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Evidence of different phylogenetic origins of two mexican sugarcane mosaic virus (scmv) isolates
Full text linkThe molecular analysis of the Sugarcane mosaic virus (SCMV) for coat protein cistron reported in the public GenBank database, revealed the presence of 45 additional nucleotides coding for 15 amino acids in the N-terminal region of the coat protein sequence of the mexican isolate GU474635. BLAST analysis indicates this particular feature is also present in the coat protein sequence identified with the accession number D00949 reported in the USA in 1991. Phylogenetic analysis of 185 SCMV coat protein sequences reported from Asia, Africa, Brazil and Argentina among others, suggest a putative different phylogeographical origin of the mexican SCMV isolates. Coat protein sequence from isolate GU474635 is phylogenetically closer to isolates from Brazil and USA, while SCMV coat protein sequences from Germany and Spain are phylogenetically closer to the coat protein from isolate EU091075. Particular features among SCMV isolates from different countries along the American continent, i.e USA, Mexico and Brazil suggest low phytosanitary control in plant material exchange among countries.El análisis molecular del cistrón, que codifica para la proteína de la cubierta del virus del mosaico de la caña de azúcar (SCMV) reportado en la base de datos del banco de genes (GenBank), reveló la presencia de 45 nucleótidos adicionales que codifican para quince aminoácidos, en la región amino de la secuencia de la proteína de la cubierta del aislamiento mexicano identificado con el número de acceso GU474635. El análisis BLAST indicó que esta característica particular también está presente en el aislamiento D00949, reportado en 1991 en Estados Unidos. El análisis filogenético de 185 secuencias de la proteína de la cubierta de SCMV reportadas de Asia, áfrica, Brasil y Argentina, entro otros, sugiere diferentes orígenes filogeográficos de los aislamientos mexicanos. El aislamiento mexicano GU474635 es filogenéticamente más cercano a aislamientos de SCMV de Brasil y de EE.UU., mientras que secuencias de la proteína de la cubierta del virus SCMV reportadas en China y Alemania son filogenéticamente más cercanas al aislamiento mexicano EU091075. Las características particulares que comparten aislamientos virales de tres países del continente americano, a saber, EE.UU., México y Brasil, sugieren un bajo control fitosanitario en el intercambio de material vegetal
Caracterización fitoquímica preliminar y por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (gc-ms) en raíces de ichthyothere terminalis recolectadas en localidades de norte de Santander y meta como posible potencial repelente de aedes aegypti
No full textRaíces de Ichthyothere terminalis han sido utilizadas por pescadores con el fin de “espantar” mosquitos en la Amazonía brasileña. Muy pocos autores han hecho comentarios al respecto sin ser concluyentes de la veracidad de este efecto y mucho menos de una descripción fitoquímica de las raíces de esta planta. Con el fin de elucidar este posible efecto bioactivo sobre los mosquitos Aedes aegypti y Aedes albopictus, vectores de enfermedades con gran incidencia sobre la salud humana; se recolectaron raíces de plantas de la especie Ichthyothere terminalis reportadas en los municipios de Ábrego (Norte de Santander), Manacacías y Cubarral (Meta) para determinar el primer perfil fitoquímico a través de un screening y la identificación de sus componentes volátiles por Cromatografía de Gases-Espectrometría de Masas. Las pruebas fitoquímicas constaron de análisis para la determinación de alcaloides, cumarinas, flavonoides, taninos, saponinas, esteroides y/o triterpenoides, compuestos quinónicos, glucósidos cardiotónicos y glucósidos cianogénicos. El análisis por GC-MS reveló un alto contenidomonoterpenos y sesquiterpenos, en los extractos del Meta; y sesquiterpenos, diterpenos, cetonas, alcoholes y acetatos en los extractos de Norte de Santander; también se evidenció la presencia de tres componentes descritos como eficientes repelentes del género Aedes. Los resultados se discuten en este proyectoPregradoIngeniero(a) Biotecnológico(a
Caracterización fitoquímica y actividad antibacteriana del extracto de hojas de zorruno (zanthoxylum caribaeum lam) (Archivo Electrónico)
No full textEl Añublo Bacterial es una enfermedad que se presenta en el cultivo del arroz, causado por la bacteria Burkholderia glumae produciendo la pudrición del grano y la plántula del arroz. Esta enfermedad ha tomado gran importancia debido a los costos causados al afectar la producción del cultivo. En el presente trabajo se realizó un estudio biológico utilizando extractos etanólicos de Zanthoxylum caribaeum Lam, nativa de la región y conocida por sus propiedades medicinales, con la finalidad de identificar metabolitos secundarios con potencial actividad antibacterial, como posible alternativa contra Burkholderia glumae. El estudio se realizó con la parte aérea de la planta (hojas), colectados en la vereda Brisas del Oriente, Norte de Santander. Se evaluó la presencia de alcaloides, taninos, carotenoides, cumarinas, flavonoides, quinonas, saponinas y sesquiterpenlactonas, triterpenoides y/o esteroides. Se determinó el porcentaje de abundancia de los compuestos mayoritarios por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, confirmando la presencia de sesquiterpenos como α-trans-farneseno (33,5%) y trans-β-cariofileno (28,1%). La identificación de los metabolitos presentes en el extracto permitió observar los compuestos que poseen potencial medicinal, de igual manera se evaluó la capacidad antibacterial al extracto por el método de antibiograma. Este estudio resalta los beneficios de caracterizar fitoquímicamente el extracto de hojas de Zanthoxylum caribaeum Lam, contribuyendo a elucidar la etnobotánica a nivel local.PregradoTecnólogo(a) Químico(a
Descripción del uso tradicional de plantas medicinales en el mercado del municipio de Sardinata, norte de Santander durante el primer semestre del 2019
No full textLa relación con la naturaleza se puede abordar de diferentes perspectivas, una de ellas la etnobotánica. Esta es una disciplina de investigación que su objeto de estudio, las plantas, se fue ampliando al relacionarlas con la alimentación y la curación de enfermedades, conocimientos heredados de manera generacional. El presente trabajo, se basa en la importancia de rescatar conocimientos tradicionales del uso de las plantas con fin medicinal en Norte de Santander, específicamente en el Mercado de Sardinata, realizando el primer reporte de plantas medicinales de venta en el mercado, relacionando sus usos orientados por el vendedor y la identificación de la presencia de metabolitos secundarios por cromatografía de capa fina (TLC). Se concluye que la en familias Agavaceae, Lamiaceae, Poaceae, Begoniaceae, Urticaceae, TheaceaePregradoTecnólogo(a) en Regencia de Farmaci
Efecto de los extractos de moringa oleífera y acmella cilliata (kunth) cass en el desarrollo radicular en arabidopsis thaliana (Archivo Electrónico)
No full textLa respuesta del crecimiento de las raíces se encuentra mediada por fitorreguladores, compuestos orgánicos que participan en todas las etapas de crecimiento y desarrollo de la planta. Un buen sistema radicular garantiza el anclaje y absorción de nutrientes para los procesos metabólicos requeridos en sus etapas fenológicas. Las alcamidas, citoquininas y auxinas, son fitorreguladores que en su sinergismo juega un papel importante en el desarrollo del sistema radicular. Se ha encontrado la presencia de citoquininas en Moringa oleífera, de igual manera la presencia de alcamidas en Acmella cilliata (Kunth) Cass, permitiendo una capacidad en el desarrollo radicular al aplicar extracto crudo de estas plantas. Para entender de manera detallada la respuesta de las raíces al extracto de Moringa oleífera y Acmella cilliata (Kunth) Cass, se utilizó un sistema in vitro con Arabidopsis thaliana usando 2 condiciones experimentales. (A) Semillas germinadas directamente en medio Murashige Skoog (MS) con dilución del extracto de Moringa oleífera y Acmella cilliata (Kunth) Cass a diferentes diluciones, lo cual permitió determinar cómo se afectaba el crecimiento de la raíz primaria. (B) Plantas germinadas y crecidas por 8 días en medio MS, sin raíces laterales, transferidas a medios con diferentes diluciones de los extractos. Los resultados obtenidos demostraron que el mejor solvente para la estimulación de la germinación de Moringa oleífera fue el extracto básico de hidróxido de potasio ( KOH 0.05M) tanto en (A) como en (B); y la dilucion adecuada entre 1.5 mL y 2.0 mL,PregradoTecnólogo(a) Químico(a
Genetic variability of <i>Papaya ringspot virus</i> isolates in Norte de Santander - Colombia
Full text linkThe Papaya ringspot virus (PRSV), a member of the potyvirus that is transmitted by aphids within the Potyviridae family, is the main limiting factor for papaya (Carica papaya L.) and Cucurbits worldwide and causes losses of up to 100%. In this study, we conducted research on the genetic diversity of PRSV isolates collected from two locations in the department of Norte de Santander, Colombia. The analysis was performed by comparing the nucleotide sequences of the region that encode the coat protein (CP) of nine PRSV isolates from the Villa del Rosario location and 12 isolates from the Campo Hermoso location. The analysis included three sequences of the CP of PRSV isolates reported in the Colombian departments of Arauca and Valle del Cauca. The bioinformatic analysis suggested that the PRSV isolates from the locations in Norte de Santander were different from each other, grouping into different phylogenetic groups. Anexistence of recombination events in the coat protein was observed. This is the first study of PRSV genetic variability that has been conducted at the local level in Colombia
Estudio fotoquímico y actividad antifúngico de duramen de Platymiscium pinnatum (Jacq) dugand (Peraco)
No full textEl Peraco (Platymiscium pinnatum Jacq Dugand), es un árbol de uso en la industria maderable por su resistencia al ataque de plagas y microorganismos, en esta investigación se identifican metabolitos posiblemente responsables de esta característica, como son escoparona perteneciente a las cumarinas, eudesmato de metilo perteneciente a los terpenos, homopterocarpin y medicarpin pterocarpanos derivados de las isoflavonas. Además, se realizan bioensayos donde se demuestra la actividad antifúngica del extracto etanólico de duramen de P. pinnatum contra Fusarium spp. Lo cual indica un posible aprovechamiento de los metabolitos secundarios revelados en el extracto de peraco en el control de ataques fúngicos en el sector agrícola.Introducción 1 1. El problema 2 1.1. Titulo 2 1.2. Planteamiento del Problema 2 1.3. Formulación del Problema 4 1.4. Justificación 4 1.5. Objetivos 6 1.5.1. Objetivo General 6 1.5.2. Objetivos Específicos 6 2. Marco de referencia 7 2.1. Antecedentes 7 2.2. Marco Teórico 7 2.2.1. Clasificación taxonómica de Platymiscium pinnatum (Jacq) Dugand 7 2.2.2. Metabolitos secundarios en la familia fabáceas 10 2.2.3. Métodos para obtención de extractos vegetales 10 2.2.3.1. Maceración 11 2.2.4. Concentración de extracto de presión reducida 11 2.2.5. Reconocimiento de metabolitos secundarios 12 2.2.5.1. Terpenoides 13 2.2.5.2. Compuestos fenólicos y sus derivados. 14 2.2.5.3. Compuestos nitrogenados o alcaloides 15 2.2.6. Antecedentes cromatógrafos 15 2.2.6.1. Cromatografía de capa fina (TLC). 16 2.2.6.2. Cromatografía de gases acoplado a masas (Cg-Ms). 18 2.2.7. Fusarium Sp 19 2.2.7.1. Especies de Fusarium sp. 20 2.2.7.2. Mecanismos de infección. 21 2.3.Marco legal 23 3. Diseño Metodológico 25 3.1. Localización y materiales 25 3.1.1. Localización 25 3.1.2. Materiales 25 3.2. Metodología 26 3.2.1. Tipo de investigación 26 3.2.2. Diseño experimental. 26 3.2.3. Análisis estadístico. 26 3.2.4. Metodología experimental 27 3.2.4.1. Obtención del extracto 27 3.2.4.2. Marcha fitoquímica 29 3.2.4.3. Separación de metabolitos por capa fina 30 3.2.4.4. Identificación de metabolitos secundarios por cromatografía de gases acoplada a masas Gc-Ms. 30 3.2.4.5. Preparación de las cepas de Fusarium Sp. 31 3.2.4.6. Preparación de las concentraciones del extracto. 31 3.2.4.7. 4. Resultados y discusiones Siembra y evaluación antifúngica del extracto. 4.1.Obtención de extracto vegetal 4.2. Caracterización fitoquímica 4.3.Cromatografía de Gases acoplado a masas (GC-MS) 4.4. Bioactividad del extracto de Platymiscium pinnatum contra Fusarium sp. 5. Conclusiones Lista de referencia ANEXOSPregradoIngeniero(a) Químico(a
Uso de plantas medicinales en la población adulto mayor para el tratamiento de diferentes patologías del barrio Cúcuta 75 de Cúcuta durante el segundo semestre de 2022
No full textEn este proyecto se determinó el uso de plantas medicinales en la población adulto mayor para el tratamiento de diferentes patologías del barrio Cúcuta 75 de Cúcuta durante el segundo semestre de 2022. La investigación de planteo de tipo cuantitativo, transversal y descriptivo para dar respuesta a la formulación del problema se utilizó la herramienta la encuesta, ya que es un método fácil de analizar y recolectar la información de los datos. De la información recolectada en las encuestas se pudo evidenciar que la población adulta utiliza las plantas medicinales para diferentes enfermedades o dolencias como gripe, diarrea, congestión, colesterol, alergias y fiebre, las cuales las plantas más utilizadas fueron la manzanilla, limonaria, menta, eucalipto, jengibre, sábila, paico, ajo, yerba buena y caléndula. Y finalmente se orientó a los adultos a darles un buen uso de las plantas medicinales y no automedicarse, puesto que las plantas, al igual que los medicamentos, al no utilizarse correctamente, puede ocasionar efectos no deseados en las personas.INTRODUCCIÓN 1. 2. PROBLEMA 1.1 Título 1.2 Descripción del problema 1.3 Formulación del problema 1.4 Objetivos 1.4.1 Objetivo general. 1.4.2 Objetivos específicos. 1.5 Justificación MARCO DE REFERENCIAS 2.1 Antecedentes 2.1.1 Internacionales. 2.1.2 Nacionales. 2.1.3 Regionales. 2.2 Marco conceptual 2.3 Marco teórico 2.3.1 Evolución, farmacognosia y plantas medicinales más usadas. 2.3.2 2.3.3 2.3.4 Principio activo y toxicidad en las plantas medicinales. Manera de recolectar, secar y guardar las plantas medicinales. Plantas medicinales aprobadas con finalidades terapéuticas 2.4 Marco contextual 2.5 Marco legal 10 12 12 12 13 14 14 14 14 15 15 15 17 20 21 25 25 27 30 32 33 34 3. DISEÑO METODOLÓGICO 37 3.1 Tipo de investigación 37 3.2 Enfoque de la investigación 3.3 Población y muestra 3.3.1 Población 3.3.2 Muestra 3.4 Operacionalización de variables y plan de análisis 3.5 Técnicas de recolección. 3.6 Aspectos éticos 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1 Datos generales sociodemográficos 4.2 Razones que conllevan al uso de las plantas medicinales RECOMENDACIONES REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANEXOS 37 37 37 38 38 42 43 43 44 46 55 57 63Archivo Medios ElectrónicosPregradoTecnólogo(a) en Regencia de Farmaci
Evaluación del uso de fibra de coco fina reutilizada en plantas madre de clavel estándar (dianthus caryophyllus l) en Madrid, Cundinamarca
No full textEste proyecto esta basado en la evaluación del uso de fibra de coco fina reutilizada en plantas madre de clavel estándar (Dianthus Caryophyllus l) en el municipio de Madrid, Cundinamarca. Para ello, se realizó una investigación tipo experimental con un diseño metodológico mixto (cuantitativa y cualitativa). La información se obtuvo mediante experimentos de campo de acuerdo a la calidad del producto. La población y muestra corresponde a los 2 bancos a estudiar, cada uno con 100 plantas madre de clavel estándar, con 17 repeticiones, la muestra se tomó aleatoriamente. Se logró, evaluar el uso de fibra de coco reutilizada en plantas madre de clavel estándar. Posteriormente, se analizó el efecto del sustrato de fibra de coco fina reutilizada en plantas madre de clavel estándar. Finalmente, se comparó económicamente cual sustrato tiene mayor rentabilidad.Introducción 16
1. Problema 17
1.1 Titulo 17
1.2 Planteamiento del Problema 17
1.3 Formulación del Problema 17
1.4 Justificación 18
1.5 Objetivos 19
1.5.1 Objetivo general 19
1.5.2 Objetivos específicos 19
1.6 Delimitación 19
1.6.1 Espacial 19
1.6.2 Temporal 20
2. Marco Referencial 21
2.1 Antecedentes 21
2.2 Marco Teórico 23
2.2.1 Cultivo de clavel en Colombia 23
2.3 Marco Legal 25
2.3.1 Marco normativo ambiental adoptado por Colombia 26
2.3.2 Leyes 27
2.4 Marco Contextual 27
3. Diseño Metodológico 30
3.1 Tipo de Investigación 30
3.2 Población y Muestra 30
3.3 Materiales y Métodos 30
3.3.1 Características de los sustratos 30
3.4 Etapas 32
3.4.1 Etapa 1. Manejo de sustratos en la empresa 32
3.4.1.1 Recepción de cascarilla 32
3.4.1.2 Almacenamiento cascarilla 32
3.4.1.3 Llenado de cajón 33
3.4.1.4 Picado de cascarilla 34
3.4.1.5 Tolva de alimentación 34
3.4.1.6 Elevador de cangilones 35
3.4.1.7 Tornillo sin fin 36
3.4.1.8 Esparcimiento de cascarilla 36
3.4.1.9 Mezcla de sustratos 37
3.4.1.10 Colocar plástico y carpa 38
3.4.1.11 Mezcla de producto 39
3.4.1.12 Encendido de caldera 40
3.4.1.13 Apertura de válvulas 41
3.4.1.14 Niveles de presión 42
3.4.1.15 Retiro de carpa y plástico 43
3.4.1.16 Revisión de temperatura 44
3.4.1.17 Empaque de cascarilla reutilizada 45
3.4.1.18 Almacenamiento cascarilla esterilizada 46
3.4.1.19 Cargue de volqueta 47
3.4.1.20 Descargue y ubicación de lonas cultivo 48
3.4.2 Etapa 2 49
3.4.2.1 Selección de esquejes 49
3.4.2.2 Llegada de esquejes de planta madre 49
3.4.3 Etapa 3 50
3.4.3.1 Aplicación de Cal 50
3.4.3.2 Alistamiento de bancos 51
3.4.4 Etapa 4 52
3.4.4.1 Llenado de bancos con cascarilla cruda 52
3.4.4.2 Llenado con los sustratos 53
3.4.4.3 Preparación de los sustratos 54
3.4.4.4 Aplicación de yeso agrícola 55
3.4.5 Etapa 5. Diseño del sistema de riego 56
3.4.5.1 Sistema de riego 56
3.4.5.2 Instalación cintas de riego 57
3.4.5.3 Instalación de drenajes 58
3.4.6 Etapa 6 59
3.4.6.1 Siembra de plantas madre 59
3.4.6.2 Marcación 60
3.4.6.3 Realización del Pinch (despunte) 61
3.4.7 Etapa 7 62
3.4.7.1 Selección de unidades muestréales 62
3.4.8 Etapa 8 63
3.4.8.1 Bases de datos 63
3.4.9 Etapa 9 63
3.4.9.1 Seguimientos fenológicos 63
4. Resultados y Análisis Parciales 65
4.1 Seguimiento de Volumen de Agua 65
4.2 Seguimiento de Drenajes 66
4.3 Seguimiento de Parámetros Ambientales 67
4.4 Seguimiento de Análisis de Agua pH y C.E 68
4.5 Datos de Curvas Fenológicas 72
4.6 Clasificación de Esquejes 74
4.6.1 Flash 1 75
4.6.1.1 Esquejes clasificación A 76
4.6.1.2 Esquejes clasificación B 76
4.6.2 Total de esquejes cosechados 77
4.7 Análisis de Costos de Fertilización 77
4.8 Análisis de Costos de Alistamiento de Bancos 78
5. Conclusiones 80
6. Recomendaciones 82
Referencias Bibliográficas 83
Anexos 86PregradoIngeniero(a) Agrónomo(a
Evaluación del efecto de nanopartículas de plata (AgNPs) como agente antiviral contra el virus de la mancha anular (PRSV) en plantas de papaya
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Las enfermedades en plantas constituyen uno de las mayores limitantes para la producción agricola. Ei virus de la mancha anular de la papaya (PRSV) con amplia presencia en ei departamento de Norte de Santander, es un miembro del género Potyvirus transmitido por pulgones, es la causa de una enfermedad destructiva y un factor limitante importante para el cultivo de papaya y cucurbitáceas en todo el mundo. En la actualidad no existen tratamientos eficaces para esta enfermedad, por lo que deben desarrollarse nuevos metodos para su control. En este sentido es necesario la exploración y desarrollo de nuevas alternativas que limiten el desarrollo de la virosis. Por consiguiente, en esta propuesta de investigación buscamos evaluar la eficiencia de las nanopartículas de plata AgNPs en la supresión o control del virus en plantas de papaya tratadas con diferentes concentraciones aplicadas a la planta 24 horas antes de la inoculación y evaluar cuál de las concentraciones ensayadas presenta mejor efecto sobre el desarrollo de la enfermedad. Lo anterior se realizara mediante el empleo de diferentes tecnicas moleculares y/o bioquímicas como RT-PCR, Elisa y ensayos de expresión enzimática. Así mismo se realizarán observación con microscopia electrónica de transmisión (TEM) para ver lo que sucede con las nanopartículas de plata y las partículas virales. Con lo anterior se espera obtener resultadas a partir de los cuales se puedan proponer y desarrollar nuevos métodos de control de PRSV en plantas de papaya.Fondo de Investigaciones Universitarias - FINU - UFPS.Mediante la resolución 125 de 24 de mayo de 2011 se reglamenta los criterios y procedimientos para la financiación de los proyectos de investigación a través del Fondo de Investigaciones Universitarias - FINU - UFPS.4.6.1. Material vegetal.
La siembra de semilla de Carica papaya de la variedad maradol se realizará directamente en
bolsas de polietileno de 20 x14 cm, calibre 1 bajo condiciones controladas en cámara de
crecimiento a 25°C. 30-45 días después de la siembra las plántulas de tamaño uniforme se
seleccionarán para el experimento.
4.6.2. Fuente del inoculo viral.
La fuente del inoculo viral se hará a partir de plantas colectadas en campo abierto en el municipio de Villa del Rosario o Cúcuta que presenten lo síntomas aparentes de PRSV. Las muestras de
hojas se analizarán inicialmente empleando un ensayo inmunoenzimático de doble anticuerpo
(DAS-ELISA) con anticuerpos específicos de PRSV. Las muestras positivas que reacciones con
los anticuerpos se emplearán como inoculo viral.
4.6.3. Identificación molecular de PRSV.
El ARN total se aislará a partir de 50 mg de hoja de papaya sintomática y verificada por DAS-
ELISA empleando el reactivo TRIzolTM de Invitrogen siguiendo las indicaciones del fabricante. La
transcripción reversa se hará con la enzima transcriptasa reversa de BioLabs New England
empleando el primer específico para la región CP con secuencia 5’-
TTTTTTTTCTCTCATTCTAAGAGGCTCG ́. El ADN complementario se amplificará con los oligos
directo 5’-GTCATGGGGATATGGGGAGTTAACACA-3’ y reverso
5’-TTTTTTTTCTCTCATTCTAAGAGGCTCG-3’. en un volumen de reacción de 25 uL siguiendo el
procedimiento previamente reportado (Chaves-Bedoya and Ortiz-Rojas 2015).El producto de PCR
obtenido se correrá en un gel de agarosa al 1.5% con buffer TAE a 45 minutos y 80V, teñido con
GelRed (Biotum). La banda de ADN será visualizada bajo luz ultravioleta (UV) a una longitud de
onda de 254nm y fotografiada empleando un sistema UVP DigiDoc-It
4.6.4. Tratamiento foliar con AgNPs
Las nanopartículas de plata se sintetizarán de acuerdo a (Padilla-Sierra et al., 2021). Las
plántulas de papaya en una cámara de crecimiento en un ambiente a prueba de insectos serán
tratadas con las AgNPs a concentraciones de 50, 60, 150 y 250 ppm. La aplicación foliar se hará
en esquema de protección 24 horas antes de la inoculación viral. Cada planta será rociada hasta
escorrentía.
4.6.5. Evaluación de la enfermedad
La severidad de la enfermedad será evaluada tres semanas después empleando una escala
numérica de la siguiente manera: 0= para plantas sin síntomas, 1= para plantas con síntomas
leves de mosaico 2= para síntomas intermedios del mosaico y poca deformación de la hoja y 3=
para aquellos que presentan síntomas de mosaico
severos, deformaciones intensas de las hojas y desarrollo reducido.(Sansini and Marques 2008).
La severidad de la enfermedad (SE) se estimará de acuerdo a la siguiente fórmula (Yang et al.,
1996).
(SE)= ∑ (grado de enfermedad x número de plantas en ese grado) x 100
número total de plantas x grado de enfermedad más alto
4.6.6. Detección de PRSV por ELISA (Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas con
doble anticuerpo en sándwich)
Las hojas nuevas que emerjan 30 días post inoculación se analizaran para PRSV empleando el
método DAS-ELISA. Cuatro hojas de cada concentración de AgNPs y control sin tratamiento
serán analizadas. La reacción de color se leerá a 405 nm en una microplaca. Las muestras que
presenten valores de absorbancia al menos dos veces mayor que el control sin inocular se
consideraran positivas. El porcentaje de inhibición de la replicación viral en plantas tratadas con
las AgNPs se calculará con base en las diferencias colorimétricas comparadas con las plantas de
control no tratadas. El índice de inhibición viral se medirá de acuerdo a la siguiente formula (El
Gamal et al., 2022):
Índice de inhibición viral (%) = C-T x 100
C
Donde C es el promedio de A405 en plantas de control no tratadas y T es el valor medio de A405 para cada grupo de tratamiento con AgNPs. La preparación de las muestras se hará según lo
reportado (El Gamal et al., 2022) y se enviaran a analizar al laboratorio de microscopia
electrónica de transmisión de la UNAL, en Bogotá.
4.6.7. Ensayos de actividad enzimática
La actividad de la peroxidasa oxidasa y polifenol oxidasa se realizara de acuerdo a la metodología
descrita (Kar and Mishra 1976) a diferentes (0, 24, 48, 72, 96, 120, y 144 h) después de rociar las
plantas con AgNPs. La actividad peroxidasa se estimará midiendo la oxidación de pirogalol a
pirogalina en presencia de peróxido de hidrogeno a 425 nm. La medición se hará por triplicado.
4.6.8. Microscopia electrónica de transmisión
La actividad de las AgNPs en las partículas virales se hará comparando las plantas tratadas a
concentración de 200 ppm de AgNPs con el control. El análisis microscópico se contratará con el
laboratorio TEM de la Universidad de Antioquia.
4.6.9. Diseño experimental
La aplicación de los tratamientos se hará bajo dos condiciones, 1) sin inoculación del virus y 2)
con inoculación del virus (PRSV) en plántulas de papaya de 30-45 días. En total son 6
tratamientos. Cada tratamiento consistirá de 5 repeticiones para un total de 30 plántulas. El
diseño será en bloques completamente al azar.
4.6.10. Análisis estadístico
Los datos del diseño de bloques completamente al azar serán analizados mediante análisis de
varianza (ANOVA) con valor de significancia de p=0.05, empleando el software SAS.Biología molecular/virología vegeta
- …
