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Legal peculiarities of trade between African states : with special focus on the African Continental Free Trade Area AfCFTA
No full textDie Pan-Afrikanische Freihandelszone (AfCFTA) zielt darauf ab, durch die Gründung einer kontinentalen Freihandelszone, den bisher geringen intra-afrikanischen Handel anzukurbeln. Da die AfCFTA auf dem Besitzstand („the acquis“) aufbaut, besteht die Annahme, dass eine erfolgreiche Umsetzung nur durch regionales Engagement und Vertragsanpassungen auf Ebene der regionalen Wirtschaftsgemeinschaften (RECs) möglich sein wird. Um diese Annahme zu überprüfen, wird in der gegenständlichen Arbeit auf die regionalen Verträge und die rechtlichen Besonderheiten der intra-afrikanischen Wirtschaftsintegration eingegangen sowie das AfCFTA-Vertragswerk in Bezug auf den Warenhandel analysiert. Die Entstehungsgeschichte wird dargestellt, der aktuelle Fortschrittsstand der AfCFTA-Verhandlungen sowie die Herausforderungen, die sich durch die Anwendung dieses unvollständigen Abkommens ergeben, werden erläutert. Schließlich wird der Frage nach der AfCFTA-Rechtsnatur nachgegangen. Daran schließt eine Auseinandersetzung mit den Institutionen der AfCFTA. Besonderes Augenmerk gilt der Einordnung der AfCFTA in das WTO-System (Artikel XXIV GATT vs. „Enabling Clause“). Ausführlich wird die „Flexibilität“, die u.a. durch das Prinzip der variablen Geometrie und die überlappende Mitgliedschaft in unterschiedlichen RECs Ausdruck findet, verdeutlicht. Schließlich wird auf die acht RECs (COMESA, EAC, ECCAS, ECOWAS, SADC, AMU, CEN-SAD, IGAD), deren Freihandelszonen als Grundbausteine der AfCFTA angesehen werden, sowie auf ihre Sub-Gruppen (CEMAC, WAEMU, WAMZ, SACU) eingegangen. Zuletzt erfolgt eine Befassung mit dem neu gegründeten AfCFTA-Streitbeilegungsmechanismus und dessen Verhältnis zum WTO-Streitbeilegungsmechanismus. Es wird geschlussfolgert, dass die AfCFTA nur ein zusätzliches Abkommen ist, das Rahmenbedingungen vorgibt und sich zum bestehenden System dazugesellt. Im Lichte der Ergebnisse der Untersuchung steht zu erwarten, dass die AfCFTA nie eine „alle afrikanischen Staaten umfassende“ einheitliche Freihandelszone werden wird.The African Continental Free Trade Area (AfCFTA) aims to boost intra-African trade, which has yet been low, by establishing a continental free trade area. Since the AfCFTA builds on “the acquis”, it is assumed that a successful implementation will only be possible through regional engagement and treaty adjustments at the level of the Regional Economic Communities (RECs). To test this assumption, the present dissertation examines the regional agreements and the legal characteristics of intra-African economic integration and analyses the AfCFTA agreement with regard to trade in goods. The history of the AfCFTA negotiations is presented and the current state of progress of the AfCFTA negotiations as well as the challenges arising from the application of this incomplete agreement are elucidated. Finally, the question of the AfCFTA’s legal nature is addressed. This is followed by a presentation of the institutions of the AfCFTA. Particular attention is paid to the integration of the AfCFTA into the WTO-system (Article XXIV GATT vs. Enabling Clause). The “flexibility”, which is i.a. expressed through the principle of variable geometry and overlapping membership in different RECs, is illustrated in detail. Finally, the eight RECs (COMESA, EAC, ECCAS, ECOWAS, SADC, AMU, CEN-SAD, IGAD), whose free trade areas are regarded as building blocks of the AfCFTA, as well as their sub-groups (CEMAC, WAEMU, WAMZ, SACU), are discussed. Last, the newly established AfCFTA dispute settlement mechanism and its relationship to the WTO dispute settlement mechanism are analysed. It is concluded that the AfCFTA is merely an additional agreement that sets out the framework conditions and joins the existing system. In light of the results of the study, it is to be expected that the AfCFTA will never become a single free trade area, which encompasses all African states.eingereicht von Verena (Esther Stefanie) WehmeyerDissertation Universität Graz 202
Exploring Responsibility Allocation for the Climate Crisis in Secondary Geography Textbooks
No full textDie vorliegende Arbeit diskutiert und vergleicht die Zuweisung von Verantwortung für die Klimakrise sowie für Maßnahmen gegen den Klimawandel in ausgewählten Geographieschulbüchern der Sekundarstufe I aus Österreich, Irland und Australien. Ausgehend vom Konzept der planetaren Grenzen (planetary boundaries), den Prinzipien der Umwelt- und Klimagerechtigkeit, der Bildung für nachhaltige Entwicklung (BNE) und der politischen Verantwortung für die Klimakrise, sowie der Bildung für Umweltbürgerschaft (Education for Environmental Citizenship), wurden zwei qualitative Inhaltsanalysen der ausgewählten Schulbücher durchgeführt.Die erste Analyse zeigte, dass alle untersuchten Schulbücher überwiegend Sektoren wie Energie, Landwirtschaft und Verkehr für die Klimakrise verantwortlich machen und in diesem Zusammenhang auch die Rolle der Abholzung der Regenwälder diskutieren. Strukturelle Ursachen wie Kolonialismus, Imperialismus, Extraktivismus und Wirtschaftsparadigmen, die grenzenloses Wachstum postulieren, sind jedoch weitgehend unterrepräsentiert und werden meist nicht in einen kausalen Zusammenhang mit der Klimakrise gebracht. Auch wenn die irischen und insbesondere die österreichischen Lehrbücher bestimmten Akteuren, etwa Staaten des Globalen Nordens und des Globalen Südens, Verantwortung zuschreiben, erwies sich dies als unzureichender relationaler Kontext, um den Lernenden ein Gesamtbild der unterschiedlichen Grade von Verantwortung für die Treibhausgasemissionen der verschiedenen Nationen zu vermitteln. Die zweite Analyse ergab, dass österreichische Schulbücher dazu neigen, die Verantwortung für Klimaschutzmaßnahmen zu individualisieren, während irische und australische Schulbücher diese primär bei Regierungen auf lokaler und nationaler Ebene verorten. Dabei liegt der Fokus in allen Schulbüchern auf der Reduktion von Treibhausgasemissionen (mitigation), während Anpassungsmaßnahmen (adaptation) oder Kompensation (compensation) kaum thematisiert werden.Insgesamt konnten die Analysen aufzeigen, dass keines der untersuchten Lehrbücher explizit auf Prinzipien der Klima- und Umweltgerechtigkeit zurückgreift, wenn es um die Verantwortung für die Klimakrise oder Maßnahmen gegen den Klimawandel geht. Zudem ist die gesellschaftspolitische Dimension der Klimakrise unterrepräsentiert. Angesichts dieser Unzulänglichkeiten wird vorgeschlagen, die Agenda der Bildung für Umweltbürgerschaft zu forcieren, die durch Prinzipien der Umwelt- und Klimagerechtigkeit ergänzt, dazu beitragen kann, dass Lernende sich als Umweltbürger:innen begreifen, die einen Beitrag zu einer gerechten sozio-ökologischen Transformation leisten können. In diesem Sinne sollte die Verantwortung für die Klimakrise und die Maßnahmen gegen den Klimawandel also nicht individualisiert, sondern politisiert werden. Dies könnte etwa durch eine Auseinandersetzung mit den ungerechten Strukturen, die zur Klimakrise beitragen und sie fortwährend verstärken, sowie durch die Einbeziehung der Perspektiven jener erreicht werden, die am stärksten von den negativen Folgen des Klimawandels betroffen und gefährdet sind.This thesis discusses and compares how responsibility for the climate crisis itself, as well as climate change measures is allocated in selected lower-secondary geography textbooks from Austria, Ireland and Australia. Drawing on the theoretical framework of the planetary boundaries, principles of environmental and climate justice, Education for Sustainable Development (ESD), and political responsibility for the climate crisis, along with the educational framework of Education for Environmental Citizenship (EEC), two qualitative content analyses of the selected textbooks are conducted.The first analysis revealed that all the selected textbooks tend to predominantly allocate responsibility for the climate crisis to sectors such as energy, agriculture, and transport, and discuss the role of deforestation in this regard. Structural causes, however, such as colonialism, imperialism, extractivism, and economic paradigms that promote limitless growth, are largely underrepresented and usually not causally linked to the climate crisis. Moreover, although the Irish and, in particular, the Austrian textbooks attribute responsibility to certain actors – such as states from the Global North and Global South – this proved to lack sufficient relational context to provide learners with an overall picture of the varying degrees of responsibility for greenhouse gas emissions among different nations. The second analysis identified a tendency in Austrian textbooks to individualise responsibility for climate change measures, whereas Irish and Australian textbooks primarily assign responsibility to governmental bodies from the local to the national level. Across all textbooks, there is a focus on mitigation rather than adaptation, while compensation measures are never explicitly addressed. Overall, the analyses revealed that none of the textbooks explicitly draw on climate justice principles when addressing responsibility for the climate crisis or climate change measures. Additionally, the socio-political dimension of the climate crisis is underrepresented. In light of these shortcomings, it is suggested that in order for learners to become environmental citizens, who contribute to a just socio-ecological transformation, it is necessary to pursue the agenda of Education for Environmental Citizenship, complemented with environmental and climate justice principles. As such, responsibility for the climate crisis as well as climate change measures should not be individualised, but politicised. This could be achieved, for instance, by addressing the unjust structures contributing to the climate crisis and by incorporating the perspectives of those most affected and vulnerable to its negative consequences.Automatisch erstellte Titelanzeige – Daten nicht geprüftMasterarbeit Universität Graz 202
The bigger, the better? The Board of Directors and Governance Risk: An empirical analysis of US banks
No full textDer Finanzsektor, oft als Rückgrat der globalen Wirtschaft bezeichnet, wurde wiederholt durch Governance-Versagen erschüttert, etwa durch betrügerische Kontoeröffnungen bei Wells Fargo, den Libor-Manipulationsskandal oder Wachovias Verwicklung in Geldwäsche. Solche Vorfälle untergraben das Vertrauen in den Bankensektor und verdeutlichen die Bedeutung von effektiver Governance und ethischer Aufsicht zur Minderung systemischer Risiken. Diese Masterarbeit untersucht das Governance-Risiko in US-Banken und analysiert insbesondere den Einfluss der Größe des Kontrollgremiums auf Governance-Ergebnisse. Governance-Risiko, gemessen an Vorfällen wie Betrug, Korruption oder regulatorischen Verstößen, bedroht nicht nur einzelne Banken, sondern auch die Stabilität des gesamten Finanzsystems. Auf Basis eines Datensatzes von 803 US-Banken (2007–2022) werden ökonometrische Modelle wie lineare Regressionen sowie Logit- und Probit-Modelle eingesetzt, um den Zusammenhang zwischen der Größe des Kontrollgremiums und der Wahrscheinlichkeit von Governance-Vorfällen (GINC) zu untersuchen. Die Ergebnisse zeigen eine klare negative Beziehung: Größere Kontrollgremien sind mit einer geringeren Wahrscheinlichkeit für Governance-Vorfälle verbunden. Dies wird auf verstärkte Aufsicht, breitere Expertise und größere Diversität zurückgeführt, welche größere Kontrollgremien ermöglichen. Gleichzeitig können jedoch Ineffizienzen, wie langsamere Entscheidungsfindung und verwässerte Verantwortlichkeiten, ihre Effektivität mindern. Die vorliegende Arbeit zeigt, dass größere Kontrollgremien mit einem geringeren Governance-Risiko einhergehen, und liefert damit wichtige Erkenntnisse für die Corporate-Governance-Forschung. Sie bietet politischen Entscheidungsträgern und Finanzaufsichtsbehörden nützliche Ansätze, um die Einflussfaktoren auf Governance-Risiken im Bankensektor besser zu verstehen.The financial sector, often regarded as the backbone of the global economy, has repeatedly been shaken by governance failures, such as Wells Fargo’s fraudulent account openings, the Libor manipulation scandal or Wachovia’s involvement in money laundering. These incidents not only erode public trust but also underscore the critical importance of effective governance and ethical oversight in mitigating systemic risk. This master’s thesis examines governance risk in US banks, specifically analyzing the influence of board size as a key determinant of governance outcomes. Governance risk, operationalized through incidents such as fraud, corruption, and regulatory breaches, represents a significant threat not only to individual banks but also to the stability of the entire financial system. Using a dataset of 803 US banks from 2007 to 2022, the study employs econometric models – including linear, logit, and probit regressions – to explore the relationship between board size and the probability of governance incidents (GINC). The findings reveal a robust negative relationship: larger boards are consistently associated with a reduced likelihood of governance failures. This association is attributed to the enhanced oversight, broader expertise, and greater diversity that larger boards bring, enabling them to better identify and mitigate risks. However, the analysis also highlights the potential inefficiencies of larger boards, such as slower decision making and diluted accountability, which could diminish their effectiveness if not carefully managed. By demonstrating that larger boards are linked to a lower probability of governance incidents, this thesis contributes to the broader discourse on corporate governance and provides valuable insights for policymakers and financial regulators seeking to better understand the factors influencing governance risk in the banking sector.Automatisch erstellte Titelanzeige – Daten nicht geprüftMasterarbeit Universität Graz 202
Organisationale Demokratie und psychische Beeinträchtigung : eine Analyse der Moderator- und Mediatorwirkung von Arbeitsintensität, Rollenunklarheit und wahrgenommener Qualifikation
No full textIn Zeiten steigender Krankheitstage und längerer Erkrankungsdauer gewinnt die Untersuchung von Ressourcen am Arbeitsplatz für die psychische Gesundheit zunehmend an Bedeutung. Aus diesem Grund befasst sich diese Forschungsarbeit mit der Fragestellung, ob die organisationale Demokratie eine schützende Wirkung auf die Gesundheit hat. Das Forschungsziel dieser Arbeit bestand in der Untersuchung der Auswirkungen der organisationalen Demokratie und der Qualifikation auf die Ausprägung psychischer Beeinträchtigungen, wobei Depression und Angst im Fokus standen. Die Analyse wurde um die Moderatorvariablen Arbeitsintensität und Rollenunklarheit erweitert. Die Stichprobe umfasste 208 Arbeitnehmer*innen aus dem deutschsprachigen Raum, die mindestens 15 Wochenstunden arbeiteten. Die Befragung erfolgte mithilfe standardisierter Fragebögen, die von den Teilnehmer*innen in Form einer Selbstauskunft beantwortet wurden. Lediglich die Zusammenhänge zwischen der Qualifikation und Depression sowie Angst wiesen signifikante Ergebnisse auf. Die Hypothesentestung der organisationalen Demokratie ergab keine signifikanten Ergebnisse, jedoch deuteten die Daten auf eine Tendenz für eine negative Korrelation mit Depression sowie eine moderierende Wirkung der Arbeitsintensität auf diese Beziehung hin. Diese Studie unterstreicht die Notwendigkeit weiterer Forschung, um mögliche bisher nicht berücksichtigte Einflussfaktoren zu untersuchen.The examination of resources of the workplace becomes more important in times of increasing sick leaves and longer absences. For this reason, this research deals with the question whether of organizational democracy has a protective effect on mental health. The aim of this study was to research the consequence of the organizational democracy and qualification on mental health, especially on depression and anxiety. In addition, the influence of the moderator variables work intensity and role ambiguity was included in the analysis. The sample consisted of 208 workers from German-speaking countries who worked at least 15 hours per week. The survey was conducted with a standardized questionnaire, which was answered through self-report. Merely the relationship between qualification and depression as well as anxiety showed significant results. The testing of the hypothesis concerning the organizational democracy did not yield significant results. However, the data suggested a tendency for a negative correlation with depression and a moderating effect of work intensity on this relationship. This study highlights the need for further research considering potential influencing factors, which were neglected so far.vorgelegt von: Charlotte WeberAbstract in englischer SpracheMasterarbeit Universität Innsbruck 202
Inwiefern haben sozialräumliche Aneignungsprozesse im Sport Potential in der offenen Jugendarbeit?
No full textIn dieser Masterarbeit geht es um die sozialen Aneignungsprozesse von SportlerInnen. Dabei wird analysiert, wie diese in der offenen Jugendarbeit herangezogen werden können. Zunächst werden in einem theoretischen Teil Begriffserklärungen, sowie der existierende Wissensstand dargelegt. Danach wird die Verbindung zum Sport beschrieben und neue Bereiche wie auch Chancen für die offene Jugendarbeit aufgezeigt. Abgeschlossen wird das Kapitel mit der Erklärung von sozialräumlichen Anordnungskonzepten. Im darauffolgenden Segment werden in einem empirischen Teil narrative Interviews ausgewertet. SportlerInnen sprechen in den Interviews über ihre sozialräumlichen Aneignungsprozesse. Abschließend werden in der Arbeit Handlungsstrategien für die offene Jugendarbeit erarbeitet.Werner SchumannMasterarbeit Universität Klagenfurt 202
From Paramagnetic Attenuation to Spectral Enhancement: Advancing the Limitations of NMR Spectroscopy of RNA
No full textDissertation Universität Innsbruck 202
Transparenz auf dem Teller : Was steckt wirklich drin? Lebensmittelkennzeichnung auf dem Prüfstand
No full textWeltweit kommt es immer wieder zu Lebensmittelskandalen, bei denen vermeintlich oder tatsächlich begangene rechtswidrige Umgangsweisen mit Lebensmitteln in Medien thematisiert werden. Skandale wie beispielsweise der Pferdefleisch-Lasagne-Skandal, der Salmonellen-Skandal beim Süßwarenhersteller Ferrero, der Fipronil Skandal (Insektizide nachgewiesen in Eiern), oder auch mit Zuckersirup gepanschter Honig, erschüttern immer wieder die europäische Öffentlichkeit. Solche Vorfälle führen zu erheblichen Gesundheitsrisiken und zu einem berechtigten Vertrauensverlust der Konsumenten. Doch wie wird der Verbraucher innerhalb der EU vor irreführenden Angaben und gesundheitlich bedenklichen Produkten geschützt? Um als Verbraucher eine fundierte Entscheidung über Ernährung, Lebensmittelqualität, Herkunft, Lebensmittelsicherheit und das damit verbundene Einkaufverhalten treffen zu können, ist eine ausreichende Kennzeichnung der Waren im Lebensmittelhandel unerlässlich.
Was steckt jedoch hinter den Kennzeichnungen? Welche Informationen sind gesetzlich verpflichtend und auch welche können Verbraucher vertrauen? Was darf als „Bio“ gekennzeichnet werden?
Was unternimmt die EU, um die gesundheitlichen Risiken im Zusammenhang mit ungesunder Ernährung durch zu hohen Zuckerkonsum zu minimieren?
1 Statistik Austria. (n.d.-b). Übergewicht und Adipositas. STATISTIKAUSTRIA. https://www.statistik.at/statistiken/bevoelkerung-und-soziales/gesundheit/gesundheitsverhalten/uebergewicht-und-adipositas, (abgerufen: 20.03.2025).
2 Übergewicht und Adipositas bei Kindern und Jugendlichen. (n.d.-b).Gesundheitsportal. https://www.gesundheit.gv.at/krankheiten/stoffwechsel/uebergewicht-adipositas-kinder.html, (abgerufen: 20.03.2025).
3 Kann eine ausreichende Kennzeichnung der Lebensmittel den Verbraucher in die Lage versetzen, sich bewusst für oder gegen bestimmte Herstellungsverfahren, wie etwa gentechnisch veränderte Lebensmittel, zu entscheiden?
Mit dieser Arbeit verfolge ich das Ziel, einen Überblick über einige der wichtigsten EU-Vorschriften zur Lebensmittelkennzeichnung und -information zu geben. Ziel ist es, dem Konsumenten eine fundierte Entscheidungsgrundlage hinsichtlich der Zusammensetzung, der Inhaltsstoffe und der Herkunft von Lebensmitteln zu ermöglichen. Ein besonderer Fokus liegt auf der Förderung einer gesunden Ernährung, wobei auch der Asket des Umweltrechts nicht unbeachtet bleibt.eingereicht von Mirjam LechleitnerDiplomarbeit Johannes Kepler Universität Linz 202
New approaches to assess microbiological drinking water quality from source to tap
No full textSicheres Trinkwasser wird von der WHO als ein grundlegendes Menschenrecht definiert. Allerdings kann entweder mikrobiologisch instabiles oder extern kontaminiertes Wasser zu ästhetischen Veränderungen, betrieblichen Problemen oder im schlimmsten Fall zu gesundheitlichen Beeinträchtigungen führen: Durch Wasser übertragene Krankheiten sind weltweit für jährlich 1,4 Millionen Todesfälle verantwortlich. Die Sicherstellung einer möglichst hohen mikrobiologischen Trinkwasserqualität ist daher von größter Bedeutung, doch gesetzlich vorgeschriebene Messungen sind oft zeit- und arbeitsaufwändig. Daher werden in dieser Dissertation „Neue Ansätze zur Bewertung der mikrobiologischen Wasserqualität von der Quelle bis zum Wasserhahn“ untersucht. Der Inhalt dieser Arbeit spannt den Bogen von der Quelle des Trinkwassers in einer exemplarischen alpinen Karstquelle über das Verteilungssystem bis hin zum Wasserhahn der Verbraucherin, wo es entweder kalt oder warm konsumiert oder für persönliche Hygiene verwendet wird. Die erste der vier Publikationen bewertet die Funktion und Anwendbarkeit von automatisierter Durchflusszytometrie für die betriebliche Überwachung einer Karstquelle, die zur Trinkwassergewinnung genutzt wird. Das Durchflusszytometriegerät mit anschließender zytometrischer Fingerprinting-Analyse, das in zwei hydrologisch dynamischen Sommern eingesetzt wurde, erwies sich als zuverlässig in seiner Funktion und beim Nachweis externer mikrobiologischer Verunreinigungen durch Boden- und Fäkalieneintrag. In der zweiten Publikation wurde die biologische Stabilität eines großen europäischen schwach gechlorten Trinkwasserverteilungssystems unter Verwendung eines neuartigen, umfassenden und systemspezifischen Parameters untersucht. Der Parameter bezieht die bakterielle Biomasse und Aktivität mit ein, um die Umsatzzeiten der Bakteriengemeinschaft zu quantifizieren. Durch die multiparametrische Berechnung der bakteriellen Umsatzzeitenkonnten konnten zeitliche und räumliche Hotspots potenzieller biologischer Instabilität ermittelt werden, die mit kultivierungsbasierten oder zellbasierten Methoden nicht identifiziert werden konnten. In der dritten Publikation wurden die biologische Stabilität und die Dynamik der Bakteriengemeinschaft verschiedener mit kaltem Trinkwasser gespeisten Heißwasserboiler aus Österreich und der Schweiz mit zellbasierten und molekularen Methoden untersucht. Alle untersuchten Heißwasserboiler wiesen im Vergleich zum zugeführten Kaltwasser signifikant höhere Zellzahlen und einen geringeren Artenreichtum auf, allerdings wurde keine spezifische Anreicherung von opportunistischen Krankheitserregern festgestellt. Dies konnte mit Hilfe fortgeschrittener durchflusszytometrischer Fingerprinting- und 16S rRNA-Gen-basierender Gemeinschaftsanalysen nachgewiesen werden. Die vierte Publikation ist die deutsche Fassung von Publikation 3, aufbereitet für die praxisbezogene Anwendung im Bereich der Wasserversorgung. Neue kultivierungsunabhängige Ansätze, einschließlich des Einsatzes von Automatisierung, multiparametrischer Konzepte, Big Data (Sequenzierung, Fingerprinting) oder KI für die Bewertung der Trinkwasserqualität bieten ein großes Potenzial, sofern sie gezielt und mit Bedacht eingesetzt werden. Ein fundiertes Verständnis der untersuchten Systeme und die Kenntnis vorhandener Methoden und Konzepte bilden die Basis für die künftige effiziente und zielgerichtete Analyse und Bereitstellung von sicherem Trinkwasser, insbesondere angesichts globaler Wasserknappheit und -verschmutzung, die durch den Klimawandel noch weiter verstärkt werden.Safe drinking water is recognized as a fundamental human right by the WHO. However, microbiologically unstable on the one hand or externally contaminated water on the other hand can lead to aesthetic alterations, operational problems or in the worst case to health impairments, including the transmission of waterborne diseases, which cause 1.4 million deaths worldwide each year. Ensuring and confirming the highest possible microbiological drinking water quality is therefore of paramount importance. The legally required measurements are often time-consuming and labour intensive and hence, “New approaches to assess microbiological water quality from source to tap” are explored in this thesis. The content of this dissertation spans the arc from the source of drinking water in an exemplary alpine karst spring, through the distribution system, to the consumer's tap, where it is used either cold or hot for consumption and personal hygiene. The first of the four publications in this thesis evaluates the performance and applicability of automated flow cytometry for operational monitoring of a karst spring used for drinking water production. The flow cytometry device including subsequent cytometric fingerprinting analysis applied during two hydrologically dynamic summers proved to be reliable in its function and in detecting external microbiological contaminations of soil and faecal origin. In the second publication, the biological stability of a large European drinking water distribution system supplying slightly chlorinated water was investigated using a novel, comprehensive and system-specific parameter incorporating bacterial biomass and microbial activity to quantify bacterial community turnover times. By calculating multiparametric turnover times, temporal and spatial hotspots of potential biological instability could be pinpointed, which could not be identified as such by cultivation-based or cell-based methods. In the third publication, the biological stability and bacterial community dynamics of various domestic hot water boilers from Austria and Switzerland fed by cold drinking water was investigated using cell-based and molecular methods. All studied hot water boilers had significantly higher cell numbers and lower species richness compared to their cold-water counterparts, but no specific enrichment of opportunistic pathogens. This could be demonstrated using advanced flow cytometric fingerprinting and 16S rRNA-gene-based community analyses. The fourth publication provides a German version of publication 3 for practitioners in the water supply field. New culture-independent tools including the use of automation, multiparametric approaches, big data (sequencing, fingerprinting) or AI for drinking water quality assessment offer great potential provided they are used wisely. A profound understanding of the systems studied and knowledge of existing methods and concepts provide the basis for progress towards efficient and targeted analysis and provision of safe drinking water, especially in the context of global water scarcity and pollution, exacerbated by emerging pressures such as climate change.Abweichender Titel laut Übersetzung der Verfasserin/des VerfassersDissertation Medizinische Universität Wien 202
Long noncoding RNA regulation of Adaptive Immunity
No full textNeuste Studien haben lange nichtkodierende RNAs (lncRNAs) als Schlüsselregulatoren der Genexpression in Immunzellen identifiziert, die eine entscheidende Rolle in physiologischen und pathologischen Prozessen spielen. Die Rolle von lncRNAs bei der Regulierung der CD8+ T Zell-Antworten gegen Krankheitserreger und Tumore in vivo ist jedoch noch nicht vollständig verstanden. Durch deep RNA-seq-Profiling von Maus-CD8+ T Zell-Subsets in verschiedenen Stadien einer bakteriellen Infektion in vivo, konnten wir unterschiedlich regulierte lncRNAs, wie Rroid2 identifizieren. Mithilfe von CRISPR/Cas9-vermittelter Genom-Editierung erzeugten wir sechs lncRNA-Knockout (KO)-Mäuse, darunter Rroid2-/- Mäuse. Mäuse mit Rroid2 knockout, wiesen erhöhte CD44dim Foxp3+ regulatorische T-Zellen auf, während andere Immunzellen unbeeinträchtigt blieben. Um die in vivo Funktion von Rroid2 in CD8+ T Zellen zu analysieren, führten wir eine adoptive co-transfer Studie von Rroid2 WT- und Rroid2-/- OT-I Zellen durch, gefolgt von einer Infektion mit Listeria monocytogenes. Unsere Ergebnisse zeigen, dass Rroid2 die Expansion von Effektor CD8+ T-Zellen sowie die Differenzierung von Effektor- zu Gedächtnis CD8+ T Zellen, Zytotoxizität und Gedächtnisbildung reguliert. Eine fein abgestimmte Repression von Id2 und T-bet wurde in Rroid2-/- CD8+ T Zellen beobachtet, die sowohl KLRG1+ als auch KLRG1- Effektor CD8+ T Zellen betraf, im Gegensatz zu Id2-/- Mäusen. Zusammenfassend ist Rroid2 eine neuartige lange nichtkodierende RNA, die die CD8+ T Zell Antwort auf Krankheitserreger in vivo entscheidend reguliert.Recent studies have identified long noncoding RNAs (lncRNAs) as key regulators of gene expression in immune cells playing crucial roles in physiological and pathological settings. However, the role of lncRNAs in regulating CD8+ T cell responses against pathogens and tumors in vivo remains incompletely understood. Deep RNA-seq profiling of mouse CD8+ T cell subsets at different stages of bacterial infection in vivo allowed us to identify differentially regulated lncRNAs, such as Rroid2. By using CRISPR/Cas9-mediated genome engineering, we generated six lncRNA knockout (KO) mice among them Rroid2-/- mice. Mice deficient in Rroid2-/- showed elevated CD44dim Foxp3+ regulatory T cell numbers, whereas other immune cells remained unaffected. To analyze the in vivo function of Rroid2 in CD8+ T cells, we performed adoptive co-transfer of Rroid2 WT and Rroid2-/- OT-I cells followed by infection with listeria monocytogenes. Our results demonstrate that Rroid2 regulates effector CD8+ T cell expansion as well as effector-to-memory CD8+ T cell differentiation, cytotoxicity, and memory generation. A fine-tuned repression of Id2 and T-bet was observed in Rroid2-/- CD8+ T cells that affected KLRG1+ and KLRG1- effector CD8+ T cells alike, contrary to Id2-/- mice. Collectively, Rroid2 is a novel long noncoding RNA that critically regulates CD8+ T cell response to pathogens in vivo.Abweichender Titel laut Übersetzung der Verfasserin/des VerfassersDissertation Medizinische Universität Wien 202
Understanding substrate recognition by human mitochondrial RNase P
No full textRibonuclease P (RNase P) ist eine essentielle Endonuklease, die für die 5'-Endreifung von Vorläufer-tRNAs (pre-tRNAs) in allen Lebensformen verantwortlich ist. In vielen Organismen ist RNase P ein RNA-basiertes Enzym, das aus einem katalytischen RNA-Molekül besteht, dessen Aktivität durch ein oder mehrere zusätzliche Proteine unterstützt wird. In einigen Bakterien und Archaeen findet man jedoch ein kleines Protein, genannt Homologs of Aquifex RNase P (HARP), zusätzlich zu dem RNA-Enzym und in einigen wenigen Bakterien hat es letzteres ersetzt. Davon unabhängig ist auch in frühen Eukarya eine protein-only RNase P (PRORP) entstanden, die in der Folge das RNA-basierte Enzym in zahlreichen phylogenetischen Linien ersetzt hat. Die verwandte menschliche mitochondriale RNase P (mtRNase P) ist ein Multienzym-Komplex und zeichnet sich durch eine einzigartige Zusammensetzung aus. Neben dem PRORP-Protein interagiert ihre Methyltransferase-Untereinheit (TRMT10C-SDR5C1) mit der nahezu gesamten tRNA-Struktur, was fundamentale Unterschiede in der Substraterkennung vermuten lässt.In dieser Arbeit führten wir eine kinetische Analyse der Substraterkennung durch die menschliche mtRNase P durch. Die Nuklease-Untereinheit (PRORP) verwendet einen konservierten “Messmechanismus” zur Positionierung der Schnittstelle, aber ihre Flexibilität wird durch Wechselwirkungen mit TRMT10C eingeschränkt, was es ermöglicht, dass selbst Substrate mit einer Verlängerung des Akzeptorstamms an der kanonischen Stelle geschnitten werden. Es zeigte sich, dass die Verarbeitung für pre-tRNAs mit langen 5'-Überhängen effizienter ist und bei einer Länge von nur einem Nukleotid markant abnimmt. Die spezifischen Interaktionen von TRMT10C-SDR5C1 mit der Anticodonschleife sind nicht entscheidend für die Stimulation der Aktivität von PRORP, aber TRMT10C-SDR5C1 stimuliert die PRORP-Spaltung ohne Interaktion mit der pre-tRNA nicht. Damit übereinstimmend zeigte mtRNase P eine drastisch verringerte Effizienz bei der Prozessierung der D-Arm-losen mitochondrialen tRNASer(AGY).Weitere Untersuchungen identifizierten zentrale strukturelle Elemente, die für die RNase P- und Methylierungsaktivität verantwortlich sind, darunter eine Reihe positiv geladener Seitenketten und zwei konservierte Aminosäuren in der N-proximalen Region von Helix α3 in der N-terminalen Domäne (NTD) von TRMT10C. Während Helix α1 der NTD die Komplexbildung mit PRORP stabilisiert, ist sie hingegen für die Katalyse nicht entscheidend.Zusammengefasst liefern unsere Daten neue Einblicke in die mechanischen Eigenschaften der mtRNase P und ihre Rolle bei der Prozessierung mitochondrialer tRNAs, Ergebnisse, die die menschliche mtRNase P von anderen RNase P-Formen, einschließlich verwandter Einzelprotein-PRORP-Enzyme, unterscheiden.Ribonuclease P (RNase P) is an essential endonuclease responsible for the 5'-end maturation of precursor tRNAs (pre-tRNAs) across all forms of life. In many organisms, RNase P is an RNA-based enzyme, consisting of a catalytic RNA molecule, whose activity is supported by one or more additional proteins. However, in some bacteria and archaea a small protein named Homologs of Aquifex RNase P (HARP), either coexists with or has entirely replaced the RNA enzyme. Independently, a protein-only RNase P form (PRORP) apparently emerged in early eukarya and subsequently spread throughout the eukaryal tree, replacing the RNA-based enzyme in many lineages. Human mitochondrial RNase P (mtRNase P) is a multi-enzyme assembly, which stands out for its unique composition, including a methyltransferase complex (TRMT10C-SDR5C1) in addition to the PRORP protein. The former interacts with the entire tRNA structure, suggesting that substrate recognition by mtRNase P differs from the more general substrate-recognition pattern employed by other RNase P enzymes.In this study we performed kinetic analyses of substrate recognition by human mtRNase P. The nuclease subunit (PRORP) employs a conserved “measuring mechanism” for selecting the cleavage site, but its flexibility is constrained by interactions with TRMT10C, that allows even substrates with extension of the acceptor stem to be cleaved at the canonical site. Processing was found to be more efficient for pre-tRNAs with long 5' extension and dropped when the length was 1 nucleotide. Although TRMT10C-SDR5C1 does not enhance PRORP cleavage without interacting with pre-tRNA, its specific contacts with the anticodon loop are not essential for PRORP activity. Consistently, mtRNase P showed a strongly reduced efficiency in the processing of the D-armless mitochondrial tRNASer(AGY).Further evaluations identified key structural elements responsible for RNase P and methylation activity in a series of positively charged side chains and two conserved amino acids in the N-proximal region of helix α3 in TRMT10C’s N-terminal domain (NTD). While helix α1 of the NTD helps stabilize the complex formation with PRORP, it is not essential for catalysis.Taken together, our data provide new insights into the mechanistic properties of mtRNase P and its role in mitochondrial RNA processing again setting human mtRNase P mechanistically apart from other RNase P forms, including the related single-protein PRORP enzymes.Abweichender Titel laut Übersetzung der Verfasserin/des VerfassersDissertation Medizinische Universität Wien 202