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肉用牛生産に関わる生殖工学技術とゲノミック評価
Get PDF第22回 麻布大学 生殖・発生工学セミナーP(論文)会議録・学会報告application/pdfPROCEEDINGSdepartmental bulletin pape
Analysis of the risk factors for superficial digital flexor tendinopathy in racing horses
Get PDF麻布大学博士(獣医学)Racehorses are a specific species of athletic horses that frequently develop orthopedic diseases. In this study, we focused on superficial digital flexor (SDF) tendinopathy, which is prevalent among thoroughbred racehorses. In chapter 1, literature discussing the pathology, diagnosis, and treatment of SDF tendinopathy is reviewed.
SDF tendinopathy is an orthopedic disease that causes degeneration and bleeding in the SDF tendon. Eventually, the damaged areas of the SDF are replaced by scar tissue, and recurrence becomes more frequent because of the loss of toughness associated with scar tissue development. In addition, the treatment for SDF tendinopathy requires a long time. Furthermore, diagnosing whether the injury has been completely healed can be difficult, and no reliable treatment method has been established so far. Therefore, preventing the onset of this disease is essential to avoid great economic loss.
In chapter 2, an analysis was performed to identify risk factors associated with the development of SDF tendinopathy in racing horses. The authors selected racehorses (n = 292) diagnosed with SDF tendinopathy based on the medical records from a racetrack. Among the track-related variables that were identified as risk factors, a sloppy track surface was associated with a significantly higher risk of SDF tendinopathy than a standard track surface (odds ratio: OR = 1.69; P < 0.01). No significant differences in the weather conditions at race times were identified between racehorses with SDF tendinopathy and control racehorses. Among the race-related variables that were identified as risk factors, the OR for SDF tendinopathy was significantly increased for the following variables: (i) when the horse finished in 10th place or worse (OR = 2.50; P < 0.01); (ii) when the racehorse ran a short race (<1,300 m) (OR = 1.45; P < 0.05); and (iii) when the racehorses’ favorites were worse than or equal to the 8th place (OR = 1.49; P < 0.05). Among the racehorse-related variables that were identified as risk factors, the body weights of racehorses with SDF tendinopathy, for the race during which SDF tendinopathy occurred, was significantly heavier than the body weights of control racehorses (P < 0.01). When the body weight at race time was ≥ 470 kg, the SDF tendinopathy OR increased significantly (OR = 1.55; P < 0.01). A decrease in body weight ≥ 5 kg compared with the body weight recorded in the previous race significantly increased the SDF tendinopathy OR (OR = 1.59; P < 0.05). In addition, male and gelding horses had higher SDF tendinopathy ORs (OR = 1.35; P < 0.05 and OR =3.09; P < 0.01, respectively) compared with female horses. No significant differences were identified in horse ages between SDF tendinopathy and control racehorses. Among the race career-related variables that were identified as risk factors, When the total race distance for the last 3 races was < 4,000 m and the total race distance for the last 6 races was < 8,000 m, the SDF tendinopathy OR increased significantly (OR = 1.40; P < 0.05 and OR = 1.47; P < 0.05, respectively). When the number of days since the previous race was ≥ 90-days, the SDF tendinopathy OR increased significantly (OR = 1.75; P < 0.05). No significant differences were identified with respect to a history of other diseases between SDF tendinopathy and control horses. A total of 0.69% of the studied horses (2/292) had a history of SDF tendinopathies.
As a countermeasure for the prevention of SDF tendinopathy, sloppy track surfaces should be avoided, and horses should be guided toward more solid track surfaces. Selecting long-distance races with slower speeds, if possible, could also reduce the risks of horses developing SDF tendinopathy. Informing horse owners and trainers of the results of this analysis will contribute to reducing the number of racehorses whose active lives are disrupted by the development of SDF tendinopathy[諸言]
アスリートである競走馬は、運動器疾患の発生が多い動物種である。本研究では、サラブレッド競走馬に好発する浅屈腱炎に着目し、浅屈腱炎によって出走できなくなる馬を減らすことを目的に、第１章で浅屈腱炎についての文献調査を、第２章で浅屈腱炎発症の危険因子の解析を行った。
第1章では、馬の浅屈腱炎の病態、診断、治療について調査した。馬の浅屈腱炎とは、浅指屈筋腱の腱中心部に変性、出血が生じる運動器疾患である。運動負荷による腱組織内の温度上昇、循環血液量低下が変性の原因である。しかし、競走馬であるゆえ、運動は避けて通ることはできないことが現実である。休養によって、腱の損傷部位は最終的に瘢痕組織に置換されるが、腱組織の弾力性は失われ、運動再開による浅屈腱の損傷は容易に発生する。そのため、馬の臨床現場では、浅屈腱炎は再発率の高い疾患と認識されている。超音波検査によって診断は可能であるものの、腱組織に回復したか、瘢痕組織に置換されたままかの判断はできないので、調教再開の判断は困難である。また、浅屈腱炎に効果のある治療方法は確立しておらず、内科治療、外科治療、再生医療のいずれも長期間の休養が必要である。これらのことから、浅屈腱炎は経済的損耗が大きく、発症を未然に防止することが重要であると考えられた。
第2章では、競走馬の浅屈腱炎の発症危険因子について解析した。2011年から2015年までの5年間の大井競馬場の医療記録から、浅屈腱炎と診断された馬292頭を症例馬群として選出した。対照馬は、浅屈腱炎を発症した症例馬と同じ調教師、同時期に出走、同じ年齢であることを選出の条件とし、浅屈腱炎の症例馬1頭に対して、対照馬を2頭、合計584頭を選出した。症例馬および対照馬のレース記録は、オンラインデータベースから収集した。解析項目は、馬場状態（良馬場、稍重、重、不良）、出走時の天候（晴、曇、雨、雪）、着順、レース距離、馬券の人気、出走時の体重、前回出走からの体重の増減、性別、直前３および６レースの競走距離、前回出走からの出走間隔とし、症例馬と対照馬の比較は、student-t検定によって、有意差検定を実施した。また、浅屈腱炎発症馬のオッズ比（ORs）は、カイ二乗検定により実施した。これらの統計学的解析は、危険率5％未満をもって有意差ありと判断した。
馬場関連の危険因子では、不良馬場は良馬場よりも、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR= 1.69; P <0.01）。出走時の天候は、症例馬群と対照馬群との間に差を認めなかった。レース関連の危険因子では、着順は、症例馬群が対象馬群よりも有意に悪かった（P < 0.01）。着順が10着以下であった場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 2.50; P < 0.01）。また、競走距離は、1,300m未満であった場合に浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.45; P < 0.05）。さらに、馬券の人気が8番より悪かった場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.49; P < 0.05）。馬関連の危険因子では、出走時の馬の体重は、症例馬群が対照馬群よりも有意に重かった（P < 0.01）。また、浅屈腱炎発症馬の体重は470kgより重い場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.55; P < 0.01）。さらに、前回出走から体重5kg以上減少していた場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.59; P < 0.05）。雄と去勢雄は、雌よりも浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（雄：OR= 1.35; P<0.05、去勢雄：OR=3.09; P < 0.01）。競走歴関連の危険因子では、直近3レースの競走距離は、症例馬群が対照馬群よりも有意に短かった（P < 0.01）。直近3レースの競走距離が4、000メートル未満であった場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.40; P < 0.05）。また、直近6レースの競走距離は、症例馬群が対照馬群よりも有意に短かった（P < 0.05）。直近6レースの競走距離が8,000メートル未満であった場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.47; P < 0.05）．前回出走からの出走間隔は、症例馬群が対照馬群よりも有意に長かった（P < 0.05）。出走間隔が90日以上であった場合に、浅屈腱炎のオッズ比は有意に高かった（OR = 1.75; P < 0.05）。病歴関連の危険因子では、病歴の有無は、浅屈腱炎発症に関連はなかった。
以上、不良馬場状態、短い競走距離、出走時の重い体重、前回出走からの体重の減少、長い出走間隔が、浅屈腱炎発症における危険因子であることが明らかとなった。獣医師、調教師、馬主がとれる浅屈腱炎を未然に防ぐ対策として、不良馬場であった場合には、騎手はレース中のコース取りに注意することを指導する。また、走行速度の速い短距離のレースは避け、比較的走行速度の遅い長距離のレースを選ぶことを提案する。
本研究の結果を馬主、調教師に啓発することで、浅屈腱炎によって出走できなくなる馬を一頭でも減らすことに貢献できると考える。doctoral thesi
The elucidation of the role of gut microbiota in behavioral development during early life period
Get PDF麻布大学博士(学術)It has been shown that early weaning induce various developmental effects and the early-weaned mice (EW mice) show increased anxiety, the enhancement of the stress response of hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis, and reduced maternal behavior in their adulthood. It has also known that early life stress including early weaning impacts the immune system and therefore increases vulnerability to infection. Interestingly, offspring of the EW mice shows the enhanced stress response of HPA axis and behavioral changes similarly with the EW mice. In addition, many studies has recently reported that composition of gut microbiota at juvenile period affects the development of both the nervous and immune system. Here, we hypothesized that early weaning modulates the gut microbiota composition and then affects the development of the nerve and/or immune system. In addition, the influence of early weaning could be transmitted to the next generation by vertical transmission of the modulated gut microbiota. To test these hypotheses, in the chapter 1, we observed the change of anxiety and depression-like behaviors in EW mice and then examined the involvement of gut microbiota in their behavioral changes using Germ-free (GF) mice. As results, EW mice showed high hyperactivity in both the marble burying test and the open field test. In tail suspension test, the higher depression-like behavior was found in EW females but lower depression-like behavior in EW males, suggesting the sex difference in the effect of early weaning on depression-like behavior. In the test using GF mice, the depression-like behavior in GF mice colonized with gut microbiota of EW mice (GF-EW mice) was higher as compare with GF mice colonized with NW mice (GF-NW mice). We also analyzed the number of immune cells in the spleen, Peyer’s patches and mesenteric lymph nodes when GF-EW and GF-NW mice were 10week of age. GF-EW mice had a decreased number of CD4+ T cells in the spleen. These results suggest that the gut microbiota is involved in the developmental effects of early weaning to depression-like behavior and immune system.
Previous studies have suggested that the maternal behavior is affected by early weaning, EW mice show a lower frequency of licking/grooming. Since the offspring of EW mice similarly show lower maternal behavior, the trait of maternal behavior is also considered to be transmitted to the next generation. In the chapter 2, in order to elucidate the involvement of gut microbiota in the change of maternal behavior by early weaning, we compared the maternal behavior between the GF-EW mice and GF-NW mice. As results, GF-EW mice tended to have a lower licking and grooming rate, and the frequency of exiting the nests was significantly higher. Thus, it is suggested that the vertical transmission of microbiota may be involved in the intergenerational transmission of the traits of maternal behavior.
If the traits of maternal behavior and its intergenerational transmission are affected by gut microbiota as suggested in the chapter 2, there is a possibility that the sexual maturation during juvenile is initially affected by gut microbiota. The experiments in the Chapter 3 was aimed to investigate the effects of gut microbiota on sexual maturation. We administered the fecal microbiota of SPF mice or guinea pigs to female GF mice at 4 weeks old (GF-SPF mice or GF-Guinea pig mice). We investigated chronological changes of levels of gonadal hormones and corticosterone in the feces of 4–8-week-old female GF, SPF, GF-SPF and GF-guinea pigs mice. In each group of mice, odor preference test was conducted at 8 weeks of age. As results, fecal steroid hormone levels of GF mice were lower than those of SPF mice, fecal level of estradiol in SPF mice increased at about 6 weeks of age. The colonization of microbiota of SPF mice or guinea pigs with GF mice increased the steroid hormone levels. However, the degree of recovery of progesterone and corticosterone by microbiota of guinea pigs was lower than that by GF mice. In odor preference test, interestingly, female GF mice preferred female odors to male odors, although this preference was not seen in other mice. These suggest that the gut microbiota affects sexual maturation.
In conclusion, these findings suggest that early weaning modulates the gut microbiota composition, and this plays an important role in the developmental changes of the endocrine, nerve and immune system in the EW mice. In addition, our study also suggest that the some behavioral traits could be transmitted intergenerational by vertical transmission of gut microbiota.この博士論文は内容の要約のみの公開（または一部非公開）になっています【緒言】
ヒトを含む哺乳類は胎盤形成を介して胎児を育て、出産に至る。新生仔は体温調節や運動機能が未熟である為、親の養育行動が仔の生存や発育には欠かせない。母親は母乳を介した栄養に加えて、身体的接触を介して仔の行動や内分泌、神経発達に対して影響を及ぼすことが明らかにされてきた。これらに加えて、哺乳類の新生仔は産道を通る際に母親の膣細菌叢に曝露される。この母親の細菌叢の垂直伝播は、その後の仔の免疫の獲得や成長において極めて重要な役割を担っていることはよく研究されてきた。近年ではそれ以外にも、妊娠期母マウスへの抗生物質投与によって腸内細菌叢の構成を攪乱すると、産まれた仔マウスの不安行動が増加することや、妊娠期の母にストレスを与えることによって膣細菌叢のdysbiosisが生じ、出生した仔の腸内細菌叢と脳のアミノ酸代謝プロファイルが変化することなどが報告され始めており、母親から影響をうける幼少期の腸内細菌叢が仔の行動や神経発達を変化させることが考えられる。本研究では、幼少期の腸内細菌叢が、発達期宿主の行動および内分泌系へおよぼす影響を解明することを目的に研究を実施した。
【第1章：早期離乳による行動発達変化における腸内細菌叢の関与】
通常よりも早く離乳された早期離乳（Early weaning : EW）マウスは、通常離乳（Normal weaning : NW）されたマウスより高い不安行動を示し、ストレス応答性も亢進することが知られている。第1章ではEWマウスにおける行動表現型や免疫系の発達変化に腸内細菌叢の変化が関与しているのかを解明することを目的に実験した。
実験1ではEWマウスとNWマウスの4週齢および8週齢における行動、腸内細菌叢の構成に差異があるかを調べた。4週齢時のTail suspension testでは、EWマウスはNWマウスより顕著なうつ様行動を示した。しかし、この差異は8週齢時にはみられなかった。Marble burying testでは、EWマウスは8週齢時にNWマウスより長い移動距離を示した。Open field testでは、EWマウスとNWマウスの運動活性に差異はなかったことから、Marble burying testでみられたEWマウスの移動距離の増加は新奇物に対する反応性が亢進したと考えられる。実験2では、ビニルアイソレーター内で無菌(Germ free: GF)マウスを出産させ、仔マウスが10日齢時にその母マウスにEWマウスまたはNWマウス糞便由来細菌叢を経口投与して細菌叢マウス（GF-EW or GF-NW）を作成した。それら仔マウスの行動と腸内細菌叢構成、腸管の免疫細胞を解析した。結果としてGF-EWマウスはGF-NWマウスよりProteobacteria門の組成比が高く、Verrucomicronita門の組成比が低かった。4週齢時のTail suspension testでは、GF-EWマウスはGF-NWマウスより顕著なうつ様行動を示したが、この差異は8週齢時にはみられず、EWマウスと類似した行動変化を示した。Marble burying testにおいては4週齢時にGF-EWマウスGF-NWマウスより長い移動距離を示した。Open field testでは、GF-EWマウスとGF-NWマウスの運動活に差異はなかった。8週齢のGF-EWマウスの脾臓ではT細胞の数およびFoxp3陽性細胞の減少が認められた。これらのことから、EWによる行動発達および免疫系の変化には腸内細菌叢の変化が関与することが明らかとなった。
【第2章：母性行動の世代間伝播における腸内細菌叢の関与】
これまでEWマウスでは母性行動の中でも仔マウスへのリッキングやグルーミングの割合が低下することが知られている。さらに近年、EWマウスに育てられた次世代マウスが成体になった時も、母と同様の低い母性行動を示すことが分かってきた。第2章では、この母性行動の伝播における腸内細菌叢の関与を明らかにすることを目的に実験した。第1章の実験2と同様の方法を用いて、GF-EWマウスとGF-NWマウスを作成してビニルアイソレーター内で繁殖させ、母性行動を観察した。その結果、GF-EWマウスはGF-NWマウスと比較して、リッキングやグルーミングの割合が低下する傾向があり、巣の出入り回数が顕著に多かった。これらのことから、EWマウスで見られる低い母性行動の次世代への伝播にも腸内細菌叢の変化が関与することが示唆された。
【第3章：性発達における腸内細菌叢の関与】
GFマウスはSPFマウスと比較して産仔数や着床率が低く、膣開口が遅延することが知られている。第2章では、EWマウスの低い母性行動は腸内細菌叢構成変化に起因することが示唆されたが、そもそも腸内細菌叢の構成変化によって性発達が影響を受けた可能性がある。第3章では、雌マウスの性発達における腸内細菌叢の影響を調査することを目的とした。4週齢のGFマウスにSPFマウスまたはモルモット（Guinea pig: GP）の糞便由来細菌叢を投与した細菌叢マウス（GF-SPFマウス or GF-GPマウス）を作出した。これらのマウスに加えて、SPFマウスおよびGFマウスのステロイドホルモン（エストラジオール、プロゲステロン、コルチコステロン）の糞中含有量を8週齢まで継時的に測定した。また、これらの雌マウスが雌雄どちらのマウス尿の匂いを選択するかを評価するためにOdor preference testも実施した。その結果、GFマウスのステロイドホルモンレベルはSPFマウスよりも顕著に低く、SPFマウスでみられる週齢による増加もなかった。GF-SPFマウスでは、SPFマウスと類似したホルモン変動がみられたが、GF-GPマウスのホルモンレベルはそれよりも低かった。Odor preference testでは雌のGF-SPFマウスは雄の匂いをより長く嗅いだが、雌のGFマウスは雄の匂いへの嗜好性を示さなかった。これらのことから、腸内細菌叢は性発達に影響をおよぼすことが示唆された。
【総括】
第1章と第2章では通常よりも早く離乳したマウスの行動表現型に及ぼす腸内細菌叢の影響を、GFマウスを用いて検討した。その結果、EWマウスとEWマウス糞便由来細菌叢を経口投与されたGFマウスは同様に高いうつ様行動と新奇物に対する反応性を示すことから、早期離乳による情動行動の変化に腸内細菌叢の変化が関わっていることが示された。また、母性行動の観察結果から、EWマウス糞便由来細菌叢を経口投与されたGFマウスは、リッキングやグルーミングの割合が低下する傾向があり、巣の出入り回数が顕著に多かった。EWマウスで見られる低い母性行動と、その低い母性行動の次世代伝播にも腸内細菌叢の変化が関与することが示唆された。
第3章では、4週齢のGFマウスにSPFマウスまたはモルモットの糞便由来細菌叢を投与した各細菌叢マウス（GF-SPF or GF-Guinea pig）を作出し、性発達に対する腸内細菌叢の影響を調査した。その結果、GFマウスはSPFマウスより糞中ステロイドホルモン含量が低く、SPFマウス腸内細菌叢を投与することでSPFマウスのレベルにまでステロイドホルモンが増加した。しかし、モルモット腸内細菌叢の投与ではこの増加レベルはSPFマウスより低かったことから、ステロイドホルモンの正常な分泌には宿主特異的な腸内細菌叢が必要であることも示唆された。また、雌のGFマウスにSPFマウスの腸内細菌叢を投与することによって、GFマウスでみられない雄の匂いへの嗜好性がみられたことから、腸内細菌叢は性嗜好性の発達にも関与することが示された。
本研究から、幼少期の母子関係やストレスによって仔の情動行動や内分泌発達が変化する現象において、腸内細菌叢の構成変化が重要な役割を果たすことが明らかとなった。今後、腸内細菌叢がどのようにこれらの現象に関与するのかといったメカニズムがさらに解明され、幼少期に母子関係が障害されたりストレスに曝露された動物の行動や中枢機能が、プロバイオティクス投与によって改善されることが示されれば、伴侶動物や家畜動物の育成方法、また人の育児においても応用価値を生み出すことが期待できる。thesi
Characterization and investigation of antimicrobial resistance, and its relevance to class 1 integrons of diarrheagenic Escherichia coli isolated from humans in Japan
Get PDF麻布大学博士(獣医学)下痢原性大腸菌はヒトに下痢等の腸管感染症を引き起こす大腸菌の総称であり、腸管出血性大腸菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC）が代表的な分類として知られている。一方で腸管凝集性大腸菌（Enteroaggregative E. coli, EAEC）は、2012年に国立感染症研究所の感染症サーベイランスシステムに下痢原性大腸菌の新たな分類として追加され、分離同定の指標としてaggRなどの遺伝子が示された。EAECは海外の調査において、健康者からも高率で分離され、分離されたEAECのO抗原型には多様性があること、さらに他の下痢原性大腸菌分類に比べ薬剤耐性率が高いことなどが報告されている。しかしながら、国内ではEAECについて十分な調査がされていない。そこで本研究は、（１）2012年から2013年にヒトの便検体から分離されるEAECについて、その分離状況や病原性について調査を行い、（２）EAEC 40株についてO：H抗原型と薬剤耐性状況について確認を行い、（３）各下痢原性大腸菌分類の薬剤耐性状況の比較、およびインテグロンと薬剤耐性の関連性について検討を行った。
第１章においてはEAECの分離率とその病原性、およびO血清型について検討を行った。近年、地方衛生研究所においてもaggRを保有する大腸菌であるEAECが新たな下痢原性大腸菌として認知されるようになった。しかしEAECは、地方衛生研究所における食中毒等の調査において、消化器症状を示さない健康者の検便検体からも分離されるが、その分離率や病原性等については明らかになっていない。そこで、本研究ではEAECの分離率とその病原性、およびO血清型について検討することとした。
2012年から2013年までに川崎市健康安全研究所に搬入された検便検体のうち大腸菌様コロニーが分離可能であった1,029 名（健康者682名、有症者347名）を供試検体とした。1,029 検体のうち32検体からEAECが32株が分離され、分離率は3.1 %（健康者3.2 %、有症者2.9 %）であった。さらに32株のうち24株（75.0 %）は市販される43種類のO血清に該当しないことから、O血清型別不能（O-untypable, OUT）となった。細胞付着性試験ではEAEC 32株中16株（50.0 %）が凝集性付着を示した。さらに遺伝子検査の結果から、凝集性付着線毛遺伝子が32株中30株（93.8 %）で検出された。
以上により、EAECの健康者における分離率は他の下痢原性大腸菌よりも高値であり、またヒトがEAECを保菌している可能性も示唆された。しかしながら細胞付着性試験及び遺伝子検査結果から、EAECの病原性は否定できないため、EAECを下痢症等の病原微生物と特定するには、症状や疫学情報等と併せて検討する必要があると考えられた。また、多くの株がOUTとなったことから、国内の市販血清によりEAECのO血清型別を行う事は困難であると考えられた。
第２章においては、第１章でOUTとなったEAECの株を中心に遺伝子検査によりO抗原の特定を行い、さらにH抗原と薬剤耐性状況についても併せて検討した。Nataroらは下痢原性大腸菌の病原性はO：H抗原型に関連すると報告している。また海外の調査では、EAECの薬剤耐性率は他の下痢原性大腸菌に比べて高く、特にアンピシリン（ABPC）、ST合剤（SXT）、テトラサイクリン（TC）の耐性率が高いことが示されている。しかしながら国内でEAECのO：H抗原型や薬剤耐性状況を調査した報告は少ない。本研究では、OUTであったEAECのO抗原型について遺伝子検査により特定することでEAECのO：H型の流行状況について確認するとともに、薬剤耐性状況についても調査を行った。
2012年から2014年に川崎市内のヒト検便検体から分離されたEAEC 40株を供試菌株とした。結果から、EAECの主なO：H型はO131：H27, O99：H10および O176：H34であった。薬剤感受性試験では、供試した12薬剤のうち9薬剤で耐性株が認められ、ABPC（82.5 %）, SXTおよびTC （52.5 %）の順に最も高い耐性率を示した。
EAECの主なO：H型（O99：H10, O131：H27およびO176：H34）はいずれも食中毒等患者からの分離報告があることから、病原性を有する可能性が示唆された。薬剤感受性試験からEAECの薬剤耐性パターンは海外の報告と同様であることが確認された。
第３章においては、第２章で確認されたEAECの薬剤耐性率について、他の下痢原性大腸菌の薬剤耐性率と比較を行った。さらに薬剤耐性に関与するインテグロンとその可動領域に含まれる薬剤耐性遺伝子の検出も併せて行った。インテグロンは、intI1により可動領域部分に薬剤耐性遺伝子を取り込むことが確認されている。さらにインテグロンを保有する大腸菌は非保有菌に比べ高い薬剤耐性率を示すことが知られている。しかしながら、ヒト由来の下痢原性大腸菌におけるインテグロン保有状況やその可動領域の遺伝子について調査した報告は少ない。そこで本研究では、下痢原性大腸菌の各分類について薬剤耐性状況を確認することで、第二章では検討できなかったEAECと他の下痢原性大腸菌の薬剤耐性率について比較を行うとともに、各下痢原性大腸菌についてインテグロン保有の有無やその可動領域部分から検出される薬剤耐性遺伝子と実際の薬剤耐性パターンについて比較検討を行った。
2012年から2014年までにヒトの検便検体から分離されたEAEC 40株、腸管病原性大腸菌 37株、STEC 83株、腸管毒素原性大腸菌2株の合計162株の下痢原性大腸菌を供試菌株とした。下痢原性大腸菌162株の薬剤感受性試験の結果、10薬剤のうち7薬剤でEAECは他の下痢原性大腸菌より高い耐性率を示した。遺伝子検査結果から162株のうち27株がインテグロンを保有していた。さらに薬剤耐性率の比較によりインテグロン保有株は、非保有株に比べ7薬剤で耐性率が有意に高いことが示された。しかしシークエンス解析結果から、可動領域部分に含まれる薬剤耐性遺伝子は主にaadAとdfrAの2種類のみであることが確認された。
以上より、EAECは他の下痢原性大腸菌に比べ高い薬剤耐性率を示すことが確認された。さらに下痢原性大腸菌においてもインテグロン保有株の方が7薬剤で耐性率が有意に高いことが示された。しかし可動領域に含まれる薬剤耐性遺伝子の種類は少なく、インテグロンが取り込んだ薬剤耐性遺伝子による薬剤耐性の表現型への影響は少ないことが示唆された。
以上、本研究は、ヒトから分離される下痢原性大腸菌のうち極めて知見が少なかったEAECの分離率やO：H型について明らかにし、さらに病原性を有する可能性についても示した。また同時に、各下痢原性大腸菌の薬剤耐性状況や検出したインテグロンと薬剤耐性との関連性についても示したことで今後の薬剤耐性菌研究に寄与する研究となった。doctoral thesi
A Proposal of the Rack for Antlered Deer Skull
Get PDFWe propose a device to store antlered deer skulls, “the antlered deer skull rack”. The frames were made of pipes, and can hold about 8 skull specimens of sika deer (Cervus nippon). It is easy to change the order of skulls. It is also possible to carry the whole rack and if a shelf to hold multiple racks is available, the racks can be three-dimensionally arranged, which results in space saving.P(論文)報告application/pdfdepartmental bulletin pape
都市域河川水において潜在的に進行する新たな重金属汚染の現状と環境影響評価
Get PDF第38回麻布環境科学研究会 生命・環境科学部教員によるセミナー3P(論文)会議録・学会報告application/pdfPROCEEDINGSdepartmental bulletin pape
地域で生き生き!と暮らしていくためのリハビリテーション : 作業療法の視点から
Get PDF第38回麻布環境科学研究会 市民公開講座3P(論文)会議録・学会報告application/pdfPROCEEDINGSdepartmental bulletin pape
Consideration of Early-Modern Philosophical Discourse with Characteristic Expressions in Samuel Beckett’s Prose Works
Get PDFThe way that ideas are expressed in Samuel Beckett’s prose works is characteristic of a peculiar narrative style. The novel, The Unnamable, is particularly focused on the relation between human existence and words, evoking a fundamental motif of early-modern philosophy. This work, Beckett’s most representative prose work, addresses the extreme pursuit of the perception of one’s identity through language. It can be supposed that this obsessive pursuit is composed of a parody of the early-modern philosophical discourse of the 17th century when Descartes, Spinoza, Locke, and others pondered human reason, understanding, intelligence, and ethics based on the logic of language. In the early-modern age, the validity of logocentric ideas was established through European philosophy, corresponding to its civilization and the spirits of its people.
Although John Locke explained the function of language in detail, it was David Hume who developed atheistic skepticism. Hume denied causality in the phenomena of things, and placed importance on ‘perception’ and ‘probability’. These conceptions seemed to be inspired by the narration of The Unnamable. Beckett who presumably was suspicious of the certainty of logocentric ideas created a characteristic narrative through an eccentric style of monologue. While the narrator perceives his own existence in a soliloquy filled with words, he cannot recognize any things through language. Beckett probably aimed to create an ‘unnamable’ vortex with cynical humor, making a critical allusion to the essence of human existence.P(論文)原著論文application/pdfORIGINAL ARTICLEdepartmental bulletin pape