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STUDIO DELLE INTERAZIONI TRA VIRUS INFLUENZA E CELLULA OSPITE IN CORSO DI INFEZIONE SPERIMENTALE CON LO STIPITE UMANO A/WSN/33: POSSIBILE RUOLO DEL SISTEMA CITOSCHELETRICO DEI MICROFILAMENTI NELLA DETERMINAZIONE DI UNA CONDIZIONE DI RESISTENZA CELLULARE ALL’INFEZIONE VIRALE
No full textIl modello sperimentale prescelto nel quadro di questa tesi è costituito dal ceppo ATCC dello stipite umano di virus influenza A/WSN/33 lo studio del cui ciclo replicativo è stato effettuato in due diverse linee cellulari di mammifero, rappresentate da cellule simil-epiteliali di rene di scimmia (LLC-MK2) e cellule simil-epiteliali di rene di cane (MDCK).
I risultati ottenuti hanno evidenziato che, in condizioni di infezione sperimentale a bassa molteplicità, il modello LLC-MK2 costituisce per il virus WSN un sistema cellulare di tipo semi-permissivo, mentre le cellule MDCK consentono l’espletamento di un’infezione virale produttiva.
Nell’ambito delle strutture cellulari che potrebbero intervenire nell’instaurare un così diversificato comportamento delle due linee cellulari nei confronti dell’infezione con lo stipite WSN/33, l’attenzione è stata principalmente rivolta alla possibile implicazione del citoscheletro, in particolar modo del sistema dei microfilamenti di actina.
I dati ottenuti mediante studio in microscopia confocale hanno consentito di evidenziare differenze rilevanti nell’organizzazione del sistema dei microfilamenti nelle due suddette linee cellulari, che si ripercuotono, verosimilmente, sulle diverse interazioni con lo stipite virale utilizzato.
Il forte grado di colocalizzazione esistente tra nucleoproteina virale (e/o altre componenti del virus) ed actina a diversi tempi dall’inizio dell’infezione sperimentale in cellule LLC-MK2 (e la pressoché totale assenza in cellule MDCK) può essere considerato quale indice di un’importante interazione di natura molecolare tra le due proteine, in grado di resistere, peraltro, all’espressione di una condizione altamente dinamica, quale il processo di depolimerizzazione dell’actina, indotto dal trattamento con citocalasina D.
La modificazione di assetto del sistema citoscheletrico di actina di cellule LLC-MK2 in corso di infezione con virus WSN, porta ad un completo ripristino dell’efficienza di moltiplicazione virale e depone per un contributo dei microfilamenti nell’instaurare una condizione di resistenza virale all’infezione
Prosomes (MCP-Proteasomes) and their relation to the messenger-RNP, the cytoskeleton and cell differentiation in normal and pathological cells
No full textEvaluation of the assay for hepatitis B virus (HBV) surface antigen quantification in the laboratory diagnosis of HBV infection
No full textEVALUATION OF THE ASSAY FOR HEPATITIS B VIRUS (HBV) SURFACE ANTIGEN QUANTIFICATION IN THE LABORATORY DIAGNOSIS OF HBV INFECTION
De Conto Flora, Fazzi Alessandra, Medici Maria Cristina, Arcangeletti Maria Cristina, Pinardi Federica, Ferraglia Francesca, Chezzi Carlo, Calderaro Adriana
Unit of Microbiology and Virology, Department of Clinical and Experimental Medicine, University of Parma, Parma, Italy
Background: Hepatitis B virus infection is a global public health problem, affecting around 2 billion people worldwide. HBV infection is a leading cause of chronic hepatitis, liver cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. The quantitative measurement of hepatitis B surface antigen (HBsAg) monitors the progress of chronic hepatitis B, and its rapid decline may be a predictor of the efficacy of antiviral therapy. Although the measurement of serum HBV DNA is the gold standard method for viral load evaluation, the assay is expensive and time consuming, while HBsAg quantification (qHBsAg) is rapid and cost-effective. The aim of this study is to compare the results of qHBsAg and HBV DNA determination, referred to subjects with chronic hepatitis B.
Material/methods: During the 2013-2015 period, 371 plasma or serum samples of subjects attending the University Hospital of Parma (Northern Italy) were subjected to qHBsAg, by means of the ARCHITECT HBsAg assay (Abbott, Wiesbaden, Germany), with a specificity and sensitivity of 99.87% and 99.52%, respectively, as reported by the manufacturer. Of these subjects, 333 (89,8%) were subjected to HBV DNA quantification, by means of the COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV version 2.0 assay (Roche, Mannheim, Germany).
Results: Of the 371 individuals analysed, 224 (60.4%) were males (median age of 53 ± 15.3 years) and 147 (39.6%) females (median age of 52 ± 15.3 years); 235 (63.3%) were Italians and 136 (36.7%) foreigners. The subjects aged ≥61 years (30.7%) prevailed, and 359 (96.8%) were positive for qHBsAg. The comparison of the mean HBsAg level of the 359 positive subjects with those of different derived subpopulations evidenced higher HBsAg levels for HBeAg-positive subjects (3.1%; P<0.0001), subjects infected with genotype D of HBV (3.6%), and females (39%). Conversely, males (61%) and human immunodeficiency virus type 1 (HIV 1) co-infected subjects (3.6%) showed lower HBsAg levels. Moreover, HBsAg levels decreased with age, with significant differences for subjects aged ≤30 (P<0.0001) and ≥51 (P<0.05) years. The accordance among the results of qHBsAg and HBV DNA determination was of 69.7% (232/333 samples) and the qHBsAg assay sensitivity of 99.6% (227/228 samples).
Conclusion: This study assesses that many factors may influence HBsAg levels, such as sex, age, HIV co-infection, HBeAg status, and HBV genotype. Although the sensitivity of qHBsAg assay is high, the discrete accordance with HBV DNA determination envisages that HBsAg measurement cannot be a reliable substitute, but a complementary assay, which allows better chronic HBV infection monitoring
In the nucleus and cytoplasm of chicken erythroleukemic cells prosomes containing the p23K subunit are found in centers of globin (pre-)mRNA processing and accumulation
No full textAnalytical evaluation and suitability of a new quantitative assay for hepatitis C core antigen
No full textStudio comparativo dell'internalizzazione di uno stipite umano di virus influenza A (NWS/33) in due modelli cellulari di mammifero in vitro
No full textInsediamento nucleolare di citomegalovirus umano in relazione al ciclo cellulare ed alla regolazione dell’espressione genica virale in un modello sperimentale
No full textReorganisation of Cytoskeleton, Prosome (MCP - Proteasome) Networks, and Actin mRNA Distribution in Myogenesis, Using 'Instantaneans Fixation'
No full textProsomes (MCP-Proteasomes) of specific subunit composition are found on all types of cytoskeletal networks, the intermediate and the actin filaments as well as on microtubules, depending on the physiological state and the cell cycle
No full textRuolo del sistema citoscheletrico dei microtubuli nella modulazione del ciclo replicativo del virus influenza A/NWS/33 in modelli cellulari di rene di mammifero
No full text- …
