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    Infección en el tracto genital masculino por Chlamydia muridarum : importancia de la citosina antiinflamatoria IL10

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    Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2015Fil: Sánchez, Leonardo R. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Alovero, Fabiana Del Lujan. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Ciencias Farmacéuticas; Argentina.Fil: Alovero, Fabiana Del Lujan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina.Fil: Cuffini, Cecilia Gabriela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina.Fil: Gruppi, Adriana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Gruppi, Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Chirdo, Fernando. Universidad Nacional de La Plata; Argentina.Fil: Chirdo, Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatalógicos; Argentina.Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) es el agente bacteriano más prevalente entre las infecciones de transmisión sexual en todo el mundo. Al presente, se tiene amplio conocimiento sobre la inmunopatogénesis de la infección causada por C. trachomatis en el tracto genital femenino. No obstante, se conoce muy poco sobre la infección del tracto urogenital masculino (TUGM). En el presente trabajo de tesis se describió un modelo de infección del TUGM utilizando ratones de la cepa NOD y la bacteria Chlamydia muridarum (C. muridarum), una especie de Chlamydia que causa en ratones una enfermedad de características similares a la causada por C. trachomatis en humanos. Ratones machos de la cepa NOD inoculados en meato urinario con C. muridarum presentaron una infección ascendente, detectándose ADN bacteriano en varios tejidos del TUGM a tiempos tempranos pos-infección (pi), pero a tiempos tardíos pi solamente en próstata. Al realizar una comparación entre distintas cepas de ratones (NOD, C57BL/6 y BALB/c), se demostró que C. muridarum fue eliminada del tejido prostático más lentamente en la cepa NOD. Durante la infección se produjo un importante infiltrado inflamatorio en el TUGM, con presencia de mayores cantidades de leucocitos CD45+ infiltrando próstata de ratones NOD, cuando se comparó con los valores hallados en próstata de ratones C57BL/6. El infiltrado leucocitario estaba compuesto mayoritariamente por células GR1+ y, en menor medida, por células CD3+ y CD19+. Además, se determinaron incrementos en la expresión prostática de CXCL1, CXCL2 y CCL5, quimiocinas relacionadas al reclutamiento de leucocitos polimorfonucleares (PMN). El análisis de la respuesta inmune adaptativa desarrollada luego de la infección del TUGM por C. muridarum, demostró la presencia de anticuerpos IgG específicos contra antígenos de la bacteria en suero de los ratones infectados a lo largo de la cinética de la infección. En cuanto a la respuesta celular frente al patógeno, se observó una importante producción de IL10 en cultivos de células mononucleares (CMN) de bazo o de nódulos drenantes de próstata estimulados con C. muridarum. Esta producción de IL10 fue mayor durante los primeros días de la infección y también más elevada en sobrenadantes provenientes de ratones NOD, en comparación con lo observado para las cepas C57BL/6 y BALB/c. Mediante marcación de moléculas de superficie de linaje celular e intracelular de IL10 se concluyó que la población de células productoras de esta citocina fueron principalmente las CD19+, es decir los LB. Además, LB purificados mediante cell-sorting o perlas magnéticas fueron capaces de producir IL10 en respuesta al estímulo de C. muridarum, sin colaboración de otras poblaciones celulares. Utilizando ratones deficientes en TLR2 o TLR4 se determinó que la producción de IL10 en respuesta a C. muridarum era dependiente de la presencia de TLR4. En concordancia, la estimulación de LB con LPS de Chlamydia, indujo la producción de IL10 por LB purificados. Luego del estímulo con C. muridarum, los LB IL10+ presentaron un fenotipo regulatorio, con incrementos en la expresión de CD39, PD-L1 y además activación de STAT3 y la vía MAPK/ERK. Mediante purificación de sub-poblaciones de LB, demostramos que los LB de zona marginal, pero no LB foliculares, produjeron IL10 en respuesta a C. muridarum. Además, los LB estimulados secretaron importantes cantidades de IgM, lo que en conjunto sugiere que se trataría de LB del tipo innatos (LBI) con potencial función regulatoria. En experimentos realizados con ratones deficientes en IL10 o sometidos a tratamientos con anticuerpos bloqueantes de IL10, se demostró que la ausencia o disminución de esta citocina en tiempos tempranos pi se asoció con una mejor eliminación bacteriana. De la misma manera, en experimentos realizados con ratones μMT (deficientes en LB) o tratados con un anticuerpo que depleta LB, se observó que la ausencia o reducción de esta población celular se asoció también con una mejor eliminación bacteriana. En todos los casos en los que se vio una mejoría en la eliminación de C. muridarum del TUGM se evidenció incrementos en la respuesta Th1 específica, sugiriendo que la presencia tanto de IL10 como de LB atenúa la generación de una respuesta Th1 protectora. Los resultados obtenidos durante el desarrollo de esta tesis doctoral demuestran el importante rol de los LB regulatorios secretores de IL10 en el modelo de infección por Chlamydia y sugieren que la inducción de esta citocina, mediada por componentes de la bacteria, sería un mecanismo que la misma desarrolla para modular negativamente la respuesta inmune protectora del hospedador.Fil: Sánchez, Leonardo R. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Rivero, Virginia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Alovero, Fabiana Del Lujan. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Ciencias Farmacéuticas; Argentina.Fil: Alovero, Fabiana Del Lujan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina.Fil: Cuffini, Cecilia Gabriela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina.Fil: Gruppi, Adriana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Gruppi, Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Chirdo, Fernando. Universidad Nacional de La Plata; Argentina.Fil: Chirdo, Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatalógicos; Argentina

    Proteínas de los cereales: Peptidos inmunoestimuladores y tóxicos

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    Las proteínas de almacenamiento de los granos de trigo son la base de una amplia variedad de productos alimenticios de elaboración casera e industrial. No obstante, esas proteínas son tóxicas para un grupo de individuos (pacientes con enfermedad celíaca EC). Las gliadinas y las gluteninas presentes en trigo, así como sus equivalentes en la cebada y el centeno, (también llamadas prolaminas), están evolutivamente relacionadas y presentan un elevado grado de homología. El resultante del amasado de estas proteínas, en presencia de agua, genera una masa viscoelástica que se denomina gluten. Los anticuerpos policlonales y monoclonales específicos de las prolaminas han sido una herramienta muy útil para caracterizar las propiedades estructurales y conformacionales de las prolaminas y particularmente, para el análisis basado en técnicas inmunoquímicas del contenido de gluten en productos alimenticios. Esta determinación es de relevancia para la salud humana, ya que los pacientes celíacos deben seguir una estricta dieta (llamada dieta libre de gluten), el único tratamiento efectivo para recuperar la histología y funcionalidad del intestino delgado. Se han usado solventes acuosos, tales como el etanol al 60-70%, para la extracción de las prolaminas de harinas y de productos alimenticios. Este método no es selectivo y por lo tanto, resulta en una compleja mezcla de proteínas que asociado a su baja solubilidad en soluciones acuosas, su elevado grado de homología y por como consecuencia, su reactividad cruzada, provocan dificultades en el análisis inmunoquímico de las proteínas derivadas del gluten. Las prolaminas generan una respuesta inmune exacerbada en la mucosa intestinal de los pacientes con EC. Los linfocitos T son una pieza clave en esta respuesta anómala frente a un componente dietario. No obstante, nuevas perspectivas en el conocimiento sobre la inmunidad innata dirigen la atención hacia algunos péptidos de gliadinas que también pueden producir reacciones inflamatorias que podrían intervenir en la patogenia de EC.Fil: Chirdo, Fernando Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Arranz, Eduardo. Universidad de Valladolid; España. Consejo Superior de Investigaciones Científicas; Españ

    The gliadin p31–43 peptide: Inducer of multiple proinflammatory effects

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    Coeliac disease (CD) is the prototype of an inflammatory chronic disease induced by food. In this context, gliadin p31–43 peptide comes into the spotlight as an important player of the inflammatory/innate immune response to gliadin in CD. The p31–43 peptide is part of the p31–55 peptide from α-gliadins that remains undigested for a long time, and can be present in the small intestine after ingestion of a gluten-containing diet. Different biophysical methods and molecular dynamic simulations have shown that p31–43 spontaneously forms oligomeric nanostructures, whereas experimental approaches using in vitro assays, mouse models, and human duodenal tissues have shown that p31–43 is able to induce different forms of cellular stress by driving multiple inflammatory pathways. Increased proliferative activity of the epithelial cells in the crypts, enterocyte stress, activation of TG2, induction of Ca2 +, IL-15, and NFκB signaling, inhibition of CFTR, alteration of vesicular trafficking, and activation of the inflammasome platform are some of the biological effects of p31–43, which, in the presence of appropriate genetic susceptibility and environmental factors, may act together to drive CD.Fil: Chirdo, Fernando Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Auricchio, Salvatore. Università degli Studi di Napoli Federico II; ItaliaFil: Troncone, Riccardo. Università degli Studi di Napoli Federico II; ItaliaFil: Barone, Maria Vittoria. Università degli Studi di Napoli Federico II; Itali

    Going Beyond Counting First Authors in Author Co-citation Analysis

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    The present study examines one of the fundamental aspects of author co-citation analysis (ACA) - the way co-citation counts are defined. Co-citation counting provides the data on which all subsequent statistical analyses and mappings are based, and we compare ACA results based on two different types of co-citation counting - the traditional type that only counts the first one among a cited work's authors on the one hand and a non-traditional type that takes into account the first 5 authors of a cited work on the other hand. Results indicate that the picture produced through this non-traditional author co-citation counting contains more coherent author groups and is therefore considerably clearer. However, this picture represents fewer specialties in the research field being studied than that produced through the traditional first-author co-citation counting when the same number of top-ranked authors is selected and analyzed. Reasons for these effects are discussed

    Variations on the Author

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    “Variations on the Author” discusses two of Eduardo Coutinho’s recent films (Um Dia na Vida, from 2010, and Últimas Conversas, posthumously released in 2015) and their contribution to the general question of documentary authorship. The director’s filmography is characterized by a consistent yet self-effacing form of authorial self-inscription: Coutinho often features as an interviewer that rather than express opinions propels discourses; an interviewer that is good at listening. This mode of self-inscription characterizes him as an author who is not expressive but who is nonetheless markedly present on the screen. In Um Dia na Vida, however, Coutinho is completely absent form the image, while Últimas Conversas, on the contrary, includes a confessional prologue that moves the director from the margins to the center of his films. This article examines the ways in which these works stand out in the filmography of a director who offers new insights into the notion of cinematic authorship

    Estudio de la enteropatía inducida por péptidos de gliadinas y ligandos de la inmunidad innata en modelos experimentales

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    La Enfermedad Celíaca (EC) es una enteropatía crónica de base inmune desencadenada por la ingestión de gluten en pacientes con predisposición genética. Se caracteriza por cambios histológicos severos en la mucosa duodenal definidos por atrofia vellositaria, infiltrado linfocitario e hiperplasia de criptas. Es una patología de alta prevalencia (estimada en un 1% de la población) con una sintomatología variada que puede estar asociada a complicaciones severas. Esta enfermedad ha sido extensamente estudiada utilizando muestras biológicas de pacientes. A pesar de los esfuerzos para desarrollar un modelo animal que reproduzca esta enteropatía, aún no se ha logrado. Usando distintos y complejos esquemas experimentales se han evaluado algunas etapas de la patogenia. Sin embargo, todos los modelos animales desarrollados han logrado replicar sólo algunas etapas del proceso inflamatorio o describir alguno de los mediadores involucrados en la patología, pero ninguno ha logrado modelar la enteropatía en forma plena. En especial, no se han logrado replicar los cambios histológicos característicos observados en el intestino delgado de pacientes con enfermedad celíaca activa. Si bien se conoce con detalle gran parte del mecanismo de patogenia de EC, se ignoran cuáles son las etapas iniciales y en especial, qué factores determinan el inicio de la enteropatía. Por este motivo, el objetivo de este trabajo fue obtener un modelo de inflamación intestinal generada por inductores de la respuesta inmune innata en ratones normales, como posible paso inicial para el desarrollo de una enteropatía más severa y a largo plazo en ratones genéticamente predispuestos. Para ello se optimizó un procedimiento de microcirugía que nos permitió inyectar los mediadores de interés directamente en la luz del intestino delgado. Encontramos que es posible generar enteropatía a las 12 horas en ratones C57BL/6 tanto con la administración de poly (I:C) como con un péptido derivado de gliadina, p31-43. Encontramos que ambos mediadores generan enteropatía por mecanismos diferentes. Por su parte, ambos inductores fueron capaces de generar una enteropatía a largo plazo cuando se emplearon ratones NOD-DQ8, conocidos por presentar sensibilidad al gluten ante ciertas circunstancias. De este modo, con el tratamiento previo de estos ratones con los inductores poly (I:C) o p31-43 y la posterior administración por vía oral de gliadina, obtuvimos dos modelos de enteropatía a largo plazo con características distintivas. En este trabajo mostramos que estos modelos constituyen herramientas muy útiles para el estudio de los mecanismos innatos, tanto moleculares como celulares, que pueden llevar a la generación de procesos crónicos en la mucosa del intestino delgado y conducir al desencadenamiento de EC.Doctor en Ciencias Exactas, área Ciencias BiológicasUniversidad Nacional de La PlataFacultad de Ciencias Exacta

    Appropriate Similarity Measures for Author Cocitation Analysis

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    We provide a number of new insights into the methodological discussion about author cocitation analysis. We first argue that the use of the Pearson correlation for measuring the similarity between authors’ cocitation profiles is not very satisfactory. We then discuss what kind of similarity measures may be used as an alternative to the Pearson correlation. We consider three similarity measures in particular. One is the well-known cosine. The other two similarity measures have not been used before in the bibliometric literature. Finally, we show by means of an example that our findings have a high practical relevance.information science;Pearson correlation;cosine;similarity measure;author cocitation analysis

    Supplementary data to "Soil bacterial biodiversity characterization by flow cytometry: The bottleneck of cell extraction from soil" (Methods in Ecology and Evolution, First published: 27 April 2022) [Conjunto de datos]

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    El archivo Supplementary Tables, incluye siete tablas según se detalla a continuación. La primera tabla (Table S1) detalla las palabras claves empleadas en las dos búsquedas realizadas en Scopus para este artículo. La segunda tabla (Tabla S2) resume información sobre un subset de artículos de la búsqueda bibliográfica Search1, referidos al uso de citometría de flujo en el análisis de comunidades microbianas en suelos. La tercera tabla (Tabla S3) presenta la lista de artículos correspondientes a la búsqueda bibliográfica Search2, que fue enriquecida con información extraída a partir de la lectura detallada de cada artículo. La cuarta tabla (Table S4) presenta la información recuperada de cada tipo de diluyente usado en la etapa de dispersión de suelo en los protocolos de extracción de microorganismos del suelo que fueron analizados. La quinta tabla (Table S5) presenta la información recuperada para las distintas etapas de los protocolos de extracción de microorganismos del suelo que fueron analizados; incluyendo las etapas de dispersión del suelo, separación de microorganismos y partículas de suelo de mayor tamaño y purificación de microorganismos de partículas de suelo de menor tamaño. La sexta tabla (Table S6) presenta la recopilación de datos reportados sobre la eficiencia de recuperación de microorganismos del suelo en los artículos analizados. La séptima tabla (Table S7) presenta la matriz de variables categóricas generada en base a la información recuperada sobre cada protocolo analizado. Detalles sobre la metodología aplicada para las búsquedas bibliográficas y los análisis realizados en base a los datos recopilados se presentan en el archivo Supplementary Information. El archivo Supplementary Figures, presenta figuras adicionales asociadas al artículo.EEA BarilocheFil: El Mujtar, Veronica Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas (CONICET). Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche (IFAB); ArgentinaFil: El Mujtar, Veronica Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche (IFAB); ArgentinaFil: Chirdo, Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas (CONICET). Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos (IIFP); ArgentinaFil: Chirdo, Fernando. Universidad Nacional de La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos (IIFP); ArgentinaFil: Chirdo, Fernando. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Lagares, Antonio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular IBBM); ArgentinaFil: Lagares, Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular IBBM); ArgentinaFil: Wall, Luis. Universidad Nacional de Quilmes. Centro de Bioquímica y Microbiología de Suelos. Laboratorio de Bioquímica y Microbiología de Suelo; ArgentinaFil: Tittonell, Pablo. Groningen University. Groningen Institute of Evolutionary Life Sciences; Países BajosFil: Tittonell, Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas (CONICET). Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche (IFAB); ArgentinaFil: Tittonell, Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche (IFAB); Argentin

    Dispelling the Myths Behind First-author Citation Counts

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    We conducted a full-scale evaluative citation analysis study of scholars in the XML research field to explore just how different from each other author rankings resulting from different citation counting methods actually are, and to demonstrate the capability of emerging data and tools on the Web in supporting more realistic citation counting methods. Our results contest some common arguments for the continued use of first-author citation counts in the evaluation of scholars, such as high correlations between author rankings by first-author citation counts and other citation counting methods, and high costs of using more realistic citation counting methods that are not well-supported by the ISI databases. It is argued that increasingly available digital full text research papers make it possible for citation analysis studies to go beyond what the ISI databases have directly supported and to employ more sophisticated methods
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