Biotecnología Vegetal (E-Journal - Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas)
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Uso de meta-topolina, una citoquinina no convencional en la multiplicación in vitro de Opuntia stricta Haw.
Get PDFThe erect prickly pear (Opuntia stricta Haw) is an important alternative used to feed ruminants during prolonged periods of drought. The objective of this research was to evaluate the effect of different types and concentrations of cytokinins on the morphophysiological aspects of in vitro multiplication of O. stricta. Segments of O. stricta were grown in liquid and semisolid Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2.22 or 1.11 µM l-1 of 6-benzylaminopurine (BAP) and 1.11 µMl-1 meta-Topolin (mT). The experiment was conducted in a growth room at 25±2 °C over a period of 45 days. It were evaluated multiplication rate, shoot formation index, rooting and callus formation, fresh biomass, height, activity of antioxidant enzymes, and content of hydrogen peroxide and malondialdehyde. The experiment was carry out in a completely randomized design with six treatments and twelve replicates. The results showed that the consistency of the medium had influence on the shoots development and roots emission. The increase in BAP concentrations resulted in a reduction in the length and fresh biomass of the shoots and in the root system. The enzymatic activity and oxidative stress were inducted with the use of 6-benzylaminopurine. The micropropagation of O. stricta was improved with the use of mT, verified through shoot with better morphophysiological quality for acclimatization, with longer shoot length, rooting and reduction in the occurrence of hyperhydricity, a morphophysiological disorder that leads to large losses in micropropagation of this specie. Keywords: antioxidant enzyme, hyperhydricity, in vitro stress, morphophysiological anomalies El nopal erecto (Opuntia stricta Haw) es una alternativa importante que se utiliza para alimentar a los rumiantes durante períodos prolongados de sequía. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de diferentes tipos y concentraciones de citoquininas en los aspectos morfofisiológicos de la multiplicación in vitro de O. stricta. Se cultivaron segmentos de O. stricta en medio de cultivo líquido y semisólido de Murashige y Skoog (MS) con 2.22 o 1.11 µM l-1 de 6-bencilaminopurina (BAP) y 1.11 µM l-1 de meta-Topolina (mT). El experimento se realizó en una sala de crecimiento a 25 ± 2 °C durante un período de 45 días. Se evaluaron la tasa de multiplicación, el índice de formación de brotes, la formación de raíces y callos, la biomasa fresca, la altura, la actividad de las enzimas antioxidantes y el contenido de peróxido de hidrógeno y malondialdehído. El experimento se realizó con un diseño completamente al azar con seis tratamientos y doce repeticiones. Los resultados mostraron que la consistencia del medio de cultivo influyó en el desarrollo de brotes y en la emisión de raíces. El aumento en las concentraciones de BAP resultó en una reducción en la longitud y la biomasa fresca de los brotes y en el sistema radicular. La actividad enzimática y el estrés oxidativo se indujeron con el uso de 6-bencilaminopurina. La micropropagación de O. stricta se mejoró con el uso de mT, verificado a través de brotes con mejor calidad morfofisiológica para la aclimatización con mayor longitud de brotes, enraizamiento y reducción en la aparición de hiperhidricidad, un trastorno morfofisiológico que conduce a grandes pérdidas de micropropagación de esta especie. Palabras clave: anomalías morfofisiológicas, enzima antioxidante, estrés in vitro, hiperhidricida
Caracterización histológica de la respuesta de caña de azúcar a la infección por Puccinia kuehnii
Get PDFABSTRACTSugarcane orange rust, caused by Puccinia kuehnii (W. Krüger) EJ Butler, is one of the major diseases impacting sugarcane (Saccharum spp.) production worldwide. The objective of this work was to characterize by histology the development of P. kuehnii in leaves and the response of the cultivars to the disease. Four cultures with different degrees of infection response were inoculated in greenhouse. Microscopy studies were performed in leaf fragments of plants at 5 and 15 days after inoculation. It was shown that the development of fungus structures, prior to foliar tissue penetration, are similar in all cultivars regardless of the type of plant response. It was found that cultivar with grade 1 developed response similar to the hypersensitive response, while grade 2 suggests resistance based on the quantitative contribution of several genes. The results are a contribution towards understanding the genetic basis of orange rust resistance in sugarcane. RESUMENLa roya naranja de la caña de azúcar, causada por Puccinia kuehnii (W. Krüger) E.J. Butler, es una de las principales enfermedades que afectan la producción de caña de azúcar (Saccharum spp.) a nivel mundial. Este trabajo tuvo como objetivo caracterizar por histología el desarrollo de P. kuehnii en hojas y la respuesta de los cultivares a la enfermedad. Se seleccionaron cuatro cultivares con diferentes grados de respuesta a la infección, los que fueron inoculados en casa de cultivo. Se realizaron estudios por microscopía en fragmentos de hojas de plantas a los 5 y 15 días posteriores a la inoculación. Se demostró que el desarrollo de las estructuras del hongo previas la penetración del tejido foliar son similares en todos los cultivares, con independencia del tipo de respuesta de la planta. Se encontró que el cultivar con grado 1 presenta una respuesta similar a la respuesta hipersensible, mientras que el grado 2 hace suponer una resistencia a partir de la contribución cuantitativa de varios genes. Los resultados son un aporte al entendimiento de las bases genéticas de la resistencia de la caña de azúcar a la roya naranja.
Optimización del medio de cultivo y las condiciones de fermentación para la producción de un biofertilizante a base de Pseudomonas fluorescens
Get PDFIn Cuba, a biofertilizer has been developed based on a Pseudomonas fluorescens strain phosphate solubilizer. Given the need to standardize its industrial scale up, this work aimed to optimize the culture medium and the fermentation conditions. First, tests in the shaker were carried out and then in a fermenter. In each case an experimental validation was performed. For the optimization of the culture medium, a central composite design was used to adjust response surfaces. A 23 factorial design with equidistant star points and six repetitions in the center of the plan considered zero was applied. A total of 20 experimental runs were performed, with three repetitions each and the regression equation was determined. As a response variable, cell growth was determined by optical density λ = 600 nm (OD600). To optimize microbial growth based on agitation speed and air flow, a 12-liter total volume fermenter with 8.5 liters of effective volume with a factorial design 22 was used, taking OD600 as the response variable. It was found that for the industrial production of P. fluorescens and the formulation of the bioproduct, an optimized semisynthetic culture medium can be used, without molasses. Together with the employed of optimal agitation speed and air flow, the bacterial biomass content can be increased. The new conditions allowed reducing the fermentation time to 12 hours compared to the 20 to 22 hours used in the production scheme. In addition, 29%, 50% and 40%, respectively, of carbon, nitrogen and phosphorus sources were reduced. Keywords: bioproduct, central composite design, response surface methodologyEn Cuba se ha desarrollado un biofertilizante a base de una cepa de Pseudomonas fluorescens solubilizadora de fosfatos. Ante la necesidad de estandarizar su escalado industrial este trabajo tuvo por objetivo optimizar el medio de cultivo y las condiciones de fermentación. Primero se realizaron ensayos a escala de zaranda y posteriormente en un fermentador. En cada caso se realizó una validación experimental. Para la optimización del medio de cultivo se empleó un diseño compuesto central para ajustar superficies de respuesta. Se aplicó un diseño factorial 23 con puntos estrellas equidistantes y seis repeticiones en el centro del plan considerado como cero. Se realizaron un total de 20 corridas experimentales, con tres repeticiones cada una y se determinó la ecuación de regresión. Como variable de respuesta se determinó el crecimiento celular por densidad óptica λ =600 nm (DO600). Para optimizar del crecimiento microbiano en función de la velocidad de agitación y el flujo de aire se empleó un fermentador de 12 litros de volumen total con 8.5 litros de volumen efectivo con un diseño factorial 22, tomando como variable de respuesta la DO600. Se comprobó que para la producción industrial de P. fluorescens y la formulación del bioproducto puede emplearse un medio de cultivo semisintético optimizado, sin melaza, que unido al empleo de una velocidad de agitación y flujo de aire óptimos permiten incrementar el contenido de biomasa bacteriana. Las nuevas condiciones permitieron reducir el tiempo de fermentación a 12 horas con respecto a las 20 a 22 horas que se empleaban en el esquema de producción. Además, se redujo el 29%, 50% y 40%, respectivamente de las fuentes de carbono, nitrógeno y fósforo.Palabras clave: bioproducto, diseño compuesto central, metodología de superficie respuest
Efecto de la luz y del ácido giberélico en la germinación in vitro de Capsicum annuum L. cv. ‘Papri King’
Get PDFABSTRACT In the coastal zone of Peru, paprika (Capsicum annuum L.) is a crop of great importance, but it has a high production cost because the seeds are germinated in seedlings and this stage is considered crucial. The objective of the present investigation was to determine the effect of light and gibberellic acid on the in vitro germination of paprika seeds cv. ‘Papri King’. The seeds were disinfected with 70% alcohol for 1 min and then sodium hypochlorite (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0%) during 10 minutes. For germination it were placed in MS culture medium. Treatments were formed with the addition of gibberellic acid (AG3) (0.25, 0.5, 1.0 mg l-1) and photoperiod of 16 hours light or dark. The percentage of contamination and germination was evaluated in vitro in the first and fourth week and the height (cm) of the seedlings was measured. Using 1.5% and 2% sodium hypochlorite solutions, the seeds were disinfected without microbial contamination. The addition of gibberellic acid and the photoperiod of 16 h light increased the seeds germination. With 1 mg l-1 gibberellic acid and photoperiod of 16 hours light, the highest germination percentage was achieved (97.8%).En la zona costera de Perú la páprika (Capsicum annum L.) es un cultivo de gran importancia, pero posee un elevado costo de producción debido a que las semillas se germinan en almácigos y se considera esta etapa como crucial. El objetivo de la presente investigación fue determinar el efecto de la luz y del ácido giberélico en la germinación in vitro de semillas de páprika cv. ‘Papri King’. Las semillas se desinfectaron con alcohol 70% por 1 min y luego hipoclorito de sodio (0.5, 1.0, 1.5 y 2.0%) durante 10 minutos. Para la germinación se colocaron en medio de cultivo MS. Se conformaron tratamientos con la adición de ácido giberélico (AG3) (0.25, 0.5, 1.0 mg l-1) y fotoperiodo de 16 horas luz u oscuridad. Se evaluó el porcentaje de contaminación y germinación en la primera y cuarta semana in vitro y se midió la altura de las plántulas (cm). Empleando soluciones de hipoclorito de sodio al 1.5% y 2% se logró desinfectar las semillas sin contaminación microbiana. La adición de ácido giberélico y el fotoperiodo de 16 h luz incrementaron la germinación de las semillas. Con 1 mg l-1 de ácido giberélico y fotoperiodo de 16 horas luz, se logró el mayor porcentaje de germinación (86%)
Estabilidad genética entre clones de berenjena in vitro inducidos por diferentes reguladores de crecimiento de plantas
Get PDFMany factors may influence the genetic stability of plant in vitro clones, among which the genotype and the regenerative process induced by plant growth regulators. The resulting somaclonal variations may be useful for breeding projects, but may be detrimental to germplasm conservation. The objective of this work was to evaluate the genetic stability of Solanum melongena cv. Florida Market clones, obtained in response to different plant growth regulators. For the production of clones, leaf explants were used from commercial seed germinated plants. The explants were inoculated in Murashige and Skoog medium supplemented with different plant growth regulators at predefined concentrations. The DNA was extracted by the CTAB method from leaves of complete plants obtained by somatic embryogenesis induced by naphthaleneacetic acid (NAA) or indirect organogenesis induced by benzylaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ). For the RAPD, 117 DNA samples were amplified by ten decamer primers and 49 specific bands were selected among the products for the comparative study. A total of 5733 fragments were obtained, with a rate of 5.37% polymorphism. NAA did not generate polymorphism and the BAP was responsible for the highest rate obtained (14.28%). Two RAPD primers were identified as markers for monitoring the genetic stability of eggplant. The polymorphic pattern was observed only in clones originating from indirect organogenesis. These results indicate the usefulness of a monitoring protocol for studies using in vitro cloned eggplant.Muchos factores pueden influir en la estabilidad genética de los clones de plantas in vitro, entre los que se encuentran el genotipo y el proceso regenerativo inducido por los reguladores del crecimiento. Por lo tanto, las variaciones somaclonales resultantes del cultivo pueden ser útiles para proyectos de mejoramiento genético, pero pueden ser perjudiciales para la conservación de germoplasma. El objetivo de este estudio fue evaluar la estabilidad genética de Solanum melongena cv. Florida Market, obtenida en respuesta a diferentes reguladores del crecimiento. Para la producción de clones se utilizaron explantes de hojas provenientes de plantas obtenidas de semillas germinadas. Los explantes se inocularon en medio de cultivo Murashige y Skoog con los diferentes reguladores del crecimiento en concentraciones predefinidas. El ADN se extrajo mediante el método CTAB a partir de plantas completas obtenidas por medio de embriogénesis somática inducida por ácido naftalenoacético (ANA) u organogénesis indirecta inducida por bencilaminopurina (BAP) o tidiazurón (TDZ). Para el RAPD, 117 muestras de ADN se amplificaron mediante diez cebadores y se seleccionaron 49 bandas puntuales entre los productos, para el estudio comparativo. Se obtuvieron un total de 5733 fragmentos, con una tasa de 5.37% de polimorfismo. ANA no generó polimorfismo y BAP fue responsable de la tasa más alta obtenida (14.28%). Se identificaron dos cebadores RAPD como marcadores para monitorear la estabilidad genética de la berenjena. El patrón polimórfico se observó solo en los clones originados en la organogénesis indirecta. Estos resultados indican la utilidad de un protocolo de monitoreo para estudios que usan berenjena clonada in vitro. Palabras clave: Solanum melongena, cultivo in vitro, variación somaclonal, RAPD, polimorfismo de ADN, fitomejoramient
Punta morada de la papa, Marchitez letal de la palma aceitera y Síndrome de cuello virado de la papaya: enfermedades asociadas a fitoplasmas en Ecuador
Get PDFPhytoplasma are wall-less bacteria limited to the phloem vessels in higher plants. Diseases associated with phytoplasma, in the past, have not been a serious problem in Ecuador. Nevertheless, for climate change effects, their importance has been increasing suddenly. This research was focused on the detection of phytoplasma using nested Polymerase Chain Reaction (PCR), in potato (Solanum tuberosum L.), oil palm (Elaeis guineensis), and papaya (Carica papaya L.) plants. Phytoplasma-specific PCR amplifications were generated by nested PCR in 50% samples of Twisted neck syndrome in papaya, 38% potato samples showing Purple top symptoms, and in all the samples showing symptoms of Lethal wilt of oil palm. A continual increase in the incidence of Potato purple top was observed, and there is a high risk of contamination in the southern production zones of the country. In potato, results of this study are more closely related to Candidatus Phytoplasma subgroup 16SrI. Lethal wilt continues to be a major threat to oil palm production. In papaya, members of the group 16SrXIII-E produce a disease similar as reported in this study. Keywords: Candidatus Phytoplasma, crop production, nested PCRLos fitoplasmas son bacterias sin pared celular limitadas al floema en plantas superiores. Las enfermedades asociadas a fitoplasmas, en el pasado, han sido poco frecuentes y severas en el Ecuador. Sin embargo, por efectos del cambio climático, su importancia se ha incrementado en un corto tiempo. Esta investigación tuvo el objetivo de detectar fitoplasmas mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada, en plantas de papa (Solanum tuberosum), palma aceitera (Elaeis guineensis) y papaya (Carica papaya). Amplicones del tamaño esperado para fitoplasma fueron obtenidos en el 50% de las muestras con síndrome de cuello virado de la papaya, 38% de plantas con sintomatología de punta morada de la papa y todas las muestras con marchitez letal de la palma aceitera. Punta morada ha ido incrementándose en incidencia y severidad, y existe alto riesgo de contaminación de la enfermedad en zonas de producción de semilla al centro-sur del país. En papa los resultados de este estudio están relacionados con Candidatus Phytoplasma sp. subgrupo 16SrI. La Marchitez letal continúa siendo una seria amenaza para el cultivo de palma aceitera. En papaya, miembros del 16SrXIII-E producen sintomatología similar a la informada en el presente trabajo. Palabras clave: Candidatus Phytoplasma, producción de plantas, PCR-anidad
Efecto del tratamiento térmico a altas temperaturas sobre la germinación in vitro de semillas de Phaseolus vulgaris cv. ‘ICA Pijao’
Get PDFThe common bean (Phaseolus vulgaris L.) production is limited by biotic and abiotic factors. Among them, water stress, saline or high temperatures. To solve this problem, genetic improvement programs are aimed at the search for tolerant cultivars. The objective of this work was to determine the effect of heat treatment at high temperatures on the in vitro germination of P. vulgaris cv. ‘ICA Pijao’. For this, seeds of 1-4 months of harvest were used. It were treated at 35 ± 2 °C in an incubator or immersed in water in a thermal bath. As a control, seeds at room temperature (28 ± 2 °C) were used. The results showed that in vitro germination was not less than 90%, however the two heat treatment conditions affected the length and thickness of the radicle and the length of the plumule. Considering the results, the ease of application and the non-affectation of germination, it is recommended to use the heat treatment at 35 ± 2 ºC in an incubator. This could be used to induce high temperature stress in the common beans cv. ‘ICA Pijao’ in an in vitro selection protocol.La producción de frijol común (Phaseolus vulgaris L.) se limita por factores bióticos y abióticos. Entre ellos, el estrés hídrico, salino o por altas temperaturas. Para dar solución a esta problemática, los programas de mejoramiento genético se encaminan a la búsqueda de cultivares tolerantes. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del tratamiento térmico a altas temperaturas sobre la germinación in vitro de P. vulgaris cv. ‘ICA Pijao’. Para ello, se utilizaron semillas de 1-4 meses de cosechadas. Estas fueron tratadas a 35±2 ºC en incubadora o sumergidas en agua en baño térmico. Como control se emplearon semillas a temperatura ambiente (28±2 ºC). Los resultados mostraron que la germinación in vitro no fue inferior al 90%, sin embargo las dos condiciones de tratamiento térmico afectaron la longitud y el grosor de la radícula y la longitud de la plúmula. Considerando los resultados, la facilidad de aplicación y la no afectación de la germinación se recomienda utilizar el tratamiento térmico a 35±2 ºC en incubadora. Este podría emplearse para inducir estrés por altas temperaturas en el cultivar de frijol común ‘ICA Pijao’ en un protocolo de selección in vitro
Daño a la membrana y respiración celular de Passalora fulva por extractos de hojas de Citrus aurantiifolia
Get PDFThe foliar mold of tomato (Solanum lycopersicum L.), produced by Passalora fulva, constitutes an important phytosanitary problem that affects the production of tomato in greenhouse. The use of plant extracts could contribute to the disease management. In this sense, ethanolic extracts of Citrus aurantiifolia leaves have shown antifungal activity against P. fulva. The aim of this study was to determine the effect of C. aurantiifolia extract on the cell membrane and respiration of P. fulva. The extract was obtained by ultrasound-assisted extraction and the content of total phenols was quantified. The effect of the extracts on the cell membrane was evaluated by determining the phosphorus and potassium concentrations in the extracellular medium and the effect in respiration for succinate dehydrogenase activity. The high concentrations of phosphorus and potassium in the extracellular medium suggested damage in the permeability of the cellular membrane of P. fulva. Similarly, the inactivity of the enzyme succinate dehydrogenase indicated an inhibition of cellular respiration of P. fulva by the extract evaluated. The results of this study confirmed the antifungal properties of the leaf extract of C. aurantiifolia. Keywords: action mode, leaf mould, lemonEl moho foliar del tomate (Solanum lycopersicum L.), producido por Passalora fulva, constituye un problema fitosanitario importante que afecta la producción de tomate en casas de cultivo. El uso de extractos de plantas pudiera contribuir al manejo de esta enfermedad. En este sentido, extractos etanólicos de hojas de Citrus aurantiifolia han mostrado actividad antifúngica frente a P. fulva. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de un extracto de C. aurantiifolia en la membrana celular y la respiración de P. fulva. El extracto se obtuvo mediante extracción asistida por ultrasonido y se cuantificó el contenido de fenoles totales. El efecto de los extractos en la membrana celular se evaluó mediante la determinación de las concentraciones de fósforo y potasio en el medio extracelular y el efecto en la respiración, mediante la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa. Las altas concentraciones de fósforo y potasio encontradas en el medio extracelular sugirieron daños en la permeabilidad de la membrana celular de P. fulva. De manera similar, la inactividad de la enzima succinato deshidrogenasa indicó la inhibición de la respiración celular del hongo por el extracto evaluado. Los resultados de este estudio confirmaron las propiedades antifúngicas del extracto de hojas de C. aurantiifolia. Palabras clave: limón criollo, moho foliar, modo de acció
Trichoderma: su potencial en el desarrollo sostenible de la agricultura
Get PDFABSTRACTThe sustainable production of food without affecting the environment is nowadays a society challenge that requires transforming the conventional systems of agricultural exploitation to agroecological in the productive forms. In this sense, the use of microorganisms for pests and diseases control constitutes a viable alternative to achieve significant increases yields, quality of the crops and reduce the negative impact of agrochemicals on the environment. Trichoderma is considered one of the most common fungal phytopathogenic antagonists in modern sustainable agriculture. This paper summarizes some theoretical and practical aspects of the multiple benefits provided by the species of Trichoderma spp. Therefore, this has made possible the development of formulation through plant biotechnology and its application in the development of sustainable agriculture.RESUMEN La producción sostenible de alimentos sin afectar el medio ambiente es un reto para la sociedad actual que impone transformar los sistemas convencionales de explotación agraria a agroecológicos en las formas productivas. En este sentido, la utilización de microorganismos para el control de plagas y enfermedades, constituye una alternativa viable para lograr aumentos significativos en los rendimientos, calidad de los cultivos y reducir el impacto negativo de los agroquímicos en el medio ambiente. Trichoderma se considera uno de los antagonistas de hongos fitopatógenos más utilizado en la agricultura moderna. En este artículo se resumen algunos aspectos teóricos y prácticos de los múltiples beneficios que aportan las especies de Trichoderma lo cual ha hecho posible la elaboración de formulados mediante técnicas biotecnológicas y su aplicación en el desarrollo de la agricultura sostenible
Conservación in vitro de cultivares de Ipomoea batatas (L.) Lam por crecimiento mínimo con el uso de manitol
Get PDFIn vitro conservation of Ipomoea batatas (L.) Lam allows the exchange of germplasm and its availability for breeding programs. The objective of this work was to determine the effect of mannitol and abscisic acid in the conservation through minimum growth of I. batatas cultivars from INIVIT Germplasm Bank. Treatments included abscisic acid (ABA) (5 and 10 mg l-1) and mannitol (1.0, 1.5 and 2.0%) in a basal MS culture medium, the combination of ABA (10 mg l-1) and mannitol (1.0 , 1.5 and 2.0%). As controls were used the MS basal culture medium and MS with sorbitol (1.0%) and glucose (1.0%). In the cultivars 'Cautillo' and 'INIVIT BS 16-2006' the best results of survival, growth decrease and green but small leaves were obtained in the treatments that contained the basal culture medium with mannitol (10, 15 and 20%) . Growth of the explants was not achieved in culture media with abscisic acid. The MS culture medium with 2 mg l-1 of thiamine, 100 mg l-1 of myo-inositol and 1.0% of mannitol, allows the in vitro conservation of sweet potato cultivars between six and eight months. Keywords: osmotic agent, sweet potato, germplasm, culture mediumLa conservación in vitro de Ipomoea batatas (L.) Lam permite el intercambio de germoplasma y su disponibilidad para programas de mejoramiento genético. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de manitol y ácido abscísico en la conservación mediante crecimiento mínimo de cultivares de I. batatas del Banco de Germoplasma del INIVIT. Los tratamientos incluyeron ácido abscísico (ABA)(5 y 10 mg l-1) y manitol (1.0, 1.5 y 2.0%) en un medio de cultivo MS basal, la combinación de ABA (10 mg l-1) y manitol (1.0, 1.5 y 2.0%). Como controles se emplearon el medio de cultivo MS basal y MS con sorbitol (1.0%) y glucosa (1.0%). En los cultivares ‘Cautillo’ e ‘INIVIT BS 16-2006’ se obtuvieron los mejores resultados de supervivencia, disminución del crecimiento y hojas verdes pero pequeñas en los tratamientos que contenían el medio de cultivo basal con manitol (10, 15 y 20%). En los medios de cultivo con ácido abscísico no se logró crecimiento de los explantes. El medio de cultivo MS con 2 mg l-1 de tiamina, 100 mg l-1 de mio-inositol y 1.0% de manitol, posibilita la conservación in vitro de cultivares de boniato entre seis y ocho meses Palabras clave: agente osmótico, boniato, germoplasma, medio de cultiv