Chung Hwa University of Medical Technology
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Study on culture of Aspergillus terreus to remove the heavy metal in wastewater
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英文摘要
誌謝
目錄
表目錄
圖目錄
第一章 緒論
1-1 前言
1-2 醱酵策略
1-3 土趜黴菌
1-4 幾丁質
1-5 幾丁聚醣
1-6 幾丁質及幾丁聚醣之應用
1-7 研究動機及目的
第二章 文獻回顧
2-1吸附理論
2-2 水中重金屬之處理
2-3 生物吸附的機制
2-4 生物轉換
第三章 材料與方法
3-1 實驗材料
3-1-1 菌株
3-1-2 藥品
3-1-3 實驗儀器
3-2 實驗方法
3-2-1 菌種保存
3-2-2 菌體活化
3-2-3 醱酵實驗
3-2-4幾丁聚醣的萃取
3-3 分析方法
3-3-1 菌體濃度分析
3-3-2 金屬離子濃度分析
3-3-3葡萄糖濃度測定
3-3-4 氣相色層分析(Gas Chromatography,GC)
3-4 幾丁聚醣特性分析
3-4-1 幾丁聚醣之去乙醯度
3-4-2 幾丁聚醣之黏度測定
3-4-3 幾丁聚醣之分子量測定
3-4-4 X-光繞射儀(X-Ray Diffraction)分析
3-4-5 粒徑分析
3-4-6 傅立葉變換紅外光譜儀(FT-IR)分析
3-4-7吸附實驗
第四章 結果與討論
4-1 代謝物的測定
4-2 活菌吸附實驗
4-2-1 有無重金屬離子存在下，其菌體生長隨時間的變化
4-2-2 廢水中僅含有Cr6+之菌體生長與時間的關係
4-2-3 廢水中僅含有Sn2+之菌體生長與時間的關係
4-2-4 廢水中同時含有Cr6+與Sn2+之菌體生長與時間的關係
4-2-5 單位菌體吸附Cr6+ 和Sn2+之比較
4-2-6 單位菌體吸附Cr6+之比較
4-2-7 單位菌體吸附Sn2+之比較
4-2-8 廢水中同時含有Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
4-3 死菌吸附實驗
4-4 幾丁質吸附實驗
4-5 市售幾丁聚醣吸附實驗
4-6 幾丁聚醣的特性分析
4-6-1 XRD分析
4-6-2 粒徑分佈
4-6-3 FT-IR的分析
4-6-4 不同真菌類幾丁聚醣含量比較
4-7 不同天數幾丁聚醣的含量
4-8 幾丁聚醣吸附實驗
4-9 吸附平衡模式
4-10 生物吸附劑吸附策略之比較
4-10-1 一階段吸附
4-10-2 兩階段橫向吸附
4-11 生物吸附劑的比較
4-11-1 吸附材料對於Sn2+的吸附效果
4-11-2 吸附材料對於Cr6+的吸附效果
4-11-3 吸附材料對於複合金屬對於Sn2+的吸附效果
第五章 結論
參考文獻
自述
表目錄
表1-1 醱酵方法
表1-2 醱酵方法的優點
表1-3 幾丁質及幾丁聚醣之應用
表2-1 物理吸附與化學吸附
表2-2 廢水處理方式
表2-3 生物吸附機制
表2-4 生物轉換機制
表3-1斜面培養基成份
表3-2 PDB及主培養基成份
表4-1不同真菌類幾丁聚醣的含量
表4-2真菌幾丁聚醣的特性
表4-3 單位菌體以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-4 幾丁質以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-5 幾丁聚醣以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-6 一階段吸附結果。預估吸附80％的重金屬Cr6+廢水
表4-7 一階段吸附結果。預估吸附90％的重金屬Cr6+廢水
表4-8 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附80％的重金屬Cr6+廢水
表4-9 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附90％的重金屬Cr6+廢水
表4-10 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附99％的重金屬Cr6+廢水
表4-11 吸附材料吸附單一Sn2+金屬離子的比較
表4-12 吸附材料吸附單一Cr6+金屬離子的比較
表4-13 吸附材料吸附複合金屬之Sn2+金屬離子的比較
圖目錄
圖1-1 纖維素、幾丁質與幾丁聚醣之結構圖
圖3-1 實驗流程圖
圖3-2醱酵槽的控制系統
圖3-3葡萄糖濃度檢量線
圖3-4不同濃度醋酸的UV光譜
圖3-5不同濃度醋酸溶液與GlcNAc混合UV光譜
圖3-6幾丁聚醣去乙醯校正曲線
圖3-7黏度測定之方法
圖4-1醱酵槽醱酵液GC分析
圖4-2溶氧值與pH值隨時間變化
圖4-3菌體生長量與時間的關係
圖4-4廢水中僅含有Cr6+之菌體生長與時間的關係
圖4-5廢水中僅含有Sn2+之菌體生長與時間的關係
圖4-6廢水中同時含有Cr6+與Sn2+之菌體生長與時間的關係
圖4-7單位菌體吸附Cr6+ 和Sn2+之比較
圖4-8單位菌體吸附Cr6+之比較
圖4-9單位菌體吸附Sn2+之比較
圖4-10 廢水中含有複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-11 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-12 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-13 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-14 幾丁聚醣XRD分析
圖4-15 幾丁聚醣粒徑分佈
圖4-16 幾丁聚醣FT-IR分析
圖4-17 不同天數幾丁聚醣的含量
圖4-18 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-19 單位菌體對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關係
圖4-20 幾丁質對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關係
圖4-21 幾丁聚醣對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關係
圖4-22 一階段吸附操作示意圖
圖4-23 兩階段橫向吸附操作示意圖
圖4-24廢水中含有Sn2+之吸附材料的吸附能力
圖4-25 廢水中含有Cr6+之吸附材料的吸附能力
圖4-26廢水中含有複合金屬Sn2+之吸附材料的吸附能力
表目錄
表1-1 醱酵方法
表1-2 醱酵方法的優點
表1-3 幾丁質及幾丁聚醣之應用
表2-1 物理吸附與化學吸附
表2-2 廢水處理方式
表2-3 生物吸附機制
表2-4 生物轉換機制
表3-1斜面培養基成份
表3-2 PDB及主培養基成份
表4-1不同真菌類幾丁聚醣的含量
表4-2真菌幾丁聚醣的特性
表4-3 單位菌體以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-4 幾丁質以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-5 幾丁聚醣以Langmuir方程式所得迴歸值
表4-6 一階段吸附結果。預估吸附80％的重金屬Cr6+廢水
表4-7 一階段吸附結果。預估吸附90％的重金屬Cr6+廢水
表4-8 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附80％的重金屬Cr6+廢水
表4-9 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附90％的重金屬Cr6+廢水
表4-10 兩階段橫向吸附之結果。預估吸附99％的重金屬Cr6+廢水
表4-11 吸附材料吸附單一Sn2+金屬離子的比較
表4-12 吸附材料吸附單一Cr6+金屬離子的比較
表4-13 吸附材料吸附複合金屬之Sn2+金屬離子的比較
圖目錄
圖1-1 纖維素、幾丁質與幾丁聚醣之結構圖
圖3-1 實驗流程圖
圖3-2醱酵槽的控制系統
圖3-3葡萄糖濃度檢量線
圖3-4不同濃度醋酸的UV光譜
圖3-5不同濃度醋酸溶液與GlcNAc混合UV光譜
圖3-6幾丁聚醣去乙醯校正曲線
圖3-7黏度測定之方法
圖4-1醱酵槽醱酵液GC分析
圖4-2溶氧值與pH值隨時間變化
圖4-3菌體生長量與時間的關係
圖4-4廢水中僅含有Cr6+之菌體生長與時間的關係
圖4-5廢水中僅含有Sn2+之菌體生長與時間的關係
圖4-6廢水中同時含有Cr6+與Sn2+之菌體生長與時間的關係
圖4-7單位菌體吸附Cr6+ 和Sn2+之比較
圖4-8單位菌體吸附Cr6+之比較
圖4-9單位菌體吸附Sn2+之比較
圖4-10 廢水中含有複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-11 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-12 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-13 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-14 幾丁聚醣XRD分析
圖4-15 幾丁聚醣粒徑分佈
圖4-16 幾丁聚醣FT-IR分析
圖4-17 不同天數幾丁聚醣的含量
圖4-18 廢水中含有Cr6+、Sn2+及複合金屬離子Cr6+與Sn2+之單位菌體吸附量與時間的關係
圖4-19 單位菌體對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關係
圖4-20 幾丁質對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關 係
圖4-21 幾丁聚醣對錫離子Sn2+ (○)、鉻離子Cr6+ (●) 等溫吸附平衡關係
圖4-22 一階段吸附操作示意圖
圖4-23 兩階段橫向吸附操作示意圖
圖4-24廢水中含有Sn2+之吸附材料的吸附能力
圖4-25 廢水中含有Cr6+之吸附材料的吸附能力
圖4-26廢水中含有複合金屬Sn2+之吸附材料的吸附能力[[abstract]]本研究以微生物的醱酵方法，結合批式醱酵與饋料批式醱酵的策略，培養高菌體密度土趜黴菌Aspergillus terreus BCRC 32068之生物吸附實際廢水中的重金屬離子Cr6+與Sn2+。以不含金屬離子的主培養基培養A. terreus可得高密度菌體量為 97 g/L；然而，當以廢水含重金屬離子Cr6+或Sn2+培養A. terreus時，由於重金屬離子對於菌體的生長是毒性因子而造成生長代謝的負擔，導致菌體生長速率緩慢，所得菌體量僅有10 g/L，兩者相差10倍。
實驗結果證明A. terreus可以活菌的形式，於對數生長期中吸附重金屬離子Cr6+與Sn2+，其活菌的吸附效率分別為 0.01 mg of Cr6+ / g of biomass．h and 0.06 mg of Sn2+ / g of biomass．h，而幾丁聚醣的吸附效率為2.64 mg of Cr6+ / g of chitosan．h and 276 mg of Sn2+ / g of chitosan．h。幾丁聚醣吸附Cr6+與Sn2+的能力分別是活菌的264、4﹐600倍。
由A. terreus萃取出的各種生物吸附劑中，以幾丁聚醣吸附廢水中的重金屬離子Cr6+與Sn2+有最佳的吸附能力，其它的生物吸附劑對於個別的金屬離子有專一性；然而，當廢水中同時含有兩種Cr6+與Sn2+複合金屬離子時，生物吸附劑皆會受到另一種金屬離子的抑制而降低其吸附能力。
土趜黴菌Aspergillus terreus是一株高經濟價值的絲狀菌，其菌體本
身具有吸附重金屬的能力，因此，在生技產業上及廢水處理應該具有相當大的潛力。
This study used the microorganism fermentation method, combining with the batch and the fed-batch feeding strategies to culture high cell density of Aspergillus terreus BCRC 32068, from which the biosorbents were able to remove heavy metal ions Cr6+ and Sn2+ in real wastewater. The results of this experiment indicated that high cell density 97 g/L of A. terreus was obtained when the main media contained no heavy metal ions, while as low as 10 g/L of A. terreus was found when Cr6+ or Sn2+ was added in the medium. The heavy metal ions were considered poisonous for cell growth, which became the burden of microorganism metabolism and prevented the cell from rapid growth.
It was found that heavy metal ion Cr6+ can be adsorbed by the living cell at the log phase. The adsorption efficiency of the living cell and chitosan are 0.01 mg of Cr+6 / g of biomass．h and 0.44 mg of Cr+6 / g of chitosan．h, respectively. The Cr+6 adsorption capacity of chitosan is 264 times higher than the living cell. Chitosan, one of the biosorbents extracted from A. terreus, was found to have the best adsorption capacity in removing Cr6+ and Sn2+. Other biosorbents that were found to have specificity on particular metal ion, however, were inhibited from the active adsorption capacity when complex metal ions Cr6+ and Sn2+ were found co-existing in wastewater.
Aspergillus terreus is a filamentous fungus that has high economical value. A. terreus can absorb heavy metals from aqueous solutions. It can have a huge potential in biotechnology industry and ecological significance in removing toxicants from wastewater treatment processing
Effect of chronic alcohol exposure on antioxidant defense and mitochondria biogenesis in rat cardiac myoblast
No full text目錄..........................................i
誌謝..........................................v
縮寫對照表....................................vi
中文摘要......................................ix
英文摘要.......................................x
第一章文獻回顧..................................1
一、酒精代謝與心臟損傷...........................1
1.酒精代謝.....................................1
2.酒精對於心臟之傷害.............................2
3.活性氧分子與氧化壓力...........................2
二、生物體之抗氧化防禦系統........................3
1.抗氧化系統....................................3
2.細胞凋亡.....................................5
3.脂多醣之簡介..................................6
三、粒線體氧化代謝與調節生合成之作用...............6
1.粒線體之介紹..................................6
2.粒線體生合成..................................7
四、研究目的....................................8
第二章、慢性酒精攝取對心肌細胞抗氧化及凋亡機制的影響.9
一、前言........................................9
二、材料與方法...................................13
1.實驗藥品......................................13
2.細胞培養......................................15
3.心肌細胞之處理.................................15
4.實驗設計流程圖.................................16
5.蛋白質測定....................................17
6.細胞存活率測試.................................17
7.Total and Oxidized Glutathione測定............18
8.Catalas測定...................................19
9.Lactate Dehydrogenase測定.....................20
10.Glutathione Peroxidase測定...................21
11.Glutathione Reductase測定....................23
12.Superoxide Dismutase測定.....................24
13.SDS-PAGE及Western blotting...................25
13.1SDS-PAGE分析................................25
13.2Western Blotting............................27
14.Cell Cycle測定...............................28
15.活性氧分子含量測定.............................29
16.分離粒線體及細胞質.............................30
17.統計分析......................................30
三、結果.........................................32
1.慢性酒精對心肌細胞毒性之影響......................32
2.慢性酒精對心肌細胞存活率之影響....................33
3.慢性酒精對心肌細胞氧化壓力之影響..................34
4.慢性酒精對心肌細胞SOD活性之影響...................36
5.慢性酒精對心肌細胞Cat活性之影響...................37
6.慢性酒精對心肌細胞GPx活性之影響...................38
7.慢性酒精對心肌細胞GR活性之影響....................39
8.慢性酒精對心肌細胞活性氧分子產生之影響.............40
9.慢性酒精對心肌細胞生長週期之影響..................43
10.慢性酒精對細胞色素C蛋白質之表現..................46
11.慢性酒精對Caspase3蛋白質之表現..................47
12.慢性酒精對Bcl-2蛋白質之表現.....................48
四、討論.........................................49
第三章長期酒精攝取對心肌細胞粒線體生合成之探討........54
一、前言.........................................54
二、材料與方法....................................56
1.實驗藥品.......................................56
2.心肌細胞之處理..................................56
3.實驗設計流程圖..................................57
4.萃取RNA........................................57
5.cDNA合成.......................................57
6.PCR............................................58
7.Primer Sequence................................59
三、結果..........................................61
1.慢性酒精對心肌細胞粒線體生合成mtTFA基因表現之影響....61
2.慢性酒精對心肌細胞粒線體生合成Pol-γ基因表現之影響....63
3.慢性酒精對心肌細胞粒線體生合成NRF-1基因表現之影響....65
4.慢性酒精對心肌細胞粒線體生合成Pgc-1基因表現之影響....67
5.慢性酒精對心肌細胞粒線體COX-I基因表現之影響.........69
四、討論..........................................71
第四章結論.........................................73
參考文獻...........................................75
附錄..............................................101[[abstract]]適度飲酒可能具有預防心血管疾病之功效。但是過度飲酒，會導致非擴張性心肌病變 (酒精性心肌病變)，在西方國家是造成心臟衰竭及假日猝死症的主要原因。酒精之心肌保護功能或是毒性機制均尚未釐清。先前實驗證實，高量急性酒精攝取會降低心肌細胞抗氧化能力，並引發細胞凋亡現象。本實驗進一步探討慢性酒精攝取對大鼠心肌母細胞株(H9c2細胞)之抗氧化及凋亡機制以及粒線體之生合成作用之影響。結果顯示以20mM酒精處理7天，並未增加H9c2細胞乳酸去氫酶之釋漏，但是會降低MTT轉化能力，同時造成細胞中GSH與GSSG含量比例及Cat與GPx之活性明顯下降。相反地，而SOD及GR活性顯著上升。DCF結果顯示，酒精對活性氧分子產生並沒有改變，顯示酒精沒有造成活性氧分子量增加。流式細胞儀偵測細胞週期結果顯示，酒精並未促使細胞出現Sub G1期或DNA損傷。酒精會降低粒線體中Cyt C含量，但並無導致Caspase 3活化之現象，而Bcl-2之蛋白質表現亦不受酒精影響。粒線體生合成方面發現20mM酒精會增加mtTFA表現同時降低COX-I表現。單獨處理20 mM酒精未改變Polymerase-r之表現，但是同時處理LPS時則誘發其表現。低劑量之酒精 (2mM)會增加PGC-1之表現，但提升劑量至20mM則無影響。由上述結果顯示慢性酒精攝取可能會影響H9c2細胞之粒線體功能及氧化還原狀態，但並不會致使細胞走向內在性細胞凋亡途徑。但可能經由誘發調節粒線體生合成調控因子之基因表現，進一步促進粒線體生合成作用。然而，粒線體生合成作用於酒精心肌保護或心臟毒性所扮演之角色值得進一步探討。
Moderate dose of alcohol may have beneficial effect in preventing cardiovascular disease. However, excessive alcohol consumption is the leading cause of post-holiday sudden death associated with cardiac failure in western countries. Long-term heavy alcohol consumption is also a major cause of non-dilated cardiomyopathy referred to alcoholic cardiomyopathy. The mechanism by which alcohol elicits either cardiac protection or toxicity is still underivestigation. It has demonstrated previously that acute-alcohol exposure decreased antioxidant capacity and induced apoptotic cell death in cardiac myoblast. In the present study, we further examined the effect of chronic-alcohol exposure on the antioxidant defense system, intrinsic apoptotic signaling pathway and mitochondria biogenesis in H9c2 cells. The results show that treatment with 20mM of alcohol for 7 days decreased MTT converting activity, but did not cause lactic acid dehydrogenase leakage in H9c2 cell, which are concurrent with the decrease of cellular glutathione and oxidized glutathione ratio, and decrease of enzyme activities of glutathione peroxidase and catalase, and the increase of superoxide dismutase and glutathione reductase activities. However, there is no significant increase in ROS accumulation detectected by using DCF in alcohol-treated cells. Alcohol treatment did not cause cells sub G1 cell cycle arrest or DNA fragmentation, but decreased mitochondrial cytochrome C level. There was no alteration in Bcl-2 expression or caspase 3 activations after alcohol treatment. The results from mitochondria biogenesis experiments demonstrated that alcohol increased the expression of mitochondria transcription factor, but decrease COX I level. Alcohol alone did not affect polymerase-r expression, however, cotreatment with LPS cause the induction of polymerase-r. Two mM but not higher dose of alcohol elevated PGC-1 expression. In conclusion, chronic alcohol exposure may cause alteration of cellular redox status in rat cardiac myoblast associated with decrease of mitochondria dysfunction by down regulation of the component protein of electron transport chain, which may lead to the compensate respond by increasing mitochondria biogenesis. However, the role of mitochondrial biogenesis in alcoholic cardiomyopathy needs further investigation
Analysis of genetic polymorphisms of MDR1 promoter
No full text第一章 文獻資料回顧
第一節 多重抗藥性（Multi-drug resistance；簡稱MDR）………….1
第二節 多重抗藥性基因（Multidrug resistance gene；簡稱MDR1 gene）…………………………………………………………..2
第三節 P-醣蛋白………………………………………………………4
第四節 P-醣蛋白的結構及功能………………………………………5
第五節 P-醣蛋白在組織中的表現……………………………………6
第六節 P-醣蛋白的受質………………………………………………8
第七節 MDR1基因多型性…………………………………………10
第八節 MDR1基因多型性與種族之間的相關性…………………12
第九節 MDR1基因多型性與藥物之間的相關性………………… 13
第十節 MDR1基因多型性與疾病之間的相關性…………………..15
第十一節 解離式高效能液相層析儀（Denaturing High Performance Liquid Chromatography；簡稱DHPLC）…………………..16
第二章 研究目的………………………………………………………18
第三章 實驗流程………………………………………………………19
第四章 實驗方法
第一節 對照質體的建構…………………………………………….20
第二節 解離式高效能液相層析儀（Denaturing High Performance Liquid Chromatography；DHPLC）分析………………….37
第五章 結果
第一節 對照質體的備製…………………………………………….48
第二節 以DHPLC分析健康人之MDR1啟動區之基因多型性….48
第三節 分析健康成人MDR1啟動區基因多型性分佈……………49
第四節 分析大腸直腸癌、肺癌病患MDR1啟動區基因多型性分佈…………………………………………………………….51
第五節 轉錄因子結合元素分析…………………………………….52
第六章 討論……………………………………………………………54
第七章 結論……………………………………………………………66[[abstract]]多重抗藥性（Multi-drug resistance；簡稱MDR）是影響化學藥物治療效果最嚴重的問題之一。多重抗藥性基因（Multidrug resistance 1 gene；簡稱MDR1/ABCB1）的產物，P-醣蛋白（P-glycoprotein），是醣化膜蛋白，當在人類腫瘤組織中過度表現時，導致腫瘤細胞產生多重抗藥性，而這個過程是透過活化蛋白輸出的系統，造成多種不同結構的化學治療藥物從細胞內被運送到腫瘤細胞外。目前已知位於MDR1上的單一核苷酸多型性（single nucleotide polymorphism；簡稱SNP）和SNP的半套體與P-醣蛋白的表現量或功能、藥物反應以及疾病的易感性有關。因此，本研究即利用解離式高效能液相層析儀（Denaturing High Performance Liquid Chromatography；簡稱DHPLC）去分析在台灣地區，健康成人及癌症（包括肺癌和大腸直腸癌）患者MDR1啟動區上游基因多型性的分佈，本實驗分析的基因涵蓋啟動區大約3Kb長度，其中至少包括18個已知基因多型性的位置。在我們分析的SNPs中，-129（T被C取代）、-41（A被G取代）、-824（T被C取代）、-1017（T被C取代）、-1459（G被A取代）和-1517（T被C取代）在健康成人、肺癌和大腸直腸癌樣本中，變異頻率與疾病並無顯著相關性。與先前其他的研究結果比較，發現在不同種族間-129（T被C取代）、-145（C被G取代）、-41（A被G取代）、-60（A被T取代）、-1017（T被C取代）、-1132（CCATC被刪除）、-1459（G被A取代）和-1517（T被C取代）等基因多型性的頻率有顯著差異。除了已知的18個基因多型性之外，在我們的研究中並未發現其他新穎的SNP。因此，DHPLC所建立的篩檢平台可以快速而有效率地大量篩檢基因變異。未來，我們可以利用功能性基因體分析技術，進一步證實在MDR1啟動區基因多型性，是否會造成P-醣蛋白表現量或功能上的異常以及改變基因轉錄調控的機轉