1,721,005 research outputs found
Role of serine proteases in Na+ and K+ handling in the kidney
No full textAbstract
Hypertension affects nearly a billion people worldwide, and it is influenced by both genetic and environmental factors. A high Na+ and low K+ diet, high saturated and low unsaturated fats, physical inactivity, heavy alcohol and tobacco use, and obesity are all known risk factors for hypertension. There is evidence that genetic factors play a role in the anti-hypertensive effect of dietary K+ intake. Our goal was to investigate and characterize the genetic factors that influence blood pressure in response to K+ intake. Epithelial Na+ channel (ENaC) plays a vital role in Na+ reabsorption along the distal nephron and drive K+ secretion via an electrochemical gradient, thereby maintaining extracellular·fluid volume and blood pressure. NR3Cl, GRXCRI, HPN, ATP12A, CAPI, CAP2, CAP3, !MPRSS3, and
TMPRSS9 were discovered to be associated with K+ sensitivity in human subjects using unbiased and targeted-gene approaches. GWAS (unbiased approach) revealed two genes, TMPRSS3 and TMPRSS9, to be strongly associated with K+ sensitivity in serum samples from female subjects. We used wild-type mice (C57BL/6N) supplemented with standard or challenged Na+ and K+ diet compositions, which revealed differences in candidate gene mRNA transcript regulation between male and female mice or on a K+ diet. Tmprss3 was further investigated in Xenopus oocytes, where it produced an ENaC-mediated Na+ current in contrast to their catalytically inactive mutants. Similarly, we studied the role of Tmprss3 in ENaC activation in the kidney, using Tmprss3-I- mice housed in a metabolic cage and fed a standard, high K+ or low Na+ diet. Our findings show that under low Na+ diets, cleavage of the a- and yENaC subunits occurs, plasma aldosterone levels remain unchanged, and i.p. administration of benzamil has no effect on fractional Na+ excretion in Tmprss3-1-· mice compared to Tmprss3+/+ mice. Furthermore, Tmprss3 mRNA was only found in a few puncta during an RNAscope analysis of the wild-type mouse kidney subjected to an 8% high Na+ diet. Collectively, our results suggest that Tmprss3 can activate ENaC in vitro and Tmprss3 does not play arole in ENaC regulation in the kidney under physiological conditions.
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L'hypertension artérielle touche près d'un milliard de personnes dans le monde et est influencée par des facteurs génétiques et environnementaux. Un régime alimentaire riche en Na+ et pauvre en K+, des graisses saturées et peu insaturées, l'inactivité physique, une consommation importante d'alcool et de tabac, et l'obésité sont autant de facteurs de risque connus d'hypertension. Il existe des preuves que les facteurs génétiques jouent un rôle dans l'effet antihypertenseur de l'apport alimentaire en K+. Notre objectif était d'étudier et de caractériser les facteurs génétiques qui influencent la pression artérielle en réponse à l'apport de K+. Le canal Na+ épithélial (ENaC) joue un rôle vital dans la réabsorption du Na+ le long du néphron distal et entraîne la sécrétion de K+ via un gradient électrochimique, maintenant ainsi le volume de liquide extracellulaire et la pression artérielle. On a découvert que NR3Cl, GRXCRl, HPN, ATP12A, CAPl, CAP2, CAP3, TMPRSS3 et TMPRSS9 étaient associés à la sensibilité au K+ chez les sujets humains en utilisant des approches génétiques non biaisées et ciblées. L'étude d'association pangénomique (approche non biaisée) a révélé que deux gènes, TMPRSS3 et TMPRSS9, étaient fortement associés à la sensibilité au K+ dans les échantillons de sérum de sujets féminins. Nous avons utilisé des souris de type sauvage (C57BL/6N) soumises à un régime alimentaire standard ou contesté à base de Na+ et de K+, ce qui a révélé des différences dans la régulation des transcriptions des gènes candidats entre les souris mâles et femelles ou sous régime K+. La protéine Tmprss3 a été étudiée plus avant dans des ovocytes de Xenopus, où elle a produit un courant Na+ médié par ENaC, contrairement à ses mutants catalytiquement inactifs. De même, nous avons étudié le rôle de Tmprss3 dans l'activation des ENaC dans le rein, en utilisant des souris Tmprss3-/- logées dans une cage métabolique et nourries avec un régime standard, à forte teneur en K+ ou à faible teneur en Na+. Nos résultats montrent que sous un régime à faible teneur en Na+, le clivage des sous-unités - et ENaC se produit, les niveaux d'aldostérone plasmatique restent inchangés, et l'administration i.p. de Benzamil n'a aucun effet sur l'excrétion fractionnelle de Na+ chez les souris Tmprss3-/- par rapport aux souris Tmprss3+/+. De plus, l'ARNm Tmprss3 n'a été trouvé que dans quelques ponctuations lors d'une analyse par ARNscope du rein de souris de type sauvage soumises à un régime à 8% de Na+ élevé. Collectivement, nos résultats suggèrent que Tmprss3 peut activer l'ENaC in vitro et que Tmprss3 ne joue pas de rôle dans la régulation de l'ENaC dans le rein dans des conditions physiologiques
Role of channel activating proteases in renal Na+ and K+ handling
No full textThe epithelium sodium channel (ENaC) is responsible for the final Na+ reabsorption in the kidney tubules. This channel can be activated by several mechanisms such as hormones, ion concentration, phospholipids, and proteases. The activation of ENaC by proteases is well characterized in vitro. Using Xenopus oocytes, it has been shown that the channel-activating protease 1 and 3 (CAP1/Prss8 and CAP3/St14) were able to activate ENaC. However, in vivo this activation has not yet been studied in the kidney. Furthermore, CAP1/Prss8 is known to have other targets like the protease receptor 2 (PAR2) in the skin. While this receptor is known to be implicated in renal K+ handling, no studies have been made on its activation in the kidney. We were thus also interested to see if CAP1/Prss8 was an activator of PAR2 in the kidney.
By using RNAscope analysis, we were first able to co-localize CAP1/Prss8 and CAP3/St14 in the same tubules with ENaC. Then, by using genetically engineered mouse models, we investigated the role of CAP1/Prss8 and CAP3/St14 in proteolytic ENaC activation and Na+/K+ homeostasis. Under low salt diet, CAP1/Prss8 tubule-specific knockout mice were able to maintain proteolytic ENaC activation through an aldosterone independent pathway, whereas CAP3/St14 tubule-specific knockout mice maintained Na+ and K+ homeostasis, but showed an altered protein expression of ENaC subunits. Surprisingly, CAP1/Prss8-CAP3/St14 tubule- specific double knockout mice rescued these phenotypes, showed no difference in ENaC protein expression, and were able to increase plasma aldosterone concentrations as in control mice. Finally, PAR2 tubule-specific knockout mice were able to maintain Na+ and K+ homeostasis and were able to increase plasma aldosterone concentration under low salt diet.
Overall, in the present study we have shown that in vivo CAP1/Prss8 and CAP3/St14 were not involved in direct ENaC proteolysis as previously described in Xenopus oocytes. Under low salt diet, CAP1/Prss8 deficiency uncoupled ENaC activation from the classical aldosterone pathway, while CAP3/St14 appears to be involved in ENaC protein synthesis. Finally, PAR2 deletion does not affect Na+ and K+ balance under low salt diet.
From a more clinical point of view, our findings could be relevant for hypertensive patients. Some patients develop hypertension with low levels of aldosterone. It would be interesting to see if some of these patients could have polymorphisms of CAP1/Prss8 and if the uncoupling of ENaC activation from aldosterone could lead to hypertension.
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Le canal sodique épithélial (ENaC) est responsable de la réabsorption finale du Na+ dans les tubules rénaux. De nombreuse voies telles que des variations de pH, les hormones ou encore les protéases peuvent activer ce canal. L’activation in vitro d’ENaC par les protéases est bien documentée. Dans le modèle d’ovocyte de xénopes, il a été montré qu’ENaC peut être activé par des protéases dites activatrices de canaux (CAP1/Prss8 et CAP3/St14). Cependant, cette activation n’a pas encore été étudiée in vivo dans le rein. De plus, CAP1/Prss8 est connu pour avoir d’autres cibles d’activation dans d’autres tissues, comme le récepteur à protéase 2 (PAR2) dans la peau. Malgré le fait que ce récepteur soit impliqué dans l’homéostasie rénale du K+, aucune étude n’a été faite sur son activation dans le rein. Nous avons donc également cherché à savoir si CAP1/Prss8 était un activateur de PAR2 dans cet organe.
Dans un premier temps, en utilisant l’analyse par RNAscope, nous avons localisé CAP1/Prss8 et CAP3&St14 dans les mêmes tubules que ENaC. Dans un second temps, en utilisant des modèles de souris génétiquement modifiées, nous avons étudié le rôle de CAP1/Prss8 et CAP3/St14 dans l'activation protéolytique d’ENaC ainsi que leur implication dans la réabsorption de Na+ et K+. Dans le cadre d'un régime faiblement salé, les souris déficientes pour CAP1/Prss8 spécifiquement dans les tubules ont été capables de maintenir l'activation protéolytique des sous unités d’ENaC par une voie indépendante de l'aldostérone. A l’inverse, les souris déficientes pour CAP3/St14 spécifiquement dans les tubules ont maintenu l'homéostasie du Na+ et du K+ tout en montrant une expression protéique altérée des sous-unités ENaC. Étonnamment, les souris doublement déficientes pour CAP1/Prss8 et CAP3/St14 ont compensé ces phénotypes, en ne montrant aucune différence dans l'expression d’ENaC au niveau protéique et ont été capables, tout comme les souris contrôles, d'augmenter les concentrations plasmatiques d'aldostérone. Finalement, les souris knockout PAR2 spécifiques des tubules ont été capables de maintenir l'homéostasie du Na+ et du K+ et d'augmenter la concentration plasmatique d'aldostérone sous un régime pauvre en sel.
En conclusion, dans la présente étude, nous avons montré que in vivo CAP1/Prss8 et CAP3/St14 n'étaient pas impliqués dans la protéolyse directe d’ENaC, comme précédemment décrit dans les ovocytes de xénopes. Sous régime faiblement salé, le knockout de CAP1/Prss8 découple l'activation d’ENaC de l’aldostérone, alors que CAP3/St14 semble être impliqué dans la synthèse protéique d’ENaC. Finalement, la délétion de PAR2 dans le rein n’affecte pas l’homéostasie du Na+ et K+ sous une diète faiblement salée. D'un point de vue plus clinique, nos résultats pourraient être pertinents dans le traitement des patients développant des signes d’hypertension avec de faibles niveaux d'aldostérone. Il serait intéressant de voir si certains de ces patients pourraient présenter des polymorphismes de CAP1/Prss8 entrainant l’activation d’ENaC par découplage de l’aldostérone
Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis
Get PDFThe present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation
counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings
are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that
only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into
account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed
Variations on the Author
Get PDF“Variations on the Author” discusses two of Eduardo Coutinho’s recent films (Um Dia na Vida, from 2010, and Últimas Conversas, posthumously released in 2015) and their contribution to the general question of documentary authorship. The director’s filmography is characterized by a consistent yet self-effacing form of authorial self-inscription: Coutinho often features as an interviewer that rather than express opinions propels discourses; an interviewer that is good at listening. This mode of self-inscription characterizes him as an author who is not expressive but who is nonetheless markedly present on the screen. In Um Dia na Vida, however, Coutinho is completely absent form the image, while Últimas Conversas, on the contrary, includes a confessional prologue that moves the director from the margins to the center of his films. This article examines the ways in which these works stand out in the filmography of a director who offers new insights into the notion of cinematic authorship
Appropriate Similarity Measures for Author Cocitation Analysis
Get PDFWe provide a number of new insights into the methodological discussion about author cocitation analysis. We first argue that the use of the Pearson correlation for measuring the similarity between authors’ cocitation profiles is not very satisfactory. We then discuss what kind of similarity measures may be used as an alternative to the Pearson correlation. We consider three similarity measures in particular. One is the well-known cosine. The other two similarity measures have not been used before in the bibliometric literature. Finally, we show by means of an example that our findings have a high practical relevance.information science;Pearson correlation;cosine;similarity measure;author cocitation analysis
Dispelling the Myths Behind First-author Citation Counts
Get PDFWe conducted a full-scale evaluative citation analysis study of scholars in the XML research field to explore just how different from each other author rankings resulting from different citation counting methods actually are, and to demonstrate the capability of emerging data and tools on the Web in supporting more realistic citation counting methods. Our results contest some common arguments for the continued
use of first-author citation counts in the evaluation of scholars, such as high correlations between author rankings by first-author citation counts and other citation
counting methods, and high costs of using more realistic citation counting methods that are not well-supported by the ISI databases. It is argued that increasingly available digital full text research papers make it possible for citation analysis studies to go beyond what the ISI databases have directly supported and to employ more
sophisticated methods
koamabayili/VECTRON-author-checklist: VECTRON author checklist
No full textWe have done our best to complete the author checklist relating to the use of animals in the hut study. Note that the objective for the hut study was to evaluate the IRS treatment applications for residual efficacy against Anopheles mosquitoes, including the local An. coluzzii mosquito population. Cows were only used to attract mosquitoes into the huts and no tests were carried out directly on the cows. The author checklist is intended for use with studies where experiments are carried out on animals, which is why we have had such difficulty in completing this for the hut study, as many of the questions do not relate to how the cows were used
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