる。
末梢神経毒性の非臨床評価では、実情として次の課題が挙げられる：①末梢神経毒性バイオマーカー（BM）が未確立、②どの行動学的評価を実施するのが有効か不明確、③病理形態学的特徴を客観的に示すための標準的な方法が未確立、④適切な解剖時点設定が困難。
そこで、末梢神経毒性の特徴づけのために最適な評価方法を見出すことを目的として、ビタミンB6（VB6）欠乏による末梢神経障害を誘発するisoniazid（INH）投与ラットを用いて、病理評価だけでなく、生化学評価及び行動評価を組み合わせて実施し、結果を関連づけながら多角的に考察した。また、薬剤開発の初期段階で神経毒性評価項目を効果的に選択することを想定し、各評価方法の意義・有用性を検証した。
【材料】
雄性SDラットに、INHを0（溶媒対照）、250、500 mg/kg/dayの用量で3日間反復経口投与した。投与初日をDay1としてDay4、Day9、Day30の3点で剖検を実施した（n=5/群）。
【第1章：行動評価】
【方法】一般状態観察、体重・摂餌量測定、熱刺激感覚検査（Hotplate法）、
詳細行動観察（Irwin変法一部項目）、血液・血液生化学検査
【結果】
一般状態観察で著変なし。投与群において体重・摂餌量の低下が投与期間中に用量依存的に継続して認められたが、投与終了後速やかに増加に転じた。
Day 3に高用量群の2/15例で、熱刺激感覚検査での回避行動遅延が認められた。Day4に高用量群の3/15例で、軽度な後肢同側屈筋反射低下が認められた。
血液学的検査では、Day4に高用量群の網状赤血球が用量依存的に減少し、Day 9に増加。投与期間中の体重減少に伴う一過性の変化及びそのリバウンド作用と考えられた。血液生化学的検査では、Day 4に以下の所見が認められた：Clは高用量群でわずかに増加（投与期間の状態悪化を疑う）、GLDH、UN及びCREの軽度の増加が認められた（一過性の肝・腎障害を疑う）。
【考察】
行動評価では、同側屈筋反射の評価が有用と考えられた。一般状態観察で検出できなかった行動異常が検出できたこと、観察が簡便なため一般毒性試験に組み込んで実施しやすいこと、動物へのストレスが少なく毎日評価が可能であること、が利点である。熱刺激感覚検査でも異常を検出できたが、主観的観察による評価で変化の判断が難しいこと、馴化と評価に長時間を要したことから、毒性試験への組込みは困難と考えられた。
【第2章：生化学評価】
【方法】血清中neurofilament-light（Nf-L）測定、
血漿中VB6（pyridoxal [PL], pyridoxal 5'-phosphate [PLP]）測定
【結果】
液性BMとしての有用性を検証するため、血清中Nf-L濃度を測定した。Day4で投与群において用量依存的に顕著な増加が認められ、Day9で高用量群において有意な増加がみられた。Day30では投与群の濃度は対照群と同等だった。
VB6レベルと神経毒性の関連性を検討するため、血漿中VB6（PL及びその活性型リン酸化体PLP）濃度を測定した。Day4で顕著かつ有意な減少が用量依存的に認められたが、Day9以降減少は認められなかった。
【考察】
血清Nf-Lの高値から、神経傷害を検出する液性BMとしてのNf-Lの有用性が示唆された。血清を用いる測定は非侵襲的であり、ヒトでの毒性モニタリングにも有用である。
INH誘導末梢神経傷害の初期段階で血漿PL及びPLP減少が生じることが確認された。毒性機序の仮説が立てられない場合はどの内因性物質を測定するべきかの判断が困難であるが、機序仮説に関連する内因性物質の測定は、毒性機序を考察するための有用な根拠となるだろう。
【第3章：病理評価】
【方法】ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）標本の組織検査（脳・脊髄・脊髄後根神経節・坐骨神経・脛骨神経・伏在神経）、坐骨神経FFPE標本の免疫組織化学染色（choline acetyltransferase [ChAT], Nf-L, Iba-1）、坐骨神経semi-thin標本の組織検査、坐骨神経semi-thin標本の画像解析、坐骨神経の超微形態学的検査
【結果】
FFPE標本観察の結果、各末梢神経に神経線維変性が用量依存的に認められた。Day4では高用量群で軽度な変化が散発的にみられたのみだったが、Day9に最も顕著となり高頻度に神経線維変性像が認められた。Day30では神経線維変性は殆ど完全に回復したが、Iba-1陽性泡沫状マクロファージ浸潤がみられた（損傷した軸索及び髄鞘の貪食処理像と考えられた）。坐骨神経ChAT免疫染色の結果、陽性となる運動神経に神経線維変性は殆ど認められず、この変化は感覚神経に主座したと考えられた。
Semi-thin標本観察の結果、神経変性の程度と相関してmyelin ovoidの頻度が増加し、神経線維の形態学的ばらつきもみられた。Day4の低用量群でもmyelin ovoidは認められた。画像解析によりG-ratio（軸索径/神経線維径）を神経線維数の分布としてヒストグラムを作成した結果、myelin ovoid増加はG-ratio 0値増加として示され、神経線維のばらつきはG-ratio分布の減少及びG-ratio0.6-0.8値の軽度な増加として示された。
病態が強い標本では、神経線維径に大小不同がみられ、G-ratio（軸索径/神経線維径）のヒストグラム画像解析の結果、G-ratioのバラつき増加として認められた。画像認識の妥当性は、目視で認識が正しい/誤っている神経線維をカウントし、陽性的中率及び感度が90%以上であることで確認した。
超微形態学的検査の結果、軸索変性の経時変化が明らかとなった。Day4に軸索損傷の初期像として軸索及び髄鞘の崩壊がみられた。Day9には多くの神経線維に軸索変性、髄鞘崩壊、軸索消失を伴うmyelin ovoid形成、シュワン細胞肥大、髄鞘過形成、小型髄鞘線維の増加が認められた。Day30には、細い髄鞘を伴う小径神経線維の頻度が増加した。
【考察】
観察された神経線維変性の病理学的特徴は、INH誘発末梢神経毒性評価の論文報告と一致していた。Semi-thin標本観察は、変化が軸索と髄鞘のどちらに起きているかを判別でき、末梢神経毒性の形態学的特徴づけに有用だった。
ヒストグラムを用いた画像解析により、病理学的特徴を客観的に示すことができた。特に医薬品開発においては画像解析の妥当性を示すことが重要で、バリデーション方法の標準化が求められている。
FFPE標本のChAT免疫染色は主にCNS神経細胞体の染色に用いられているが、本研究での染色結果は、ChATが末梢神経においても運動/自律神経と感覚神経を識別するのに有用であることを示唆した。
また、第2章で述べた末梢神経毒性BMとしてのNf-Lの有用性は、病理評価結果と組み合わせることで、病変を感度よく早期に捉えられることがわかり、さらに強く示唆された。血清Nf-L濃度は、病理変化が最も顕著だったDay9よりもDay4で高く、損傷初期に多くのNf-Lが漏出すると考えられた。FFPE標本で病変が認められなかったDay4低用量群でもNf-Lは高値であった。過去の報告からは、血清Nf-L濃度は病理学的変化と同時に増加することが想定されたが、本研究では、Nf-L高値は病理変化のピークよりも早いことを示した。
【結論】
本研究では、INH誘発末梢神経障害ラットをモデルとして使用し、末梢神経毒性の特徴づけのために最適な評価方法を見出した。顕著な病理学的変化の時点と生化学及び行動的評価の変化時点の間には不一致があり、複数の剖検時点を設定し、各評価を組み合わせることの重要性が示唆された。病理学的評価は病理学的特徴づけに必須であるが、病理学的評価と同じ時点での生化学及び行動的評価の結果は価値がある。
また、本研究では、血清Nf-L測定が病理変化より早期かつ顕著に変動することを見出し、末梢神経毒性BMとして非常に有用であることを示した。さらに、semi-thin標本の観察とChAT免疫染色は形態学的神経毒性の特徴づけに有用であり、semi-thin標本の画像解析により客観的に病理学的特徴を示すことができた。
なお、本アプローチを一般化するためには、他の末梢神経毒性機序を有するモデルを用いたさらなる評価及び検証が必要である。doctoral thesi
