Alberto Sols Biomedical Research Institute
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Mecanismos arritmogénicos del síndrome de QT corto Tipo 3
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de Lectura: 07-10-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 07-04-2026Short QT Syndrome Type 3 (SQTS3) is a rare arrhythmogenic c hannelopathy c aused by g ain -of -function mutations in K CNJ2 , the gene coding the inward rectifier potassium channel Kir2.1
responsible for the repolarizing current IK 1 . The main characteristics of S QTS3 are substantial abbreviation of the QT interval on the electrocardiogram (ECG ) and life -t hreatening arrhythmias. Due to its recent description and lethality, there are not enough individuals for clinical trials, so animal models are highly needed and desirable. The main objective of my Thesis project was to enhance the understanding of S QTS3 b y i nvestigating its electrophysiologic and arrhythmogenic mechanisms . It is characterized
by variable expressivity , which led me to test the hypothesis that the phenotype depend son the
specific gain -of -function mechanisms triggered by each mutation . Iused in-vivo mouse model s of
three different pathogenic SQTS3 mutations (Kir2.1D 172N , Kir2.1 E 299V a nd Kir2.1 M 301K ). The last two were identified in patients presenting with the most extremely abbreviated QT intervals described in the literature. On ECG, the QT i nterval was significantlys hortened in all S QTS3 models, recapitulating the electrical phenotype of the patients . Intracardiac stimulation showed variable
inducibility among S QTS3 subtypes . Kir2.1 D 172N animals presented the mildest phenotype, but Kir2.1 E 299V mice manifested atrial -specific arrhythmias, whereas Kir2.1 M 301K mice presented the most severe ventricular episodes . Patch-clamping demonstrated extremely abbreviated action potentials in Kir2.1 E 299V and Kir2.1 M 301K cardiomyocytes due to lack of inward -going rectification and increased IK 1 at voltages positive to -8 0mV. The specific interaction of Kir2.1 with other proteins contributed to the explicit cardiac manifestations in each S QTS3 mouse model . Among these, the f unctional interactions of Kir2.1 with the voltage -gated cardiac sodium channel Na V 1.5 r esponsible for IN a stand out . On one hand, Kir2.1 E 299V increase d IN a in Purkinje fibers and shifted ventricular IN a a ctivation and inactivation, increasing the excitability a nd protecting t he ventricle against arrhythmia. On the other, Kir2.1 M 301K reduced the availability of NaV 1.5, reducing I N a density a nd cardiac excitability. Altogether, my research served to i mprove the understanding of S QTS3 , and to demonstrate that its cardiac manifestations are different depending on the
specific molecular defects produced by each mutation.
Moreover, isoprenaline and spermine demonstrated to be effective in prolonging the QT interval of SQTS3 models, without altering other ECG parameters , so my results may contribute to identify novel a ntiarrhythmic drugs in an inheritable cardiac disease with no defined therapyMoreover, the present PhD project was supported by La Caixa Banking Foundation [ LCF/PR/HR19/52160013]; grant PI -FIS -2 020 of the public call “Proyectos de Investigación en Salud 2020” [PI20/01220 ] and “Proyectos de Investigación en Salud 2 023” [PI23/01039] funded by Instituto de Salud Carlos III (ISCIII); the Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (M CIU ) grant BFU2016 -7 5144 -R and PID2020 -
1 16935RB -I 00, and co-f nded by Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER); and Fundación La Marató de TV3 [736/C/2020]. W e also receive support from the European Union's Horizon 2020 Research and Innovation programme [grant agreement GA -
9 65286]. CNIC is supported by the ISCIII, the Ministerio de Ciencia e Innovación (MCIN) and the Pro CNIC Foundation, and is a Severo Ochoa Center of Excellence grant CEX2020 -
0 01041 -S funded by MICIN/AEI/10.13039/50110001103
El gobierno de una Monarquía Universal: el VIII duque de Medinaceli, primer ministro (1680-1685)
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Filosofía y Letras, Departamento de Historia Moderna. Fecha de Lectura: 08-11-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 08-05-2026Juan Francisco Tomás de la Cerda, VIII duque de Medinaceli fue uno de los personajes más relevantes en la monarquía de España durante la segunda mitad de la década de 1670 y el primer lustro de la de 1680. A lo largo del presente trabajo se analiza la faceta cortesana y política que desplegó el duque para sobrevivir y medrar en la corte de Carlos II hasta su ascenso al primer ministerio. Una vez situado en esta preeminente posición se ha pretendido desentrañar su práctica de gobierno y ponerla relación con los principales desafíos que tuvo que afrontar el conjunto de la monarquía durante este periodo. Finalmente se han repasado las causas que desgastaron el ministerio de Medinaceli y que, en último término, precipitaron su caídaJuan Francisco Tomás de la Cerda, VIII Duke of Medinaceli was one of the most important figures in the Spanish monarchy during the second half of the 1670s and the first half of the 1680s. This paper analyses the courtly and political facet that the duke deployed to survive and prosper at the court of Charles II until his ascension to the position of prime minister. Once in this principal position, the aim is to unravel his governmental practice and to relate it to the main challenges that the monarchy had to face during this period. Finally, we have reviewed the causes that wore down Medinaceli's ministry and ultimately precipitated his downfal
Explorando los efectos sinérgicos del ciclo hipocalórico combinado con metformina sobre la longevidad y el cáncer colorrectal.
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología. Fecha de Lectura: 18-11-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 18-05-2026The rising global life expectancy necessitates a deeper understanding of the biological processes of aging and their implications for public health. Effective management of aging is essential not only for enhancing individual health but also for alleviating pressures on healthcare systems due to age-related diseases, such as colorectal cancer (CRC). Moreover, the increasing incidence of obesity adds complexity by intensifying metabolic and age-related chronic diseases.
This study examines the effectiveness of nutritional interventions (cycles of very low-calorie intake - VLCI) together with pharmacological interventions (metformin) on aging and metabolic health both under standard and dietary-induced obesogenic conditions. Likewise, we examine the effectiveness of nutrient restriction, in combination with metformin in in vitro colorectal cancer cells and in vivo models of induced CRC-carcinogenesis. By utilizing middle-aged C57BL/6 mice, young BALB/c mice, and cellular assays, the research aims to elucidate the impact of these interventions on healthspan, lifespan and cancer across different biological settings.
Our findings reveal that cycles of VLCI alone, in combination or not with metformin, leads to reductions in body weight and improvements of metabolic health markers such as glucose and insulin sensitivity, which were more evident under standard diet than under obesogenic conditions. Despite these benefits, any of our experimental intervention was able to enhance survival. In the context of cancer, the combination of nutrient restriction and metformin synergistically boosts anti-proliferative and pro-apoptotic responses in CRC cell models, with all the interventions tested slowing tumor progression and diminishing the number of myeloid-derived stem cells in preclinical BALB/c mice.
In sum, addition of metformin to VLCI, neither in standard diet nor in obesogenic condition, does not exhibit a synergistic effect on healthy aging when compared to VLCI alone. In addition, although in vitro studies combining nutrient restriction with metformin showed notable anti-proliferative and pro-apoptotic, these outcomes were not replicated in an in vivo CRC modelEl aumento de la esperanza de vida mundial requiere una comprensión más profunda de los procesos biológicos del envejecimiento y sus implicaciones para la salud pública. La gestión eficaz del envejecimiento es esencial no solo para mejorar la salud individual, sino también para aliviar las presiones sobre los sistemas de salud debido a las enfermedades relacionadas con la edad, como el cáncer colorrectal (CRC). Además, la creciente incidencia de la obesidad añade complejidad al intensificar las enfermedades metabólicas y crónicas relacionadas con la edad.
Este estudio examina la efectividad de las intervenciones nutricionales (ciclos de ingesta muy baja en calorías - VLCI) junto con las intervenciones farmacológicas (metformina) sobre el envejecimiento y la salud metabólica tanto en condiciones obesogénicas estándar como inducidas por la dieta. Asimismo, examinamos la efectividad de la restricción de nutrientes, en combinación con metformina en células de cáncer colorrectal in vitro y modelos in vivo de carcinogénesis inducida por CRC. Mediante la utilización de ratones C57BL/6 de mediana edad, ratones jóvenes BALB/c y ensayos celulares, la investigación tiene como objetivo dilucidar el impacto de estas intervenciones en la salud, la esperanza de vida y el cáncer en diferentes entornos biológicos.
Nuestros hallazgos revelan que los ciclos de VLCI solos, en combinación o no con metformina, conducen a reducciones en el peso corporal y mejoras en los marcadores de salud metabólica como la sensibilidad a la glucosa y la insulina, que fueron más evidentes bajo la dieta estándar que bajo condiciones obesogénicas. A pesar de estos beneficios, cualquiera de nuestras intervenciones experimentales fue capaz de mejorar la supervivencia. En el contexto del cáncer, la combinación de restricción de nutrientes y metformina aumenta sinérgicamente las respuestas antiproliferativas y proapoptóticas en modelos de células de CRC, y todas las intervenciones probadas ralentizan la progresión tumoral y disminuyen el número de células madre derivadas de mieloides en ratones BALB/c preclínicos.
En resumen, la adición de metformina a VLCI, ni en la dieta estándar ni en condiciones obesogénicas, no exhibe un efecto sinérgico sobre el envejecimiento saludable en comparación con VLCI solo. Además, aunque los estudios in vitro que combinaron la restricción de nutrientes con metformina mostraron notables propiedades
antiproliferativas y proapoptóticas, estos resultados no se replicaron en un modelo de CCR in vivoThis work was supported by the following fellowships and grants:
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PhD research contract by Fundación IMDEA Alimentación – PR2019/013_PEJD-2019-PRE/BMD-17041 obtained by Comunidad de Madrid (May 2020 – October 2022)
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PhD fellowhip financed by Intramural Research Program by National Institute on Aging (August 2019- February 2020)
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Research funded by Comunidad de Madrid-Talento Grant 2018-T1/BMD-11966 for Dr. Alberto Diaz-Rui
Mecanismos subyacentes a la mejora cognitiva mediada por el ejercicio físico en ratón
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Anatomía, Histología y Neurociencia. Fecha de Lectura: 08-11-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 08-05-2026El ejercicio físico ha demostrado tener efectos positivos tanto en el organismo como en el cerebro, y estudios previos han corroborado su impacto beneficioso en la cognición. Sin embargo, los mecanismos subyacentes a esta mejora cognitiva inducida por el ejercicio, especialmente utilizando el ejercicio forzoso con la cinta de correr, aún no están completamente claros. En nuestro laboratorio, nos propusimos investigar ciertos mecanismos que contribuyen a la facilitación cognitiva mediada por el ejercicio en una curva dosis-respuesta.
La hormesis es un fenómeno biológico en el que una sustancia o agente puede tener efectos positivos en dosis bajas pero que resulta ser nocivo en dosis altas. El presente trabajo pretende demostrar este perfil hormético en el contexto de la cognición y el ejercicio físico; no todos los protocolos de ejercicio conllevan una mejora cognitiva.
Para analizar la hormesis de la mejora cognitiva inducida por el ejercicio físico, nos centramos en dos factores clave: las mitocondrias y la microbiota. Definimos tres protocolos diferentes de ejercicio, con sutiles diferencias en el tiempo total de carrera y la velocidad máxima utilizada. Observamos que el protocolo de ejercicio moderado fue el único capaz de inducir una facilitación cognitiva medida mediante pruebas dependientes de hipocampo como el reconocimiento de objetos (NOR) o el reconocimiento de la posición novedosa (NOL), y esta mejora estuvo relacionada con cambios en precursores neurales y progenitores de tipo 2b, pudiendo observar un perfil hormético dependiente de la intensidad del ejercicio tanto en los parámetros conductuales valorados como en marcadores del nicho neurogénico.
Con este perfil hormético como base, investigamos la implicación de las mitocondrias y la microbiota en este fenómeno. En cuanto a la funcionalidad mitocondrial, observamos un aumento en la respiración celular general inducida por el ejercicio, especialmente en el hipocampo. Además, el ejercicio pro-cognitivo se asoció con mayores niveles de lactato. No encontramos cambios en la biogénesis mitocondrial ni en el número de mitocondrias en el hipocampo, pero observamos una morfología mitocondrial específica asociada con el ejercicio moderado, caracterizada por un menor área, perímetro y circularidad, lo que correlacionó con el desempeño cognitivo. Estos hallazgos sugieren que el tipo de ejercicio influye en la morfología mitocondrial y, por ende, en la funcionalidad, potencialmente conduciendo a una mayor eficiencia energética en el grupo con mejora cognitiva. En cuanto a la microbiota, encontramos que el ejercicio moderado conlleva una mayor diversidad microbiana. Identificamos 15 géneros microbianos diferencialmente expresados, destacando 4 por su correlación con el desempeño cognitivo (Angelakisella, Erysipelatoclostridium, Coriobacteriaceae y Acetatifactor). Además, confirmamos mediante un ensayo funcional que la microbiota de un animal que fue sometido a un protocolo de ejercicio moderado es suficiente para inducir beneficios cognitivos en un animal sedentario.
En resumen, este estudio destaca la importancia de reconocer que no todo tipo de ejercicio es beneficioso para el cerebro, especialmente en lo que respecta a la cognición y la memoria. Observamos que un exceso de ejercicio puede inducir perfiles más similares al sedentarismo en cuanto a la mejora cognitiva. Además, resaltamos el papel crucial de la morfología mitocondrial y la composición microbiana en la hormesis de los efectos positivos del ejercicio físicoEl trabajo se ha financiado por el plan estatal del Ministerio de Economía y Competitividad de España, con una beca FPI; con número: BES- 2017/080415, y un profecto; PID2019-110292RB-I00. Los ensayos llevados a cabo en animales se realizaron de acuerdo con las directrices vigentes de la Unión Europea (Directiva 2010/63/UE) y han sido aprobados por el Comité de Ética y Experimentación Animal del Instituto Cajal (20/05/2016), el Comité Ético del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (07/27/2016) y el Área de Protección Animal de la Consejería del Medio Ambiente de la Comunidad de Madrid (10/26/2016
DNA damage: on the origin of the photostability of DNAand its response to platination with biheterometallic compounds
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Química. Fecha de Lectura: 29-11-2024Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 29-05-2026Nucleic acids play a key role in the encoding of the genetic information necessary for
the development and function of all living organisms. Their exceptional properties,
such as structural stability and photostability, are key factors in their evolutionary
selection as the primary carriers of genetic information. Structural stability
enables nucleic acids to adopt a diverse range of spatial conformations without compromising
their integrity, while photostability allows their chromophores to rapidly
dissipate towards the environment the excess energy accumulated from UV light absorption,
thereby preventing damage. These attributes had significant evolutionary
implications, influencing the selection of nucleobases and the exclusion of certain
candidates from early genetic alphabets. Moreover, these properties are crucial for
the functionality of nucleic acids incorporating non-canonical bases, such as those
formed by the Hachimoji genetic alphabet.
This thesis investigates factors influencing the stability of DNA, focusing on its
two key aspects. The study of the photostability focuses on the excited-state potential
energy surfaces beyond the Franck-Condon region upon promotion to the
low-lying bright states in purines and their derivatives, both natural and synthetic.
Relaxation mechanisms are characterized by means of ab initio calculations, estimating
the order of magnitude of the excited state lifetimes and identifying primary
reaction coordinates involved in the returning to the ground state, with consideration
of photoproduct formation when plausible. Our computational results are
compared with experimental data from the literature or facilitated by our collaborators
from the groups of Carlos Crespo-Hernández (Case Western Reserve University)
and Jinquan Chen (East China Normal University). All our results are compiled
along with those from experimental and theoretical studies in the literature, forming
a comprehensive review of the photophysics of purines.
In terms of structural stability, the interaction of DNA with a series of heterobimetallic
complexes proposed as chemotherapeutic agents and developed by Ana
María González-Vadillo’s group at Universidad Autónoma de Madrid is explored.
These compounds are designed to benefit from the synergistic cytotoxic effects of a
platinum center and a ferrocene moiety. Efforts have been focused on the quantification
of the imposed distortion in a double-stranded DNA model upon its interaction
with the chemotherapeutic agents as well as a specific description of the distortion
mechanisms. The expected cytotoxicity of these compounds, which was measured
through the distortion imposed on DNA, was compared to experimental essays from
Francisco Sanz’s group at Universidad Autónoma de Madrid. Additionally, the potential
generation of reactive oxygen species through redox reactions and oxygen
quenching of the phosphorescence of photosensitizers is also consideredLos ácidos nucleicos juegan un rol central codificando las estructuras que conforman
cualquier ser vivo. Sus extraordinarias propiedades son las responsables de que los
procesos evolutivos hayan elegido esta biomolécula y no otra para almacenar toda
información genética. Entre estas propiedades destacan su estabilidad estructural,
que les permite adoptar una amplia variedad de conformaciones espaciales sin comprometer
su integridad, y su fotoestabilidad, que permite a los cromóforos que los
conforman disipar rápidamente la energía potencial que acumulan tras la absorción
de luz ultravioleta y difundirla hacia el medio. Ambas propiedades han tenido
importantes implicaciones evolutivas, determinando qué nucleobases fueron descartadas
de los alfabetos genéticos de los ácidos nucleicos prebióticos. De igual forma,
estas propiedades son fundamentales para el correcto funcionamiento de ácidos nucleicos
constituidos por nucleobases no canónicas, como es el caso de las estructuras
compuestas por el alfabeto genético Hachimoji.
Esta tesis se centra en el estudio de los factores que pueden alterar la estabilidad
del ADN en cualquiera de sus dos aspectos centrales. En el caso de la fotoestabilidad,
se ha realizado una exploración de las superficies de energía potencial más
allá de la región de Franck-Condon que el sistema visitaría tras la promoción de la
población a los estados electrónicos excitados brillantes de baja energía. Todos los
sistemas analizados son purinas o derivados de purinas, tanto naturales como artificiales,
contribuyendo al estudio sistemático de la fotofísica del espacio químico de
las purinas y sus derivados. Mediante cálculos ab initio se ha explorado los mecanismos
de relajación, estableciendo cuáles son los órdenes de magnitud esperados de
los tiempos de desactivación y las principales coordenadas de reacción involucradas
en la recuperación del estado fundamental, incluyendo la potencial formación de
fotoproductos en los casos en los que esto es plausible. Los resultados obtenidos se
han comparado con información experimental disponible en la literatura o que bien
fueron facilitados por nuestros colaboradores, el grupo de Carlos Crespo-Hernández
de la Case Western Reserve o el grupo de Jinquan Chen de la East Normal China
University. Todos nuestros resultados se han recopilados junto a los estudios teóricos
y experimentales publicados en la bibliografía para conformar una pequeña revisión
de la fotofísica de las purinas.
En cuanto a la estabilidad estructural, se ha simulado mediante dinámicas clásicas
el comportamiento en disolución del ADN enlazado a una serie de compuestos
pertenecientes a una familia de complejos heterobimetálicos propuestos por nuestros
colaboradores del grupo de Ana María González-Vadillo de la Universidad
Autónoma de Madrid. Estos compuestos pretenden aprovechar la acción citotóxica
y sinérgica entre los dos principales componentes del fármaco: un centro de platino
y una unidad de ferroceno. Los esfuerzos de esta tesis se han centrado en proporcionar
una estimación cuantitativa de la distorsión generada en un modelo de doble
hélice tras la interacción con los fármacos así como una descripción específica de
los mecanismos de distorsión. La citotoxicidad, estimada a través de la distorsión
inducida en el ADN, es comparada con los ensayos de citotoxicidad realizados por
nuestros colaboradores del grupo de Francisco Sanz de la Universidad Autónoma de
Madrid. Adicionalmente, se ha descrito la potencial formación de especies reactivas
de oxígeno mediada por reacciones redox y de mecanismos asociados al ”oxygen
quenching” de la fosforescencia de fotosensibilizadore
Value of ultrasound-assessed dactylitis in the early diagnosis of psoriatic arthritis
No full textPurpose: The primary objective of this prospective, longitudinal, observational, single-centre study was to evaluate the association between ultrasound-assessed lesions of dactylitis and the diagnosis of psoriatic arthritis (PsA) in patients with psoriasis (PsO) and hand arthralgia. Methods: We included adult patients diagnosed with PsO with hand arthralgia, with or without other musculoskeletal complaints. They were clinically assessed at baseline, 6 and 12 months by a rheumatologist blinded to the ultrasound findings. At baseline, patients underwent a B-mode (BM) and power Doppler (PD) ultrasound assessment by other rheumatologist blinded to clinical data. The ultrasound evaluation included bilateral detection and scoring of synovitis (3 joints, 0-3), tenosynovitis (flexor tendons, 0-3), enthesitis (9 sites, 0-1), peri‑extensor tendon inflammation (PETI) (0-3), and subcutaneous tissue inflammation (SCTI) (0-3) in the 2nd-5th fingers. Results: Seventy patients [44 women; mean (SD) age 51 (12.4) years] were included, of whom 64 completed the study. Of these, 15 (23.4 %) were diagnosed with PsA during the 12-month follow-up period. At finger level, the presence and amount of baseline BM and PD synovitis, BM tenosynovitis, BM and PD enthesitis, and BM and PD PETI were associated with PsA diagnosis (p < .05). A predictive model including two variables, presence of PD synovitis and BM enthesitis, was found to predict PsA diagnosis (χ2 = 35.38; p < .001) with an accuracy of 89.1 %, a sensitivity of 86.7 % and a specificity of 89.8 %. Conclusions: Ultrasound-assessed lesions of dactylitis were associated with a diagnosis of PsA and the short-term development of PsA in patients with PsO and hand arthralgiaThis study was funded by a grant from the Instituto de Salud Carlos III, co-funded by the European Regional Development Fund (FEDER)[PI19/00176]. The Instituto de Salud Carlos III or FEDER did not participate in the study design, data collection, data analysis, writing of the manuscript or the decision to submit the article for publicatio
Estudio del Complejo Shelterina: fundamentos estructurales e interacciones
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de Lectura: 10-04-2025Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 10-10-2026Los telómeros son estructuras nucleoproteicas complejas que han evolucionado en las células eucariotas para proteger y garantizar la integridad del genoma. En vertebrados, el ADN telomérico está compuesto por repeticiones de la secuencia TTAGGG, con un extremo terminal de ADN monocatenario rico en guanina (3’). La linealidad de los cromosomas y la presencia de este extremo de ADN monocatenario 3’ conllevan dos desafíos para la célula. En primer lugar, la maquinaria de replicación canónica no puede replicar completamente los extremos de los cromosomas, lo que lleva a un acortamiento de los telómeros en cada ciclo celular. Lejos de ser un problema, este fenómeno funciona como un reloj biológico de envejecimiento, lo que lleva a las células a la senescencia para evitar la acumulación de mutaciones que podrían poner en peligro la función celular. Sin embargo, en células con alta tasa de proliferación, como las células embrionarias y las células madre, se activa una enzima llamada telomerasa, con actividad transcriptasa inversa, que alarga los telómeros y, por tanto, previene la pérdida de información genética. En segundo lugar, las células están equipadas con una maquinaria de reparación de ADN para detectar y reparar rápidamente cualquier potencial daño en el genoma. De modo que el extremo de los telómeros podría confundirse con rupturas en el ADN, activando las vías ATM y ATR y conduciendo a la pérdida de la homeostasis telomérica, fusiones de telómeros y consiguiente muerte celular. Los defectos en la protección y el mantenimiento de los telómeros pueden dar lugar a patologías graves, conocidas colectivamente como telomeropatías. Además, la activación descontrolada de la telomerasa puede llevar a una proliferación celular excesiva, lo que podría desencadenar en cáncer. Para prevenir la erosión de la información genética y garantizar la protección de los extremos cromosómicos, las células de los mamíferos dependen del complejo shelterina, un conjunto de seis proteínas específicas de los telómeros: TRF1, TRF2, RAP1, TIN2, TPP1 y POT1, que ayudan a mantener la homeostasis telomérica. En esta tesis, adoptamos un enfoque multidisciplinario, utilizando crio -E M y técnicas bioquímicas, biofísicas y computacionales para estudiar la organización del complejo shelterina que protege los extremos cromosómicos y asegura su correcta replicación. Después de extensos esfuerzos de optimización para generar todos los componentes de este complejo, logramos aislar las proteínas individuales de shelterin y ensamblarlas en complejos. Estos reactivos fueron utilizados como herramientas para extraer la mayor cantidad de información posible. A pesar de la dificultad en la obtención de estructuras con resolución atómica, probablemente debido a la flexibilidad intrínseca de estas proteínas y sus complejos, empleamos otras técnicas altamente informativas para complejos dinámicos, como HDX -M S. Además, hemos incorporado herramientas de IA en nuestra investigación, enfocándonos en identificar nuevas proteínas de unión y en el diseño de novo de ligandos específicos. En particular, aplicamos un enfoque de proteómica insilico para identificar nuevos interactores de TRF1 que nos han permitido descubrir nuevas características estructurales de esta proteína. Además, hemos diseñado de novo inhibidores de TRF1 con potencial aplicación terapéutica. Estos hallazgos no solo mejoran nuestra comprensión de la dinámica estructural y funcional del complejo shelterina, sino que también abren nuevas vías para intervenciones terapéuticas, con aplicaciones en la lucha contra enfermedades relacionadas con los telómeros y el cáncerThe research described in this Doctoral Thesis has been funded by projects BFU2017-87316-P, PID2020-120258GB-I00 and C NS2023-143762 (Agencia Estatal de Investigación ), as well as by a Predoctoral Contract from the Plan for the Training of Research Personnel (FPI) associated with project BFU2017-87316-P ( Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades ). The stay at Leiden University (Netherlands) was funded by the FPI plan and the stay at the University of Dundee (United Kingdom) with the EMBO Scientific Exchange Grant (10872)
Control de la respuesta de linfocitos T por miRNAs específicos de NK-EVs y la exorribonucleasa ISG20L2
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 11-04-2025Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 11-10-2026La activación de las células T conlleva cambios dinámicos en la regulación del ARN, los cuales se producen en más de la mitad de los casos a nivel post-transcripcional. Los microARNs (miARNs) y las exonucleasas desempeñan un papel crucial en la regulación de la dinámica de las células T. En particular, los miRNAs bajan sus niveles de expresión globalmente tras la activación, lo que conduce a la inducción de sus dianas de mARNs necesarias para el desarrollo de la función de las células T. Así, ciertas exonucleasas aumentan su expresión tras la estimulación, donde controlan la degradación de miRNAs en etapas tempranas o la eliminación de ARNs que ya no son necesarios, entre otros procesos. En este estudio, investigamos la modulación del ARN en la respuesta de linfocitos T, centrándonos en la función (i) de los miARNs secretados en vesículas extracelulares (EVs) de células NKs y (ii) de la exonucleasa ISG20L2.
El primer objetivo abordó la secuenciación de miRNAs de células NK humanas activadas y en reposo, así como de sus EVs. En este contexto, se ha identificado un repertorio específico de miARNs asociados a NK-EVs y sus firmas de modificación post-transcripcional. Estos miARNs contienen citosilaciones y adenilaciones de las secuencias canónicas, así como otras secuencias cortas que parecen actuar como señales de empaquetamiento en EVs. En particular, varios miRNA de las NK-EVs, como miR-10b-5p, miR-92a-3p y miR-155-5p, degradan mensajeros implicados en respuestas de tipo Th1. Las NK-EVs promueven la degradación del ARNm de GATA3 en los linfocitos T CD4+, lo que conduce a la desrepresión de T-BET y la polarización a Th1 así como a la producción de IFN-γ e IL-2. Además, las NK-EVs influyen en la diferenciación, presentación antigénica y funciones co-estimuladoras de los monocitos y las células dendríticas derivadas de monocitos (moDC). Estos miARNs unidos a nanopartículas de oro recapitulan parcialmente los efectos observados con las NK-EVs en ratones. Estos hallazgos revelan nuevos aspectos de las funciones inmunomoduladoras de las NK-EVs, lo que podría mejorar su uso potencial como herramientas inmunoterapéuticas en un futuro próximo.
El segundo objetivo se centró en el estudio de ISG20L2, una exorribonucleasa inducida tras la activación de células T que se ha asociado a respuestas inmunitarias en un trabajo previo con la línea celular T humana Jurkat. Por ello, hemos generado ratones deficientes en Isg20l2 globales, que no son viables, así como ratones CD4-Cre KO condicionales. Estos últimos presentan un número reducido de linfocitos y una activación deficiente de sus células T. Los análisis de secuenciación transcriptómica revelan un perfil diferenciado, con un aumento de las firmas inflamatorias y una disminución de las vías relacionadas con la progresión del ciclo celular y el metabolismo. Además, los defectos observados en células en cultivo también se confirmaron in vivo, tanto en el contexto de reacción del centro germinal como en la respuesta inmunitaria ante la infección por LCMV. Estos datos indican que ISG20L2 ejerce un papel clave en la modulación de las respuestas inmunitariasThis work was supported by:
• Grant PRYCO223003PEIN funded by the AECC
• Grant PID-2020-120412RB-I00 and PID-2020-119352RB-I00 funded by the Spanish Ministry of Science and Innovation.
• Grant P2022/BMD7209-INTEGRAMUNE from the Comunidad de Madrid.
• Grant from the Ramón Areces Foundation “Ciencias de la Vida y la Salud” (XIX Concurso-2018).
• Ayudas Fundación BBVA a Equipos de Investigación Científica (BIOMEDICINA-2018).
• Grant INFLAMUNE-CM B2017/BMD-3671 funded by the Comunidad de Madrid.
• Grant SAF2017-82886-R funded by the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness.
• CIBER Cardiovascular (CB16/11/00272), Fondo de Investigación Sanitaria del Instituto de Salud Carlos III and co-funding by Fondo Europeo de Desarrollo Regional FEDER).
• La Caixa Grant (HR17-00016) funded by “La Caixa” Fundation.
The Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (CNIC) is supported by the Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), the Ministerio de Ciencia e Innovación (MCIN) and the Pro CNIC Foundation), and is a Severo Ochoa Center of Excellence (grant CEX2020-001041-S funded by MICIN/AEI/10.13039/ 501100011033). Funding agencies do not have intervened in the design of the studies, with no copyright over the stud
Evaluation and perception of Spanish varieties by Majorcans: Distance, prestige, and identity
No full textBased on surveys of a socially stratified group of 108 informants from Majorca, it was found that 1) Majorcans establish hierarchies among different geographical varieties of Spanish and associate the Castilian variety used in Madrid with the normative, prestige model; 2) the informants recognized varieties that were socially or geographically closer to their own better and felt more connected to them; and 3) greater exposure to some varieties did not necessarily result in a more positive evaluatio
Desarrollo de inhibidores de IFN-I inspirados en poxvirus con potencial terapéutico
No full textTesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 21-03-2025Esta Tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 21-09-2026Además de su acción antiviral, el interferón de tipo I (IFN-I) desempeña un papel clave en la inducción de la respuesta inflamatoria y la patología en un grupo de trastornos autoinflamatorios conocidos como interferonopatías. El desarrollo de nuevas terapias para estas enfermedades se ha centrado en el desarrollo de anticuerpos específicos contra el IFN-I o el receptor celular del IFN-I (IFNAR), pero con un éxito limitado.
A lo largo de la evolución, los poxvirus han desarrollado numerosos mecanismos de evasión para eludir la respuesta inmunitaria del huésped, especialmente interfiriendo con las funciones efectoras inmunes. Entre ellos han desarrollado los “receptores señuelo”, proteínas solubles secretadas por las células infectadas para unirse y bloquear las citoquinas clave del huésped e impedir la respuesta inmunitaria. La proteína de unión a IFN-I de poxvirus (vIFNbp) es un receptor soluble único, conservado entre orthopoxvirus y no relacionado con IFNAR, capaz de unirse y bloquear muchos subtipos de IFN-I con amplia especificidad de especie. Su deleción resulta en una clara atenuación en diferentes modelos de infección, demostrando la importancia de este mecanismo para la infección por poxvirus. Además, este receptor señuelo es capaz de unirse a glicosaminoglicanos (GAGs) en la superficie celular mientras se une a IFN-I, lo que parece aumentar su potencial inmunomodulador al permitir la retención de este receptor alrededor del lugar de la infección.
En esta tesis, hemos profundizado en cómo la vIFNbp de poxvirus modula el IFN-I durante la infección con el fin de aplicar este conocimiento al desarrollo de nuevas terapias anti-IFN. Para ello hemos diseñado y expresado un conjunto de proteínas recombinantes basadas en la vIFNbp y caracterizado extensamente su capacidad para neutralizar el IFN-I y unirse a la superficie celular in vitro. También hemos estudiado las proteínas recombinantes basadas en la vIFNbp en el modelo de patogénesis de la viruela del ratón usando virus ectromelia mutantes. Además, hemos estudiado la inducción de IFN-I en tiempo real durante la infección en ratones con virus vaccinia mutantes. Por último, hemos estudiado por primera vez el potencial terapéutico de los inhibidores solubles del IFN-I en dos modelos murinos diferentes de enfermedad autoinflamatoria, la psoriasis inducida por imiquimod y el lupus inducido por pristan